15189对分子诊断设备的要求及应用中的问题(发送版)
微生物领域申请ISO15189对设备、试剂、耗材要求
1 生物安全柜的类型和安装应满足工作要求；培养箱的数量和种类（如特殊温度范围和气体要求）、冰箱应满足诊断需要；无菌体液的显微镜检查应配备细胞离心机。
2设备校准、验证等应符合如下要求：（a）自动化鉴定仪、血培养仪的校准应满足制造商建议；（b）每6个月进行检定或校准的设备至少应包括浊度仪；（c）每12个月进行检定或校准的设备至少应包括：生物安全柜（高效过滤器、气流、负压等参数）、CO2浓度检测仪、细胞离心机、压力灭菌器、游标卡尺、培养箱、温度计、移液器、微量滴定管或自动分配器；（d）应保存仪器功能监测记录的设备至少应包括：温度依赖设施（冰箱、培养箱、水浴箱、加热块等每日记录温度）、CO2培养箱（每日记录CO2浓度）、超净工作台（定期做无菌试验）、压力灭菌器（至少每个灭菌包外贴化学指示胶带、内置化学指示卡，定期进行生物监测）。
3应制定预防性维护计划并记录的设备至少应包括：生物安全柜、CO2培养箱、自动化鉴定仪、血培养仪、压力灭菌器、超净工作台、显微镜和离心机。
如果设备故障影响了方法学性能，在设备修复、校准后，实验室可通过检测质控菌株或已知结果的样品的方式进行性能验证。
4 试剂和耗材验收试验应符合如下要求：（a）新批号及每一货次试剂和耗材使用前，应通过直接分析参考物质、新旧批号平行实验或常规质控等方法进行验证，并记录；（b）新批号及每一货次试剂和耗材，如吲哚试剂，杆菌肽，奥普托辛，X、V、XV 因子纸片等应使用阴性和阳性质控物进行验证；（c）新批号及每一货次的药敏试验纸片使用前应以标准菌株进行验证；（d）新批号及每一货次的染色剂（革兰染色、特殊染色和荧光染色）应用已知阳性和阴性（适用时）的质控菌株进行验证；（e）新批号及每一货次直接抗原检测试剂（无论是否含内质控）应用阴性和阳性外质控进行验证；（f）培养基外观良好（平滑、水分适宜、无污染、适当的颜色和厚度，试管培养基湿度适宜），新批号及每一货次的商品或自配培养基应检测相应的性能，包括无菌试验、生长试验或与旧批号平行试验、生长抑制试验（适用时）、生化反应（适用时）等，应以质控菌株进行验证；（g）一次性定量接种环每批次应抽样验证。
ISO15189基因诊断最新应用说明
CNAS-CL36医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明Guidance on the Application of Accreditation Criteria for the Medical Laboratory Quality and Competence in the Field of Molecular Diagnostics中国合格评定国家认可委员会前言本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是CNAS根据分子诊断领域的特性而对CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》所作的进一步说明，并不增加或减少该准则的要求。
本文件与CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》同时使用。
在结构编排上，本文件章、节的条款号和条款名称均采用CNAS-CL02：2012中章、节条款号和名称，对CNAS-CL02：2012应用说明的具体内容在对应条款后给出。
本文件的附录A、B为规范性附录。
附录的序号及内容与CNAS-CL02:2012不对应。
本文件于2012年制定，本次为第1次修订换版。
医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明1 范围本文件规定了CNAS对分子诊断领域的认可要求，包括：病原体核酸和人体基因等领域涉及的核酸扩增试验、杂交试验（包括原位杂交试验）、核酸电泳分析等。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括修改单）适用于本文件。
GB/T 20468-2006 临床实验室定量测定室内质量控制指南CNAS-RL02 能力验证规则CNSA-CL31 内部校准要求临床技术操作规范·病理学分册，人民军医出版社，2004医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则病理科建设与管理指南（试行），卫办医政发〔2009〕31号3 术语和定义4 管理要求4.1 组织和管理责任4.1.1.2 实验室为独立法人单位的，应有医疗机构执业许可；实验室为非独立法人单位的，其所属医疗机构执业证书的诊疗科目中应有医学实验室，自获准执业之日起，开展分子诊断工作至少2年。
ISO15189对医学实验室环境设施、设备及生物安全的要求
ISO15189对医学实验室环境设施、设备及生物安全的要求医学实验室环境、设施、设备管理的好坏直接影响着检验项目的数量和检测结果的质量，同时实验室生物安全的有效管理是对保证工作人员和环境免受感染或污染的关键。
ISO15189：2007《医学实验室质量和能力认可准则》技术要素5.2、5.3条款以及GB19489—2004《实验室生物安全通用要求》就对医学实验室环境、设施、设备以及生物安全的管理给出了具体而又明确的要求，可作为实验室进行有效管理的主要依据。
一医学实验室环境、设施、设备以及生物安全的管理依据1 ISO15189：2007《医学实验室质量和能力认可准则》在准则的技术要素5.2中，描述了对设施和环境条件，包括实验室空间和设计要求、实验室生物安全要求和实验室环境条件要求及监控。
在5.3中，描述了对实验室设备的要求，包括设备的配备、设备性能要求、设备操作规程的建立和设备的管理。
2 GB19489—2004《实验室生物安全通用要求》《实验室生物安全通用要求》是我国第一部关于实验室生物安全的国家标准。
它主要参考了ISO15190《医学实验室—安全要求》和WHO《实验室生物安全手册》第二版，适本期《临床实验室》主题为“微生物”，在众多读者来信中我们选取具有代表性、典型性的问题，邀请国内此领域的著名专家为各位解答。
解放军第302医院临检中心毛远丽教授与南京医科大学第一附属医院童明庆教授，分别就“生物学实验室”与“细菌耐药性”相关问题回答读者提问、与读者进行对话，并进行相应扩展，以满足读者在理论学习与临床实践中的需求。
用于医学实验室和进行生物因子操作的各类实验室。
本标准规定了对不同生物安全防护级别实验室的设施、设备和安全管理的基本要求，适用于涉及生物因子操作的实验室。
二实验室设施与环境管理（一）实验室整体布局与设计1 实验室整体布局与设计原则实验室的整体布局应符合医学实验室生物安全标准，在科室内部应划分污染区、半污染区和清洁区。
15189的应用与实施-推荐下载
技术要求 在技术要求的基本原则上，两个标准的区别不大，但 ISO 15189 对医学检
验实验室有额外的要求，更强调对病患者照顾。
人员要求 条款 5.1.3 描述实验室负责人的责任及能力:“实验室应由负管理责任且有
能力对实验室所提供服务负责的一人或多人领导”。这明示团队管理可行性但必 须强调团队责任及能力。
ISO15189 概况 ISO 1518:2003 标准是建立于 ISO 9001:2000 和 ISO/IEC 17025:1999 的基
础上: ISO 9001:2000 族标准作质量管理活动的母体标准，当中质量管理体系 的观念包括八项质量管理原则在 ISO15189( 和 ISO/IEC17025:2005 版 )标淮中 作出阐述，是该标淮的理论依据和指导思想；ISO/IEC 17025:1999 作为医学实 验室能力的通用要求，而 ISO/IEC 17025 的基本要求也包含在 ISIO15189 里面， 只是两者的强调重点仍有区别，而后者采用了更贴近医学领域的语言编订，从 医学专业角度，针对医学实验室的检验流程，更细化地描述了医学实验室质量 管理的要求，而特别强调“质量和能力”，专用性更强，从而更方便医学实验室 改进和整合质量管理体系；更适宜成认可医学实验室新的标准。
及患者、访客和普罗大众。像 2004 年发生的 SARS 事件，就与医学实验室泄漏 有关。因此 ISO 15189 不仅要求医学实验室人员接受安全培训，还扩展至患者、 雇员乃至访客、维修人员也必须受保障，免遭受潜在危险伤害。例如在运送标 本过程，运送者和公众的生物安全也是同样重要。安全要求贯穿于条款 5.1 人 员，5.2 设施和环境条件，5.3 实验室设备，5.4 检验前程序和 5.7 检验后程序 之中。
ISO15189实验室认可中临床微生物检验技术要求
抗菌药物敏感性试验方法包括纸片扩散法、稀释法（琼脂稀释法、 肉汤稀释法）、浓度梯度扩散法（E试验）或自动化仪器检测。 实验室需遵循一定的准则，提供与服务相适应的抗菌药物敏感性 试验，并能检测苯唑西林耐药葡萄球菌、万古霉素耐药肠球菌、 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌等。
戴手套和进行呼吸道防护（适用时），确保容 器密封性，嗅平板时的潜在危害及其防护等； (d)渗漏标本的处理措施； (e)工作环境及设备的消毒措施
5.2.4 实验室内照明宜充足，避免阳光直射及反射， 如果可能，可在实验室内不同区域设置照明控制，以 满足不同实验的需要。应有可靠的电力供应和应急照 明。
原则不使用抗菌药物！
2011年上级要求：7项指标
指标名称
1 住院患者抗菌药物使用率 2 门诊患者抗菌药物处方比例 3 I类切口手术患者预防使用抗菌药物比例 4 预防用抗菌药物术前0.5-2h内给药百分率 5 I类切口预防用抗菌药物时间≤24h的比例 6 抗菌药物患者微生物检验样本送检率 7 抗菌药物使用强度（DDD）
风向+与外 界相连
BSL-3
百万级 Lab 分子生物学 Lab
Class III BSC
3. 生物安全柜与洁净台的区别
Clean bench
实验室结构（负压） 与生物安全柜？
5.3.2 设备校准、维护及性能等应符合如下要求：
（a）自动化鉴定仪、血培养仪的校准应满足制造商建议； （b)每半年进行检定或校准的设备至少应包括浊度仪； (c)每年进行检定或校准的设备至少应包括：生物安全柜（高效
5.2 设施和环境条件
5.2.1 实验室应有足够的办公、文字处理、培养基制备、 实验工作空间。宜有适当的水池、排水管道、电源插 座、通风设施、通讯设备。
ISO15189实验室认可质量手册之实验室设备
ISO15189实验室认可质量手册之实验室设备ISO15189是国际标准化组织（ISO）制定的针对临床实验室的质量管理要求标准，旨在确保实验室能够提供准确、可靠、可追溯的测试结果。
实验室设备作为实验室的核心资源，对于实验室的正常运行和测试结果的准确性至关重要。
1. 设备管理实验室设备管理是ISO15189认可质量手册的一个重要组成部分。
为了确保设备的可靠性和稳定性，实验室应建立完善的设备管理体系，包括设备的购置、验收、鉴定、校准、维护和报废等环节。
1.1 设备购置在购置设备前，实验室应进行需求评估，明确所需设备的功能和性能指标。
同时，实验室还需充分考虑设备的可靠性、维修保养成本以及供应商的信誉度等因素，选择适合实验室需求的设备。
1.2 设备验收设备验收是确保设备符合规格和性能要求的一项重要工作。
在验收过程中，实验室应按照制定的验收标准进行检查，确保设备的功能和性能满足实验室的要求。
1.3 设备鉴定设备鉴定是为了验证设备的测量准确性和可靠性。
实验室应周期性地进行设备鉴定，检测设备的偏差，并与标准设备进行比较，确保设备的测量结果符合精度要求。
1.4 设备校准设备校准是为了保证设备的测量结果的准确性。
实验室应按照制定的校准计划对设备进行校准，确保设备输出的测量结果能够与标准结果一致。
1.5 设备维护设备维护是确保设备正常运行的关键环节。
实验室应建立设备维护计划，定期对设备进行维护保养，清洁设备、更换耗材，及时处理设备故障，确保设备始终处于良好的工作状态。
1.6 设备报废实验室设备的报废应根据设备的使用寿命、技术性能和安全性等因素进行评估，并制定相应的报废标准和程序。
报废的设备应按照规定方式进行安全处理，同时记录设备报废的相关信息。
2. 设备记录和文件实验室应建立完善的设备记录和文件管理体系，对设备相关的信息进行规范的记录和保存。
设备记录和文件包括但不限于以下内容：2.1 设备清单实验室应编制设备清单，包括设备的名称、型号、购置时间、使用地点等信息，并对设备进行分类管理，以便于查找和统计。
15189对分子诊断设备的要求及应用中的问题PPT课件
第二类：医疗技术是指安全性、有效性确切，涉及一定伦 理问题或者风险较高，卫生行政部门应当加以控制管理的 医疗技术。（如PCR）
第三类：医疗技术是指具有下列情形之一，需要卫生行政
部门加以严格控制管理的医疗技术：（1）涉及重大伦理
问题；（2）高风险；（3）安全性、有效性尚需经规范的
临床试验研究进一步验证；（4）需要使用稀缺资源；（5）
院、2.中华医学会、3.中国医院协会、4.中华医师协会、5.中华口腔医学会）。
省级卫生行政部门指定或者组建的技术审核机构负责第二类医 疗技术临床应用能力技术审核工作。 卫生部可以委托省级卫生行政部门组织对指定的第三类医疗技 术进行临床应用能力技术审核工作。
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5.2 设施和环境条件
5.2.1 应实施安全风险评估，如果设置了不同的控制 区域，应制定针对性的防护措施及合适的警告。
5.2.2 涉及基因扩增检验的实验室原则上分四个独立 的工作区域：试剂贮存和准备区；样品制备区；扩增区；扩 增产物分析区。如使用自动分析仪（扩增产物闭管检测）， 扩增区和扩增产物分析区可合并。具体实验室分区应依据其 所使用的技术平台及检验项目和工作量而定。
• 实验室流程布局
• 人员上岗证书
• 实验室的管理（参照ISO 17025，10章38款）
• 规范的应该是：实验室验收合格证书（技术 审核报告）+卫生行政部门的登记（诊疗科 目）
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第二部分
开展分子诊断检测涉及的主 要设备
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主要设备（5.5 检验过程）
1、核酸提取仪 2、PCR
•e）样品制备区应配置二级生物安全柜和洗眼器，实验室附
ISO 15189认可过程中应注意的问题
临床分子诊断质量管理问题及思考
二、分子诊断检测质量问题分析
（一）“质量”周边风险“潜伏”
• 1.有些实验室未及时校准； • 2.校准未覆盖检测所需的参数； • 3.不对校准报告进行评估，导致未达到检测要求的设备由
于实验室人员不知晓仍在使用；
• 4.校准单位无相关资质及校准人员，无相应校准能力，导 致仪器校坏等情况时有发生；
• 5.校准时间和校准报告及时性都受到影响。
(二)仪器设备校准不到位
• 2.3开展分子病理项目的实验室除公立医院除病理科外，普遍缺乏具 备组织标本质量评估能力的病理医师。
• 其状况与20世纪90年代病原体PCR检测遍地开花情况类似，质量令 人担忧！
案例1：
•
在某三甲教学医院的事情。临床医生给某乙
型肝炎患者开了乙肝“两对半”和HBV DNA定量
检测申请单，但是医生对检验结果看不懂，三个
的应用等方面的不规范等因素。
• 分子诊断最为常用的方法是基因扩增，包括实时荧光 PCR、PCR+扩增产物分析等。基因扩增检验灵敏度高、 特异性好，但涉及步骤多，受影响的因素也多，如标本的
稳定性、扩增产物的“遗留污染”与标本间的“交叉污
染”、仪器设备的状态、耗材质量等。
案例3：
•
有家医院在去年12月的一次实验中发生了爆管事件，
事件过后已经按照标准操作程序(SOP)规程进行了消毒处
理，到现在已经半年了，还是不能消除污染。
IOS15189认可过程中临床分子生物学实验室管理体会
首都医科大学附属北京天坛医院吕虹写在课前的话ISO15189的条款有15个管理条款，以及8个技术要求。
从整个实验室的条款来说，对这23个条款都是需要非常关注的，对实验室认可是非常重要的。
通过本课程学习，您将充分掌握临床分子生物学实验室质量管理的技术要求。
实验室管理文件指南的制定应当参考哪些资料？一、指南主要依据以下指南或文件来制定自己的实验室管理文件，并且依据自己制定的文件来管理实验室， CNAS-GL26 ： 2008 医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的指南； CNAS-CL02 ： 2008 《医学实验室质量和能力认可准则》；卫生部卫医发〔 2002 〕10 号文件《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》。
卫生部 2002 年就颁布了《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》，但是 CNAS 直到 2008 年才将临床基因扩增检验实验室纳入到实验室范围之中，这也是考虑到临床基因扩增检验实验室也是一个特殊的实验室，国家对它已经出台了严格的要求。
但是在 CNAS 的前言当中也描述了， CNAS 对持有许可证的基因扩增实验室不可以豁免评审；即使是获得了卫生部颁发的临床基因扩增检验实验室认可证书，也不能代替 CNAS 的认可，也就是说这 2 个证书是不通用的。
CNAS 对 CPR 的认可条款不是一个强制性的条款，建议性为主，很多地方都用到了“以”或者是“需”这样的字眼来表达，期望医学实验室尽量能够满足的要求。
任何一个参加认可的实验室都要有自己的实验室的质量体系文件，文件分为 4 个部分。
A. 质量手册（质量方针、质量目标）；B. 程序文件（描述为实施质量体系要素所涉及的各职能部门的活动）；C. 标准操作程序（详细的作业指导书 SOP 文件）；D. 记录表格（后面详述）。
如果作为一个独立的临床基因扩增实验室的申请，就要有自己的独立的文件体系。
如果 PCR 实验室只是作为 ISO15189 实验室的一部分，可以和整个大的实验室使用一套管理体系，但是部分程序文件、标准操作程序、记录表格都是要独立的。
15189实验室认可程序文件之仪器设备检定校准程序
15189实验室认可程序文件之仪器设备检定校准程序仪器设备检定/校准程序1 目的科学制定仪器设备的检定/校准程序，维护仪器设备合格的使用性能，保证仪器设备的正常使用，使得测量数据和检测结果具有良好的溯源性、准确性和可靠性。
2 适用范围实验室影响检验质量的设备、器具及检测仪器。
3 职责3.1 设备责任人负责监督仪器的周期性保养维护和日常保养，并负责联系仪器设备维修及对维修效果的检查、跟踪。
3.2 技术负责人批准仪器设备的检定或校准并负责联系法定计量检定所的检定。
4 工作程序4.1 计量设备的检定4.1.1 各专业组组长收集需要检定的计量设备（如分光光度计、天平、电导仪、酶标仪等），分类整理，报技术负责人审核。
4.1.2 检验科主任批准和联系法定计量检定所进行检定。
4.1.3 对小型计量设备（如温度计、加样器、移液管等），可直接送计量所；对较大设备（如分光光度计等），一般由计量所来检验科进行检定。
4.1.4 检验科可以制定作业指导书，对温度计、加样器、移液管等进行自校。
可以采用计量所检定合格的计量设备来校准其它相应的计量设备，用来校准其它计量设备的校准设备的精确度不能低于被校准的计量设备。
自校的计量设备也要报技术负责人审批。
4.1.5 检验科使用的计量设备均应该是经过有效机构检定合格或校准合格的计量设备。
4.2 检测仪器的校准4.2.1 实验室对重要仪器或对测量有重要影响的仪器设备，在使用前必须经过校准鉴定合格，保证仪器性能能够满足质量目标要求，实验室还应对这些仪器设备制定校准计划，以保证在使用过程中对其进行定期检测/校准,一般要求检测/校准周期为12个月，维持仪器使用状态的可信度。
其它设备在使用前和使用后定期对其性能进行适当评价。
4.2.2 对曾脱离了实验室的直接控制的设备和长期不用的设备在重新投入使用前应按规定程序进行校准或核查，确保其功能和校准状态符合检测的要求。
4.2.3 对重要的专业性仪器（如生化分析仪、血细胞分析仪等），应由检验科主任联系仪器工程师，按照厂家制定的校准程序进行校准，并出具检定/校准报告，以明确仪器运转状态合格。
ISO15189有关生物安全及仪器试剂要求
ISO 15189有关生物安全及仪器试剂要求丛玉隆标题：空间及环境控制程序版本号：A修订号：0文件编号：PLA301-LJK-CX-018发布日期：2004年6月29日生效日期：2004年7月1日发布部门：安全管理小组编制人：马骏龙、邓新立审核人：丁志平批准人（签章）：秦小玲页码：第1页，共3页空间及环境控制程序1.目的规范实验室在常规工作中的空间及环境控制活动，使科室空间及环境满足医学实验室工作和活动的需要。
2范围实验室在常规工作中的空间及环境控制活动。
3职责3.1科主任负责任命安全小组，指导、规范其工作。
3.2安全小组组长负责安全小组日常工作的安排。
3.3安全小组为科室空间及环境监控的常设机构，负责与医疗有关的空间及环境监控的日常工作。
4工作程序4.1安全小组组成，具体规定《安全管理程序》。
4.2科室活动空间的确定、评估与监督4.2.1科主任确定科室大致区间的划分，各实验室负责人和安全小组组长确定科室具体空间的划分，保证科室各种物品及资源放臵合理有序。
4.2.1.1划分污染区和非污染区。
严禁污染区的物品未经消毒处理进入非污染区；禁止患者及其他来访者在未采取隔离措施的情况下进入污染区；所有标本为污染源，直接接触标本的区域为污染区。
4.2.1.2标本接受区域、标本处理区域、标本储存区域应严格划分，不得混淆。
4.2.1.3科室规定检验工作区域，非工作人员未经许可，严禁进入。
4.2.1.4保证仪器放臵区间适合仪器工作的需要，避免各种干扰。
具体规定见《仪器管理程序》。
4.2.2 安全小组对科室活动空间的执行情况进行监督。
4.2.3安全小组组长领导安全小组对科室活动空间进行定期评估，并将评估情况及修正意见上报科主任。
4.3安全小组制定科室安全规章制度，对科室安全进行具体规定，并监督执行。
具体见《安全管理程序》。
4.4环境监控的原则4.4.1 安全小组成员主要负责与临床医疗工作有关的环境因素变化的内容。
各专业实验室工作人员每日监测相对湿度(标准为30～80%)和温度(标准为20～28℃)，记录入《实验室日志》，安全小组定期监督。
ISO15189实验室认可质量手册之实验室设备
实验室设备1 总则实验室设备是检验工作的基本需要，检验科应根据业务需求购置相应的设备，并且对所用设备，包括但不限于仪器设备、参考物质、消耗品、试剂和分析系统进行合理评价和选择，保证实验室检测结果准确可靠。
在使用过程中，应该制定正确的使用和维护保养、校准等程序，对仪器操作人员进行正规的上岗培训，保证设备处于良好的工作状态。
2 实验室设备的定义实验室设备包括仪器设备以及仪器设备使用的参考物质、消耗品、试剂和分析系统等。
3 实验室设备的配置检验科主任应该根据检验科的业务开展情况，申请并配置为提供服务所需的全部设备，选择设备时应考虑实验室能源以及在使用和将来的处置过程中对保护环境的影响。
对于非永久控制的设备（借用、租用等），也应确保满足本要求。
4 设备性能要求4.1 设备在安装时及常规使用中应能够显示出达到的性能标准，并符合相关检验所要求的规格。
4.2 仪器设备一般12个月（血细胞分析仪6个月）由制造商工程师进行全面的保养、检测并校准和验证设备、试剂及分析系统处于正常的功能状态，并出具校准报告。
在常规使用中，一般采用质控物对设备进行验证／核查／监测，必要时进行校准。
4.3 实验室应该根据制造商的建议对使用的仪器制定定期维护保养计划，并严格执行，减少仪器过度损耗，维持仪器性能的稳定性。
5 实验室应根据制造商的使用说明、操作手册或其他可供使用的文件，编写仪器作业指导书，其内容应符合相关标准或规定定期校准的要求。
仪器作业指导书的编写参见《文件编写与控制管理程序》。
6 操作与安全只有经授权者可操作设备，实验室人员应随时可得到关于设备使用和维护的最新指导书，包括设备制造商提供的所有相关的使用手册和指导书。
操作人员应维持设备始终处于安全的工作状态，，包括检查电气安全，紧急停止装置，以及由授权人员安全操作及处置化学、放射性和生物材料。
适用时，应使用制造商提供的规格说明和/或使用说明。
操作人员在操作仪器时应遵循生物安全规定合理使用实验室提供的个人防护装备对自身进行生物安全防护，实验室应将所采取降低污染措施的清单提供给该设备工作人员，并且应留出合适的空间以供设备修理和放置。
医学分子检测实验室设备管理
医学分子检测实验室设备管理分子检测实验室仪器设备主要有核酸扩增仪、核酸杂交仪、测序仪、生物安全柜、离心机、移液器、移动紫外灯、恒温金属浴、震荡混匀器、温湿度计、冰箱等。
为了保证实验室设备能够正常、有效运行，确保检测结果的正确和可靠，除了对实验室设置、人员进行必要的要求外，仪器设备的正确使用、维护和校准也是非常关键的环节。
实验室应制订仪器、试剂、耗材购买、验收程序文件及试剂、耗材储存要求，应分册建立主要仪器设备档案，内容至少包括：设备名称、制造商名称、型号、序号或其他唯一性标识、到货日期和投入运行日期、目前放置地点、接收时的状态、仪器使用说明书或其存放处、证实设备可以使用的设备验证报告、校准和（或）检定报告、维护、损坏、故障或维修记录。
每一台设备应有明显的仪器状态标识，校准了的设备应贴校准标识，标明其校准的状态。
一、主要仪器使用、维护和保养考虑到分子检测实验室设备较多，本节主要对核酸扩增仪、离心机、移液器、生物安全柜、恒温金属浴的使用、维护和保养进行阐述。
（一）核酸扩增仪目前分子检测实验室中应用最为广泛的核酸扩增仪为荧光PCR仪，此仪器属于复杂精密仪器，其对运行环境具有一定要求。
操作人员需掌握仪器正确使用方法及使用过程中的注意事项，这对于高效发挥仪器的作用和延长仪器使用寿命非常关键。
1.荧光PCR仪的使用：为保证荧光PCR仪的正确使用，应根据仪器使用说明书编写和制定相应的标准操作程序（SOP），以指导实验室技术人员正确使用仪器。
2.荧光PCR仪的维护保养（1）样品池的清洗：先打开盖子，然后用95%乙醇浸泡样品池5 min，用微量移液器吸取液体，用棉签吸干剩余液体；打开PCR仪，设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行，让残余液体挥发去除。
一般5～10 min即可。
（2）热盖的清洗：对于荧光定量PCR仪，当有荧光污染出现，而且这一污染并非来自样品池时；或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时，需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面，确保样品池的孔镜干净，无污物阻挡光路。
分子诊断技术质量管理要求
相同检验项目在不同仪器或系统上进行检测时，须对检验
结果进行比对( 2次/年，每次至少20份标本，计算回归方
程，系统误差应<7.5%）
应保存主要设备的档案，档案内容应包括：设备标识、型
号、序号或其它唯一性识别、到货日期和投入运行日期、 目前放置地点、接收时的状态、仪器使用说明书或其存放
接观察设备维护和功能检查、监控检验结果的记录和报告过程、核查工作记录（ 实验室原始记录、质控记录、定标记录、试剂、使用记录、仪器保养维护记录、仪
器维修记录等）、评估解决问题的技能、使用特殊材料执行一个给定程序（盲样检
测、留样再测） 培训方法可有：讲座（包括小组教学）、计算机相关的练习、自学、观看示例现场或视频、实践监督、实践结果的自我评估、特殊样品的检验或鉴定 培训效果考核方式：口头提问、笔试、现场操作演示、获取合格证、填写培训 小结等 培训记录至少包括：培训通知、培训课件、培训照片、签到表、效果评价证据
设施和环境
实验室有足够的空间保证：标本处置符合分析前、后样本分
区放置、仪器放置符合维修和操作要求、打印检验报告时交 叉污染的控制
标本接收区建议放在四个区域以外的房间
开展基于组织的分子病理项目宜有独立的切片制备和前处理 （脱蜡、水化）区域
设施和环境
进入和使用实验室各区域应有明确的限制和措施，防止患 者和其他非相关人员的随意进出 各工作区域应有明确的标记，应按照单一方向进入各工作 区域，不同区域内的设备、物品不得混用 实验室应规定环境温、湿度的要求，实施监控，并有记录
移液器
维护： 75%乙醇擦拭
校准：校准周期、外校（厂家、计量所）、 校准量程（应涵盖试验过程中所涉及的量程） 计量性能要求（容量允许误差、测量重复性） 内部校准-参照《定量、可调移液器试行检定规程》 (JJG646-2006) 注意：环境的要求 计量性能要求（标称容量、标定点、容量允许
ISO15189实验室认可过程中常见问题剖析及对策（二）
ISO15189实验室认可过程中常见问题剖析及对策（二）ISO15189实验室认可过程中常见问题剖析及对策（二）————技术要求一、对人员的要求认可准则中要求实验室管理层应确定所有人员资格，这实际上是要求实验室确定每个岗位的资质要求并形成文件，同时要求所有人员要符合对应岗位的资质要求。
有些实验室仅进行了岗位描述，但缺乏其资质要求的描述。
准则中要求实验室建立全部人员的档案。
这就要求不可遗漏任何成员。
同时成员档案中不可缺准则中要求的任何内容，特别是“工作描述”和“能力评估”。
实验室在建立质量体系时，容易遗漏的两项全员培训记录：质量保证以及质量管理方面的专门培训、实验室安全培训。
所有成员都必须进行这两项培训。
其次，大多数实验室至少进行两次这样的培训，因为仅培训一次，会遗漏值班人员。
培训记录应完善：培训时间、地点、内容、培训者、被培训者的签到、培训后的考核及验证、对培训不合格采取的措施，其中培训内容应尽量提供原始记录，如培训者使用的教材等。
实验室应定期对所有工作人员进行能力评审，并形成书面记录载入个人档案。
关键岗位负责人应规定有备用的代理人，科主任的职能代理人应在文件中加以规定。
实验室应对工作人员进行定期监督，其方法可采用过程描述的方法，也可采用职责描述的方法。
例如对某专业实验室的检验工作人员的监督，就可根据检验的全过程来进行，对其标本接收、标本识别、标本编号、检验前注意事项、标本检测、仪器操作、质量控制、原始检测结果登记、检测结果登记或输入计算机、实验结果确认、实验结果修改、检验后标本的保存、检验后标本处理、仪器维护与保养等方面的情况进行评价，此谓过程的方法。
再例如，外部供应部门的负责人的主要职责是包括：负责科室外部供应的具体工作、负责调查外部供应的详细情况、负责协同质量管理小组对外部供应的评审、负责协调科室与外部供应商及医院采购部门的关系，那么对他的监督就应包括上述几个方面。
二、对设施和环境条件的要求实验室应对保存试剂、标本等的冰箱的温度进行不间断记录，特别是节假日的记录。
ISO15189对医学实验室环境设施、设备及生物安全的要求
ISO15189对医学实验室环境设施、设备及生物安全的要求ISO15189对医学实验室环境设施、设备及生物安全的要求医学实验室环境、设施、设备管理的好坏直接影响着检验项目的数量和检测结果的质量，同时实验室生物安全的有效管理是对保证工作人员和环境免受感染或污染的关键。
ISO15189：2007《医学实验室质量和能力认可准则》技术要素5.2、5.3条款以及GB19489—2004《实验室生物安全通用要求》就对医学实验室环境、设施、设备以及生物安全的管理给出了具体而又明确的要求，可作为实验室进行有效管理的主要依据。
一医学实验室环境、设施、设备以及生物安全的管理依据1 ISO15189：2007《医学实验室质量和能力认可准则》在准则的技术要素5.2中，描述了对设施和环境条件，包括实验室空间和设计要求、实验室生物安全要求和实验室环境条件要求及监控。
在5.3中，描述了对实验室设备的要求，包括设备的配备、设备性能要求、设备操作规程的建立和设备的管理。
2 GB19489—2004《实验室生物安全通用要求》《实验室生物安全通用要求》是我国第一部关于实验室生物安全的国家标准。
它主要参考了ISO15190《医学实验室—安全要求》和WHO《实验室生物安全手册》第二版，适本期《临床实验室》主题为“微生物”，在众多读者来信中我们选取具有代表性、典型性的问题，邀请国内此领域的著名专家为各位解答。
解放军第302医院临检中心毛远丽教授与南京医科大学第一附属医院童明庆教授，分别就“生物学实验室”与“细菌耐药性”相关问题回答读者提问、与读者进行对话，并进行相应扩展，以满足读者在理论学习与临床实践中的需求。
用于医学实验室和进行生物因子操作的各类实验室。
本标准规定了对不同生物安全防护级别实验室的设施、设备和安全管理的基本要求，适用于涉及生物因子操作的实验室。
二实验室设施与环境管理（一）实验室整体布局与设计1 实验室整体布局与设计原则实验室的整体布局应符合医学实验室生物安全标准，在科室内部应划分污染区、半污染区和清洁区。
PCR实验室基因扩增检验人员培训试题(二)正确答案
pcr练习题1.理想的质控品应具备的条件不包括单选题10.0分•A基质与待测样本一致•B阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平•C靶值或预期结果已知•D含有未灭活的传染性病原体•E稳定、价廉、同一批次可大量获得2.某临床分子生物学检验项目每2周检测1次，最适用的统计学质控方法是单选题10.0分•ALevey-Jennings 质控图方法•B即刻法质控方法•CWestgard多规则质控方法•D累积和质控方法•E6 Sigma质控方法3.发出临床检验报告前应进行结果审核，审核内容不包括单选题10.0分•A室间质量评价是否合格•B临床医生申请的检验项目是否已全部检验•C室内质控是否在控•D检验报告是否正确•E检验结果与临床诊断是否相符4.在核酸检测体系中加入内质控，其作用不是监控的是单选题10.0分•A标本中抑制物或干扰物所致的假阴性•B仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性•C核酸提取效率太低所致的假阴性•D样本吸取错误所致的假阴性5.下列不是临床分子生物学实验室分析前质量控制内容的是单选题10.0分•A实验室严格分区•B定期进行仪器设备的功能检查、维护和校准•C所用试剂和耗材的质量符合要求•D临床标本的采集、运送和保存符合要求•E进行核酸提取的有效性评价6.临床分子生物学实验室检测方法的选择原则不包括单选题10.0分•A根据检测目的选择•B根据实验室的技术特点选择•C根据本地区患者的承受能力选择•D根据实验室的实验条件选择•E根据实验室技术人员的喜好选择7.规范化的临床基因扩增检验实验室工作区域不包括单选题10.0分•A试剂储存和准备区•B标本制备区•C隔离区•D扩增区8.可在二级生物安全实验室开展的新冠病毒相关实验室活动不包括单选题10.0分•A病毒分离•B标本分装•C标本灭活•D核酸检测9.以下哪个条件不能确认新冠病毒感染？单选题10.0分•A同一份标本中新冠病毒2个靶标（ORF 1a/b、N）实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性•B两种标本实时荧光RT-PCR检测同时出现单靶标（ORF 1a/b或N）阳性•C同志类型标本两次采用检测重复出现单个靶标阳性•D单种标本单次单靶标阳性（ORF 1a/b或N）10.新冠病毒感染的特异性检测不包括单选题10.0分•A核酸检测•B病毒分离•C抗体检测•D生化检测11.可以进行新冠病毒检测标本采集人员为？单选题10.0分•A经生物安全培训，培训合格且具备采样技能的人•B医生•C研究所科研人员•D实验室管理人员12.新冠核酸检测标本采集时应优先采集患者单选题10.0分•A痰液•B血液•C粪便•D尿液13.临床PCR测定的重复性不好的原因单选题10.0分•A核酸提取时干扰物去除不净•B加样重复性差•C核酸扩增仪孔间温度不均•D以上均是14.如果需要吸取100µl的液体，最好使用以下哪个型号加样器单选题10.0分•A5~50µl•B10~100µl•C20~200µl•D100~1000µl15.新冠病毒样本的采集操作穿戴个人防护装备错误的是单选题10.0分•A防护服•B1层乳胶手套•C护目镜•DN95口罩16.新型冠状病毒核酸检测的临床假阴性问题（临床高度疑似COVID-19而核酸检测阴性）主要与以下哪些因素有关多选题10.0分•A患者体内病毒载量低，样本中的病毒量达不到试剂的最低检测限•B所使用的病毒核酸检测试剂灵敏度不够高•C实验室未严格遵循临床基因扩增检验的质量管理•D样本的质量问题，如未规范采集、未采集到含病毒的细胞等•E与疾病进程有关，疾病不同阶段不同检测样本的阳性率不同17.ISO15189对分子诊断人员要求，正确的是单选题10.0分•A技术负责人——中级以上，5年以上分子诊断工作经验•B检验员——本科以上，或10年以上工作经验•C专业组组长——中级及以上、3年以上分子诊断工作经验•D授权签字人——副高以上18.适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。
ISO 15189:2012和ISO 15189:2022的不符合对照分析及换版策略
ISO 15189：2012和ISO 15189：2022的不符合对照分析及换版策略何菁;胡长爱;杨大干【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2024(42)4【摘要】目的通过分析ISO 15189:2012与ISO 15189:2022版标准的不符合项,为实验室换版工作提供改进策略。
方法收集24家实验室32次现场评审的522项ISO 15189:2012不符合项目,并将其对应到ISO 15189:2022版标准的相关条款。
基于标准要求、文献研究和实验室现状,探讨ISO 15189换版的工作策略。
结果每次现场评审平均16条不符合项,最少8条,最多31条。
这些不符合项主要集中在ISO 15189:2022版7.3检验过程(165条)、6.5设备校准和计量学溯源(43条)、6.6试剂和耗材(40条)等条款要求。
而对于风险管理、患者相关要求、即时检验等新增或加强的条款要求,不符合项相对较少。
结论ISO 15189:2022版标准的不符合项主要集中在检验过程环节,建议实验室利用数字化、智能化技术手段,加强这一环节的管理,以顺利实施新版标准要求,并通过组织培训、差距分析、文件修订、全员参与实施、加强风险管理和持续改进等策略,确保换版工作的顺利推进。
【总页数】4页(P304-307)【作者】何菁;胡长爱;杨大干【作者单位】绍兴文理学院附属医院检验科;浙江大学医学院附属第一医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.9【相关文献】1.ISO15189:2012与临床实验室定量检测程序分析性能评价2.ISO15189:2012与ISO15189:2007不同之处的解读3.临床微生物实验室与ISO15189医学实验室认可标准常见不符合条款分析及持续改进措施4.ISO15189医学实验室认可在临床免疫检验评审中常见不符合项及纠正措施5.ISO 15189评审自动生化分析仪使用中的常见不符合项及解决方案因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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检测，比较所得到的结果。
5.3 实验室设备
用于定性检验的试剂，选择阴性和弱阳性的样 品进行试剂批号验证。 用于定量检验的试剂，应进行新旧试剂批间的 差异验证，方法和要求参照附录A.6要求。 耗材的抑制物验收：对关键耗材应检测是否存 在核酸扩增的抑制物，方法和要求参照附录A.6 要求。
试剂质检
强调采用患者标本进行试剂质检的意义： • PCR实验时两个关键步骤：
5.2 设施和环境条件
工作区域应符合如下要求： • c）实验室各分区应配置固定和移动紫外线灯，波长为 254nm，照射时离实验台的高度一般为60～90cm； • e）样品制备区应配置二级生物安全柜和洗眼器，实验室 附近应有喷淋装置。 • 所有分子病理实验室均应设置独立的标本前处理区，包括 切片区和脱蜡区，用于组织切片、脱蜡、水化、染色等。 脱蜡、水化及染色应在通风设施中进行。
辅助设备（5.2设施和环境条件）
1、加样器 2、金属浴 3、离心机 4、冰箱 5、生物安全柜 6、UPS 7、纯水器（能除RNA酶）
第三部分 ISO15189 在分子诊断领域的 应用说明简介： 5.2 、 5.3 、 5.5及附录
医学实验室质量和能力认可准则 在分子诊断领域的应用说明 CNAS-CL36
卫生部负责第三类医疗技术的临床应用管理工作。
第三类医疗技术目录由卫生部制定公布，并根据临床 应用实际情况，予以调整。
省级卫生行政部门负责第二类医疗技术临床应用管理 工作。 第二类医疗技术目录由省级卫生行政部门根据本辖区 情况制定并公布，报卫生部备案。
医疗技术临床应用 能力审核
属于第三类的医疗技术首次应用于临床前，必须经过卫生部组
5.2 设施和环境条件
• 5.2.3用以保存临床样品和试剂的设施应设置目标温度和允许 范围，并记录。实验室应有温度失控时的处理措施并记录。 • 5.2.6 不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污 染。工作结束后应立即对工作区进行清洁，必要时进行消毒 及去污染。
应依据所用分析设备和实验过程的要求，制定环境温湿度控制要 求并记录。应有温湿度失控时的处理措施并记录。 扩增仪应配备不间断电源（UPS）； 应依据用途（如：RNA检测用水），制定适宜的水质标准（如： 应除RNase），并定期检测。 分子检验各工作区域应有明确的标记。进入基因扩增实验室各工 作区应按照单一方向进行，即试剂贮存和准备区→样品制备区→扩增 区→扩增产物分析区。不同的工作区域宜使用不同的工作服（如不同 的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不应将工作服带出。
• 规范的应该是：实验室验收合格证书（技术 审核报告）+卫生行政部门的登记（诊疗科 目）
第二部分 开展分子诊断检测涉及的主 要设备
主要设备（5.5 检验过程）
1、核酸提取仪 2、PCR
（1）普通PCR仪 （2）实时荧光PCR仪 （3）液体芯片
3、杂交仪 4、基因芯片 5、一体化/工作站 6、测序仪
• 2009年5月1日后：卫生部关于印发《医疗技术临 床应用管理办法》的通知（卫医政发〔2009〕18 号）和《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理 办法》（卫办医政发〔2010〕194号）。
医疗技术分为三类：
第一类：医疗技术是指安全性、有效性确切，医疗机构通 过常规管理在临床应用中能确保其安全性、有效性的技术。 第二类：医疗技术是指安全性、有效性确切，涉及一定伦 理问题或者风险较高，卫生行政部门应当加以控制管理的 医疗技术。（如PCR） 第三类：医疗技术是指具有下列情形之一，需要卫生行政 部门加以严格控制管理的医疗技术：（1）涉及重大伦理 问题；（2）高风险；（3）安全性、有效性尚需经规范的 临床试验研究进一步验证；（4）需要使用稀缺资源；（5） 卫生部规定的其他需要特殊管理的医疗技术。（共19项， 第8项基因芯片诊断技术，现划为第二类）
5.3 实验室设备
• 5.3.1.4 应按国家法规要求对强检设备进行检定。 应进行外部校准的设备，如果符合检测目的和要 求，可按制造商校准程序进行。应至少对分析设 备的加样系统、检测系统和温控系统进行校准（ 适用时）。分析设备和辅助设备的内部校准应符 合CNAS-CL 31《内部校准要求》。
• ABI 5700 FAM™/SYBR® Green I ， VIC®/JOE™ ， NED™/TAMRA™/Cy3®，ROX™/Texas-Red®和Cy5®
• 应定期对基因扩增仪、加样器、温度计、恒温设 备、离心机和生物安全柜等进行校准。
样本升降温速率：快速模式：－1.6-＋0.8℃/秒 标准模式：±1.6℃/秒 加热块最高升降温速率：2.5℃/秒 温度范围：4℃-100℃
温度精度：设置值/显示温度的±0.25℃(35℃至95℃)( 时钟启动后3分钟开始测量)
• 标本接收与处理：流程和标本是否合格的要点
• 试剂耗材质检：为何要质检、如何做 • 核酸提取：原理和操作技术要领 • 防污染：措施和意识 • 质量控制：程序和实际运行情况、失控的分析处理
• 结果分析与判断：结果审核、报告发放
5.2 设施和环境条件
5.2.1 应实施安全风险评估，如果设置了不同的控制区 域，应制定针对性的防护措施及合适的警告。 5.2.2 涉及基因扩增检验的实验室原则上分四个独立的 工作区域：试剂贮存和准备区；样品制备区；扩增区；扩增 产物分析区。如使用自动分析仪（扩增产物闭管检测），扩 增区和扩增产物分析区可合并。具体实验室分区应依据其所 使用的技术平台及检验项目和工作量而定。 上述每个区域应有充足空间以保证： • 样品处置符合分析前、后样品分区放置； • 仪器放置符合维修和操作要求； • 样品制备区放置生物安全柜、离心机和冰箱等仪器设备； • 打印检验报告时交叉污染的控制。
性能验证：通过实验才能判断的，如试剂的核酸提取 效率和核酸扩增效率、试剂的批间差异、关键耗材的 抑制物等。
5.3 实验室设备
试剂性能验证记录应能反映该批试剂的核酸
提取效率和核酸扩增效率。一般情况下，临床实
验室在新批号试剂或关键耗材使用前，应验证试 剂批间差异和耗材的抑制物，符合附录 A.6要求即 可视为满足要求。特殊情况下，如实验室怀疑提 取试剂有质量问题，可采用凝胶电泳试验比较核
5.3实验室设备、试剂和耗材
• 5.3.1.1 如从事RNA检测，宜配备－70℃的冷冻设 备。需要时，配备高速冷冻离心机。标本制备区 使用的一次性加样器吸头应带有滤芯。 PCR 试验
用容器应可密闭，不同工作区域内的设备、物品
不能混用。 • 组织标本前处理区的设备通常应包括切片机、裱 片机、切片刀、电热恒温箱、脱蜡缸、水化缸及 HE染色缸等。
5.5 检验过程
对产前检验，在完成分子诊断前应保留备份培 养物并跟踪监测实验的准确性；在检验胎儿标本前， 应检验父母一方或双方的突变状态，宜由同一实验 室检验；如有足够的标本，应从两份不同标本中提 取 DNA 进行双份检验。实验室应了解检验方法受母 体细胞污染的影响，应有程序评估并减少这种影响。 应有明确和统一的原位杂交（ISH）阳性信号的 标准，并建立本实验室的阳性阈值。组织病理ISH， 应结合组织形态进行结果判读，并采用国际通用的 评分标准。
5.3 实验室设备
5.3.2.1 实验室应建立试剂和关键耗材（如离心管、带 滤芯的吸头）的验收程序，相应程序中应有明确的判 断符合性的方法和质量标准（宜参考附录A）。 5.3.2.3 实验室应对新批号或同一批号不同货运号的试 剂和关键耗材进行验收，验收试验至少应包括： 外观检查：肉眼可看出的，如包装完整性、有效期等；
六、分子诊断设备制造商在帮组用户通过
ISO 15189认可过程中应注意的问题
第一部分 开展分子诊断检测的国家及 行业相关规定
• 分子诊断的基本概念 • 基因体外扩增检验，通常称为PCR检验
• 2002-2009年:该检验项技术验收合格方可开展临床检验的技术准入 项目。
ISO15189认可对分子诊断设备 的要求及应用中的问题
沈佐君 shenzuojun@
主要内容
一、开展分子诊断检测的国家及行业相关规定 二、开展分子诊断检测涉及的主要设备 三、ISO 15189在分子诊断领域的应用说明简介 四、ISO 15189对分子诊断设备的性能要求
五、ISO 15189对分子诊断检测的系统完整性要求
织的安全性、有效性临床试验研究、论证及伦理审查。 第二类医疗技术和第三类医疗技术临床应用前实行第三方技术
审核制度。
对医务人员开展第一类医疗技术临床应用的能力技术审核，由 医疗机构自行组织实施，也可以由省级卫生行政部门规定。 卫生部指定或者组建的机构、组织（以下简称技术审核机构） 负责第三类医疗技术临床应用能力技术审核工作（1.中国医学科学
温度均一性：±0.5℃(35℃至95℃)(时钟启动后30秒开 始测量) 光学系统：五色激发光滤光片，五色发射光滤光片和 CCD成像系统 安装时已校准染料：SYBR® Green I，FAM™，VIC™， JOE™，NED™，TAMRA™，ROX™，Texas Red®，Cy3™ ， Cy5™。 被动参照染料：ROX™
（1）从标本中提取核酸；
（2）提取核酸的扩增。
• 商品化的质控品和标准曲线的结果良好， 并非能反映提取试剂的质量。
推荐的试剂质检方案
• 标本选择：一般选择已用老试剂测定过 的患者标本 5 份，其中一份阴性，其余 4 份一般要尽可能涵盖高、中、低、临界 等浓度差。
• 结果判断：用新试剂重复测定上述5份标 本，计算偏差 (%) ；判断标准 ( 根据实验 室室内质控RCV和能力验证允许总误差 TEa)；关注临界值和高值！
5.5 检验过程
5.5.1.2 定量检测方法和程序的分析性能验证 内容至少应包括精密度、正确度、线性、测 量和/或可报告范围、抗干扰能力等。定性检 测项目验证内容至少应包括测定下限、特异 性、准确度（方法学比较或与金标准比较）、 抗干扰能力等。验证结果应经过授权人审核。 应使用验证过的核酸抽提和纯化方法，必要 时进行核酸定量。