最新 酮体的生成及定性
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
酮体的生Biblioteka Baidu及定性
【目的】
1.通过实验证明肝有生成酮体的作用。 2.学习生物分子提取和鉴定的基本方法。
【原理】
酮体包括乙酰乙酸、β-羟丁酸与丙酮三种复合 物。肝脏组织中含有合成酮体的酶系，用丁酸作为 底物和肝脏组织匀浆一起保温后，即有酮体生成， 酮体与含亚硝基铁氰化钠的显色粉(酮体粉）反应产 生紫红色的化合物。与此对照，经同样处理的肌肉 匀浆，因为缺乏酮体生成的酶则不产生酮体，无显 色反应。
摇匀，37℃水浴40min
三氯醋酸
20
20
20
20
离心2500rpm, 5min
分别取上清滴入白瓷板小孔，加酮体粉， 搅拌，观察颜色
结果 粉色 浅粉色 无色 浅粉色
【步骤】
1.肝匀浆和肌匀浆的制备 取兔肝和兔肌肉各3g，剪碎，分别放入两个研 钵内，各加2ml生理盐水，研磨成匀浆，各以生理 盐水稀释至6ml。 实验中，可以两个小组之间合作，分别研磨肝 匀浆和肌匀浆。
2.取试管4支，编号，按下表操作：
试剂（滴） 洛克氏液 丁酸 磷酸盐缓冲液 肝匀浆 肌匀浆 蒸馏水 1 15 30 15 8 --2 15 -15 8 -30 3 15 30 15 --8 4 15 30 15 -8 --
【目的】
1.通过实验证明肝有生成酮体的作用。 2.学习生物分子提取和鉴定的基本方法。
【原理】
酮体包括乙酰乙酸、β-羟丁酸与丙酮三种复合 物。肝脏组织中含有合成酮体的酶系，用丁酸作为 底物和肝脏组织匀浆一起保温后，即有酮体生成， 酮体与含亚硝基铁氰化钠的显色粉(酮体粉）反应产 生紫红色的化合物。与此对照，经同样处理的肌肉 匀浆，因为缺乏酮体生成的酶则不产生酮体，无显 色反应。
摇匀，37℃水浴40min
三氯醋酸
20
20
20
20
离心2500rpm, 5min
分别取上清滴入白瓷板小孔，加酮体粉， 搅拌，观察颜色
结果 粉色 浅粉色 无色 浅粉色
【步骤】
1.肝匀浆和肌匀浆的制备 取兔肝和兔肌肉各3g，剪碎，分别放入两个研 钵内，各加2ml生理盐水，研磨成匀浆，各以生理 盐水稀释至6ml。 实验中，可以两个小组之间合作，分别研磨肝 匀浆和肌匀浆。
2.取试管4支，编号，按下表操作：
试剂（滴） 洛克氏液 丁酸 磷酸盐缓冲液 肝匀浆 肌匀浆 蒸馏水 1 15 30 15 8 --2 15 -15 8 -30 3 15 30 15 --8 4 15 30 15 -8 --