Octet BLI 小分子动力学检测亲和力数据分析-1第一章-Small Molecule Kinetics-by row
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1.双击数据分析软件图标,打开数据分析软件,在软件Data Selection界面左下侧子窗口路径下选中
待分析kinetics数据,双击后载入左上侧子窗口Loaded Data Kinetics文件夹下:
2.左键单击所载入待分析数据,右侧窗口显示Sensor Tray按钮下界面,即该检测中sensor所在sensor tray
上位置,在此可选择分析哪些sensor采集的数据,本例分析所有sensor的数据
3.该窗口另一个按钮Summary按钮下界面如下,包括实验运行信息,检测程序的步骤及时间、板孔排列
等。
4.选择所需分析sensor后,点击Processing进行数据处理:
5.数据处理界面如下,该窗口左侧依次包括Step1:Data Selection,Step2:Subtraction,Step3:Align Y Axis,
Step4:Inter-step Correction,Step5:Process,Step6:View Results,Step7: Save Results;右侧窗口默认为Raw Data View下界面,即原始数据预览。
6.点击Step 1下Sensor Selection按钮,界面如下:
7.对于经典小分子实验,在实验设计上包括sensor对照和孔对照(间经典小分子实验设计SOP),数据
处理时需分别扣除对照孔及对照sensor引入的干扰;选中对照孔,右键下选择Change Well Type…下的Refference Well:
设置Refference Well后界面如下:
8.在Sensor Tray下选中对照Sensor,右键选择Change Sensor Type…下的Refference Sensor:
设置Refference Sensor后的界面如下:
9.在Step 2下选中Double Subtraction,即扣除对照空及对照sensor可能引入的干扰:
10.在Step 3下Step框下拉菜单中选择Baseline,起止时间可采用默认时间,也可适当将起始时间调整至
靠近中止时间5~10s(尤其在基线起始段有跳动或未平整时)。注意:对于需要分析结合解离等参数样品,必须设置Baseline步骤!
11.勾中Step 4后小方框,选择Align to Dissociation,该步骤适用于解离与基线检测在相同板孔中进行,可
理解为交互步骤校正。注意:如果实验设计中基线与解离在不同板孔中进行,不需勾中Step 4后方框!