医院感染环境监测及采样方法讲义
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LWC-1型空气微生物采样器采样法
作用：定时测定空气微生物浓度和提供控制污染的有 效数据，替代平皿沉降法
原理：固体撞击式，定量地把空气微生物收集到培养 基上。用叶轮的高速旋转将40cm距离以内的空气吸进 涡壳，空气中的粒子在离心力的作用下，撞击在涡壳 内的培养基条上，经恒温定时培养，可得出单位空气 中的微生物数。
出致病菌（包括金黄色葡萄球菌、B溶血链球菌、沙门 氏菌）
灭后的内窥镜：无菌生长
谢谢聆听！
范围：治疗台面、治疗车、门把手、内镜存放柜内壁 、水龙头、听诊器、重要仪器设备表面、电筒、键盘 等
方法：棉试子涂抹法（棉签涂抹法） 材料：10ML的无菌生理盐水 采样：待物体表消毒处理或消毒后4小时内采样，被采样面积
≥100cm2时，用5X5cm2无菌规格板，放在被采样的物体表面上， 无菌生理盐水采样液棉试子1支，在规格板内往各返涂抹5次，交 随之转动棉签，连续采样1-4个规格板面积，采样后剪去接触工作 人员手的部分，放入装盐水的采样液中，记录送检。被采样面积 ∠100cm2时或采样物体不规则时，棉签直接涂抹物体和取其全部 表面
物体表面消毒合格标准
物体和表面环境流程
使用中消毒剂的监测
范围 ：戊二醛、碘伏、过氧乙酸、含氯 消毒剂、酚类、醇类等消毒剂。
方法：原液吸取法 材料：9ML指定采样液 采样：用无菌空针吸1ML被检样液，加入
9ML稀释液中混匀送检
使用中消毒剂与无菌器械保存液监测合格标准
使用中消毒剂细菌菌落总数应≤100cfu/ml,
医院感染 环境监测 及采样方
法
11 环境卫生学监测 2 环境卫生学监测采样
环境卫生学监测
空气消毒效果监测 手卫生消毒效果监测 物体和环境表面消毒效果监测 使用中消毒液监测
2019/11/1
采样原则
培养基妥善保存，防止污染，及时采样 采样后及时送检，时间不超4小时 标本不宜放置4度冰箱保存（常温下保存
计算
基条上的菌落数
空气细菌菌落总数（cfu）/
×1000
m3 =
采样时间(min)×40(L/min)
非洁净区空气消毒合格标准
自然沉降法流程
WORD
手卫生的消毒效果监测
采样时间：接触患者或进行医疗活动前 范围：洗手，双手搓揉15S（A-G）总：（40-
60S）、卫生手消毒（3ml、15S（A-G）总： （20-30S）、 外科手消毒（双手搓揉4min) 方法：棉试子涂抹法（棉签涂抹法） 材料：10ML的无菌生理盐水 采样方法：手消毒后，在接触患者或进行医疗活动
采样部位：空气中的微生物，固体表面上的微生物（ 被褥、地面等）。
采样场所：医院、旅馆、影剧院、商场制药、生物制 品、发酵车间、动物实验室、生物试剂气溶胶的采样 及野战部队防疫检验等
LWC-1型空气微生物采样器采样法
采样时间：样时间分五档，不能合并各档定时。为避免 培养基干燥和微生物死亡，采样时间不可超过8分钟
LWC-1型空气微生物采样器采样 法
6、物体表面的采样 （1）采用仪器法：将涡壳进气口朝向物体表面（如被褥、工作
服、桌面、地面等），保持距离约50mm，沿物体表面慢速移动 采样。涡壳进气口中部吸气周围排气，能将附着在物体表面上微 生物吹起，吸入涡壳撞击到培养基上。 （2）采用印迹法：往培养基条注入培养基时，培养基略高于基 条方格，或用无菌板刮平。将基条上的培养基面压贴在物体表面 10秒～20秒，然后37℃恒温培养24小时。计算公式如下：物体表 面细菌菌落总数（cfu) / cm2 =基条上的菌落数基条面积 物体表面细菌菌落总数（cfu) / cm2 =基条上的菌落数
基条面积
基条每个方格的面积为1cm2 ，可根据需要选用其中10、20、30
LWC-1型空气微生物采样器采样 法
采样头部的消毒
叶轮与电机轴座为磁性吻合，向前拔出 叶轮，再拧下涡壳，用75﹪酒精擦拭叶 轮和涡壳；还可采取启动空转1分钟排气 方法，以排除涡壳和叶轮附着的细菌。 两次采样之间不需消毒
LWC-1型空气微生物采样器采样 法
操作方法 1、从外套中取出基条，培养基表面朝内，插入涡壳一
周。放入和取出基条时，必须戴口罩，以防口鼻排出 细菌污染。 2、打开电源开关，指示灯亮，按一下启动按钮，开始 采样。 3、采样定时时间到，叶轮自动停转，关上电源开关。 4、取出基条，插入外套中。在外套上编号、记录，放 入无菌塑料袋中。 5、采样时指示灯不亮，表示电池电压不足应更换电池 ，使用完毕取出电池。
前采样→被检查人五指并拢→取浸盐水棉试子1支在双 手指曲面从指根到指端来回涂抹各2次（1只手涂抹面 积30cm2 ） →随之转动采样棉试子→剪去手接触部分 →采样棉试子放入盐水采液试管管内送检
Fra Baidu bibliotek
医护人员手细菌菌落总数卫生标准
1、洗手流程
2、手消毒方法
物体和表面环境消毒效果监测
致病性微生物不得检出 无菌器械保存液必须无菌
使用中消毒液采样流程
内窥镜消毒效果监测
采样部位：内窥镜的内腔面 采样方法：用无菌注射器抽取10ML无菌生理盐
水，从待检内窥镜活检口注入，用无菌试管从 活检出口收集，及时送检，2小时内检测。 合格标准： 消毒后的内窥镜：细菌总数＜20cfu/件，不能检
LWC-1型空气微生物采样器采样法
作用：定时测定空气微生物浓度和提供控制污染的有 效数据，替代平皿沉降法
原理：固体撞击式，定量地把空气微生物收集到培养 基上。用叶轮的高速旋转将40cm距离以内的空气吸进 涡壳，空气中的粒子在离心力的作用下，撞击在涡壳 内的培养基条上，经恒温定时培养，可得出单位空气 中的微生物数。
出致病菌（包括金黄色葡萄球菌、B溶血链球菌、沙门 氏菌）
灭后的内窥镜：无菌生长
谢谢聆听！
范围：治疗台面、治疗车、门把手、内镜存放柜内壁 、水龙头、听诊器、重要仪器设备表面、电筒、键盘 等
方法：棉试子涂抹法（棉签涂抹法） 材料：10ML的无菌生理盐水 采样：待物体表消毒处理或消毒后4小时内采样，被采样面积
≥100cm2时，用5X5cm2无菌规格板，放在被采样的物体表面上， 无菌生理盐水采样液棉试子1支，在规格板内往各返涂抹5次，交 随之转动棉签，连续采样1-4个规格板面积，采样后剪去接触工作 人员手的部分，放入装盐水的采样液中，记录送检。被采样面积 ∠100cm2时或采样物体不规则时，棉签直接涂抹物体和取其全部 表面
物体表面消毒合格标准
物体和表面环境流程
使用中消毒剂的监测
范围 ：戊二醛、碘伏、过氧乙酸、含氯 消毒剂、酚类、醇类等消毒剂。
方法：原液吸取法 材料：9ML指定采样液 采样：用无菌空针吸1ML被检样液，加入
9ML稀释液中混匀送检
使用中消毒剂与无菌器械保存液监测合格标准
使用中消毒剂细菌菌落总数应≤100cfu/ml,
医院感染 环境监测 及采样方
法
11 环境卫生学监测 2 环境卫生学监测采样
环境卫生学监测
空气消毒效果监测 手卫生消毒效果监测 物体和环境表面消毒效果监测 使用中消毒液监测
2019/11/1
采样原则
培养基妥善保存，防止污染，及时采样 采样后及时送检，时间不超4小时 标本不宜放置4度冰箱保存（常温下保存
计算
基条上的菌落数
空气细菌菌落总数（cfu）/
×1000
m3 =
采样时间(min)×40(L/min)
非洁净区空气消毒合格标准
自然沉降法流程
WORD
手卫生的消毒效果监测
采样时间：接触患者或进行医疗活动前 范围：洗手，双手搓揉15S（A-G）总：（40-
60S）、卫生手消毒（3ml、15S（A-G）总： （20-30S）、 外科手消毒（双手搓揉4min) 方法：棉试子涂抹法（棉签涂抹法） 材料：10ML的无菌生理盐水 采样方法：手消毒后，在接触患者或进行医疗活动
采样部位：空气中的微生物，固体表面上的微生物（ 被褥、地面等）。
采样场所：医院、旅馆、影剧院、商场制药、生物制 品、发酵车间、动物实验室、生物试剂气溶胶的采样 及野战部队防疫检验等
LWC-1型空气微生物采样器采样法
采样时间：样时间分五档，不能合并各档定时。为避免 培养基干燥和微生物死亡，采样时间不可超过8分钟
LWC-1型空气微生物采样器采样 法
6、物体表面的采样 （1）采用仪器法：将涡壳进气口朝向物体表面（如被褥、工作
服、桌面、地面等），保持距离约50mm，沿物体表面慢速移动 采样。涡壳进气口中部吸气周围排气，能将附着在物体表面上微 生物吹起，吸入涡壳撞击到培养基上。 （2）采用印迹法：往培养基条注入培养基时，培养基略高于基 条方格，或用无菌板刮平。将基条上的培养基面压贴在物体表面 10秒～20秒，然后37℃恒温培养24小时。计算公式如下：物体表 面细菌菌落总数（cfu) / cm2 =基条上的菌落数基条面积 物体表面细菌菌落总数（cfu) / cm2 =基条上的菌落数
基条面积
基条每个方格的面积为1cm2 ，可根据需要选用其中10、20、30
LWC-1型空气微生物采样器采样 法
采样头部的消毒
叶轮与电机轴座为磁性吻合，向前拔出 叶轮，再拧下涡壳，用75﹪酒精擦拭叶 轮和涡壳；还可采取启动空转1分钟排气 方法，以排除涡壳和叶轮附着的细菌。 两次采样之间不需消毒
LWC-1型空气微生物采样器采样 法
操作方法 1、从外套中取出基条，培养基表面朝内，插入涡壳一
周。放入和取出基条时，必须戴口罩，以防口鼻排出 细菌污染。 2、打开电源开关，指示灯亮，按一下启动按钮，开始 采样。 3、采样定时时间到，叶轮自动停转，关上电源开关。 4、取出基条，插入外套中。在外套上编号、记录，放 入无菌塑料袋中。 5、采样时指示灯不亮，表示电池电压不足应更换电池 ，使用完毕取出电池。
前采样→被检查人五指并拢→取浸盐水棉试子1支在双 手指曲面从指根到指端来回涂抹各2次（1只手涂抹面 积30cm2 ） →随之转动采样棉试子→剪去手接触部分 →采样棉试子放入盐水采液试管管内送检
Fra Baidu bibliotek
医护人员手细菌菌落总数卫生标准
1、洗手流程
2、手消毒方法
物体和表面环境消毒效果监测
致病性微生物不得检出 无菌器械保存液必须无菌
使用中消毒液采样流程
内窥镜消毒效果监测
采样部位：内窥镜的内腔面 采样方法：用无菌注射器抽取10ML无菌生理盐
水，从待检内窥镜活检口注入，用无菌试管从 活检出口收集，及时送检，2小时内检测。 合格标准： 消毒后的内窥镜：细菌总数＜20cfu/件，不能检