大鼠血清雌激素水平测定方法总结

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1、酶联免疫吸附实验(ELISA)
即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。

该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

2、放射免疫分析(英语:radioimmunoassay,缩写为RIA)
简称放免或放免法,是一种在无须采用生物测定方法的情况下,用于检测抗原(例如血清之中激素的水平)的实验室测定方法。

这一方法是由罗莎琳·萨斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于1950年代创建的。

通过抽取的少量血液或病人标本,利用放射性核素标记的抗原和未标记的抗原(两者的免疫原性相同)对专一抗体的竞争性相结合反应,来分析测定体内抗原的含量。

放射免疫分析法具有灵敏性高(可达10-12g~10-15g)。

3、免疫荧光法(免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )FIA)
是标记免疫技术中发展最早的一种。

用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。

主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。

4、化学发光免疫分析(CLIA)
亦称化学发光标记免疫测定,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体(化学发光剂标记物),与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入发光促进剂进行发光反应,通过对发光强度的检测进行定量或定性检测。

5、时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析(time-resolved
fluoroimmunoassay, TRFIA)
是以具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合剂作为示踪物,建立的一种新型的非放射性微量分析技术。

自从1983年Pettersso n等采用时间分辨荧光免疫分析
(TRFIA)法定量测定hCG以来,TRFIA方法学研究和临床应用发展迅速,成为继RIA之后标记免疫分析发展的一个新的里程碑,国内外相继研制了多种TRFIA仪和配套的商品化试剂盒。

是近十年发展起来的非同位素免疫分析技术,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10^(-12)g/ml,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。

它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。

由于其高灵敏度,在临床上得到了广泛的应用,逐渐代替了放射免疫分析。

缺点是E2的线性浓度范围为2.5-200pg/ml.
???正常值
检测方法检测范围
常规免疫mg~μg(10-3 ~10-6 g)
荧光免疫,酶免疫μg~ng(10-6 ~10-9 g)
放射免疫,发光免疫 ng~pg(10-9 ~10-12 g)
PCR pg~fg(10-12 ~10-15 g)
这些正常检测范围等没有统一的说法,但可以肯定的是TRFIA最优。

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