挥发性脂肪酸(VFA)的测定
挥发性脂肪酸的测定——5种方法
5 VFA的滴定法分析（1）原理本法原理是将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH溶液滴定馏出液。
废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮，如果要同时测定氨态氮，以硼酸溶液吸收后滴定之。
因此此法可用于氨态氮和VFA的联合测定。
（2）药品①10%NaOH溶液②NaOH标准溶液，0.1000mol/l③10%磷酸溶液，取70ml密度1.7mg/cm3的磷酸用水稀释至1L。
④酚酞指示剂，1%的乙酸溶液。
（3）测定步骤于蒸馏瓶中放入50—200ml待测废水，其VFA含量不超过30mmol。
如水样体积不足100ml，可以蒸馏水稀释至100ml。
放入几滴酚酞指示剂。
加入10%NaOH溶液，使溶解呈碱性，并使NaOH略过量。
开始蒸馏，至蒸馏瓶中剩余的液体为50—60ml为止。
用蒸馏水将蒸馏瓶剩余液体稀释至原来的体积，用10ml10%的磷酸酸化，在接受瓶中放入10ml蒸馏水并使接受瓶与蒸馏瓶上的冷凝管连接，导入管应浸入接受瓶的液面以下。
蒸馏至瓶中液体为15—20ml为止。
待蒸馏瓶冷却后，加入50ml蒸馏水再次蒸馏，至剩余10—20ml液体为止。
为了除去二氧化碳、硫化氢、二氧化硫等干扰物，可向馏出液中通入高纯氮气10—15min，然后加入10滴酚酞，用NaOH标准溶液滴定至淡粉色不消失为止。
（4）计算挥发性脂肪酸含量计算如下：VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L)式中：V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH标准溶液的体积，ml;c ------ 滴定消耗的NaOH标准溶液的准确浓度，mol/L;挥发性脂肪酸(VFA)的测定挥发性脂肪酸是厌氧硝化过程的中间产物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO2和H2生成。
VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA浓度对甲烷菌有抑制作用。
实验7污泥中挥发性脂肪酸的测定
实验三污泥中挥发性脂肪酸的测定一、实验目的挥发性脂肪酸（VFA)包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸及它们的异构体，在VFA测定中，其单位常换算为按乙酸计，以mg/L表示。
常用的测定方法有滴定法和气相色谱分析法。
通过本实验将掌握滴定法测定污泥中VFA的方法。
二、实验原理VFA的含量是污染性质的一项重要指标，如新鲜污泥中的脂肪酸含量为10~30mg/L。
消化正常的污泥，其中脂肪酸的含量只有1~5mg/L。
VFA在酸性条件下，经加热蒸馏随水蒸汽逸出，用水蒸汽吸收并用NaOH滴定。
三、实验仪器及试剂1、实验仪器（1）圆底烧瓶；（2）玻璃导管；（3）锥形瓶；（4）电炉。
2、实验试剂（1）磷酸或硫酸；（2）酚酞指示剂；（3）蒸馏水；（4）0.1mol/L的NaOH。
四、实验步骤1、样品的制备移取50mL污泥离心上清液于500mL圆底烧瓶中，加50mL蒸馏水，再加2mL 磷酸或2mL硫酸。
接好玻璃导管，将橡胶塞塞严。
导管一头接烧瓶口，另一头接冷凝管，冷凝管下面导管插入盛有25mL蒸馏水作为吸收液的250mL锥形瓶中。
2、样品的标定加热蒸馏至烧瓶刻度的20mL左右，停止加热使其冷却。
再加入50mL蒸馏水继续蒸馏至烧瓶刻度的25mL 左右。
取下锥形瓶，在电炉上加热至沸，趁热加10滴酚酞指示剂，用0.1mol/L 的NaOH 滴定，记录用量。
挥发性脂肪酸测定实验记录如表3-3所示。
表3-3 挥发性脂肪酸测定实验记录表 序号 氢氧化钠溶液浓度/(1-∙L mol ) 滴定消耗氢氧化钠体积/mL水样体积/mL 挥发性脂肪酸含量/(1-∙L mg ) 1233、数据处理挥发性脂肪酸含量L （mg/L)=100021⨯V cV （3-7） 式中 c ——氢氧化钠溶液浓度，mol/L ；V 1——滴定消耗氢氧化钠体积，mLV 2——水样体积，mL 。
五、讨论（1)在污泥的两相厌氧消化中，如何有效控制挥发性脂肪酸？（2)自行了解气相色谱法测定VFA 的方法，有条件可以进行操作。
挥发性脂肪酸VFA测定步骤与方法
挥发性脂肪酸的测定一、GC（Gas chromatograph）工作条件仪器：GC-14B型气相色谱仪（日本岛津公司）毛细柱：NUKOLTM Capillary Column ( Supelco )；Column No.34292-07B30m×0.32mm×0.25μm film thickness气相色谱仪参数：色谱柱采用毛细吸管柱，柱温130℃，汽化温度180℃，采用氢离子火焰检测器，检测温度180℃，载气为氮气，压力为60 KPa，氢气压力为50 KPa，氧气压力50 KPa，灵敏度（档）为101，衰减 3.0二、样品制备1．试剂制备（1）配制25%w/v 的偏磷酸溶液，将25g偏磷酸溶在100mL双蒸水中（2）巴豆酸的配制，在100ml的偏磷酸溶液中加入0.6464g的巴豆酸，定容到100mL。
（可先用80 ml双蒸水，加热溶解偏磷酸，然后定容至100 ml）（3）标准样品，准确称取色谱标准级乙酸0.9100 g、丙酸0.3700 g、丁酸0.1765 g、异丁酸0.1765g、戊酸和异戊酸分别为0.1985g，分别溶于双蒸水中，再各自定容至100 mL。
2．样品制备(1) 发酵液取（或过滤瘤胃液）VFA测定1ml样品到离心管中，再加入0.2 ml的偏磷酸巴豆酸混合溶液，－20℃冰箱保存过夜，解冻后12000rpm离心5min，取上清液保存，测定前再12000rpm离心5min(或少许通过0.22μm针式滤器，滤液直接进样用 1.0微升微量进样器瞬时注入色谱仪，进样量为0.2－1.0μL。
(2) 食糜及粪样VFA测定取1g置于离心管中，加入5－10倍的双蒸水，混合均匀。
取1mL上清夜，加偏磷酸巴豆酸0.2mL/mL。
其它步骤同上。
3．保留时间的确定与样品处理相同，在 1 ml标准样品中加入0.2mL偏磷酸与巴豆酸的混合样，上样测出乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸的保留时间。
挥发性脂肪酸(VFA)的测定操作规程
挥发性脂肪酸（VFA）的测定
一、VFA的组成:：乙酸、丙酸、丁酸和戊酸等组成，本方法测定
此四种脂肪酸。
二、测定原理
本方法采用直接进样-气相色谱质谱法，根据不同组分在气相色谱柱中保留时间不同而分离，用质谱定性并定量，从而测定待测物中各组分的含量。
三、标准曲线的配制
1、配制10g/L的标准溶液
2、配制1000mg/L的中间液。
用20%HCL配制。
3、配制20、50、80、100、200mg/L的标准曲线溶液。
四、气相色谱质谱条件设置
水样50ml加入0.5ml的30%磷酸，浑浊水样需要提前过滤或者离心。
五、气相色谱质谱条件设置
进样口温度：220℃柱流量：2.09ml/min
进样模式：分流（20：1）
升温程序：40℃（2min）--20℃/min--240℃（2min）
离子源温度：200℃接口温度：240℃
六、实际操作
首先使用SCAN定性，再生成SIM方法定量，升温程序等条件相同。
VFA测定
VFA含量测定采用比色测定法[124]。
测定原理：含挥发性脂肪酸的样液，在加热条件下，与酸性乙二醇作用生成脂，此脂再与羧胺反应，形成氧肟酸。
在高铁试剂存在下，氧肟酸可以转化为高铁氧肟酸的棕红色络合物，其颜色的深浅在一个较大的范围内与反应初始物—挥发性脂肪酸的含量成正比。
故可以用比色法测定。
测定方法Ⅰ、试剂1:1硫酸：浓硫酸加至同体积的蒸馏水中稀释配置；酸性乙二醇试剂：取30.0 ml乙二醇与4.0 ml配置的稀硫酸混合；4.5 mol·L-1NaOH：称量180 g NaOH溶于蒸馏水中，冷却后用蒸馏水定容至1 L；10%的硫酸羟胺溶液：称取硫酸羟胺10.0 g溶于100 ml蒸馏水中；羟胺试剂：量取20.0 ml 4.5 mol·L-1NaOH溶液与5.0 ml 10%的硫酸羟胺溶液相混合；酸性氯化铁试剂：将20.0 g FeCl3·6H2O溶于500 ml蒸馏水中，准确加入20.0 ml 浓硫酸，以蒸馏水稀释至1 L。
Ⅱ、定程序①乙酸标准液的配置：准确称取乙酸（分析纯，比重1.045，含量99.0%）1.010 g，以蒸馏水稀释至100 ml，此溶液含乙酸10 mg／ml；准确吸取乙酸标准溶液5.0，10.0，15.0，20.0，25.0 ml，分别置于100 ml容量瓶中，以蒸馏水定容，摇匀，即得500，1000，1500，2000，2500（ppm）的标准系列液；②标准曲线的绘制：分别吸取上述标准系列液0.5 ml分置于试管中（12.5×1.5 cm），每瓶中加入1.7 ml酸性乙二醇试剂，充分混匀，于沸水中加热3 mins，后立即以冷水冷却，再加入2.5 ml羟胺试剂，充分摇匀，然后全部加入装有10 ml酸性氯化铁试剂的25 ml容量瓶中，充分振荡摇匀，以蒸馏水定容。
用72型分光光度计以500 nm波长测定其OD值。
绘制标准曲线，乙酸的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标。
挥发酸的测定方法-磷酸法
挥发性脂肪酸(VFA)的测定挥发性脂肪酸是厌氧硝化过程的中间产物，甲烷菌主要利用VFA 形成甲烷，只有少部分甲烷由CO 2和H 2生成。
VFA 在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA 浓度对甲烷菌有抑制作用。
VFA 包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸及它们的异构体，在运转良好的反应器中，乙酸比例较高，反应器不好时，甲酸、丙酸浓度升高。
在VFA 测定中，其单位常换算为按乙酸计，以mg/L 表示。
常用的测定方法有：滴定法和气相色谱分析法滴定法测VFA ：1、原理将废水酸化后，从中蒸馏出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用氢氧化钠滴定馏出液。
废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸馏出。
2、仪器：50ml 碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸馏烧瓶（500ml ）、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试剂：(1)10%氢氧化钠：10g 氢氧化钠溶于水,稀至100ml 。
(2)10%磷酸溶液：取70ml 浓磷酸稀释至1L 。
(3)酚酞指示剂：称取酚酞溶于50ml 95%的乙醇中,用水稀释至100ml 。
(4)氢氧化钠标准溶液L)：称取60g 氢氧化钠溶于50ml 水中，转入聚乙烯瓶中静置24h ，吸取上层清夜约置于1000ml 容量瓶中,稀释至标线。
标定：称取在105-110℃干燥过的基准试剂(邻)苯二甲酸氢钾约（称准至）,置于250ml 锥形瓶中，加无二氧化碳水100ml 使之溶解，加入4滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠标液滴定至浅红色为终点，同时，用无二氧化碳水做空白滴定。
计算：()23.2041000)L /(01⨯-⨯=V V m mol 氢氧化钠标液浓度 m -苯二甲酸氢钾的质量(g); 0V —滴定空白时消耗氢氧化钠标液的量(ml)1V —滴定苯二甲酸氢钾时消耗氢氧化钠的量(ml);—苯二甲酸氢钾的摩尔质量(g/L)3、实验步骤(1)于蒸馏烧瓶中加入100ml 待测水样，几粒玻璃珠，加入几滴酚酞指示剂，然后加入10%氢氧化钠溶液使使水样呈碱性（溶液出现红色），并使氢氧化钠略过量。
VFA的测定方法及标准曲线
VFA的测定方法及标准曲线
VFA测定的方法
指标挥发性脂肪酸VFA，包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸
检测方法液相色谱法
分析仪器高效液相色谱仪，HPLC （Agilent 1200, 安捷伦科技有限公司，美国）
检测条件流动相：%稀磷酸，流速mL min-1；
检测器：紫外检测器，波长=210 nm；
分析柱：Shodex RSpak KC-811 有机酸专用分析柱（6 μm, 8× 300 mm）+ KC-G 保护住（10 μm, 6× 50 mm），柱温箱恒定55℃；
进样：自动进样器进样，进样量20 μL；
定量：基于峰面积的外标法。
样品处理：过μm水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。
注：乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为、、、、、。
实验仪器
高效液相色谱仪（Agilent 1200,）
VFAs标准系列配置
选取分析纯或色谱纯的乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸六种标准品。
首先配置5g/L的标准储备液
然后再配制VFAs标准系列
VFAs标线
通过对标准样品的VFAs测定，做出VFAs的标准曲线。
整理后的数据
做出标准曲线
注：纵坐标为浓度（mg/L），横坐标为峰面积。
VFA 测定方法
挥发性脂肪酸（VFA）分析化验方法目的：提供有关有机物厌氧降解过程中最适于甲烷菌的最佳环境条件的资料，动态调节厌氧处理系统以确保厌氧生化降解过程的顺利进行。
原理：挥发性脂肪酸和醇类可在酸性介质中水蒸汽蒸馏法蒸馏分离，用煮沸法驱除滤液中的二氧化碳，再用氢氧化钠滴定，以酚酞作指示剂。
化学试剂的配制和标定：1.酚酞指示剂：将0.5g酚酞溶入50ml95％的乙醇中，再加蒸馏水稀释至100毫升。
2.氢氧化钠溶液：浓度大约为0.1mol/la).称取4克分析纯的氢氧化钠固体于100ml的烧杯中，加入约50ml蒸馏水溶解，溶解完全后转移至100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至1000ml,摇晃均匀，浓度标记为：N mol/l。
b).准确称取0.2g于105℃电烘箱中预先烘干至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾，精确至小数点后四位，即天平的精确度，记为X1，加50ml无二氧化碳的蒸馏水（普通蒸馏水加热至沸腾5分钟冷却后备用）溶解，加5滴酚酞指示剂，用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，并保持30秒，记录所用的氢氧化钠溶液的毫升数，精确至小数点后两位。
记为：L1，以50ml无二氧化碳的蒸馏水做空白，记录氢氧化钠的毫升数，精确至小数点后两位，记为：L2。
等当量关系为：（L1-L2）*N/1000=X1/204.223其中：204.233为邻苯二甲酸氢钾（ KHP）的分子量（可参照所购化学药品标签上所标注的分子量值）计算出氢氧化钠的浓度为：N = X1*1000÷204.223*(L1-L2)(mol/l)3.浓磷酸：分析纯浓磷酸实验室操作步骤：1．取50ml样品水样放入消化管中，加入5ml浓磷酸，轻轻摇晃均匀，用蒸馏器进行蒸馏，以500ml的锥形瓶为容器，弃用开始馏出的5ml,待蒸馏液200ml后停止蒸馏，将蒸馏液置于电炉煮沸5分钟后取下自然冷却至室温。
2．加5滴酚酞指示剂，用已标定的氢氧化钠溶液滴定，终点为粉红色。
VFA测定操作规程-滴定法
VFA 分析操作规程------蒸馏后滴定法脂肪酸（挥发性脂肪酸）属于可以在常压下蒸馏的水溶性脂肪酸，它是鉴定污泥消化及厌氧发酵好坏的重要指标之一。
一、适用范围本方法规定了蒸馏后用氢氧化钠滴定法测定沼液中脂肪酸的方法。
本方法适用于城市污水处理厂中消化污泥样品及厌氧发酵试验沼液中脂肪酸的测定。
二、实验原理将挥发性脂肪酸从上清液中蒸馏出来，用水吸收后与标准碱反应，测定挥发性脂肪酸的含量。
三、试剂1 无二氧化碳水将pH 值不低于6.0的蒸馏水，煮沸15min ，加盖冷却至室温。
如果蒸馏水pH 值较低，可适当延长煮沸时间，最后水的pH ≥6.02 酚酞指示液称取0.5g 酚酞溶于50ml 95%乙醇中，用水稀释至100ml 。
3 磷酸（H 3PO 4）：ρ=1.70g/ml ，分析纯4 氢氧化钠标准溶液（c=0.1000 mol/L ）(1) 氢氧化钠标准溶液的配制称取60g 氢氧化钠，溶于50ml 蒸馏水中，冷却后移入聚乙烯细口瓶中，盖紧橡皮塞，静置4d 以上。
然后吸取上层澄清溶液7.5 ml ，用无二氧化碳水稀释至1000ml 容量瓶，此溶液约为0.1mol/L 。
(2) 氢氧化钠标准溶液的标定取基准试剂级邻苯二甲酸氢钾在105℃-110℃烘干至恒重。
精确称取约0.5g （称准至0.0001g ），置于250ml 锥形瓶中，加入100ml 水，稍加热使之溶解。
然后加入4滴酚酞指示剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至淡红色不褪为止。
记录下氢氧化钠标准溶液的用量（ml ），并按下式计算其浓度：23.2041000⨯⨯=V G C b式中，Cb--氢氧化钠标准溶液浓度（mol/L）；V--氢氧化钠标准溶液用量（ml）；G--邻苯二甲酸氢钾重量（g）；204.23--邻苯二甲酸氢钾(KH4C8H4O4)摩尔质量(g/mol)。
四、试验装置及仪器低速离心机带有500ml烧瓶和直型冷凝管的蒸馏装置碱式滴定管：15ml250ml锥形瓶打浆机五、实验步骤5.1采样测定脂肪酸的样品应特别注意样品的代表性，采集的样品应尽快分析测定，如需放置，应密闭储存在4℃冷藏冰箱中，保存时间不能超过24h。
VFA的测定
挥发性脂肪酸（VFA）的测定--------Q/YZJ10-03-02-2000 1、范围本标准适用于工业废水厌氧消化过程中消化液中的挥发酸含量的测定。
2、引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
本标准出版时，所示版本均有效。
所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T 6682-1992分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696-1978）GB12999-1992水质采样样品保存规定。
3、方法提要样品中的乙酸、丙酸、丁酸等挥发性有机物在酸性条件下被蒸馏出来，馏出液经回流以除去CO2、H2S、SO2等气体，趁热以酚酞为指示剂用L的氢氧化钠溶液滴定，结果以乙酸计算。
4、试剂和材料除另有说明，本标准使用的试剂和水，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。
；25%硫酸溶液取250毫升分析纯浓硫酸加入约700毫升蒸馏水中，然后加水至1升。
酚酞指示剂称取0.5克酚酞，溶于50ml 95%乙醇中，用水稀释至100ml。
氢氧化钠溶液配制及标定称取60克氢氧化钠溶于50ml水中，转入150ml的聚乙烯瓶中，冷却后，用装有碱石灰管的橡皮塞塞紧，静置24小时以上。
吸取上层清液约置于1000ml 容量瓶中，用无二氧化碳水稀释至标线，摇匀。
称取在105-110度干燥过的基准试剂级苯二甲酸氢钾约0.5克（称至0.0001g），置于250ml锥形瓶中，加无二氧化碳水100ml使之溶解，加入4滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠标准溶液滴定至浅红色为终点。
同时用无二氧化碳水做空白滴定，按下式计算。
氢氧化钠标准溶液浓度（mol/L）=M×1000/[(V1-V0) ×]式中：m—称取苯二甲酸氢钾的质量（g）；V0—滴定空白时所耗氧氧化钠标准溶液体积（ml）；:V1—滴定苯二甲酸氢钾时所耗氢氧化钠标准溶液的体积（ml）；—苯二甲酸氢钾的摩尔质量（g/mol）。
挥发性脂肪酸VFA测定
VFA的测定一、滴定法测VFA：1、原理将废水酸化后，从中蒸馏出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用氢氧化钠滴定馏出液。
废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸馏出。
2、仪器：50ml碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸馏烧瓶（500ml）、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试剂：(1)10%氢氧化钠：10g氢氧化钠溶于水,稀至100ml。
(2)10%磷酸溶液：取70ml浓磷酸稀释至1L。
(3)酚酞指示剂：称取0.5g酚酞溶于50ml 95%的乙醇中,用水稀释至100ml。
(4)氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L)：称取60g氢氧化钠溶于50ml水中，转入聚乙烯瓶中静置24h，吸取上层清夜约7.5ml置于1000ml容量瓶中,稀释至标线。
称取在105-110℃干燥过的基准试剂(邻)苯二甲酸氢钾约0.5g（称准至0.0001g）,置于250ml锥形瓶中，加无二氧化碳水100ml使之溶解，加入4滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠标液滴定至浅红色为终点，同时，用无二氧化碳水做空白滴定。
计算：-苯二甲酸氢钾的质量(g);—滴定空白时消耗氢氧化钠标液的量(ml)—滴定苯二甲酸氢钾时消耗氢氧化钠的量(ml);204.23—苯二甲酸氢钾的摩尔质量(g/L)3、测定步骤：(1)于蒸馏烧瓶中加入100ml待测水样，几粒玻璃珠，加入几滴酚酞指示剂，然后加入10%氢氧化钠溶液使使水样呈碱性（溶液出现红色），并使氢氧化钠略过量。
(2)打开冷凝水，开始蒸馏，蒸馏至瓶中液体为50～60ml，(如果测定氨氮，则可用50ml硼酸吸收馏出液。
如果不，可倒掉。
)(3)加入约40～50ml蒸馏水，加入10ml10%磷酸酸化，在接受瓶中加入10ml蒸馏水，将冷凝管插入液面下，蒸馏至瓶中液体为15～20ml。
待冷却后，加入50ml 蒸馏水继续蒸馏，至瓶中剩余液体10～20ml止。
(4)向馏出液中加入10滴酚酞指示剂，用氢氧化钠标液滴定至氮淡粉红色不消失止，记录用量。
VFA检测规程
UASB出水挥发酸（VFA）检测规程1．目的挥发性脂肪酸（VFA）是厌氧消化过程的重要中间产物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷。
只有少部分甲烷由CO2和H2生成，但CO2和H2的生成也经过高分子有机物形成VFA的中间过程。
由此看来，形成甲烷的过程离不开VFA的形成，但是VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA （如乙酸）浓度对甲烷有抑制作用。
因此在反应器运行中，出水VFA 用作重要控制指标。
2．适用范围以本检测适用于UASB出水挥发酸的测定3．检测准备3．110%NaOH溶液。
3．2NAOH标准溶液，0.1000mol/L3．3 10%磷酸溶液，取70ml密度1.7g/cm3的磷酸用水稀释至1000ml3．3酚酞指示剂，1%的乙醇溶液4．检测过程于蒸馏水中放入50—200ml待测废水，其VFA含量不超过30mmol，如果水样体积不足100ml，可用蒸馏水稀释至100ml。
放入几滴酚酞指示剂。
加入10%NaOH溶液，使溶液呈碱性，并使NaOH略过量。
开始蒸馏，至蒸馏瓶中剩余液体为50—60ml为止。
（废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当在碱性条件下蒸发出氨态氮）。
用蒸馏水将蒸馏瓶中剩余液体稀释至原来的体积，用10ml10%磷酸酸化，在接收瓶中放入10ml蒸馏水并使接收瓶与蒸馏瓶上的冷凝管连接，导入管应浸入接收瓶的液面以下。
蒸馏至瓶中液体为10—20ml为止。
为除去二氧化碳，硫化氢，二氧化硫等干扰物，可向馏出液中通入高纯度氮气10--15秒，然后加入10滴酚酞，用标准液滴定至淡粉红色不消失为止。
计算：挥发性脂肪酸含量计算如下V NaOH×CVFA=———————×1000(mmol/L)V式中：V NaOH---滴定消耗的标准溶液的体积(ml)C---滴定消耗的标准溶液的准确浓度(mol/L)V---被测废水水样的体积(ml)5．注意事项5．1 在VFA测定中，常进行VFA总量测定，其单位以mmol/L 或换算为按乙酸计，以单位mg/L表示。
VFA的测定方法及标准曲线
VFA的测定方法及标准曲线
VFA测定的方法
指标挥发性脂肪酸VFA，包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸
检测方法液相色谱法
分析仪器高效液相色谱仪，HPLC （Agilent 1200, 安捷伦科技有限公司，美国）
检测条件流动相：0.05%稀磷酸，流速0.7 mL min-1；
检测器：紫外检测器，波长=210 nm；
分析柱：Shodex RSpak KC-811 有机酸专用分析柱（6 μm, 8× 300 mm）+ KC-G 保护住（10 μm, 6× 50 mm），柱温箱恒定55℃；
进样：自动进样器进样，进样量20 μL；
定量：基于峰面积的外标法。
样品处理：过0.45 μm水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。
注：乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为15.15、17.30、19.18、20.64、23.43、28.00min。
实验仪器
高效液相色谱仪（Agilent 1200,）
VFAs标准系列配置
选取分析纯或色谱纯的乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸六种标准品。
首先配置5g/L的标准储备液
然后再配制VFAs标准系列
VFAs标线
通过对标准样品的VFAs测定，做出VFAs的标准曲线。
整理后的数据
做出标准曲线
注：纵坐标为浓度（mg/L），横坐标为峰面积。
挥发性脂肪酸和碱度的测定办法
VFA即挥发性脂肪酸，下边为大家整理了一些相关资料，希望对大家有所帮助。
挥发性脂肪酸和碱度的测定步骤
1、随机取样，5000rpm离心5分钟，或滤纸过滤。
取上清液测定。
2、取V毫升离心或过滤后的样品，估计不超过3meq的VFA，用去离子水稀释至100mL。
3、用0.1N的HCl滴定至pH为3.0，并记录所用HCl的体积数（A mL）。
4、移至锥形瓶，接带有流动的冷凝水的玻璃冷凝器在电炉上加热并煮沸3分钟去除CO2。
5、去除热源，继续回流冷凝2分钟，用蒸馏水进一步喷淋冷却快速将温度降至室温。
锥形瓶与回流冷凝管脱离后，在冷却过程中瓶口应加盖以防止空气中CO2融入。
6、冷却后用0.1N的NaOH滴定至样品pH为6.5。
记录所用NaOH量（B mL）。
7、VFA 和碱度的计算公式为：
VFA （meq/L ）=
碱度（meq/L ）= 以上就是有关VFA 碱度测定的一些相关介绍，希望对您进一步的认识了解有所帮助。
B ×101－(A+100) ×100 99.23 V (A －B)×100
V。
挥发酸的测定方法-磷酸法
挥发性脂肪酸(VFA)的测定挥发性脂肪酸是厌氧硝化过程的中间产物，甲烷菌主要利用VFA 形成甲烷，只有少部分甲烷由CO 2和H 2生成。
VFA 在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA 浓度对甲烷菌有抑制作用。
VFA 包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸及它们的异构体，在运转良好的反应器中，乙酸比例较高，反应器不好时，甲酸、丙酸浓度升高。
在VFA 测定中，其单位常换算为按乙酸计，以mg/L 表示。
常用的测定方法有：滴定法和气相色谱分析法滴定法测VFA ：1、原理将废水酸化后，从中蒸馏出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用氢氧化钠滴定馏出液。
废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸馏出。
2、仪器：50ml 碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸馏烧瓶（500ml ）、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试剂：(1)10%氢氧化钠：10g 氢氧化钠溶于水,稀至100ml 。
(2)10%磷酸溶液：取70ml 浓磷酸稀释至1L 。
(3)酚酞指示剂：称取0.5g 酚酞溶于50ml 95%的乙醇中,用水稀释至100ml 。
(4)氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L)：称取60g 氢氧化钠溶于50ml 水中，转入聚乙烯瓶中静置24h ，吸取上层清夜约7.5ml 置于1000ml 容量瓶中,稀释至标线。
标定：称取在105-110℃干燥过的基准试剂(邻)苯二甲酸氢钾约0.5g （称准至0.0001g ）,置于250ml 锥形瓶中，加无二氧化碳水100ml 使之溶解，加入4滴酚酞指示剂，用待标定的氢氧化钠标液滴定至浅红色为终点，同时，用无二氧化碳水做空白滴定。
计算：()23.2041000)L /(01⨯-⨯=V V m mol 氢氧化钠标液浓度 m -苯二甲酸氢钾的质量(g);0V —滴定空白时消耗氢氧化钠标液的量(ml)1V —滴定苯二甲酸氢钾时消耗氢氧化钠的量(ml);204.23—苯二甲酸氢钾的摩尔质量(g/L)3、实验步骤(1)于蒸馏烧瓶中加入100ml 待测水样，几粒玻璃珠，加入几滴酚酞指示剂，然后加入10%氢氧化钠溶液使使水样呈碱性（溶液出现红色），并使氢氧化钠略过量。
挥发性脂肪酸(VFA)的测定
挥发性脂肪酸(VFA)的测定挥发性脂肪酸,VFA,的测定--碳酸氢盐碱度和VFA分析的联合滴定法,VFA,是厌氧消化过程的重要中间产物～甲烷菌主要利用VFA 挥发性脂肪酸形成甲烷～只有少部分甲烷由CO和H生成。
但CO和H的生成也经过高分子有2222机物形成VFA的中间过程。
由此看来～形成甲烷的过程离不开VFA的形成～但是VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化～较高的VFA,例如乙酸,浓度对甲烷菌有抑制作用。
因此在反应器运行中～出水VFA用作重要的控制指标。
在VFA测定中～常进行VFA总量测定～其单位以mmol/L或换算为按乙酸计～以单位mg/L表示。
对VFA中各种低级脂肪酸,乙酸、丙酸,的分别定量分析也是重要的～有时常需要知道以COD表示的VFA的量,即VFA以单位mgCOD/L,表示～此时也需要知道VFA中各种有机酸的含量～因此它们换算为COD的换算系数是不同的。
VFA包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸以及它们的异构体。
在运转良好的高速厌氧反应器中～VFA中乙酸可占有很高的比例～但当反应器运行状态不好时～丙、丁酸浓度会上升。
,1,分析原理主厌氧处理中会产生大量的CO～在反应器条件下,pH6，8之间,～这些CO22---要以HCO形成存在。
这是厌氧处理中最重要的pH缓冲物～由HCO或主要由HCO333-引起的碱度称为碳酸氢盐碱度。
HCO产生最大缓冲能力的范围约在pH6，7。
如前3-所述～HCO可以通过滴定测定～但测定过程受到其它一些阴离子的干扰～其中发3酵液中常含有的VFA的阴离子是影响碳酸氢盐碱度的主要因素。
为此～在荷兰发展了碳酸氢盐碱度和VFA同时进行测量的方法。
其原理如下:水样先以0.1000mol/L的HCl标准溶液滴定至pH3～在这一pH值下～所有-HCO 被完全转化为HCO～VFA也几乎完全地转化为其非离子形式。
此后～已被滴323 定至pH3的水样在如图所示的带回流冷凝器的烧瓶中煮沸～所有转化为HCO的23-HCO将分解为CO和HO～其中CO完全由其中溢出～而VFA则因为有回流冷凝器3222而保留在水样中。
挥发性脂肪酸(VFA)的测定
挥发性脂肪酸是厌氧消化过程的重要中间产物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO 2和H 2生成。但CO 2和H 2生成也经过高分子有机物形成VFA的中间过程。由此看来，形成甲烷的过程离不开VFA的形成，但是VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA（例如乙酸）浓度对甲烷菌有抑制作用。因此在反应器运行中，出水VFA用作重要的控制指标。
加入10滴酚酞，用NaOH标准溶液滴定至淡粉色不消失为止。
4． 计算
挥发性脂肪酸含量计算如下：
VFA=V (NaOH)V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH标准溶液的体积，ml;
c ------ 滴定消耗的NaOH标准溶液的准确浓度，mol/L;
在VFA测定中，常进行VFA总量测定，其单位异mmol/L或换算为按乙酸计，以单位mg/L表示。
VFA包括甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己酸以及它们的异构体。在运转良好的高速厌氧反应器中，VFA中乙酸可占有很高的比例，但是当反应器运行状态不好时，丙，丁酸浓度会上升。
滴定法分析
1． 原理：将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH溶液滴定馏出液。废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。
加入10% NaOH溶液，使溶解呈碱性，并使NaOH略过量。
蒸馏至蒸馏瓶中剩余液体为50~60ml为止。
用蒸馏水将蒸馏瓶中的剩余液体稀释至原来体积，用10ml 10%的磷酸酸化，在接收瓶中放入10ml蒸馏水并使接收瓶与蒸馏瓶上的冷凝管连接，导入管应浸入接收瓶的液面以下。蒸馏至瓶中液体为15~20ml为止。待蒸馏瓶冷却以后，加入50ml蒸馏水再次蒸馏，至10~20ml液体为止。
挥发性脂肪酸检测方法
挥发性脂肪酸（VFA）的检测方法
a.药品和设备仪器：0.1000mol/L的HCl标准溶液、0.1000mol/L的NaOH标准溶液、250ml 烧瓶（带磨口）、50ml烧杯、移液管、加热回流装置，PH酸度计等。
b.操作步骤
（1）安装并校准自动电位滴定计。
（2）取已经过滤的水样20ml（其中含有VFA的量不超过3ml）加入50ml烧杯。
（3）若此样品水样的pH值高于6.5，则准确调节pH至6.5。
（4）然后，在pH酸度计上滴定此水样至3.0，消耗的0.1000mol/lHCl记作aml。
（5）将此水样转移至磨口烧瓶，加入沸石或玻璃珠少许，加热回流至沸腾3min，然后撤下电炉等待2min，将溶液转稳回50ml烧杯。
（6）以NaOH标准溶液滴定至pH=6.5，消耗的NaOH溶液记作bml。
c.计算：VFA=b*0，1000*1000/20=5bmmol/l
碱度=（a-b）*0.1000*1000/20=5(a-b)mmol/l。
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挥发性脂肪酸(VFA)的测定
挥发性脂肪酸,VFA,的测定
--碳酸氢盐碱度和VFA分析的联合滴定法
,VFA,是厌氧消化过程的重要中间产物～甲烷菌主要利用VFA 挥发性脂肪酸形成甲烷～只有少部分甲烷由CO和H生成。
但CO和H的生成也经过高分子有2222
机物形成VFA的中间过程。
由此看来～形成甲烷的过程离不开VFA的形成～但是VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化～较高的VFA,例如乙酸,浓度对甲烷菌有抑制作用。
因此在反应器运行中～出水VFA用作重要的控制指标。
在VFA测定中～常进行VFA总量测定～其单位以mmol/L或换算为按乙酸计～以单位mg/L表示。
对VFA中各种低级脂肪酸,乙酸、丙酸,的分别定量分析也是重要的～有时常需要知道以COD表示的VFA的量,即VFA以单位mgCOD/L,表示～此时也需要知道VFA中各种有机酸的含量～因此它们换算为COD的换算系数是不同的。
VFA包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸以及它们的异构体。
在运转良好的高速厌氧反应器中～VFA中乙酸可占有很高的比例～但当反应器运行状态不好时～丙、丁酸浓度会上升。
,1,分析原理
主厌氧处理中会产生大量的CO～在反应器条件下,pH6，8之间,～这些CO22---要以HCO形成存在。
这是厌氧处理中最重要的pH缓冲物～由HCO或主要由
HCO333-引起的碱度称为碳酸氢盐碱度。
HCO产生最大缓冲能力的范围约在pH6，7。
如前3-所述～HCO可以通过滴定测定～但测定过程受到其它一些阴离子的干扰～其中发3
酵液中常含有的VFA的阴离子是影响碳酸氢盐碱度的主要因素。
为此～在荷兰发展了碳酸氢盐碱度和VFA同时进行测量的方法。
其原理如下:
水样先以0.1000mol/L的HCl标准溶液滴定至pH3～在这一pH值下～所有-HCO 被完全转化为HCO～VFA也几乎完全地转化为其非离子形式。
此后～已被滴323 定至pH3的水样在如图所示的带回流冷凝器的烧瓶中煮沸～所有转化为HCO的23-HCO将分解为CO和HO～其中CO完全由其中溢出～而VFA则因为有回流冷凝器3222
而保留在水样中。
然后水样以0.1000 mol/L的NaOH标准溶液滴定至pH6.5～在此pH下～所有的VFA和其他弱酸将被转化为其离子形式。
由使用的HCl和NaOH 标准溶液的量～即可计算出碳酸盐碱度和VFA的浓度。
由此得到的结果更易于判断水样在厌氧条件下的缓冲能力。
,2,仪器
1(250ml带磨口烧瓶～250ml烧杯,
2(10ml半微量酸式滴定管,
3(10ml半微量碱式滴定管,
4(回流冷凝器,
5( 自动电位滴定计,
,3,试剂
1(无二氧化碳水
用于制备标准溶液及稀释用的蒸馏水或去离子水～临用前煮沸15min～冷却至室温。
PH值应大于6.0～电导率小于2μs/cm。
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2(酚酞指示液
称取1g酚酞溶于100ml 95%乙醇中～用0.1mol氢氧化钠标准溶液滴定至出现淡红色为止。
3(甲基橙指示剂
称取0.1g甲基橙溶于100ml蒸馏水中。
CO=0.0250 mol/L, 4(碳酸钠标准溶液,1/2 Na23
称取1.392g(于250?烘干4h)的无水碳酸钠(NaCO)～溶于少量无二氧化碳23 水中～移入1000ml容量瓶中～用水稀释至标线～摇匀。
贮于聚乙烯瓶中～保存时间不要超过一周。
5(盐酸标准溶液,0.0250 mol/L,
用分度吸管吸取2.1 ml浓盐酸(ρ=1.19g/ml)～并用蒸馏水稀释至1000ml,此溶液浓度?0.0250 mol/L。
其准确浓度按下法标定:
用无分度吸管吸取25.00 ml碳酸钠标准溶液于250 ml锥形瓶中～加无二氧化碳水稀释至约100ml～加入3滴甲基橙指示液～用盐酸标准溶液滴定至由桔黄色刚变成桔红色～记录盐酸标准液用量。
安下式计算其准确度:
式中～
盐酸标准溶液浓度,mol/L,, c--
V--盐酸标准溶液用量,ml,。
6( 氢氧化钠标准溶液,0.0250 mol/L,
称取60g氢氧化钠～溶于50ml水中～冷却后移入聚乙烯细口瓶中～盖紧瓶盖静置4d以上。
然后吸取上层澄清溶液1.4ml～用水稀释至1000ml～此溶液约为001mol/L。
其精确浓度可用邻苯二甲酸氢钾标定～标定方法如下: 取基准试剂级邻苯二甲酸氢钾在105?-110?烘干至恒重。
精确称取三份～每份约0.1g,称准至0.0001g,～分别置于250ml锥形瓶中～加入100ml水～稍加热使之
溶解。
然后加入4滴酚酞指示剂～用氢氧化钠标准溶液滴定至淡红色不褪为止。
记录下氢氧化钠标准溶液的用量,ml,～并按下式计算其浓度:
式中～
c--氢氧化钠标准溶浓度,mol/L,,
V--氢氧化钠标准溶用量,ml,,
G--邻苯二甲酸氢钾重量,g,,
204.22--苯二甲酸氢钾(KHCHO)摩尔质量(g/mol)。
4844
,4,操作步骤
按自动电位计说明书安装、校正好电位计～以蒸馏水清洗电极。
用移液管吸取过滤后的水样Vml,其中含有VFA的量不超过3mmol,～加入250ml 烧杯中。
将样品水温调制,25?2,?～将盛有此样品的250ml烧杯置于滴定台上～投入长约1.5cm的磁力搅拌棒～打开搅拌开关并调置一定搅拌强度～小新将电极放入烧杯的液面下。
如果此样品水样的pH高于6.5～则准确调节至6.5。
然后在自动电位滴定计上滴定此水样至pH3.0～消耗的0.1000mol/LHCl记作Zml。
将此水样转移至磨口锥形瓶中～加入沸石或玻璃珠少许～按图安装好回流冷第 2 页共 4页
凝器。
打开冷却水～加热至沸腾并维持3min以上～撤离酒精灯并等待2min～将溶液移回250ml烧杯。
以NaOH标准溶液滴定至pH=6.5～消耗的NaOH标准溶液记作bml。
,5,结果计算
式中～
Ca--标准HCl溶液的浓度,mol/L,, Cb--标准NaOH溶液的浓度,mol/L,。
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