微生物实验抽签考试题

1.显微镜的基本构造？

机械装置、光学系统两大部分组成。

2.显微镜观察标本时的基本步骤？

先安放好显微镜，距离桌面边缘10cm左右。接通电源，打开镜座处的照明光源，把聚光器调到最高，将待观察的标本玻片放在载物台上，用玻片夹夹住，移动推进器使观察对象在物镜正下方。将×10倍的物镜下降，先调节粗调节器使标本在视野中初步聚焦，在调节细调节器调至图像清晰。调节时先从侧面注视，小心调节物镜靠近标本，然后用目镜观察，慢慢调节物镜离开标本，以免因操作失误而损坏镜头及玻片。

3.显微观察时如何调节光强？正确使用光强在显微镜操作中的意义何在？

主要调节镜座照明光源的亮度、聚光器的高度、反光镜，一般虹彩光圈数值孔径确定后不应再调节，但也不一定。意义，使视野的光线均匀，量度适宜，如果量度过低或过高都会导致视野不清晰。

4.如何使用显微镜的油镜？观察时有哪些注意事项？

先高倍镜下找到要观察的目标，转动转换器将高倍镜转离工作位置，在待观察的样本区域第一滴香柏油，将油镜转到工作位置，从侧面观察调节粗调节器使油镜的镜头浸到香柏油中。将聚光器调到最高的位置并开足光圈，若所用油镜的数值孔径值超过1.0，还应在聚光器和载玻片之间滴加香柏油。调节照明视野的适应亮度，微调细调节器使物象清晰，移动推进器仔细观察标本，记录所观察到的现象。

注意事项：切不可将高倍镜转动经过加有镜油的区域；应先从侧面观察将油镜的镜头浸泡在镜油中，再微调节细调节器观察样品标本，以免因操作失误而损坏镜头；有时按照规范的操作仍找不到目标，可能是镜头下降还未到位，或因油镜上升过快，以至眼睛捕捉不到一闪而过的物象，此时应重新操作。

5.为什么目镜测微尺必须用镜台测微尺校正，而且接物镜改变，校正也要改变？

目镜测微尺是放在接目镜的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象，因此在用目镜测微尺测量微生物大小前必须用镜台测微尺校正；由于不同目镜和不同的物镜组合放大倍数是不一样的，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也是不同的，因此每次换用物镜或目镜时都应重新校正。

6.高压蒸汽灭菌锅工作的基本原理？

加热时高压蒸汽灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽，待水蒸气急剧的将空气从锅内排出去后，关闭排气阀，继续加热，此时，锅内蒸汽压上升，使水的沸点升高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

湿热灭菌效力比干热高的原因：湿热中细菌吸水，蛋白质凝固所需的温度降低，更易凝固；湿热的穿透性比干热的强；湿热的蒸汽有潜热存在，能够迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力。

7.用于活菌计数的方法是哪些？各有何优缺点？

平板菌落计数法：将待测菌液经适当稀释后涂布在平板上；经过培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据稀释倍数和取样量计算出样品中细胞密度。

缺点：待测样品往往不易完全形成单菌落，因此一个菌落不一定是由一个细胞生长繁殖

而成，可能来自两个或多个细胞，因此平板菌落计数法得到的结果往往比样品实际细胞数低；操作繁琐，结果需要培养一段时间才能获得；测定结果受多种因素的影响。

优点：直接反应样品中活细菌的数量。

8.细菌菌落特征的描述包括哪些方面？

形状、大小、颜色、中间是否凹凸、边缘是否光滑、菌落周围是否有菌环等。

9.牛肉膏蛋白胨培养基包含哪些基本组分？

牛肉膏3g、蛋白胨10g、琼脂15—20g、NaCl 5g、水1000ml

10.微生物的分离为什么进行梯度稀释？

11.为什么进行倒置培养？

防止培养基被污染影响接种细菌的生长；这样可以防止养分沉淀在培养基底部，可以给细菌提供充分的细菌。

12.何为cfu，通过分离培养对土壤细菌数量进行确定，为何可以用cfu？

Cfu：colony-forming unit的缩写，菌落形成单位。由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，平板上形成的每个菌落不一定是由一个细胞生长繁殖而成的，有的可能来自两个或两个以上的细胞，因此，平板菌落计数的结果往往比样品中实际细胞数低，这就是现在使用菌落形成单位取代以前用绝对菌落数来表示样品活菌含量的原因。

13.细菌革兰氏染色的基本原理？在实际应用中有何意义？

基本原理：革兰氏阴性菌和阳性菌的细胞壁结构和组成的差异，导致染色结果不同。先用草酸铵结晶紫初染，所有细菌均着上结晶紫的紫色。再用卢氏碘液进行媒染，形成碘—结晶紫复合物增强染料在菌体内的滞留能力。再用95%的乙醇脱色，两种细菌的脱色效果不同。阳性菌细胞壁肽聚糖含量高，壁厚且脂质含量低，其所具有的网孔结构可以滞留碘-结晶紫复合物，乙醇处理可以使肽聚糖网孔收缩而使碘-结晶紫复合物滞留在细胞壁，菌体保持原有的蓝紫色。而革兰氏阴性细菌细胞肽聚糖含量低，交联度低，壁薄且脂质含量高，乙醇处理时脂质溶解细胞壁通透性增加，原先滞留在细胞壁内的染料被洗脱下来，菌体为无色，用复染剂染色后为复染剂的颜色。

意义：用来区分革兰氏阴性细菌和阳性细菌；染色后便于观察。

14.革兰氏染色的基本步骤？

15.放线菌的形态特征？

菌丝直径小于1μm，无隔膜，单细胞；可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种；主要以无性孢子繁殖。

16.酵母菌的形态特征？

单细胞真核微生物，形状——单细胞，卵圆、柱状等 n 假菌丝——母子细胞连接而成的链状丝。 n 大小——ø为细菌的10倍 n 繁殖：芽体、子囊孢子

17.霉菌的形态特征？常见有哪些种类？

组成单位：菌丝。n 细胞呈管状，直径约为3～ 10μm。n 许多菌丝相互交织形成菌丝体。霉菌的菌丝

v 按结构分：

v 无隔菌丝（如根霉、毛霉等）v 有隔菌丝（如青霉、曲霉等）

v 按功能分：

v 营养菌丝v 气生菌丝v 繁殖菌丝

18.我们观察的放线菌、酵母及各类霉菌各有何重要用途？

19.何为大肠菌群，包括哪些属的菌？

是一群能在37℃下24h内发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。是温血动物肠道内的正常菌群，包括4个属：埃希氏菌属（Escherichia）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、克雷伯菌属（Klebsiella）、肠杆菌属（Enterobacter）。

20.谈谈三步九管法的基本原理？

溴甲酚紫水溶液在PH7左右是蓝紫色的，当ph减小时会变黄色，利用这一指示剂的特性初发酵时可以判断产酸的试管。大肠菌群发酵会产酸，因此可以进而判断出那支试管里有产酸的大肠菌群。

21.胆盐培养基含哪些成分，各有何作用？

蛋白胨20g、牛胆盐5g、乳糖10g、0.04%溴甲酚紫水溶液25mL、水1000mL，pH 7.4

22.伊红美蓝（EMB）培养基含哪些成分，各有何作用？

蛋白胨10g、乳糖5g、蔗糖5g、K2HPO4 2g、伊红Y 0.4g、美蓝0.065g、蒸馏水1000mL

23.为什么要选择大肠菌群作为水源、食品、药品被肠道病原菌污染的指示菌？

大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示水体、食品、药品中有否粪便污染。

24.有哪些经典的实验可以研究细菌对含碳化合物和含氮化合物的分解和利用？

. 含碳化合物的分解和利用

淀粉水解试验、油脂水解试验、甲基红试验、糖类（醇或糖苷）发酵试验、

含氮化合物的分解和利用