实验二:淀粉酶活性测定实验报告

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淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告一、实验目的1、学习和掌握淀粉酶活力测定的原理和方法。

2、了解淀粉酶的作用特点及其在生物体内的重要性。

3、培养实验操作技能和数据处理能力。

二、实验原理淀粉酶是能够水解淀粉分子中α-1,4 糖苷键的一类酶的总称,包括α淀粉酶和β淀粉酶。

α淀粉酶可以随机地作用于淀粉分子内部的α-1,4 糖苷键,生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。

β淀粉酶则从淀粉分子的非还原性末端依次水解相隔的α-1,4 糖苷键,生成麦芽糖。

在本次实验中,利用淀粉酶水解淀粉生成还原糖,还原糖能与 3,5-二硝基水杨酸试剂反应,生成棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。

颜色的深浅与还原糖的量成正比,通过比色法测定吸光度,并与标准曲线对比,即可计算出淀粉酶的活力。

三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜淀粉酶提取液1%淀粉溶液(称取 1g 可溶性淀粉,加入少量蒸馏水调匀,然后缓缓倾入沸水中并不断搅拌,最后定容至 100ml)pH 69 的磷酸缓冲液3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS 试剂)麦芽糖标准溶液(1mg/ml)2、实验仪器分光光度计恒温水浴锅移液器离心机试管、刻度吸管、容量瓶等四、实验步骤1、标准曲线的绘制取 7 支干净的具塞刻度试管,编号,按下表加入试剂:|管号|麦芽糖标准液(ml)|蒸馏水(ml)| DNS 试剂(ml)|麦芽糖含量(mg)|||||||| 0 | 0 | 20 | 20 | 0 || 1 | 02 | 18 | 20 | 02 || 2 | 04 | 16 | 20 | 04 || 3 | 06 | 14 | 20 | 06 || 4 | 08 | 12 | 20 | 08 || 5 | 10 | 10 | 20 | 10 || 6 | 12 | 08 | 20 | 12 |摇匀后,在沸水浴中加热 5 分钟,取出后立即用冷水冷却至室温,再向每管中加入蒸馏水 20ml,摇匀。

以 0 号管为空白对照,在 540nm 波长下测定各管的吸光度值。

淀粉活性测定实验报告

淀粉活性测定实验报告

一、实验目的1. 掌握淀粉酶活性的测定原理和方法。

2. 了解不同条件对淀粉酶活性的影响。

3. 学会使用比色法测定淀粉酶活性。

二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解成葡萄糖、麦芽糖等小分子糖类。

在实验中,淀粉酶将淀粉水解成还原糖,还原糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)反应生成红色复合物。

通过测定该复合物的吸光度,可以计算出淀粉酶的活性。

三、实验材料与仪器1. 材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、硫酸铜、无水碳酸钠、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水、待测样品(如唾液、植物组织等)。

2. 仪器:恒温水浴锅、移液器、容量瓶、试管、试管架、吸管、比色计、电子天平。

四、实验步骤1. 准备DNS试剂:称取DNS试剂0.1g,加入50ml蒸馏水溶解,再加入0.5g硫酸铜和0.5g无水碳酸钠,搅拌均匀。

2. 标准曲线制作:准确配制一系列浓度的麦芽糖标准溶液(如0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml),各取2ml加入试管中,加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度,以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

3. 待测样品处理:准确称取一定量的待测样品,加入适量的蒸馏水,搅拌均匀,离心取上清液。

4. 测定淀粉酶活性:取2ml待测样品和2ml淀粉溶液(浓度根据实际情况调整)加入试管中,置于恒温水浴锅中,保持一定温度(如37℃)反应一定时间(如30分钟),取出后立即加入2ml DNS试剂,沸水浴10分钟,取出冷却,用分光光度计在波长540nm处测定吸光度。

5. 计算淀粉酶活性:根据标准曲线,计算出待测样品中还原糖的浓度,再根据反应时间、温度、待测样品浓度等参数,计算淀粉酶活性。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:以麦芽糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,计算相关系数,验证标准曲线的线性关系。

生化实验淀粉的实验报告

生化实验淀粉的实验报告

一、实验目的1. 学习淀粉的提取和鉴定方法。

2. 掌握淀粉酶的活性测定方法。

3. 了解淀粉在生物体内的作用。

二、实验原理1. 淀粉是一种由葡萄糖分子组成的多糖,广泛存在于植物中,是植物储存能量的主要形式。

2. 淀粉酶是一种能够催化淀粉水解的酶,根据其作用方式可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶。

3. 淀粉酶活性可以通过测定在一定时间内淀粉水解的量来衡量。

三、实验材料与仪器1. 材料:马铃薯、淀粉酶、碘液、蒸馏水、盐酸、氢氧化钠、酚酞指示剂等。

2. 仪器:天平、烧杯、试管、滴管、移液管、恒温水浴锅、分光光度计等。

四、实验步骤1. 淀粉的提取(1)称取一定量的马铃薯,去皮,切成小块。

(2)将马铃薯块放入烧杯中,加入适量的蒸馏水,用研钵捣碎。

(3)将捣碎后的马铃薯浆液过滤,收集滤液。

(4)向滤液中加入适量的盐酸,调节pH值为4.5。

(5)将调好pH值的滤液加热至60℃,保持30分钟。

(6)将加热后的滤液冷却,用蒸馏水定容至100mL。

2. 淀粉的鉴定(1)取少量提取的淀粉溶液,加入碘液,观察颜色变化。

(2)将淀粉溶液滴在载玻片上,用显微镜观察淀粉颗粒的形态。

3. 淀粉酶的活性测定(1)取一定量的淀粉酶溶液,加入适量的淀粉溶液,混合均匀。

(2)将混合液置于恒温水浴锅中,设定温度为37℃。

(3)每隔一定时间,取出少量混合液,加入碘液,观察颜色变化。

(4)根据颜色变化,计算出淀粉酶的活性。

五、实验结果与分析1. 淀粉的鉴定:提取的淀粉溶液加入碘液后,溶液呈蓝色,证明提取的淀粉成功。

2. 淀粉酶的活性测定:根据颜色变化,计算出淀粉酶的活性为X单位。

六、实验讨论1. 淀粉的提取过程中,盐酸的作用是调节pH值,使淀粉酶活性适宜。

2. 淀粉酶的活性受温度、pH值等因素的影响,本实验中选取了适宜的温度和pH值进行测定。

3. 实验过程中,要注意操作规范,避免误差的产生。

七、实验总结通过本次实验,我们学习了淀粉的提取和鉴定方法,掌握了淀粉酶的活性测定方法,了解了淀粉在生物体内的作用。

淀粉活性测定实验报告

淀粉活性测定实验报告

淀粉活性测定实验报告1. 引言淀粉是一种重要的多糖类物质,在食品工业、医药领域以及纺织工业等许多领域都有广泛的应用。

淀粉的活性测定是衡量其质量的一种重要方法。

本实验旨在通过测定淀粉的还原糖含量来确定淀粉的活性。

2. 实验原理淀粉的活性指的是淀粉能够与酶相互作用并被其降解的能力。

本实验采用的是酶法测定淀粉的活性,具体原理如下:1. 淀粉被酶淀粉酶水解成为还原糖;2. 还原糖与费林试剂反应,在酸性条件下形成紫红色物质;3. 使用分光光度计测定紫红色物质的吸光度,并根据标准曲线计算出还原糖的质量。

3. 实验步骤3.1 样品的制备将待测样品称取5 g,加入100 mL的蒸馏水中,搅拌均匀,并将溶液转移到250 mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度线。

3.2 酶解反应取5 mL样品溶液,加入0.5 mL淀粉酶,加水至10 mL。

将混合液置于37恒温水浴中反应1小时。

3.3 费林试剂反应取2 mL反应液,加入4 mL费林试剂,混合并立即加入1 mL浓硫酸。

放置冷却至室温。

3.4 吸光度测定使用分光光度计在520 nm波长下测定吸光度。

3.5 绘制标准曲线取一系列浓度已知的还原糖溶液,加入费林试剂和硫酸进行反应,测定吸光度。

根据吸光度与浓度的关系绘制标准曲线。

3.6 计算样品中淀粉的活性根据标准曲线计算样品中还原糖的质量,进而计算出样品中淀粉的活性。

4. 结果与讨论通过测定一系列已知浓度的标准溶液的吸光度,绘制了标准曲线。

利用标准曲线,计算出待测样品中淀粉的活性为X g。

本实验中使用的淀粉酶和费林试剂均具有较高的效率和灵敏度,能够准确测定淀粉的活性。

由于实验条件和操作的标准化,实验的重复性和可重复性均较高。

在实际应用中,淀粉的活性测定可以用于食品质量的监控以及生物反应器等相关工艺的控制。

根据淀粉的活性,可以调整淀粉的使用量,以获得最佳的产品质量和产率。

5. 结论通过酶法测定,本实验成功测定了淀粉的活性为X g。

实验结果表明,本方法可准确快速地测定淀粉的活性,为淀粉的应用和生产提供了重要的参考依据。

淀粉酶测定实验报告

淀粉酶测定实验报告

一、实验目的1. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法;2. 了解淀粉酶在生物体内的作用及其影响因素;3. 通过实验验证不同条件下淀粉酶活性的变化。

二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,主要分为α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。

本实验采用α-淀粉酶作为研究对象,通过测定其在特定条件下催化淀粉水解的速率,来评价淀粉酶的活性。

实验原理如下:1. 淀粉酶能够将淀粉水解成葡萄糖,反应式如下:淀粉 + 水酶→ 葡萄糖2. 淀粉在碘存在下呈现蓝色,当淀粉被水解后,蓝色逐渐消失,通过测量蓝色消失的程度,可以判断淀粉酶的活性。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉、碘液、蒸馏水、pH缓冲液、比色皿等;2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、比色计、天平等。

四、实验步骤1. 准备淀粉酶溶液:将淀粉酶用pH缓冲液稀释至一定浓度;2. 准备淀粉溶液:将淀粉用蒸馏水配制成一定浓度的溶液;3. 配制碘液:将碘液用蒸馏水稀释至一定浓度;4. 设置实验组:将淀粉溶液和淀粉酶溶液按照一定比例混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应;5. 设置对照组:将淀粉溶液和蒸馏水按照一定比例混合,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应;6. 取样:在反应一定时间后,取出实验组和对照组的溶液,加入碘液;7. 比色:将实验组和对照组的溶液在比色计上测定吸光度;8. 计算淀粉酶活性:根据实验组和对照组的吸光度差值,计算淀粉酶活性。

五、实验结果与分析1. 实验结果:实验组吸光度:A1对照组吸光度:A22. 结果分析:根据实验结果,计算淀粉酶活性:淀粉酶活性 = (A1 - A2) / A2淀粉酶活性越高,表示淀粉酶的催化能力越强。

六、实验讨论与心得1. 实验过程中,需要注意温度、pH值等因素对淀粉酶活性的影响,以保证实验结果的准确性;2. 实验结果表明,淀粉酶活性受到多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度等;3. 通过本实验,加深了对淀粉酶活性的理解,为后续研究提供了实验基础。

淀粉酶活性的测定实验报告

淀粉酶活性的测定实验报告

淀粉酶活性的测定实验报告淀粉酶活性的测定实验报告引言淀粉酶是一种重要的酶类,能够催化淀粉的降解为葡萄糖。

淀粉酶活性的测定对于了解酶的特性以及其在生物化学过程中的作用具有重要意义。

本实验旨在通过测定淀粉酶的活性,探究其受到不同因素的影响,为进一步研究酶的功能提供基础数据。

材料与方法1. 实验材料:淀粉酶溶液、淀粉溶液、缓冲液、I2-KI试剂、洗涤液。

2. 实验仪器:比色皿、移液管、离心机、恒温水浴。

实验步骤:1. 预热水浴至37°C。

2. 准备不同浓度的淀粉溶液(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%),并分别加入比色皿中。

3. 向每个比色皿中加入相同体积的淀粉酶溶液,混匀后立即放入预热的水浴中。

4. 在反应开始后的不同时间点(如0、5、10、15、20分钟),取出一个比色皿,立即加入I2-KI试剂,形成蓝色淀粉-碘复合物。

5. 使用比色计测定各比色皿中的吸光度,并记录下实验数据。

6. 重复实验步骤2-5,以获得可靠的结果。

结果与讨论通过实验测定得到各个时间点下不同淀粉浓度的吸光度值,进而计算出淀粉酶的活性。

实验结果显示,随着淀粉浓度的增加,淀粉酶的活性也随之增加。

这是因为淀粉浓度的增加会提供更多的底物供淀粉酶催化反应,从而增加反应速率。

然而,当淀粉浓度超过一定范围时,淀粉酶的活性开始饱和,即使再增加淀粉浓度,反应速率也不再显著增加。

此外,实验结果还显示,随着反应时间的增加,淀粉酶的活性逐渐增加,但增加速率逐渐减缓。

这是因为淀粉酶需要一定的时间来结合底物,并催化反应发生。

随着反应进行,底物逐渐减少,淀粉酶与底物的结合也变得更加困难,从而导致反应速率的下降。

此外,实验还可以探究其他因素对淀粉酶活性的影响,如温度、pH值等。

通过调节这些因素,可以进一步了解淀粉酶的特性以及其在生物体内的作用机制。

结论通过本实验的测定,我们得出了淀粉酶活性与淀粉浓度和反应时间的关系。

实验结果表明,淀粉酶活性随着淀粉浓度的增加而增加,并随着反应时间的增加而逐渐饱和。

实验二 淀粉酶活性的测定

实验二 淀粉酶活性的测定

实验二淀粉酶活性的测定预习报告生物094 左宇 0902040409一、研究背景:酶作为生物体内催化剂,测定其活力是非常有必要的。

不同种类的酶的活力测定方法不同,我们将通过在细节设计上差异较大的酶活力测定方法的设计细节的分析和具体酶活测定操作,体会分析比较其设计细节的差异,从而获取相关设计理念并完成没活力测定实验操作的训练。

二、研究目标:按照淀粉酶水解淀粉的作用方式,可以分为α-淀粉酶和β-淀粉酶等。

根据其催化产物的特点和现有测定方法规定酶活力单位为:每分钟每克鲜重麦种所催化生成的麦芽糖毫克数,来对这两种酶进行有效的测定。

三、研究策略:两种淀粉酶特性不同,α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下迅速钝化;β-淀粉酶不耐热,在70℃15min钝化。

根据它们的这种特性,在测定活力时钝化其中之一,就可测出另一种淀粉酶的活力。

本实验采用加热的方法钝化β-淀粉酶,测出α-淀粉酶的活力。

在非钝化条件下测定淀粉酶总活力(α-淀粉酶活力+β-淀粉酶活力),再减去α-淀粉酶的活力,就可求出β-淀粉酶的活力。

四、研究方案及可行性分析:两种酶作用淀粉的方式不同。

α-淀粉酶可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。

β-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水解,每次水解下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶。

淀粉酶催化产生的这些还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比。

用标准浓度的麦芽糖溶液制作标准曲线,用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量,以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。

五、具体实验设计1、所需的主要材料、试剂、仪器(1)实验材料:小麦种子(2)实验仪器:离心机、离心管、研钵、电炉、容量瓶(50mL×1,100mL×1)、恒温水浴、分光光度计。

淀粉酶活性测定实验报告

淀粉酶活性测定实验报告

淀粉酶活性测定实验报告淀粉酶活性测定实验报告引言:淀粉酶是一种重要的酶类,它在生物体内起着关键的消化和代谢作用。

淀粉酶能够将淀粉降解为较小的分子,以供生物体吸收和利用。

因此,测定淀粉酶的活性对于了解生物体的消化系统以及酶的功能机制具有重要意义。

本实验旨在通过测定淀粉酶的活性,探究其在不同条件下的变化规律,从而加深对淀粉酶的认识。

材料与方法:1. 实验器材:试管、移液管、恒温水浴、分光光度计。

2. 实验试剂:淀粉溶液、淀粉酶溶液、碘液、磷酸盐缓冲液。

3. 实验步骤:a. 准备一系列稀释淀粉酶溶液,分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。

b. 取一定量的淀粉溶液置于试管中,加入相应浓度的淀粉酶溶液,混匀。

c. 将试管置于恒温水浴中,保持温度在37°C,反应10分钟。

d. 在反应结束后,加入适量的磷酸盐缓冲液停止反应。

e. 加入适量的碘液,使溶液变为蓝黑色。

f. 使用分光光度计测定溶液的吸光度,记录下吸光度值。

g. 重复以上步骤,分别测定其他浓度的淀粉酶溶液。

结果与讨论:通过实验测定,我们得到了不同浓度淀粉酶溶液的吸光度值,并以吸光度值作为淀粉酶活性的指标。

根据实验结果,我们可以得出以下结论:1. 淀粉酶活性与浓度呈正相关关系:实验结果显示,随着淀粉酶溶液浓度的增加,吸光度值也随之增加。

这表明淀粉酶的活性与其浓度呈正相关关系。

当淀粉酶溶液浓度较低时,其活性较弱,无法有效降解淀粉;而当浓度增加时,淀粉酶活性也相应增强,能够更快速地将淀粉降解为较小的分子。

2. 淀粉酶活性受温度影响较大:实验中将反应温度保持在37°C,这是因为淀粉酶在人体内的最适温度为37°C。

然而,当温度偏离最适温度时,淀粉酶的活性会受到显著影响。

过高或过低的温度都会导致淀粉酶的构象变化,从而影响其催化效率。

因此,合适的温度对于淀粉酶的活性至关重要。

3. 淀粉酶活性受pH值影响:酶活性与pH值之间存在一定的关系。

测定淀粉酶活性实验报告

测定淀粉酶活性实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的作用。

2. 掌握淀粉酶活性的测定方法。

3. 分析淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。

二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解为麦芽糖和葡萄糖。

淀粉酶活性是指单位时间内淀粉酶催化淀粉分解的速率。

本实验采用DNS法测定淀粉酶活性,DNS 法是一种灵敏、准确、精确度高的测定方法,适用于测定小样品淀粉酶活性。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、标准葡萄糖溶液、pH缓冲液、蒸馏水、试管、恒温水浴锅、移液器、量筒、滴定管等。

2. 实验仪器:pH计、电子天平、电子显微镜、分光光度计等。

四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液:称取适量淀粉酶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉酶溶液。

2. 配制淀粉溶液:称取适量淀粉,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉溶液。

3. 测定淀粉酶活性:取一定量的淀粉溶液于试管中,加入适量淀粉酶溶液,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。

4. 测定DNS反应液:取一定量的反应液,加入DNS试剂,置于沸水浴中反应一定时间。

5. 比色:用分光光度计在特定波长下测定DNS反应液的吸光度。

6. 计算淀粉酶活性:根据标准葡萄糖溶液的吸光度值,绘制标准曲线,计算反应液中葡萄糖的浓度,进而计算淀粉酶活性。

五、结果与分析1. 淀粉酶活性随温度升高而增加,在一定温度范围内达到最大值,之后随温度升高而降低。

2. 淀粉酶活性随pH值升高而增加,在一定pH范围内达到最大值,之后随pH值升高而降低。

3. 淀粉酶活性受激活剂和抑制剂的影响,其中激活剂可以增强淀粉酶活性,抑制剂可以抑制淀粉酶活性。

六、实验结论1. 淀粉酶是一种水解淀粉的酶,在生物体内具有重要作用。

2. DNS法是一种灵敏、准确、精确度高的测定淀粉酶活性的方法。

3. 淀粉酶活性受温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素的影响。

七、实验讨论1. 实验过程中,淀粉酶溶液和淀粉溶液的浓度对实验结果有较大影响,需要严格控制浓度。

生化实验--淀粉酶活性测定标准实验报告

生化实验--淀粉酶活性测定标准实验报告

⽣化实验--淀粉酶活性测定标准实验报告实验⼆:酶活⼒测定⽅法的研究⼀.研究背景及⽬的酶是⾼效催化有机体新陈代谢各步反应的活性蛋⽩,⼏乎所有的⽣化反应都离不开酶的催化,所以酶在⽣物体内扮演着极其重要的⾓⾊,因此对酶的研究有着⾮常重要的意义。

酶的活⼒是酶的重要参数,反映的是酶的催化能⼒,因此测定酶活⼒是研究酶的基础。

酶活⼒由酶活⼒单位表征,通过计算适宜条件下⼀定时间内⼀定量的酶催化⽣成产物的量得到。

本实验选取萌发的⽲⾕类种⼦为材料,通过对其所含两种淀粉酶活⼒的测定来研究酶活⼒测定的⽅法。

⼆.实验原理萌发的种⼦中存在两种淀粉酶,分别是α淀粉酶和β淀粉酶,β淀粉酶不耐热,在⾼温下易钝化,⽽α淀粉酶不耐酸,在pH3.6下则发⽣钝化[1]。

本实验的设计利⽤β淀粉酶不耐热的特性,在⾼温下(70℃)下处理使得β淀粉酶钝化⽽测定α淀粉酶的酶活性[1]。

酶活性的测定是通过测定⼀定量的酶在⼀定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的,麦芽糖的浓度利⽤⽐⾊法可以很容易测得。

然后利⽤同样的原理测得两种淀粉酶的总活性,拟将总活性与α淀粉酶的活性的差值看作β淀粉酶的活性,再做进⼀步分析。

实验中为了消除⾮酶促反应引起的麦芽糖的⽣成带来的误差,每组实验都做了相应的对照实验,在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以校正。

三.材料、试剂与仪器材料:萌发的⼩麦种⼦试剂:①1%淀粉溶液(称取1克可溶性淀粉,加⼊80ml蒸馏⽔,加热熔解,冷却后定容⾄100ml);②pH5.6的柠檬缓冲液:A液(称取柠檬酸20.01克,溶解后定容⾄1L)B液(称取柠檬酸钠29.41克,溶解后定容⾄1L)取A液5.5ml、B液14.5ml 混匀即可;③3,5-⼆硝基⽔杨酸溶液(称取3,5-⼆硝基⽔杨酸1.00克,溶于20ml 1M 氢氧化钠中,加⼊50ml蒸馏⽔,再加⼊30克酒⽯酸钠,待溶解后,⽤蒸馏⽔稀释⾄100ml,盖紧瓶盖保存);④麦芽糖标准液(称取0.100克麦芽糖,溶于少量蒸馏⽔中,⼩⼼移⼊100ml 容量瓶中定容);⑤0.4M NaOH仪器:722光栅分光光度计(编号990695)DK-S24型电热恒温⽔浴锅(编号L-304056)离⼼机(TDL-40B) 配平天平药物天平电热锅100ml容量瓶50ml容量瓶移液管试管研钵烧杯洗瓶四.实验⽅法本实验按照下列表格的中的操作步骤进⾏:五.数据整理上表中前4⾏数据为实验的原始数据。

淀粉酶活性测定实验报告

淀粉酶活性测定实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的重要作用;2. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法;3. 通过实验,探究温度、pH值等因素对淀粉酶活性的影响。

二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,其活性高低可以反映酶的催化能力。

本实验采用DNS 法测定淀粉酶活性,DNS 法是利用淀粉酶催化淀粉水解生成还原糖,还原糖与DNS 试剂发生反应,产生黄色化合物,通过比色法测定还原糖的浓度,从而间接反映淀粉酶的活性。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉酶(市售)- 淀粉溶液- DNS 试剂- 碘液- 酚酞指示剂- 蒸馏水- pH 试纸- 温度计2. 实验仪器:- 721分光光度计- 磁力搅拌器- 电子天平- 试管- 移液器四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液:将市售淀粉酶按照说明书配制一定浓度的淀粉酶溶液。

2. 设置实验组:- 温度实验组:分别设置30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ 的温度梯度,每组加入相同量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,搅拌反应 10 分钟。

- pH 值实验组:分别设置 pH 3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 的 pH 值梯度,每组加入相同量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,搅拌反应 10 分钟。

3. DNS 反应:- 取反应后的溶液,加入 DNS 试剂,沸水浴加热 5 分钟。

- 取出后,加入 1 滴酚酞指示剂,继续沸水浴加热 5 分钟。

4. 比色:- 使用 721 分光光度计在 540 nm 波长下测定溶液的吸光度值。

5. 数据处理:- 根据标准曲线,计算各组反应生成的还原糖浓度。

- 比较各组实验结果,分析温度、pH 值等因素对淀粉酶活性的影响。

五、实验结果与分析1. 温度对淀粉酶活性的影响:- 从实验结果可以看出,淀粉酶活性随着温度的升高而增加,在60℃ 时达到峰值,之后随着温度的继续升高,淀粉酶活性逐渐降低。

2. pH 值对淀粉酶活性的影响:- 从实验结果可以看出,淀粉酶活性在 pH 6.0 时达到峰值,之后随着 pH 值的继续升高或降低,淀粉酶活性逐渐降低。

淀粉酶活性测定实验报告

淀粉酶活性测定实验报告

淀粉酶活性测定实验报告2 淀粉酶活性测定实验报告一、实验目的1. 学习使用淀粉酶活性测定方法来评估淀粉酶的活性。

2. 了解淀粉酶在不同条件下的活性变化规律。

3. 探究影响淀粉酶活性的因素。

二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可将淀粉水解为糖。

淀粉酶活性的测定方法是通过测定淀粉酶作用下淀粉水解产生的糖的含量来评估淀粉酶的活性。

实验中使用碘液来检测淀粉的含量,通过比色法测定样品中碘与淀粉结合生成的淀粉-碘复合物的光吸收值,进而计算淀粉酶的活性。

三、实验步骤1. 准备工作(1)将淀粉酶溶液和淀粉溶液放置在室温下适应30分钟。

(2)调整分光光度计波长为550nm。

(3)用0.1mol/L HCl稀释0.1mol/L NaOH。

2. 样品处理(1)分别取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液分别放入两个试管中作为对照组。

(2)取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液混合放入一个试管中作为实验组。

(3)将试管放入37℃恒温水浴中反应10分钟。

3. 反应终止(1)将样品分别取出,加入5ml稀释后的HCl。

(2)用1%淀粉溶液稀释碘液。

(3)向每个试管中加入1ml稀释后的碘液。

4. 比色测定(1)将试管放入分光光度计中,设置波长为550nm。

(2)调零分光光度计,记录对照组和实验组的吸光度值。

5. 计算淀粉酶活性(1)计算对照组的吸光度平均值,并减去实验组的吸光度值。

(2)根据标准曲线,计算实验组中淀粉的含量。

(3)根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量,计算淀粉酶的活性。

四、实验结果对照组吸光度平均值为0.3,实验组吸光度值为0.6,经过计算,实验组中淀粉的含量为2mg。

根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量,计算得到淀粉酶的活性为20U。

五、实验讨论根据实验结果,淀粉酶的活性为20U。

通过对照组和实验组的吸光度值的比较,可以看出淀粉酶在实验组中得到了激活,使淀粉水解为糖的速度加快。

这表明淀粉酶在37℃的条件下具有较高的活性。

淀粉酶活性测定实验报告[仅限参考]

淀粉酶活性测定实验报告[仅限参考]

淀粉酶活性测定实验报告[仅限参考]一、实验目的1. 学习淀粉酶的基本概念和性质,掌握酶活性测定的方法;2. 研究淀粉酶的催化作用,分析温度、pH等因素对酶活性的影响;3. 加深对酶的认识,掌握科学实验中的实验设计、数据处理和实验报告的撰写。

二、实验原理淀粉酶属于水解酶,可以水解淀粉为麦芽糖、葡萄糖等单糖,是一类非常重要的酶。

酶活性是酶催化反应速度的指标,可以反映出酶的活性程度和效率。

酶活性的测定一般采用底物的消耗量或产物的增加量来测定。

本实验测定酶活性采用淀粉水解反应中所产生的糖的分析,在反应过程中定时取出反应液,停止反应后加入碘液,把蓝色淀粉-碘复合物转变成紫色复合物,在紫色复合物和糖的还原作用下逐渐变为蓝色,最终消失。

通过测定溶液颜色的变化,可以计算出每个时间点的淀粉酶酶活性。

三、实验过程1. 实验步骤:(1)准备淀粉酶的底物、淀粉的浓度为1%;(2)制备不同pH值的反应液:分别加入0.1mol/L HCl或0.1mol/L NaOH调节pH,浓度为0.1mol/L;(3)将淀粉溶液和不同pH值的反应液混合,装入试管中,对照组不加淀粉酶;(4)孵育试管,在37℃下孵育30分钟,每5分钟取出一个反应液离心分离;(5)取出反应液加入1mL碘液,使淀粉水解反应停止,测定吸光度(OD);(6)将样品吸光度的均数减去对照组,得到相对活性值;(7)计算酶活性,用相对活性值乘以标准曲线的淀粉质量,得到酶活性数据,在表格中记录。

(1)淀粉酶活性测定实验仪器:分光光度计、离心机;(2)淀粉酶活性测定实验试剂:淀粉、淀粉酶、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、碘液、磷酸缓冲液;(3)淀粉酶活性测定实验条件:温度为37℃,pH为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0,浓度为1%的淀粉溶液。

四、实验结果实验数据记录如下表:| 时间 | pH=4 | pH=5 | pH=6 | pH=7 | pH=8 || :---: | :---: | :---: | :---: | :---: | :---: || 0s | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 || 5s | 0.05 | 0.04 | 0.06 | 0.05 | 0.04 || 10s | 0.08 | 0.09 | 0.12 | 0.11 | 0.09 || 15s | 0.11 | 0.14 | 0.18 | 0.15 | 0.14 || 20s | 0.14 | 0.18 | 0.23 | 0.20 | 0.17 || 25s | 0.18 | 0.21 | 0.28 | 0.25 | 0.21 || 30s | 0.20 | 0.25 | 0.35 | 0.30 | 0.25 |五、结果分析从数据可以看出,淀粉酶水解淀粉的最佳pH值为6.0,pH值过高或过低都会影响淀粉酶的活性。

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告淀粉酶活力测定实验报告实验三、淀粉酶活性的测定实验报告实验四、淀粉酶活性的测定一、实验目的:1、了解α - 淀粉酶和β - 淀粉酶的不同性质及其淀粉酶活性测定的意义;2、学会比色法测定淀粉酶活性的原理及操作要点。

二、实验原理:淀粉酶存在于几乎所有植物中,特别是萌发后的禾谷类种子,淀粉酶活力最强,其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。

根据α-淀粉酶和β-淀粉酶特性不同,α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下迅速钝化;β-淀粉酶不耐热,70? 15min 则被钝化。

测定时,使其中一种酶失活,即可测出另一种酶的活性。

淀粉在淀粉酶的催化作用下可生成麦芽糖,利用麦芽糖的还原性与3,5-二硝基水杨酸反应生成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸,测定其吸光度,从而确定酶液中淀粉酶活力(单位重量样品在一定时间内生成麦芽糖的量)。

三、实验用具:1、实验设备研钵,具塞刻度试管,离心管,分光光度计,酸度计,电热恒温水浴锅,离心机,电磁炉。

2、实验材料与试剂(1)0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液:A液:称取柠檬酸20.01g,定容至1000ml;B液:称取柠檬酸钠29.41g,定容至1000ml;取A液55ml与B液145ml混匀。

(2)1%可溶性淀粉溶液:1g淀粉溶于100ml 0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液;(3)1%3,5-二硝基水杨酸试剂:称取3,5-二硝基水杨酸1g、NaOH 1.6g、酒石酸钾钠30g,定容至100ml水中,紧盖瓶塞,勿使CO2进入;(4)麦芽糖标准溶液:取麦芽糖0.1g溶于100ml水中;(5)pH 6.8的磷酸缓冲液: 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8,加水稀释至1000ml即得。

(6)0.4mol/L的NaOH溶液;(7)1%NaCl溶液。

(8)实验材料:萌发的谷物种子(芽长约1cm)四、操作步骤1、酶液提取:取6.0g浸泡好的原料,去皮后加入10.0mL 1%的NaCl 溶液,磨碎后以2000r/min 离心10min,转出上清液备用。

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告淀粉酶活力测定实验报告引言:淀粉是一种常见的多糖类物质,广泛存在于植物的种子、块茎和根部等部位。

淀粉酶是一类能够催化淀粉水解为糖类的酶,广泛存在于植物、动物和微生物中。

淀粉酶活力的测定对于研究淀粉酶的性质、功能以及酶的催化机制具有重要意义。

本实验旨在通过测定淀粉酶活力的方法,探究淀粉酶的催化作用及其影响因素。

实验材料与方法:材料:1. 淀粉溶液2. 淀粉酶溶液3. 碘液4. 盐酸5. 碘化钾溶液6. 蒸馏水方法:1. 预先制备好一定浓度的淀粉溶液和淀粉酶溶液。

2. 取一定量的淀粉溶液,加入适量的淀粉酶溶液,混匀后放置一段时间。

3. 取适量的混合液,加入盐酸,停止淀粉酶的活性。

4. 加入碘液,使混合液呈现蓝黑色。

5. 用碘化钾溶液滴定至混合液呈现淡黄色,记录滴定所需的碘化钾溶液体积。

6. 重复上述步骤,分别改变淀粉酶的浓度、温度和pH值等条件,进行多组实验。

结果与讨论:通过实验测定,我们得到了不同条件下淀粉酶活力的数据,并进行了分析和讨论。

1. 淀粉酶浓度对活力的影响:在一定温度和pH值下,我们分别取不同浓度的淀粉酶溶液进行实验。

结果显示,淀粉酶活力随着酶浓度的增加而增加,但当酶浓度达到一定程度后,活力的增加趋势趋于平缓。

这说明在一定范围内,淀粉酶活力与酶浓度呈正相关关系。

2. 温度对活力的影响:我们分别在不同温度下进行实验,结果显示,淀粉酶活力随着温度的升高而增加,但当温度超过一定范围后,活力开始下降。

这是因为温度的升高可以增加酶分子的运动速度和碰撞频率,促进酶与底物的结合,从而提高活力。

然而,过高的温度会导致酶分子的构象变化和热失活,从而降低活力。

3. pH值对活力的影响:我们在不同pH值下进行实验,结果显示,淀粉酶活力在一定范围内随着pH值的变化而增加。

这是因为pH值的变化可以改变酶分子的电荷状态和离子化程度,从而影响酶与底物的结合能力和催化效率。

然而,当pH值偏离酶的最适pH值时,酶分子的构象发生改变,导致活力的降低。

酶的活性实验报告

酶的活性实验报告

酶的活性实验报告酶的活性实验报告一、引言酶是一类生物催化剂,能够加速化学反应的速率而不参与反应本身。

酶在生物体内起着至关重要的作用,例如在消化、代谢和免疫等过程中。

因此,研究酶的活性对于理解生物体内化学反应的机制具有重要意义。

本实验旨在通过测定酶的活性,了解酶在不同条件下的催化效果。

二、实验材料与方法1. 实验材料:- 淀粉溶液- 淀粉酶溶液- 碘液- 试管- 酶活性测定器2. 实验方法:1) 准备淀粉溶液:取适量淀粉加入适量蒸馏水中,搅拌均匀,得到淀粉溶液。

2) 准备淀粉酶溶液:取适量淀粉酶加入适量蒸馏水中,搅拌均匀,得到淀粉酶溶液。

3) 实验组设置:将试管分为三组,每组加入适量淀粉溶液和淀粉酶溶液,分别标记为A组、B组和C组。

4) 活性测定:使用酶活性测定器对A组、B组和C组进行测定,记录酶活性数值。

5) 反应停止:向每个试管中加入适量碘液,停止反应。

6) 结果记录:记录每组试管中溶液的颜色变化。

三、实验结果与分析经过实验测定,A组试管中的溶液颜色变化最慢,B组次之,C组最快。

这表明淀粉酶在不同条件下的活性存在差异,其催化效果受到实验条件的影响。

在本实验中,A组是对照组,即没有添加淀粉酶的淀粉溶液。

由于没有酶参与,淀粉无法被分解,因此试管中的溶液颜色变化较慢。

B组是添加了淀粉酶的淀粉溶液。

淀粉酶能够催化淀粉的降解,将淀粉分解为较小的分子,如葡萄糖。

由于淀粉酶的存在,淀粉能够被迅速分解,溶液中的淀粉浓度降低,碘液的颜色变化较快。

C组是在B组的基础上加入了适量温度升高的蒸馏水。

温度的升高能够增加酶的活性,使酶催化反应加速。

因此,C组中的溶液颜色变化最快。

通过对实验结果的分析,我们可以得出结论:酶的活性受到多种因素的影响,如酶的种类、底物浓度、温度等。

在本实验中,我们观察到温度对酶活性的影响,温度升高能够提高酶的活性,加速酶催化反应的进行。

四、实验结论通过本实验的结果分析,我们可以得出以下结论:1. 酶的活性受到实验条件的影响,如温度的升降。

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告

淀粉酶活力测定实验报告1. 引言淀粉酶是一种在生物体内起着重要作用的酶类。

它能够催化淀粉的水解,将淀粉分解成葡萄糖等可溶性糖分子。

淀粉酶活力的测定对于研究酶的功能和特性具有重要意义。

本实验旨在通过测定淀粉酶活力的方法,探究酶的催化作用及其影响因素。

2. 实验目的本实验的目的是通过测定淀粉酶活力,了解酶的催化作用和影响因素,并掌握测定酶活力的方法。

3. 实验原理淀粉酶是一种催化淀粉水解的酶,其催化作用可以用以下反应表示:淀粉 + 淀粉酶→ 可溶性糖本实验使用淀粉作为底物,通过观察淀粉水解的速度来测定淀粉酶的活力。

实验中,我们将淀粉酶和淀粉溶液一起加入反应体系中,随着反应的进行,淀粉逐渐被水解,产生可溶性糖。

我们可以通过检测可溶性糖的浓度变化来确定淀粉酶的活力。

4. 实验步骤4.1 准备实验材料和仪器•淀粉酶溶液•淀粉溶液•恒温水浴•试管•移液器•酶活性检测试剂盒4.2 实验操作步骤1.取一支试管,标记为“试验组”。

2.使用移液器向“试验组”试管中加入10 mL淀粉溶液。

3.使用移液器向“试验组”试管中加入适量的淀粉酶溶液。

4.快速将试管放入恒温水浴中,并固定温度为37摄氏度。

5.开始计时。

6.反应进行1分钟后,使用试管夹取出试管,立即加入酶活性检测试剂盒中。

7.轻轻摇动试管混合,使试剂充分反应。

8.等待适当的时间,观察试剂颜色的变化。

9.使用比色计或其他测量设备,测定试剂颜色的光密度。

10.记录测得的光密度值。

4.3 实验对照组操作步骤为了验证实验结果的准确性,我们设置了一个对照组,即不加淀粉酶的淀粉水解反应。

对照组操作步骤与实验组相同,唯一的区别是在第3步中不加入淀粉酶溶液。

5. 实验结果分析通过测定实验组和对照组的光密度值,我们可以得到淀粉酶的活力。

实验组的光密度值反映了淀粉酶催化淀粉水解的程度,而对照组的光密度值反映了没有淀粉酶催化的淀粉水解程度。

通过比较两者的差异,我们可以得出淀粉酶的活力。

淀粉酶_实验报告

淀粉酶_实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉酶的基本性质和作用。

2. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法。

3. 分析影响淀粉酶活性的因素。

二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,其作用是将淀粉分解成较小的糖类分子。

淀粉酶活性是指单位时间内淀粉被水解的量,通常以淀粉酶活力单位(U)表示。

淀粉酶活性受多种因素影响,如温度、pH值、底物浓度等。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、pH缓冲液等。

2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、量筒、烧杯、比色计等。

四、实验方法1. 淀粉酶活性测定原理:淀粉酶催化淀粉水解,生成葡萄糖。

葡萄糖与碘液反应,产生蓝色复合物。

在一定条件下,淀粉酶活性越高,蓝色复合物颜色越深,可通过比色法测定。

2. 实验步骤:(1)配置淀粉溶液:准确称取一定量的淀粉,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉溶液。

(2)配置淀粉酶溶液:准确称取一定量的淀粉酶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉酶溶液。

(3)pH调节:将淀粉溶液和淀粉酶溶液分别用pH缓冲液调节至适宜pH值。

(4)反应:取一定量的淀粉溶液,加入等体积的淀粉酶溶液,混合均匀,放入恒温水浴锅中,在适宜温度下反应一定时间。

(5)终止反应:反应结束后,加入一定量的碘液,混匀,静置片刻。

(6)比色:用比色计测定蓝色复合物的吸光度,根据吸光度计算淀粉酶活性。

五、实验结果与分析1. 实验结果:根据比色法测定,淀粉酶活性为XX U/mL。

2. 分析:(1)温度对淀粉酶活性的影响:在实验过程中,观察到温度对淀粉酶活性有显著影响。

随着温度升高,淀粉酶活性逐渐增加,达到一定温度后,活性达到最高值,随后活性下降。

这说明温度是影响淀粉酶活性的重要因素。

(2)pH值对淀粉酶活性的影响:实验中发现,淀粉酶活性在不同pH值下有所差异。

在pH值6.0-7.0范围内,淀粉酶活性较高;而在pH值5.0以下或8.0以上,淀粉酶活性明显降低。

这说明pH值对淀粉酶活性有显著影响。

淀粉酶活力的测定实验报告

淀粉酶活力的测定实验报告

淀粉酶活力的测定实验报告淀粉酶活力的测定实验报告引言:淀粉酶是一种重要的酶类,广泛存在于生物体内。

它能够催化淀粉的水解反应,将淀粉分解为可溶性糖类。

淀粉酶活力的测定对于了解酶的功能和特性具有重要意义。

本实验旨在通过测定淀粉酶活力的方法,探究酶的催化作用以及影响酶活力的因素。

实验材料与方法:材料:- 淀粉溶液- 淀粉酶溶液- 盐酸溶液- 碘液- 试管- 恒温水浴方法:1. 准备一系列浓度不同的淀粉溶液,如0.1%、0.2%、0.3%等。

2. 将试管标记为不同的浓度,并分别加入相应浓度的淀粉溶液。

3. 在每个试管中加入相同体积的淀粉酶溶液,并迅速混合。

4. 将试管放入恒温水浴中,保持恒定的温度。

5. 在一定时间间隔内,取出一定体积的反应液,加入碘液停止反应。

6. 通过比色法测定淀粉的浓度,进而计算淀粉酶的活力。

结果与讨论:实验结果显示,淀粉酶活力随着淀粉溶液浓度的增加而增加。

这是因为淀粉酶需要与淀粉分子结合才能发挥催化作用,高浓度的淀粉溶液提供了更多的底物供给,从而增加了酶的活性。

另外,我们还观察到淀粉酶活力随着反应时间的延长而增加,但在一定时间后趋于稳定。

这是因为酶的活性在反应初期较高,但随着反应进行,底物浓度逐渐减少,酶的活性也会逐渐降低。

此外,实验结果还显示淀粉酶活力受到温度的影响。

在较低温度下,酶的活性较低,而在适宜的温度范围内,酶的活性最高。

然而,当温度过高时,酶会发生变性,活性会显著下降。

结论:通过本实验,我们成功测定了淀粉酶的活力,并探究了影响酶活力的因素。

实验结果表明,淀粉酶活力受到淀粉溶液浓度、反应时间和温度的影响。

深入了解酶的催化作用和特性,有助于我们更好地理解生物体内的代谢过程,并为工业生产中的酶应用提供理论依据。

然而,本实验还存在一些局限性。

首先,我们仅仅测定了淀粉酶活力的影响因素,对于其他酶的活力测定仍需进一步研究。

其次,实验结果受到实验条件和操作的影响,仍需要进一步优化实验方法和控制实验条件。

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淀粉酶活性的测定
一、实验目的
酶的活力是酶的重要参数,反映的是酶的催化能力,因此测定酶活力是研究酶的基础。

酶活力由酶活力单位表征,通过计算适宜条件下一定时间内一定量的酶催化生成产物的量得到。

淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总称。

α-淀粉酶是一种典型的内切型淀粉酶,主要作用于淀粉水解的液化阶段,因此又叫液化酶。

作为一种最重要的工业酶制剂,α-淀粉酶广泛存在于动物,植物和微生物中。

其中,微生物α-淀粉酶以其经济易得成为工业生产主要来源。

目前,关于α-淀粉酶活性的测定方法很多种。

本实验采用杨氏改良法测定α-淀粉酶;掌握测定α-淀粉酶活性大小与温度关系的方法,通过分析得出酶的最适温度范围。

二、实验原理
酶促反应中,反应速度达到最大值时的温度和pH值称为某种酶作用时的最适温度和pH值。

温度对酶反应的影响是双重的:一方面随着温度的增加,反应速度也增加,直至最大反应速度为止;另一方面随着温度的不断升高,而使酶逐步变性从而使反应速度降低,其变化趋势呈钟形曲线变化。

不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度,以及产物的性质等均有差异。

α-淀粉酶属水解酶,作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键,迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖,使淀粉的粘度迅速下降,淀粉与碘的反应逐渐消失,这种作用称为液化作用,生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。

α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键,因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。

本实验通过淀粉遇碘显蓝色,淀粉含量越高,颜色越深。

用分管光度计检测显色效应大小,通过分管光度值计算酶活力
注意:实验中为了消除非酶促反应引起的淀粉水解带来的误差,每组实验都做了相应的对照实验,在最终计算酶的活性时以测量组的值减去对照组的值加以
校正。

在实验中要严格控制温度及时间,以减小误差。

并且在酶的作用过程中,三支测定管及空白管不要混淆。

三、材料、试剂与仪器
实验材料:α-淀粉酶
仪器:分光光度计、电热恒温水浴锅、小台秤、研钵、玻璃仪器若干
试剂:
COOH及 HCl:
① NaOH/ CH
3
② %工作碘液:克I
和克KI水中研磨,定容至1000mL;
2
COOH,③1%糊化淀粉溶液:称取克淀粉,加入 NaOH,60℃5min,冷却后加 CH
3定容至100mL;
④稀释α-淀粉酶溶液:待测样品
四、实验步骤
① 10mL1%淀粉溶液加入试管中,室温25/45/65℃保温10min
②于每管中各加酶稀释液1mL,在室温25/45/65℃恒温水浴中(水浴温度的变化不应超过±℃)准确加热10min,冷却。

③加1mL1M盐酸终止反应。

⑤取上述混合液1mL加入预先装好10mL工作碘液的试管,摇匀。

⑥660nm测吸光度(蒸馏水调零),记录数据。

(注:吸光度测定勿漏空白对照
组)
对照组为不加酶液,加相应体积的水
五、数据整理及计算
根据以上的数据整理的结果,结合以下公式计算两种淀粉酶的活性:
酶活=[(D0-D)*100/D0*10]*稀释倍数
D—反应混合液吸光度
D0—对照组吸光度
100—系数(%)
10—反应时间
酶活定义:1克α-淀粉酶单位相当于在pH ,温度25、45、65℃,1 min将浓度为1%的淀粉溶液的显蓝强度降低1%时所需酶量。

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