酒石酸亚铁法测定茶多酚
测定茶多酚含量实验报告
一、实验目的1. 了解茶多酚的化学性质和生理功能。
2. 掌握测定茶多酚含量的实验原理和方法。
3. 通过实验操作，提高对分光光度法等实验技术的熟练程度。
4. 比较不同茶叶样品中茶多酚含量的差异。
二、实验原理茶多酚是茶叶中的主要活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗癌、降血脂、降血压等多种保健功效。
本实验采用分光光度法测定茶叶中茶多酚的含量。
该方法基于茶多酚与特定试剂发生显色反应，根据吸光度与茶多酚含量成正比的关系，计算样品中茶多酚的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 绿茶、红茶、乌龙茶等茶叶样品- 茶多酚标准品- 乙醇、氢氧化钠、盐酸、硫酸等试剂- pH7.5磷酸盐缓冲液- 酒石酸亚铁溶液- 水为蒸馏水2. 实验仪器：- 分析天平- 分光光度计- 烧杯、试管、移液管、滴定管等玻璃仪器四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：- 准备一系列已知浓度的茶多酚标准溶液。
- 将标准溶液与酒石酸亚铁溶液混合，在特定波长下测定吸光度。
- 以茶多酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：- 称取一定量的茶叶样品，用乙醇提取茶多酚。
- 将提取液稀释至适当浓度。
- 将稀释后的样品溶液与酒石酸亚铁溶液混合，在特定波长下测定吸光度。
- 根据标准曲线，计算样品中茶多酚的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：- 在特定波长下，茶多酚标准溶液的吸光度与浓度呈线性关系。
- 标准曲线的线性回归方程为：A = 0.033C + 0.005，相关系数R² = 0.996。
2. 样品测定：- 绿茶、红茶、乌龙茶样品中茶多酚含量分别为：27.6%、24.2%、22.8%。
- 不同茶叶样品中茶多酚含量存在显著差异，可能与茶叶品种、产地、加工工艺等因素有关。
六、实验结论1. 本实验采用分光光度法测定茶叶中茶多酚含量，方法简便、准确、可靠。
2. 绿茶、红茶、乌龙茶样品中茶多酚含量存在显著差异，可能与茶叶品种、产地、加工工艺等因素有关。
实验报告
提取茶叶中的茶多酚
徐成郡
经济管理学院12-1班
实验名称：提取茶叶中的茶多酚
实验目的：计算茶叶中的茶多酚含量
实验器材：试管、烧杯、量筒、加热器、加压过滤器、胶头滴管、 移液管、比色皿
实验药品：磷酸氢二钾溶液、磷酸二氢钾、茶叶、酒石酸亚铁溶 液
实验原理：茶叶中含有很多的酚类，酚类会与酒石酸亚铁发生反 应生成紫蓝色络合物，通过测量器吸光度计算其含量
计算公式为：茶多酚（%）=
100**1*10002*957.1*m
V A % 实验步骤：
1.取磷酸二氢钾溶液15ml 和磷酸氢二钾溶液85ml
于
烧杯中混合均匀。
2.称取5g 茶叶，加入200ml 水煮沸，静止20分钟， 加压过滤，量取滤液体积，记为V=150ml.
3.准确吸取上述试液1ml ，注入25ml 容量瓶中，加 水4ml 和酒石酸亚铁溶液5ml ，充分混匀后，再 加PH7.5的缓冲溶液至刻度线。
然后取一个干净
的25ml 容量瓶，加入4ml 水和酒石酸亚铁溶液
5ml ，充分混匀后再加PH 7.5的缓冲溶液至刻度
线制得空白溶液。
4.用两个10mm 比色皿分别取上述两种溶液，测定
吸光度（A ）=1.315
实验结果：
茶叶中茶多酚的含量 =100**1*10002*957.1*m
V A =100*5*1150*10002*957.1*315.1%= 15.44% 实验总结：在这次的实验中感受到团队合作的重要性，因为我是 一个人做的，当有些东西不懂的时候也没有人可以 问，可以的话下次找个同学搭档，另外就是自己的动
手能力还有些不行，必须加强才行。
茶多酚酒石酸亚铁比色法
====Word行业资料分享--可编辑版本--双击可删====多酚类物质的提取与含量测定一、实验原理酒石酸亚铁分光光度比色法的原理：过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
测定总多酚时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定，比如测定茶叶中茶多酚含量时，儿茶酚能较好地代表茶多酚，则以儿茶酚作标准物；而测定藤茶多酚时，则以没食子酸作标准物较合适。
二、实验材料、试剂与仪器材料：茶叶；仪器：水浴锅，分光光度计，三角瓶，容量瓶，吸管等；试剂：（1）酒石酸亚铁溶液：称取硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）和酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O）,混合后加蒸馏水溶解,定容到1000mL；（2）pH 7.5磷酸盐缓冲液：称取Na2HPO4·12H2O和NaH2PO4·12H2O，混合后加蒸馏水溶解,定容到1000mL。
三、操作步骤（一）标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用# 标准曲线的制作参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法。
为简化操作，可用在一定操作条件下“吸光度值为1.00时，供试液中茶多酚的浓度为7.826 mg/mL”这一经验值，直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。
（二）样品总多酚的提取准确称取磨碎并混匀的茶叶样品于200mL三角瓶中，加入80mL沸水，并在沸水浴中保温浸提30min，然后过滤、洗涤滤渣，将滤液合并、冷却、加蒸馏水定容至100mL。
（二）样品多酚提取液的多酚总量测定吸取1mL样品多酚提取液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液，摇匀，再用pH 7.5磷酸盐缓冲液稀释至刻度，混匀。
同是以蒸馏水代替样品提取液，加入与样品测定同样的试剂作空白，用比色皿在540nm波长处测定吸光度。
4.3 测定步骤试液的制备按GB 8305-87《茶水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。
实验报告
茶叶深加工与综合利用——实验报告学校：华南农业大学学院：园艺学院专业：茶学（加工与贸易）学号：201030030213姓名：骆彩萍指导老师：黄亚辉茶叶中茶多酚的提取制备技术一、实验原理：利用茶多酚在不同溶剂中的分配系数的差异来达到分离的效果。
二、实验准备：（一）材料：绿茶、没食子酸丙脂、氯仿、乙酸乙酯、蒸馏水（二）酒石酸亚铁溶液：称取硫酸亚铁（FeSO4∙7H2O）1g与酒石酸钾钠（KNaC4H4O6∙4H2O）5g，加水稀释至500ml。
（三）PH7.5的磷酸缓冲溶液：先配置以下两种溶液（A）1/15M的磷酸氢二钠溶液：称取11.876g的Na2HPO4∙12H2O，加水溶解，稀释至1L。
（B）1/15M的磷酸二氢钾溶液：称取KH2PO49.078g，加水定容至1L。
取（A）85ml和（B）15ml混合后，即为pH7.5的缓冲液。
三、实验方法：（一）没食子酸丙酯标准曲线制作（已制备好）（二）茶汤制备：称取3g茶样（稍研磨），置于三角瓶中，加入100ml沸蒸馏水（茶水比：3:100），摇匀后，沸水浴1h，每15min搅拌一次，浸提结束后，用滤纸趁热过滤与干净的三角瓶中，洗涤残渣，冷却至室温。
（三）萃取：滤液移入分液漏斗中，用等体积的氯仿萃取1次，除去咖啡碱、树脂、脂溶性色素等，静置分层，取水层，再用等体积的乙酸乙酯萃取2次，合并上层乙酸乙酯层，于旋转蒸发器浓缩并在60℃下真空干燥，得到橙黄色粉末，真空干燥得茶多酚成品，称量重量A，回收氯仿、乙酸乙酯。
（四）茶多酚纯度测定：准确称取1份0.0500g茶多酚加入50mL的容量瓶中，加水至刻度线，摇匀至溶解，得到1mg/mL的茶多酚溶液，备用。
然后用移液管从容量瓶中吸取1mL茶多酚溶液加入25mL的容量瓶中，再加入4mL蒸馏水，加入酒石酸亚铁溶液5mL，用配制好的PH值为7.5的磷酸缓冲溶液冲稀至刻度，摇匀。
用722型分光光度计，在540nm处，用1cm比色皿，空白试剂作参比，测量吸光度，计算茶多酚纯度。
酒石酸亚铁分光光度法测定茶多酚
酒石酸亚铁分光光度法测定茶多酚
王丽珠;吴棱
【期刊名称】《光谱实验室》
【年(卷),期】1997(014)003
【摘要】采用没食子酸丙酯为基准物质酒石酸亚铁作为显色剂，光度法测定茶多酚制品中茶多酚的含量。
最大吸收波长５４０ｎｍ摩尔吸光系数２．６５×１０＾３回收率为９８％－１０１％，相对标准偏差为０．９０％。
方法简便，结果令人满意。
【总页数】3页(P52-54)
【作者】王丽珠;吴棱
【作者单位】中国科学院福建物质结构研究所;中国科学院福建物质结构研究所【正文语种】中文
【中图分类】R392－33
【相关文献】
1.降低茶多酚酒石酸亚铁比色法的误差 [J], 张凯农;肖纯
2.酒石酸亚铁法和福林酚法测定茶多酚的差异原因研究 [J], 钟兴刚;刘淑娟;郑红发;黄怀生;赵熙;粟本文;周浩
3.酒石酸亚铁-标准曲线法检测绿茶提取物中茶多酚含量 [J], 邓祥;韩伟
4.分光光度法测定茶多酚注射剂中茶多酚的含量 [J], 杨美燕;李楠;邢国秀;郭永学;宫为民
5.硫酸亚铁分光光度法测定食盐中亚铁氰化钾的方法改进 [J], 王秋菊;毕玉友;孙继春
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GB-21733中茶多酚测定方法的说明
茶饮料中茶多酚测定方法的注意事项
目前集团茶饮料品项增多，生产工厂数量不断增加，茶多酚是GB/T 21733-2008茶饮料标准中衡量茶饮料合格与否的一个重要参数，针对目前各工厂对GB/T 21733-2008 附录A中茶多酚检测方法理解存在偏差与疑问的问题，特对该方法中已发生混淆之处进行说明，以确保各生产工厂产品品质统一。
A.3.2 测定方法的说明：
（1）该步骤中测定吸光度A1、A2时的试剂空白不同。
测定A1的试剂空白为不添加产品样液，加水5mL、酒石酸亚铁溶液5mL，用pH7.5磷酸缓冲液定容的试液；测定A2的试剂空白为不添加产品样液，加水5mL，不添加酒石酸亚铁溶液，用pH7.5磷酸缓冲液定容的试液。
（2）目前集团已有的茶饮料品相在测定茶多酚时，计算时公式中的K值为1即可。
如若对该方法仍有疑问，请与研发中心联系。
茶多酚总量的测定
结果计算
测试效果
pH对测定结果有影响，在pH6.24时连位羟基和铁起 反应，而邻位几乎不起反应；在pH6.8和8.1时，连 位羟基变化不大，颜色的加深是由邻位羟基引起的。 低于pH7.0，酒石酸铁和索伦逊缓冲液会形成乳状 混浊液干扰比色结果。
酒石酸铁主要与茶多酚中的邻位羟基和连位羟基功 能团呈色，而对间位羟基和单羟基不呈色，而且与 连位羟基呈色能力比与邻位羟基呈色强3倍。由于 不同种类茶叶的多酚组成不完全相同，对酒石酸铁 的显色强度也有差异。
pH7.5的索伦逊缓冲液：
pH7.5的索伦逊缓冲液
先配制以下两种溶液
（1） 1/15M的Na2HPO4溶液：称取Na2HPO4.2H2O 11.876 克，加水溶解并稀释至1 L。 （2） 1/15M的KH2PO4溶液：称取经110℃ 烘干2 h 的KH2PO4 9.078克，加水溶解并稀释至1 L。
取溶液（1）85 ml和溶液（2）15 ml混匀，
主要仪器
分光光度计，恒温水浴，分析天平。
测定方法
茶汤制备：准确称取磨碎试样3 克，加450 毫升沸 水，在沸水浴中浸提 45分钟，每隔10 分钟摇瓶一 次，过滤。洗涤残渣，滤液合并于500毫升容量瓶 中，冷却后加水定容至刻度，摇匀。 测定：准确吸取茶汤1 毫升，注入25 毫升容量瓶 中，加水4 毫升、酒石酸铁溶液5 毫升，用缓冲溶 液定容至刻度，混匀。用10 mm比色皿，以试剂 空白作参比，于波长 540 nm处测吸光度，根据经 验系数求得茶汤中茶多酚含量。
茶多酚总量的测定
─酒石酸铁比色法
制作人：汪小钢
实验目的
茶多酚是茶叶中多元酚类物质的总称，具有苦 涩味，对茶叶的品质有非常重要的影响。此外， 药理学试验表明，茶多酚对心血管疾病、癌症 等具有一定的防治效果。因此，检测茶叶中多 酚类物质总量对评价茶叶的品质具有非常重要 的作用。
茶多酚的含量
酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量1．原理根据酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色配合物。
配合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比，因此可以用比色方法测定。
该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。
在一定的操作条件下，光密度为1.00时，供试液中茶多酚浓度为7.826mg/mL 。
2．仪器和试剂仪器：水浴、分光光度计、三角烧瓶、容量瓶、吸管、滴瓶等。
试剂：酒石酸铁溶液、pH7.5的磷酸缓冲溶液。
3．操作步骤（1）样品溶液的制备方法准确称取茶叶麻碎样品1g ，于200 mL 三角烧瓶中，加入沸水80 mL ，在沸水浴中浸提30min ，然后过滤、洗涤，滤液倒入100 mL 容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。
（2）测定吸取样品溶液1 mL 于25 mL 容量瓶中，加蒸馏水4 mL ，加酒石酸铁溶液5 mL ，摇匀，再加入pH7.5磷酸缓冲液稀释至刻度。
以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作为空白。
选择540nm 波长和0.5cm 的比色杯测定光密度。
4．结果计算1001000826.7⨯⨯⨯⨯=mV T A x 式中：x ——茶多酚含量，%；A ——样品溶液的光密度值；T ——样品溶液总量，mL ；V ——吸取的试剂量，mL ；m ——样品质量，g 。
5．注意事项磷酸缓冲液在常温下容易生长霉菌，以冷藏为宜。
酒石酸铁与茶多酚反应时，因连苯酚比邻苯酚显色强，所以没食子酸酯类儿茶素显色深，凡是此类儿茶素含量比例大的，显色就较深。
因此酒石酸铁比色法与高锰酸钾滴定法两者测定的结果会有所出入。
食品中锡的测定1．原理样品经消化后，在弱酸性溶液中，四价锡离子与苯芴酮形成微溶性橙红色配合物，在保护性胶体存在下，与标准系列比较定量。
2．仪器和试剂（1）仪器分光光度计（2）试剂酒石酸溶液（100g/L）；抗坏血酸溶液（10g/L）；动物胶溶液（5g/L）；酚酞指示液（10g/L）；氨水（1+1）；硫酸（1+9）；苯芴酮溶液（0.1g/L）；锡标准储备液（1.0mg/ mL）；锡标准使用液（10.0μg/ mL）。
茶多酚提取综合试验(1)
茶叶提取茶多酚综合实验一、实验目的1）熟悉酒石酸亚铁法测定茶多酚含量；2）掌握天然植物中提取活性物质的实验方案设计及操作方法；3）熟练掌握各种实验操作的正确方法；4）熟悉数据处理及科技论文的写作方法。
二、实验原理茶多酚是一类以儿茶素类为主体的多酚类化合物，由于其酚性羟基易氧化而提供质子H ＋，而具有抗氧化和消除自由基作用，是一种理想的天然抗氧化剂。
含醇羟基的有机溶剂对植物多酚具有良好的溶解性，而含水的有机溶剂对多酚的溶解能力比纯有机溶剂大，这是因为含水有机溶剂可破坏多酚分子间的氢键从而减弱了多酚间的缔合，有利于多酚的溶出。
二、试验仪器及药品BS210S 电子分析天平 722分光光度仪 KQ-5200超声波振荡器RE-52D 旋转蒸发器 粉碎机试验原料：苏州碧螺春绿茶（2008年春制取，冰箱保存）.... ....三、试剂与溶液配制1.标准溶液的配制：精确称取没食子酸乙酯（100℃烘干燥1h ）25mg ，水溶解，定容至25mL 容量瓶中，作为标准溶液。
2．酒石酸铁溶液称取硫酸亚铁（GB 664）1.0g ，酒石酸钾钠（GB 1288）5.0g ，加水溶解并定容至1L ，可稳定10天。
3．pH7.5的磷酸缓冲液a 液： 1/15mol/L 的磷酸氢二钠溶液：称取磷酸氢二钠（GB 1263）23.877g ，加水溶解并稀释至1L 。
b 液： 1/15mol/L 的磷酸二氢钾溶液：称取经110℃烘干2h 的磷酸二氢钾（GB 1274）2.2695g ，加水溶解至250mL 。
c 液：.取a 液85mL 和b 液15mL 混匀，即得pH7.5的缓冲液。
四、试验方法（一）分析方法多酚类物质能与亚铁离子生成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
虽然各种儿茶素的呈色度不同，但茶多酚中的儿茶素组成范围大致相同，在此范围内，对吸光度的影响不大，故用一条标准曲线即可。
此标准曲线与没食子儿茶素没食子酸酯的标准曲线一致，但因没食子儿茶素没食子酸酯不易得到，故用没食子酸乙酯。
茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定
茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定一、本文概述本文旨在探讨茶叶中茶多酚的提取工艺及其含量测定方法。
茶多酚是茶叶中的重要成分，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性，对人体健康具有显著的益处。
因此，研究茶叶中茶多酚的提取工艺和含量测定方法，对于茶叶的品质控制、新产品开发以及茶产业的可持续发展具有重要意义。
本文将首先介绍茶多酚的基本性质及其在茶叶中的分布情况，为后续提取工艺和含量测定方法的研究提供理论基础。
接着，将详细阐述茶多酚的提取工艺，包括提取原料的选择、提取溶剂的选用、提取条件的优化等方面，以期获得高效、环保、经济的提取方法。
在此基础上，本文还将探讨茶多酚的含量测定方法，包括紫外可见光谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等常用的分析方法，并对各种方法的优缺点进行比较和评价。
通过本文的研究，旨在为茶叶加工企业、科研机构以及广大茶叶爱好者提供一套科学、实用的茶多酚提取工艺和含量测定方法，为茶叶的品质控制和新产品开发提供技术支持，推动茶产业的健康发展。
二、茶多酚的提取工艺茶多酚（Tea Polyphenols）是茶叶中的重要活性成分，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗癌等。
因此，提取茶多酚的工艺研究对于茶叶深加工和茶多酚的开发利用具有重要意义。
选择品质优良、无污染的茶叶作为提取原料。
通常，绿茶中茶多酚的含量较高，因此绿茶是提取茶多酚的首选。
将选好的茶叶进行粉碎处理，以提高后续提取过程中的传质效率。
茶多酚的提取通常采用有机溶剂提取法，常用的溶剂有乙醇、丙酮、甲醇等。
其中，乙醇因其毒性低、安全性高、提取效果好而被广泛应用。
乙醇的浓度、温度以及提取时间等因素都会影响茶多酚的提取效果。
常用的茶多酚提取方法包括浸提法、回流提取法、超声提取法等。
其中，回流提取法因其提取效率高、操作简便而被广泛应用。
回流提取法是将茶叶粉末与乙醇混合后，在加热条件下进行回流提取，使茶多酚充分溶解在乙醇中。
提取液经过浓缩后，可采用大孔树脂吸附法、柱层析法等方法进行纯化，以去除杂质，提高茶多酚的纯度。
茶叶中茶多酚含量的测定
茶叶中茶多酚的含量测定1、实验目的：掌握实验操作的趣味性，了解实验内容在实际生活中的应用，充分理解和掌握茶多酚含量在现实生活中的作用，进一步熟悉茶叶中茶多酚测定的原理及操作。
2、实验原理：茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
3、仪器和用具：分析天平 (感量. 分光光度仪及实验常用仪器4、试剂和溶液：所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。
在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物，均称茶多酚。
5、操作方法：秤取5g茶叶加入100mL水煮沸，静止冷却20分钟，加压过滤，量酒石酸亚铁溶液：称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁和5g 取滤液体积记为V1(准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L(溶液应避光，低温保存，有效期一个月)。
6、磷酸盐缓冲液：磷酸氢钠: 称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。
磷酸二氢钾：称取9.078g磷酸二氢钾，加水溶解后定容至1L。
取上述磷酸氢二钾溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
7、准确称取上述试液1mL ，注入25mL容量瓶中加水4mL和酒石酸亚铁溶液5ml 充分混合，再加入pH=的缓冲溶液至刻度，用10mm比色皿，在波长等于540nm出，以试液空白溶液做参比溶液，测定吸光度为A.8、茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表现，按下式计算：A××2 V1茶多酚(％)＝────────× --------- ×100结果=1000 1×m式中——滤液体积记为VmL1m——试样的质量，g；A——试样的吸光度；此次实验测定A=——用10mm比色杯，当吸光度等于时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于。
注意：a. 应取两次测定的算术平均值作为标准。
同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过。
b.应用的法子；用分光光度法测定其含量.c.测定的结果 (取小数点后一位)；化学化工学院环境工程XX班学生：XXX2010/11/03。
实验一 茶多酚总量的测定
实验一茶多酚总量的测定一实验目的茶多酚是茶叶中多元酚物质的总量，具有苦涩味，对茶汤的滋味和茶叶的保健功能有非常重要的影响。
药理学研究表明，茶多酚对心血管系统疾病、癌症等具有一定的防治效果。
因此，检测茶多酚总量对评价茶叶品质具有非常重要的作用，同时对于茶叶深加工产品如茶饮料、茶叶提取物、速溶茶等的品质评判也有重要作用。
福林酚法由于采用没食子酸为标准品，因而其适用范围较宽，不仅可以用于茶叶，而且还可适用于茶叶提取物、茶叶深加工制品等。
而酒石酸亚铁法由于采用经验系数1.957，因而仅适用于茶叶中多酚总量测定，而不适于茶叶提取物制品等其他产品中多酚总量测定。
二实验原理本实验引用国家标准方法《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》（GB/T 8313-2008）中的“方法二茶叶中茶多酚的检测”的方法。
茶叶磨碎样中茶多酚用70%的甲醇在70℃水浴上提取，福林酚试剂（主要成分为磷钨酸和磷钼酸）在碱性条件下氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色，最大吸收波长为765 nm，用没食子酸作校正标准，根据标准曲线定量茶多酚。
三实验材料、仪器与试剂1 实验材料：均匀磨碎茶样。
2 仪器：电子天平（感量分别为0.000 1g和0.01g）、分光光度计、恒温水浴锅、低速离心机、移液管、容量瓶（10、100、250、500mL）、10mL离心管、10mL具塞刻度试管。
3 10%福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂：将25mL福林酚试剂转移到250mL容量瓶中，用水定容并摇匀，避光储存，现配现用。
4 Na2CO3溶液：按质量浓度7.5%配置，即称取37.50g Na2CO3，加适量水溶解，转移到500mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
该试剂在室温下可保存30天。
5 没食子酸标准储备溶液：按1mg/mL（1 000 μg/mL）的浓度现配，即称取0.110g没食子酸（GA，相对分子质量188.14）于100mL容量瓶中溶解，并定容至刻度，摇匀，避光保存。
茶叶中多酚类物质的测定
实验二茶叶中多酚类物质的测定一、原理酒石酸铁能与多酚类物质反应，生成紫蓝色络合物，络合物吸光度与多酚类含量在线性范围内成正比，符合朗伯比尔定律。
因此，可以用分光光度法来测定多酚类含量。
二、仪器设备l、分光光度计2、天平、电炉、常用容量、吸量玻璃仪器等。
三、样品、试剂及配制方法1、样品：不同等级绿茶或不同茶类茶样。
2、酒石酸铁溶液称取FeSO4·7H2O 1克(AR级)与KNa C4H8·H2O(洒石酸钾钠)5克(AR)，加蒸馏水溶解定容至1000毫升，该溶液可稳定使用一周。
3、pH7.5磷酸缓冲液(PBS)（1）1/15M的Na2HPO4·12H20溶液：称取23.9克Na2HPO4·12H20，加水溶解后定容至1000ml。
（2）1/15M 的KH2PO4溶液：称取9.08克经110℃烘干2h的KH2PO4(AR级)加入水溶解后定容至1000ml。
取上述1/15M Na2HPO4溶液85毫升和1/15M 的KH2P04溶液15毫升混合均匀，即得pH7.5的磷酸缓冲液(该液宜冷藏随配随用)。
四、测定步骤1、供试液制备准确称取磨碎干样3克，加沸水450毫升，立即移入沸水浴，浸提45min，每隔10min分钟摇动一次。
然后趁热减压过滤，残渣用少量热水洗2—3次，合并滤液；滤液置于500毫升容量瓶中，待冷后蒸馏水定容，充分混匀后备用。
2、定量吸取上述供试液1毫升，注入25毫升容量瓶中，加水4毫升，加酒石酸铁溶液5ml充分混匀，然后再加pH7.5磷酸缓冲液至刻度，即为比色液；除以蒸馏水代替供试液外其余以相同试剂定容至25ml作为空白对照，然后用540nm波长1cm 比色杯测定吸光度A 值。
3、计算注：“3.913”——用1cm 比色杯，当吸收光度等于1.00时，每1ml 茶汤中含有茶多酚相当于3.913mg 。
五、实验记录1、 冲泡茶样所用水须蒸馏水或不含铁质水。
酒石酸铁比色法检测奶茶饮料中茶多酚
内外检测茶多酚常用的方法有酒石酸铁比色法、福林材料 市场常见的奶茶饮料、奶茶粉；去离子水、乙醇电子天平（浙江赛因科学仪器有限公司 ，BSA224S），紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司，T6新世纪）。
实验方法 将奶茶饮料样液充分摇匀后，准确吸取10.0mL 于50mL 容量瓶中。
加入不同沉淀剂（①法按国标加乙醇，②法加乙酸锌和亚铁氰化钾，③法加盐酸后用丙酮定容，④法加乙酸），充分摇匀，放置15min 后定容。
待用。
（奶茶粉包按参照包装要求，冲泡成奶茶溶液，再按上述方法处理。
）之后检测方法和计算方式同国标。
不同处理方法之间的比较分析显色效果比较分析。
从步骤3实验情况看，③法中原本澄清滤液出现轻微胶状浑浊，②法中少部分待测液出现轻微乳白色浑浊。
从步骤3结果比较：④＞②＞③＞①。
实验结果稳定性比较分析。
分光光度计比色法建立的基础是朗伯比尔定律，而根据该定律要求待测物应为均一稀溶液，且无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射。
根据步骤3以及实验结果及稳定性情况效果比较：④＞②、③＞①。
方法①方法②方法③方法④步骤1加入沉淀剂后样液实验现象无多大变化迅速沉淀，底部出现糊状沉淀迅速分层，底部出现结块沉淀，顶部出现悬浮颗粒物溶液发生轻微变化，变化不明显步骤2样液过滤情况过滤速度慢，几乎无法过滤过滤速度快过滤速度快过滤速度快滤液情况滤液浑浊滤液澄清（少部分样品时间久后出现絮状漂浮物）滤液澄清滤液澄清步骤3加入水、显色剂等比色前实验现象显色正常，待测液依旧浑浊显色正常（部分待测液出现轻微乳白色浑浊现象）显色正常（待测液有轻微胶状浑浊现象）显色正常，待测液澄实验结果及稳定性浑浊导致偏高稳定性不够，少部分有轻微絮状物则会影响实验结果稳定性不够，轻微胶状浑浊会致结果偏高结果稳定，R S D ＜5%实验可操作性低实验可操作性不强实验可操作性不强强不同浓度的乙酸比较分析。
乙酸浓度根据表在本实验范围内进行综合比较分析后，乙酸法能有效酒石酸铁比色法检测奶茶饮FOOD INDUSTRY酚法、高锰酸钾滴定法、硫酸铈滴定法、原子吸收分光光度法、近红外光谱法、高效液相色谱法等。
酒石酸亚铁溶液茶多酚提取工艺流程
酒石酸亚铁溶液茶多酚提取工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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1. 茶叶，选用新鲜、无病虫害的茶叶。
酒石酸法茶多酚含量测定
0.2
0.4
0.6
0.8
1
坐标轴标题
微克/毫升
线性 (微克/毫升)
1.2
1.4
四、 计算
▪ 茶多酚含量 W=C/1000×100%
W
茶多酚含量%
C
所测吸光度带入标准曲线得到样品中茶多酚
浓度（ μg/ml）
10mg儿茶素，用蒸馏水定容至10ml， 浓度为1000μg/ml。分别稀释到200、400、600、800μg/ml， 得5个浓度标准品溶液。
▪ 2、 标准曲线：分别吸取1ml标准液，磷酸缓冲液3ml，酒石酸钾 铁1ml混匀，3000转离心10min。吸取上清液3ml加入玻璃比色 皿，用分光光度计测定540nm处的OD值三次求平均值，并绘制 浓度-OD标准曲线。以蒸馏水代替标准品溶液加入同样的试剂作 空白对照。
三、 操作步骤
▪ 1、溶液配制
▪ （1）酒石酸钾铁溶液。称取FeSO4•7H2O 0.100g，含4个结晶水 的酒石酸钾钠0.500g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至 100mL。
▪ （2）pH7.5的磷酸缓冲液。6.020g Na2HPO4•12H2O ，0.500g NaH2PO4•2H2O，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至100mL。
▪ 3、取提取物10mg，用蒸馏水定容至10ml。取1ml，按上述同 样方法测定540nm处的OD值3次求平均值。以蒸馏水代替样品溶 液加入同样的试剂作空白对照。
标准曲线
坐标轴标题
1200 1000 800 600 400 200
0 0
微克/毫升
y = 840.35x + 24.753 R²= 0.9972
茶叶中茶多酚含量测定
一、 实验原理
饮料中茶多酚的测定方法
饮料中茶多酚的测定方法1.原理茶多酚能与酒石酸亚铁作用显紫蓝色，与没食子酸乙酯的检量线进行比色定量。
2．仪器与试剂（1）仪器分光光度计、恒温水浴锅（2）试剂1）酒石酸亚铁溶液：称取100mg硫酸亚铁和500mg酒石酸钾钠，用水溶解并定容至100ml。
溶液应避光、低温保存，有效期一个月。
2）pH＝7.5磷酸盐缓冲液：磷酸氢二钠（1/15mol/L）：称取23.377g磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。
磷酸二氢钾（1/15mol/L）：称取9.078g磷酸二氢钠，加水溶解后定容至1L。
取85ml磷酸氢二钠溶液（1/15mol/L）和15ml磷酸二氢钾溶液（1/15mol/L）混合均匀。
3）没食子酸乙酯标准溶液：准确称取用水重结晶并在100℃下干燥1h的没食子酸乙酯0.5g，加水溶解后，置于100ml容量瓶中稀释定容，充分摇匀，此溶液1ml含有5mg没食子酸乙酯。
3.操作步骤（1）标准曲线的绘制吸取没食子酸乙酯标准溶液0.0 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL，分别置于25 mL容量瓶中，均加水至5.0mL，再各加入5.0 mL酒石酸亚铁溶液，用磷酸盐缓冲溶液定容，充分摇匀，放置15min。
在540 nm处用分光光度计分别测定它们的吸光度。
以没食子酸乙酯标准溶液的浓度为横坐标，测得的吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。
（2）样品的测定准确吸取10～20mL样品，置于100 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，用干滤纸过滤，弃去最初约20mL滤液。
吸取5mL滤液，移入25mL容量瓶中，以下按标准曲线绘制中的步骤进行操作。
根据公式计算样品中的没食子酸乙酯含量：X= c×1.5×100/v式中X—样品中茶多酚的质量分数（%）；c—从工作曲线查得的没食子酸乙酯质量（g）；V—5ml滤液相当于样品的量（mL）。
桑叶成分测定方法
桑叶成分测定方法茶多酚的测定（GB/T 8313-2002）本标准适用于茶叶中茶多酚的测定，不适用于茶叶提取物制品中茶多酚的测定。
引用标准：GB/T 8302-2002 茶取样；GB/T 8312-2002 茶咖啡碱测定；GB/T 8303-2002 茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定；茶多酚（tea polyphenols）：茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚类物质。
原理：茶叶中多酚类物质能与与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
设备：分析天平、分光光度计。
试剂和溶液：水为蒸馏水。
1、酒石酸亚铁溶液：称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L(溶液应避光，低温保存，有效期一个月)。
2、pH7.5磷酸盐缓冲液：1/15mol/L磷酸氢二钠: 称取23.9g十二水磷酸氢二钾钠，加水溶解后定容至1L。
1/15mol/L 磷酸二氢钾：称取经110度烘干2h的磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。
取上述磷酸氢二钠溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
操作方法1 取样：按《茶取样》的规定取样。
2 试样的制备：按《茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定GB/T8303-2002》的规定，制备试样。
3 测定步骤：(1)试液的制备：按《茶水浸出物测定GB/T 8312-2002》中的11.1的规定，制备试液。
(2)测定：准确吸取上述(1)试液1mL，注入25mL的容量瓶中，加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL，充分混合，再加pH7.5的缓冲液至刻度，用10mm比色杯，在波长540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。
4、结果计算：计算方法和公式茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算：茶多酚(%)=【(A×1.957×2)/1000】×【L1/(L2×M0×m)】×100式中：L1——试液的总量，mL；L2——测定时的用液量，mL；M0——试样的质量，g；m——试样干物质含量百分率，%；A——试样的吸光度；1.957——用10mm比色杯，当吸光度等于0.50时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
酒石酸亚铁法测定茶多酚
方法一：酒石酸亚铁法测定茶多酚1.适用范围：茶叶、茶粉及其制品，茶饮料等。
2.原理：在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物，均称茶多酚。
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物，可用分光光度法测定其含量。
3.试剂：所用试剂应为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。
3.1酒石酸亚铁溶液：称取1g（准确至0.0001）硫酸亚铁，5g酒石酸钾钠（准确至0.0001），用水溶解并定容至1L（低温保存，有效期10天）。
3.2 PH7.5磷酸缓冲溶液：3.2.1 1/15M磷酸氢二钠：称取23.9g十二水磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15M磷酸氢钾：称取经110℃烘干2小时的磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。
取上述1/15M的磷酸氢二钠溶液85ml和1/15M的磷酸二氢钾15ml混合均匀。
4.仪器及用具：4.1分光光度计4.2磨碎机：由不吸收水分的材料制成；死角尽可能小，易于清扫；使磨碎样品能完全通过孔径600~1000um的筛子。
5.操作步骤：5.1茶叶：5.1.1试样的制备：（紧压茶以外的各类茶）先用磨碎机将少量试样磨碎，弃去，再磨碎其余部分。
如果水分含量太高，不能磨到2.2所规定的细度，必须将样品预先干燥（烘箱不超过100℃为宜）。
待试样冷却后（置干燥器内），再进行磨碎。
5.1.2试液的制备：（1）称取3g（准确至0.001g）磨碎试样于500ml锥形瓶中。
（2）加沸蒸馏水450ml，立即移入沸水浴中，浸提45min。
若水浴无振动装置则每隔10min 摇动一次。
（3）浸提完毕后，冷却后（自然冷却或于自来水流下冷却）将样液转移到500ml容量瓶内，并定容至刻度。
（4）定容后立即常压过滤，弃去初滤液（5ml以上），收集滤液备用。
（所用滤纸为杭州新华纸业有限公司，双圈牌，定量，慢速滤纸）。
5.2茶粉：茶粉试液的制备：称取一定量的样品，用沸蒸馏水450ml冲泡，冷却后用蒸馏水稀释定容至500ml。
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方法一：酒石酸亚铁法测定茶多酚
1.适用范围：茶叶、茶粉及其制品，茶饮料等。
2.原理：
在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物，均称茶多酚。
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物，可用分光光度法测定其含量。
3.试剂：
所用试剂应为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。
3.1酒石酸亚铁溶液：称取1g（准确至0.0001）硫酸亚铁，5g酒石酸钾钠（准确至0.0001），用水溶解并定容至1L（低温保存，有效期10天）。
3.2 PH7.5磷酸缓冲溶液：
3.2.1 1/15M磷酸氢二钠：称取23.9g十二水磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15M磷酸氢钾：称取经110℃烘干2小时的磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。
取上述1/15M的磷酸氢二钠溶液85ml和1/15M的磷酸二氢钾15ml混合均匀。
4.仪器及用具：
4.1分光光度计
4.2磨碎机：由不吸收水分的材料制成；死角尽可能小，易于清扫；使磨碎样品能完全通过孔径600~1000um的筛子。
5.操作步骤：
5.1茶叶：
5.1.1试样的制备：（紧压茶以外的各类茶）先用磨碎机将少量试样磨碎，弃去，再磨碎其余部分。
如果水分含量太高，不能磨到2.2所规定的细度，必须将样品预先干燥（烘箱不超过100℃为宜）。
待试样冷却后（置干燥器内），再进行磨碎。
5.1.2试液的制备：
（1）称取3g（准确至0.001g）磨碎试样于500ml锥形瓶中。
（2）加沸蒸馏水450ml，立即移入沸水浴中，浸提45min。
若水浴无振动装置则每隔10min 摇动一次。
（3）浸提完毕后，冷却后（自然冷却或于自来水流下冷却）将样液转移到500ml容量瓶内，并定容至刻度。
（4）定容后立即常压过滤，弃去初滤液（5ml以上），收集滤液备用。
（所用滤纸为杭州新华纸业有限公司，双圈牌，定量，慢速滤纸）。
5.2茶粉：茶粉试液的制备：称取一定量的样品，用沸蒸馏水450ml冲泡，冷却后用蒸馏水稀释定容至500ml。
5.3茶饮料、茶汁：
5.3.1较透明的样液，如果味茶饮料：将样液充分摇匀后，备用。
5.3.2较浑浊的样液，如果汁茶饮料：称取充分混匀的样液25ml于50ml容量瓶中，加入95%乙醇（C2H2OH）15ml，充分摇匀，放置15min后，用水定容至刻度。
用慢速定量滤纸过滤，滤液备用。
5.3.3含碳酸气的样液：量取充分混匀的样液100ml于250ml烧杯中，称取其总质量，然后置于电炉上加热至沸腾，在微沸状态下加热10min，将二氧化碳气排除。
冷却后，用水补足原来的质量。
摇匀后，备用。
5.4测定：
5.4.1用20ml移液管精确量取20ml待测样品至100ml定量瓶中，加入蒸馏水（或RO水）稀释定容至100ml，充分振荡混匀。
5.4.2于25ml容量瓶内吸取5ml稀释液。
对于5ml移液操作，请使用5ml定量加样器（即移液枪）进行精确操作；若没有定量加样器方采用5ml移液管进行精确操作。
5.4.3 加酒石酸亚铁溶液5ml，充分混合，再加PH7.5缓冲液至刻度，摇匀。
5.4.4用10mm比色杯，在波长540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A1）。
（试剂空白溶液为：5ml蒸馏水（或RO）水+5ml酒石酸亚铁溶液+磷酸缓冲液定容至25ml）5.4.5同时移取等量的试液于25ml容量瓶中，用PH7.5磷酸缓冲液定容至刻度，测定其吸光度（A2）。
（试剂空白溶液为：5ml蒸馏水（或RO）水+磷酸缓冲液定容至25ml）
6.结果计算：
6.1茶叶及茶粉中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算：
式中：A1—试液显色后的吸光度；
L1—试液的总量，ml ；
L2—测定时的用液量，ml ；
M—试样的质量，g；
m—试样干物质含量百分率，%；
1.957—用1cm比色杯，当吸光度等于0.5时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
6.2饮料中茶多酚含量按下式计算：
式中：A1—试液显色后的吸光度；
A2—试液底色的吸光度；
K—稀释倍数；
L—测定时吸取试液的体积，ml ；
1.957—用1cm比色杯，当吸光度等于0.5时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
7.重复性：
7.1茶叶等同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.5g。
7.2茶饮料等同一样品的两次测定值之差，不得超过平均值的5.0%。
8.备注：
8.1酒石酸亚铁溶液应妥善保存，若有沉淀或颜色发生变化等，应重新配制。
8.2 1.957是一个经验值，故各个操作步骤应严格要求。
8.3整个实验过程控制在3小时之内。
9.参考资料：
GB/T 8302-2002《茶取样》
GB/T 8303-2002《茶磨碎试样的制备及其干物质含量的测定》
GB/T 8313-2002《茶茶多酚测定》
GB 2499—200《茶饮料行业标准》。