(完整版)防腐挑战实验
(完整word版)微生物挑战性实验方法
微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
化妆品防腐挑战测试 标准
化妆品防腐挑战测试标准摘要：1.化妆品防腐挑战测试的背景和意义2.化妆品防腐挑战测试的标准和方法3.化妆品防腐挑战测试的应用案例4.化妆品防腐挑战测试对保障消费者健康的重要性正文：一、化妆品防腐挑战测试的背景和意义化妆品作为日常生活中不可或缺的一部分，其质量和安全性备受关注。
在化妆品生产过程中，由于水分、营养物质等成分的存在，容易引发微生物污染，导致化妆品变质、失效，甚至对使用者的健康造成威胁。
因此，化妆品防腐挑战测试应运而生，其目的是评估化妆品中防腐剂的效果，以确保产品在保质期内不会发生微生物污染。
二、化妆品防腐挑战测试的标准和方法1.标准在我国，化妆品防腐挑战测试的标准主要参照国家药监局的相关规定。
例如，2020 年第141 号公告批准月桂酰精氨酸乙酯hcl 作为化妆品准用防腐剂；2021 年74 号公告将苄氯酚列为禁用防腐剂。
此外，欧盟和美国等国家也有相应的防腐挑战测试标准。
2.方法化妆品防腐挑战测试的方法主要包括以下两种：（1）一次加菌法：在受试样品中加入一定量的已知菌种，要求样品中的细菌初始加菌浓度达到10^5~10^6 cfu/g；酵母和霉菌初始加菌浓度达到10^4~10^5 cfu/g。
然后定期跟踪检测产品中微生物的消长情况，以评估防腐剂的效果。
（2）连续接种法：在化妆品中连续加入不同种类和浓度的微生物，观察化妆品中微生物的生长情况，以评估防腐剂的效果。
三、化妆品防腐挑战测试的应用案例某化妆品生产商在开发一款新的护肤品时，为了确保产品在保质期内不会发生微生物污染，需要进行防腐挑战测试。
测试过程中，分别采用一次加菌法和连续接种法，选取多种菌株进行测试。
测试结果显示，当防腐剂浓度为0.5% 时，产品中的微生物生长得到了有效抑制。
因此，该生产商决定在生产该护肤品时，添加0.5% 的防腐剂。
四、化妆品防腐挑战测试对保障消费者健康的重要性化妆品防腐挑战测试有助于确保化妆品在保质期内不会发生微生物污染，从而保障消费者的健康和安全。
细菌防腐剂挑战性实验
细菌防腐剂挑战性实验摘要：对建立化妆品防腐体系的各种要素进行了分析，就国内外有代表性的微生物挑战试验的评价方法进行了比较，提出了符合实践情况并适用于我国化妆品行业的化妆品防腐体系的效能测试方法的评价标准，还为化妆品防腐体系筛选过程的快速判定提供了经验依据。
关键词：化妆品；防腐剂；防腐体系；微生物挑战试验大多数化妆品富含微生物生长所需的养分，环境中的微生物一俟进入，即可迅速繁殖，破坏产品的感官品质，损害消费者的健康。
因此，一个良好的防腐体系，对于化妆品产品来说是必不可少的。
1 化妆品的防腐体系化妆品的防腐体系实际上是由若干种防腐剂（和助剂）按一定比例构建而成。
防腐体系的基本要素是防腐剂，但其效能大小又与其用量和使用对象的剂型（液态、粉状、乳状、膏霜状等）特性、组成（是否含碳水化合物、蛋白质、动植物抽提物等）、pH值、可能污染的微生物种类和数量等密切相关。
1.1化妆品防腐剂早期使用的防腐剂有：尼泊金脂类、苯甲醇、烷基二甲基苄基铵氯化物、对氯间二甲酚、苯氧基乙醇、布罗波尔（Bronopol，2-溴-2-硝基丙烷-1，3-丙二醇）、道维希尔200（Dowicil-200,六亚甲基四胺衍生物）、杰马-115(Germall-115，咪唑烷基脲)、脱氢醋酸、甲醛、山梨酸等。
这些防腐剂至今很多仍在使用。
近期推广商品化的化妆品防腐剂见表1。
至于复配而成的防腐剂商品更是数不胜数。
防腐剂对微生物的最低抑制浓度（cmc）是判断一种防腐剂效果的首先考虑的基本指标，MIC值越小，表明其效力越高。
表2是某些化妆品防腐剂对主要测试微生物的MIC。
表1一些化妆品防腐剂商品及化学成分商品名称化学成分Enxylk400 甲基二溴戊二腈和苯氧乙醇Biopure100 咪唑烷基脲Nipaguard DMDMH 二甲基二羟基乙内酰脲Nipaguard TCC N-（4-氯苯基-N-3，4-二氯苯基）脲Nipacide PX (PCMX) 对氯间二甲苯酚GERMALLⅡ双咪唑烷基脲GERMALL PLUS 双咪唑烷基脲和碘丙炔基氨基甲酸丁酯（IPBC）ALLANTOIN 乙醛双酰脲SUTTOCIDE A 羟甲基甘氨酸钠华科-98、凯松CG、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-2甲基-4-异JX-515、YN-H3 噻唑啉-3-酮GLYDANT 二甲基二羟基乙内酰脲GLYDANT PLUS DMDM和IPBCIRGASAN DP300（玉洁新DP-300）、 2，4，4’-三氯-2’-羟基二苯醚Oletron1.2化妆品的防腐体系的构建1.2.1防腐剂的复配一种万能的防腐剂是不存在的。
微生物挑战性实验方法
微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
防腐挑战性实验方法
防腐挑战性实验规程一、目的本方法及标准摘自欧盟标准BP2002 XVIC EFFICAIY OF ANTIMICROBIAL PRESERVATION,测定化妆品抵抗微生物的能力。
二、材料及工具1.待检样品600g（实际操作中常用300g以节约样品）；2.电子秤1台、不锈钢勺子、200ml烧杯、10ml试管、150ml三角烧瓶、酒精灯1盏、1ml移液枪（100～1000μL）、1ml移液枪枪尖、灭菌培养皿、0.85%灭菌生理盐水；3.适量普通营养琼脂培养基、虎红培养基；4.金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠艾希氏菌、黑曲霉、白色念珠霉菌的菌种各1支，其菌种传代次数<5代。
三、步骤1.标准悬液的配制1%硫酸9.9ml与1%氯化钡0.1ml，混合后配制成的悬液浓度为3×108cfu/ml，此悬液再做3倍稀释。
2.细菌菌悬液的配制将已培养好的活性菌种，用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀。
用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释，浊度和标准悬液的浊度（3×108cfu/ml）相同为止；此时的稀释菌液再做3倍稀释，即为所需的1×108cfu/ml的菌悬液，做细菌总数确定细菌数。
3.霉菌菌悬液的配制将已培养好的活性菌种，用灭菌的生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀；用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作依次的10倍稀释，每次的稀释用血球计数板计数，必须5个中格的霉菌总数在190～210，落在此范围内的菌悬液为我们所需的1×108cfu/ml的霉菌菌悬液，做霉菌总数确定霉菌数。
4.分别称取待测样品100g，倒入5个烧杯中，分别标记大、金、绿、黑、白及日期。
5.分别在5个烧杯中，对应加入1ml浓度为1×107～1×108cfu/ml的细菌菌悬液及霉菌菌悬液，用干净的无菌勺子搅拌均匀后盖上保鲜膜，细菌在32.5±2.5℃的培养箱中培养，霉菌在22.5±2.5℃的培养箱中培养。
金属防锈化学实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解金属生锈的原理和条件。
2. 探究不同防锈方法对金属防锈效果的影响。
3. 学习金属防锈实验的操作方法和注意事项。
二、实验原理金属生锈是金属与氧气和水发生化学反应的结果。
在潮湿的环境中，金属表面形成一层氧化层，即铁锈。
铁锈松散、多孔，容易吸收水分和氧气，加速金属的腐蚀。
本实验通过控制实验条件，探究不同防锈方法对金属防锈效果的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 铁片- 铝片- 锌片- 硫酸铜溶液- 氢氧化钠溶液- 铅笔- 烧杯- 滴管- 酒精灯- 铁架台- 研钵- 研杵2. 实验仪器：- 电子天平- 秒表- 温度计- 显微镜四、实验步骤1. 将铁片、铝片、锌片分别用铅笔标注编号，放入烧杯中。
2. 向烧杯中加入适量的硫酸铜溶液，使金属片浸没在溶液中。
3. 将烧杯放入铁架台上，用酒精灯加热烧杯，使溶液沸腾。
4. 用滴管向溶液中滴加氢氧化钠溶液，观察金属片的反应。
5. 记录金属片在溶液中的变化情况，如颜色、形状、是否有气泡产生等。
6. 分别用不同方法对金属片进行防锈处理：- 涂抹防锈油- 涂刷防锈漆- 镀锌7. 将处理后的金属片放入烧杯中，重复步骤2-5，观察金属片的防锈效果。
8. 对比不同防锈方法的防锈效果，分析原因。
五、实验结果与分析1. 铁片在硫酸铜溶液中加热时，表面逐渐出现蓝色沉淀，说明铁与硫酸铜发生反应。
2. 滴加氢氧化钠溶液后，金属片表面产生气泡，溶液颜色变深，说明金属与氢氧化钠发生反应。
3. 涂抹防锈油和涂刷防锈漆的金属片在溶液中防锈效果较好，表面无明显变化。
4. 镀锌的金属片在溶液中防锈效果最好，表面无明显变化，说明镀锌层能有效防止金属腐蚀。
1. 金属生锈是金属与氧气和水发生化学反应的结果。
2. 防锈油、防锈漆和镀锌等方法能有效防止金属腐蚀。
3. 镀锌是金属防锈的最佳方法。
七、实验注意事项1. 实验过程中注意安全，防止烫伤和腐蚀。
2. 实验操作要规范，避免污染环境。
化妆品防腐性能挑战性试验及评价标准
化妆品防腐性能挑战性试验及评价标准化妆品防腐挑战性试验及评价标准投产前对产品防腐体系的可靠性做效能测试是十分必要的，目前，国内外配方设计时普遍采用防腐挑战性试验评价防腐剂的有效性。
防腐挑战性试验更接近实际应用，该方法能够模拟化妆品生产和使用过程中受到高强度的微生物污染的潜在可能性和自然界中微生物生长的最适宜条件，从而避免由微生物污染造成的损失和为消费者健康提供可靠的保证。
1.CTFA推荐的一次加菌防腐挑战性试验及评价标准CTFA的方法初始的霉菌和细菌的接种量分别为10000cfu/g(ml)和1000000cfu/g(ml)(CFU为菌落单位)，要求在第7天时霉菌降低90%，细菌降低99.9%，并且在28天内菌数持续下降。
美国在CTFA评价方法的基础上提出更为严格的标准，即，若单菌接种的三个平行试验中任何一种微生物数量的平均值，在第七天时下降到100 cfu/g(ml)以下，28天全部为0，则视为效果优良通过挑战试验;若第七天时下降到1000 cfu/g(ml)以下，则视为勉强通过;若单菌接种的任何一种微生物，任何一个平行样达不到上述标准，也达不到CTFA的要求，防腐体系则评定为无效。
2.国内参照CTFA加菌防腐挑战性试验及评价标准初始接种细菌量1000000 cfu/g(mL)(1)第28天时，样品中含细菌或霉菌,1000cfu/g(mL)该样品不能通过微生物攻击的挑战试验，表明样品的防腐体系不能有效地志到抑制微生物的作用，产品在生产、贮藏和使用中很容易受到微生物的污染。
(2)第28天时，样品中含细菌或霉菌在100 cfu/g-1000 cfu/g(mL)，该样品有条件地通过挑战试验，即当产品中蛋白质或其他动植物材料成分不是特别高，同时生产的卫生环境符合要求，包装物不易发生二次污染时，该防霉体系可以使用，否则不能。
(3)第28天时，样品中含细菌或霉菌在10 cfu/g-100 cfu/g(mL)，表明该样品的防腐体系对微生物有较强的抑杀效果，通过挑战试验，产品在生产、贮藏和使用时不容易受到微生物污染。
防腐挑战测试 标准(一)
防腐挑战测试标准(一)防腐挑战测试是指在特定环境条件下对涂层的耐腐蚀性能进行测试。
这种测试可以帮助生产商评估并改进涂层的性能。
以下是防腐挑战测试的标准。
ASTM B117-16ASTM B117-16标准是一项针对盐雾腐蚀的测试。
该测试要求将待测试试样放入含有5%盐度的盐水中，在特定的环境条件下进行测试，测试时要记录样品在盐雾环境中的腐蚀情况。
该标准可以帮助企业确定涂层能否经受住在盐雾环境下的使用。
ISO 9227ISO 9227是一项针对雾露腐蚀的测试。
这项测试要求在特定的温度和湿度条件下，将试样放置在压水式雾露设施中，然后观测样品的腐蚀情况。
该标准可以帮助企业确定涂层能否经受住在潮湿或有雾露的环境下的使用。
ASTM D4585-16ASTM D4585-16是一项针对氙灯老化的测试。
该测试要求将待测试试样放入氙灯光源下进行测试，测试时间取决于试样材料和预测的使用条件。
该标准可以帮助企业确定涂层在室外光照环境下的耐久性。
ASTM G85-11ASTM G85-11是一项针对盐雾、酸雾和湿热环境的测试。
该测试要求将待测试试样放入盐雾、酸雾或湿热环境中，根据试样材料、使用条件和预期寿命等别进行不同时间的测试。
该标准可以帮助企业确定涂层能否经受住在恶劣环境下的使用。
结论通过使用这些防腐挑战测试标准，企业可以确定其涂层的性能，以便改进涂层的配方和应用。
这些测试标准可以确保产品在使用寿命内能够表现出所需的耐腐蚀性能。
其他防腐挑战测试标准除了以上提到的标准，还有一些其他的防腐挑战测试标准可以用于评估涂层的性能，如：•ASTM D2247-15，是一项针对热循环腐蚀的测试，要求将试样在高温和低温之间循环进行测试。
•ASTM D4329-13，是一项针对紫外线老化的测试，要求将试样暴露在紫外线光源下进行测试。
•ISO 20340-2017，是一项针对海水腐蚀的测试，要求将试样放置在海水环境中进行测试。
这些标准都是在特定的条件下对涂层的耐腐蚀性能进行测试，可以帮助企业了解涂层在不同环境中的表现。
钢铁防腐实验报告
钢铁防腐实验报告钢铁防腐实验报告引言：钢铁是一种常见而重要的材料，广泛应用于建筑、制造业和交通运输等领域。
然而，由于其易受腐蚀的特性，钢铁在使用过程中需要进行防腐处理，以延长其使用寿命。
本实验旨在探究不同防腐方法对钢铁腐蚀的效果。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 钢铁试样：使用相同尺寸和材质的钢铁板作为实验样本。
- 防腐涂料：选择市场上常见的几种防腐涂料，如环氧树脂涂料、聚氨酯涂料和聚合物涂料。
- 盐水溶液：制备一定浓度的盐水溶液，模拟海洋环境中的腐蚀情况。
2. 实验方法：- 准备试样：将钢铁板切割成相同尺寸的试样，确保表面光洁。
- 涂覆防腐涂料：将不同种类的防腐涂料均匀涂覆在试样表面，待干燥。
- 腐蚀实验：将涂有不同防腐涂料的试样分别浸泡在盐水溶液中，置于恒温恒湿条件下进行腐蚀实验。
- 观察与记录：定期观察试样表面的腐蚀情况，并记录下相应的观察结果。
实验结果与分析：经过一段时间的腐蚀实验，观察和记录了不同防腐涂料下试样表面的腐蚀情况。
以下是实验结果的总结与分析：1. 环氧树脂涂料：- 腐蚀情况：经过一段时间的腐蚀实验，环氧树脂涂料表现出良好的防腐性能，试样表面未出现明显的腐蚀现象。
- 分析：环氧树脂涂料具有较高的耐腐蚀性能，能有效隔绝钢铁与外界环境的接触，从而延长钢铁的使用寿命。
2. 聚氨酯涂料：- 腐蚀情况：聚氨酯涂料下的试样表面出现了一些细小的腐蚀点，但整体腐蚀程度较轻。
- 分析：聚氨酯涂料具有较好的耐腐蚀性能，但相对于环氧树脂涂料而言，其防腐效果稍逊一筹。
3. 聚合物涂料：- 腐蚀情况：聚合物涂料下的试样表面出现了较大面积的腐蚀现象，试样表面出现锈蚀。
- 分析：聚合物涂料的防腐性能较差，可能是由于其涂层密度不够，无法有效隔绝钢铁与外界环境的接触。
结论：通过本次实验，我们对比了不同防腐涂料对钢铁腐蚀的效果。
实验结果表明，环氧树脂涂料具有较高的耐腐蚀性能，能有效延长钢铁的使用寿命。
聚氨酯涂料在防腐方面也表现出良好的效果，但相对于环氧树脂涂料而言稍逊一筹。
iso11930 防腐挑战试验方法
（原创实用版5篇）编制人员:_______________审核人员:_______________审批人员:_______________编制单位:_______________编制时间:____年___月___日序言下面是本店铺为大家精心编写的5篇《iso11930 防腐挑战试验方法》，供大家借鉴与参考。
下载后，可根据实际需要进行调整和使用，希望能够帮助到大家，谢射!（5篇）《iso11930 防腐挑战试验方法》篇1ISO 11930是关于防腐挑战试验的标准，该标准规定了评估在腐蚀性介质中材料耐久性的方法。
ISO 11930提供了一种系统的方法，用于确定材料在各种腐蚀性环境中的耐久性，包括均匀腐蚀、局部腐蚀和其他类型的腐蚀。
ISO 11930包含以下主要部分：1. 第一部分：概述和试验原理2. 第二部分：试验方法3. 第三部分：结果评价ISO 11930标准已被许多国家所接受，并被许多国际组织所引用。
在中国，该标准由国家质量监督检验检疫总局于2004年5月17日发布，并于2004年12月1日开始实行。
《iso11930 防腐挑战试验方法》篇2ISO 11930是关于防腐挑战试验的标准，该标准规定了评估在腐蚀性环境中使用的防护等级和涂层在预期使用条件下防腐性能的标准试验方法。
ISO 11930通过模拟实际使用条件，如高温、低温、湿热、干湿交替等，来评估产品的防腐性能。
这些条件可以模拟海洋、河流、湖泊和河流等水环境中常见的腐蚀性条件。
在进行ISO 11930试验时，需要将样品暴露于这些条件下，然后观察其表面和内部的腐蚀情况。
根据观察结果，可以评估产品的防腐性能，并确定其是否符合标准。
《iso11930 防腐挑战试验方法》篇3ISO 11930是关于防腐挑战试验的国际标准，该标准由国际标准化组织于1999年发布。
该标准规定了用于评估材料在特定环境条件下耐腐蚀性能的试验方法。
ISO 11930提出了以下步骤来进行防腐挑战试验：1. 准备试样：选择适当的材料（如不锈钢、铝、铜等）制成试样。
几种防腐挑战常用方法的异同
几种防腐挑战常用方法的异同一、分享主题防腐挑战方法对比二、目的介绍几种防腐挑战常用方法的异同三、具体内容目前，国际上有多种防腐挑战的测试方法可供参考，但其在所使用的微生物种类、培养条件、接种方式和评价标准不完全相同。
下面比较了CTFA（美国化妆品、盥洗用品和香料协会）、USP法（美国药典）、EP(欧洲药典）、ISO11930、广东省日化商会团体标准5种方法的异同。
1、测试微生物5种不同防腐挑战测试方法所用的测试微生物见表1。
表15种不同防腐挑战测试方法所用的测试微生物从表1中可知，USP、EP、ISO11930、广东省日化商会团体标准中对于防腐挑战测试的微生物种属是相同的，只是在具体的菌种代码有所区别。
CTFA在选取挑战用菌时的余地最大，每一类型的微生物至少需要选择一种，还可以根据实验需求选择性地添加枯草芽孢杆菌和环境中分离的微生物作为测试微生物。
欧洲药典也可以选择性地增加可能污染产品的其他微生物进行测试。
2、菌种的传代次数为防止菌种因传代次数过多后转化为敏感性菌株，各方法对菌种的传代次数均有限定，USP、广东省日化商会团体标准规定不超过5代，ISO11930则不超过3代，EP是代数越少越好。
3、接种量各方法的微生物接种量均≤1%4、菌液终浓度CTFA、广东省日化商会团体标准中规定细菌菌液在样品中的最终浓度为106CFU/g(mL)，真菌菌液的最终浓度为105CFU/g(mL)，USP、EP中细菌和真菌的菌液终浓度均为105-106CFU/g(mL)，ISO11930则规定细菌菌液的终浓度为105-106CFU/g(mL)，真菌菌液的终浓度为104-105CFU/g(mL)。
5、取样时间不同方法的取样时间间隔不一样，其中CTFA的取样间隔最密，为0、7、14、21、28天；欧洲药典没有规定具体的取样时间点；USP为0、7、14、28天；ISO11930为7、14、28天；广东省日化商会团体标准则为7、14、21、28天。
防腐实验报告
2011—2012学年第一学期实验（实习）报告课程名称：飞机结构防腐授课班级：090146F授课教师：谭娜姓名：桑磊学号：090146619实验一超声波检测法一、实验目的1、了解超声波检测法的基本原理、优点和应用局限性。
2、熟悉超声波检测设备的基本使用方法；熟悉使用垂直探头和斜探头探测试件内部缺陷的操作过程。
二、实验仪器设备（只需写明实验设备的重要组成部分，无需写具体型号）数字式超声波探伤仪、被测试块和耦合剂三、实验原理超声波工作的原理：主要是基于超声波在试件中的传播特性。
a 、声源产生超声波，采用一定的方式使超声波进入试件；b、超声波在试件中传播并与试件材料以及其中的缺陷相互作用，使其传播方向或特征被改变；c 、改变后的超声波通过检测设备被接收，并可对其进行处理和分析；d 、根据接收的超声波的特征，评估试件本身及其内部是否存在缺陷及缺陷的特性。
四、实验步骤1、探头连接：将直探头、斜探头或其它类型探头与超声波探伤仪相连接。
2、超声波探伤仪基本参数的设定：根据探伤构件的材料、外形尺寸及选用的探头类型，调节、设定超声波探伤仪的声速、声程等检测参数。
3、仪器校准：利用标准校准试块，校准仪器，设定仪器零点。
4、涂耦合剂：在探伤区域内涂抹耦合剂。
5、进行探伤操作五、实验结果描述1、在纵波检测法中：工件无缺陷时，只显示始波和底波，当工件有缺陷时，在始波和底波之间出现一个伤波，当缺陷横截面积很大时，将无底波，声束被缺陷全反射。
2、在横波检测法中：横波检测可以弥补纵波检测的不足之处，近表面检测能力高。
因为横波穿透能力差，所以检测一般无底部回波，在缺陷的地方只有一个伤波出现，。
六、回答思考题1、简述超声波检测法的特点及适用性。
答：超声波检测法的特点：（1）优点：a、穿透能力强，可对较大厚度范围内的试件内部缺陷进行检测。
如对金属材料，可检测厚度为1~2mm的薄壁管材和板材，也可检测几米长的钢锻件；b、对面积型缺陷的检出率较高；c、灵敏度高，可检测试件内部尺寸很小的缺陷；d、检测成本低、速度快，设备轻便，对人体及环境无害，现场使用较方便，可进行现场检测。
(完整版)防腐挑战实验
第一部分防腐挑战实验调研结果1 实验样品样本要求新鲜，没有被微生物污染，一般每个样本为300g。
2 微生物挑战性实验2.1实验菌株不同国家、组织、企业对挑战实验选择的测试菌种有一定差异（如表1），国内参照美国化妆品、香精和洗涤剂协会（CTFA）推荐的菌种（因其较具代表性，如表2所示），所以更为恰当。
（注意菌株来源问题：同属一个种的细菌来源不同，菌株不同，MIC值不同）表1 某些国家、组织、企业用于化妆品微生物挑战试验的测试菌株菌株美国(药典)美国(ISP公司)英国(药典)德国(Henkel公司)德国(S&M公司)白假丝酵母√√√√√黑曲霉√√√√√红色青霉√绿色木霉√绳状青霉√大肠埃希氏菌√√√√镉绿假单胞菌√√√√金黄色葡萄球菌√√√√√粪肠球菌√产气肠杆菌√表皮葡萄球菌√日勾维肠杆菌√洋葱假单胞菌√√肺炎克雷伯氏菌√恶臭假单胞菌√荧光假单胞菌√表2 CTFA化妆品微生物挑战试验的菌株选择种类菌株数量革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌至少选一种表皮葡萄球菌发酵革兰氏阴性杆菌肺炎克雷伯氏菌至少选两种阴沟肠杆菌大肠埃希氏菌变形菌属日勾维肠杆菌非发酵革兰氏阴性杆菌铜绿假单胞菌至少选一种洋葱假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌黄杆菌属不动杆菌属酵母白假丝酵母至少选一种近平滑假丝酵母霉菌黑曲霉至少选一种黄绿青霉产芽孢菌枯草芽孢杆菌供选用生产现场分离菌适当菌株一种以上2.2 培养基牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂培养基2.3 试验用菌液的配置（1）标准悬液的配制1%硫酸9.9ml与1%氯化钡0.1ml，混合后配制成的悬液浓度为3×108cfu/ml，此悬液再做3倍稀释。
（2）细菌菌悬液的配制实验前将菌株接种到各个培养基斜面上，36摄氏度恒温培养48小时。
将已培养好的活性菌种，用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀。
用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释，浊度和标准悬液的浊度（3×108cfu/ml）相同为止；此时的稀释菌液再做3倍稀释，即为所需的1×108cfu/ml的菌悬液，做细菌总数确定细菌数。
木材防腐处理实验报告(3篇)
一、实验目的本次实验旨在研究木材防腐处理方法对木材耐久性的影响，通过对比不同防腐剂对木材的防腐效果，为实际应用提供理论依据。
二、实验材料与设备1. 实验材料：樟木（直径50mm，长度100mm）、木炭粉、水、乙醇、氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜、苯酚、甲醛、醋酸、磷酸等。
2. 实验设备：恒温恒湿箱、电子天平、电热鼓风干燥箱、分析天平、玻璃棒、烧杯、移液管、容量瓶、试管、滴定管、pH计等。
三、实验方法1. 木材预处理：将樟木浸泡在水中，浸泡时间为24小时，去除木材表面的杂质。
2. 防腐剂配制：按照不同比例，分别配制氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜、苯酚、甲醛、醋酸、磷酸等防腐剂溶液。
3. 防腐处理：将樟木分别浸泡在上述防腐剂溶液中，浸泡时间为24小时。
4. 干燥：将浸泡后的樟木取出，放入电热鼓风干燥箱中，干燥温度为60℃，干燥时间为48小时。
5. 测试：分别测试干燥后樟木的含水率、抗弯强度、抗拉强度、抗冲击强度等性能。
四、实验结果与分析1. 含水率：实验结果显示，经过防腐处理的樟木含水率均低于未处理木材，其中氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜、苯酚等防腐剂对木材的含水率降低效果较好。
2. 抗弯强度：实验结果显示，经过防腐处理的樟木抗弯强度均高于未处理木材，其中氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜等防腐剂对木材抗弯强度提升效果较好。
3. 抗拉强度：实验结果显示，经过防腐处理的樟木抗拉强度均高于未处理木材，其中氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜等防腐剂对木材抗拉强度提升效果较好。
4. 抗冲击强度：实验结果显示，经过防腐处理的樟木抗冲击强度均高于未处理木材，其中氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜等防腐剂对木材抗冲击强度提升效果较好。
1. 防腐处理可以有效提高木材的耐久性，降低木材含水率，提升木材的抗弯、抗拉、抗冲击强度等性能。
2. 在本次实验中，氯化锌、氢氧化钠、硫酸铜等防腐剂对木材的防腐效果较好，可用于实际应用。
3. 实验结果表明，防腐处理方法对木材的耐久性有显著影响，为实际应用提供了理论依据。
电化学腐蚀与防腐措施实验
电化学腐蚀与防腐措施实验电化学腐蚀对于许多材料来说是一个重要的问题，因为它可以导致设备和结构的破坏。
为了解决这个问题，人们采取了各种防腐措施。
本实验旨在探究电化学腐蚀的原理，并验证不同防腐措施的有效性。
实验一：阳极和阴极的腐蚀在这个实验中，我们将使用两个电极：一个作为阳极，一个作为阴极。
我们还将使用一种称为NaCl的电导液体来模拟腐蚀环境。
实验材料：- 金属片（可以选择铜、铁或铝）- NaCl溶液- 电导仪- 电源实验步骤：1. 准备金属片，并优先清洁表面以确保无杂质。
2. 将一个金属片置于NaCl溶液中，作为阳极。
3. 将另一个金属片也置于NaCl溶液中，作为阴极。
4. 将电导仪的阳极引线连接到阳极金属片上，阴极引线连接到阴极金属片上。
5. 打开电源，并逐渐增加电压，记录下电流的变化。
6. 观察金属片表面是否出现腐蚀痕迹，并记录下来。
实验结果：实验结果显示，阳极的金属片的电流逐渐增加，而阴极的金属片的电流变化较小。
此外，阳极金属片的表面出现了明显的腐蚀痕迹，而阴极金属片的表面基本上没有受到损坏。
实验二：防腐措施的有效性比较在这个实验中，我们将比较不同的防腐措施对于减缓金属腐蚀的效果。
我们选择了三种常见的防腐措施进行比较：喷涂防锈漆、热镀锌和电镀。
实验材料：- 金属片（同实验一）- NaCl溶液- 喷涂防锈漆- 热镀锌液- 电镀液- 电导仪- 电源实验步骤：1. 准备金属片，并分别涂上喷涂防锈漆、热镀锌和电镀。
2. 将这些金属片置于NaCl溶液中，并进行相同的电流测试。
3. 观察每个金属片的腐蚀情况，并记录下来。
实验结果：实验结果显示，在相同的腐蚀环境下，喷涂防锈漆和电镀均有效地减缓了金属片的腐蚀速度，而热镀锌效果较差。
金属片上喷涂了防锈漆的部分几乎没有腐蚀痕迹，而电镀处理的金属片也只有轻微的腐蚀痕迹。
结论：通过这个实验，我们验证了电化学腐蚀对金属的破坏性，以及不同防腐措施的有效性。
喷涂防锈漆和电镀被证明是较为有效的防腐方法，可以延缓金属的腐蚀速度。
防腐材料实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本实验旨在研究不同防腐材料在高温、腐蚀性气体、酸雾等环境下的防腐性能，为实际工程中防腐材料的选择提供理论依据。
二、实验材料与设备1. 实验材料：- KNM22烟道防腐材料- 二氧化硫烟气烟囱防腐材料- 盐酸酸雾专用氯离子防腐材料- 氰凝防水防腐材料- 环氧树脂涂料- 有机硅改性涂料- 聚氨酯涂料- 防锈漆- 含氟涂料- 丙烯酸盐类防腐涂料- 防腐合金（如不锈钢、哈氏合金、钛合金）2. 实验设备：- 高温烤箱- 腐蚀性气体发生装置- 盐酸酸雾发生装置- 水下浸泡装置- 耐候性试验箱- 机械强度测试仪- 耐磨性测试仪三、实验方法1. 高温防腐性能测试：将不同防腐材料样品置于高温烤箱中，在1800℃下持续加热，观察材料表面变化及重量损失。
2. 腐蚀性气体防腐性能测试：将不同防腐材料样品置于腐蚀性气体发生装置中，模拟烟气中的二氧化硫等腐蚀性气体，观察材料表面变化及重量损失。
3. 盐酸酸雾防腐性能测试：将不同防腐材料样品置于盐酸酸雾发生装置中，模拟盐酸酸雾腐蚀，观察材料表面变化及重量损失。
4. 水下浸泡防腐性能测试：将不同防腐材料样品置于水下浸泡装置中，模拟长期浸泡在水中的腐蚀环境，观察材料表面变化及重量损失。
5. 耐候性测试：将不同防腐材料样品置于耐候性试验箱中，模拟户外环境，观察材料表面变化及重量损失。
6. 机械强度及耐磨性测试：使用机械强度测试仪和耐磨性测试仪，对不同防腐材料样品进行测试，评估其机械强度和耐磨性能。
四、实验结果与分析1. 高温防腐性能：KNM22烟道防腐材料、环氧树脂涂料、含氟涂料等材料在高温环境下表现出较好的防腐性能。
2. 腐蚀性气体防腐性能：二氧化硫烟气烟囱防腐材料、KNM22烟道防腐材料、防腐合金等材料在腐蚀性气体环境下表现出较好的防腐性能。
3. 盐酸酸雾防腐性能：盐酸酸雾专用氯离子防腐材料、氰凝防水防腐材料等材料在盐酸酸雾环境下表现出较好的防腐性能。
4. 水下浸泡防腐性能：氰凝防水防腐材料、环氧树脂涂料等材料在长期浸泡水中表现出较好的防腐性能。
微生物挑战性实验方法
1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108 个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
化妆品防腐挑战
1.2防腐剂的作用：
合理延长产品的保存期； 减少产品使用过程中的污染； 保障消费者的健康安全；
1 防腐剂的介绍
1.1 防腐剂种类： 《化妆品安全卫生技术规范》（2015版）第三章 化妆品准用组分 共51类
1 防腐剂的介绍
有机酸类 酯类
酚类
防腐剂 种类
<1
>5.61
符合标准I
3 防腐挑战实验及其评价
3.6.2 举例
RX =lgNO-lgNX
log值 RX
大肠在样品中的 初始浓度（N0） 4.1×106 CFU/mL
6.61
第7天大肠菌落数 （NX）
2.8×103 CFU/mL
3.45
3.16
第14天大肠菌落数 （NX）
3.3×103 CFU/mL
3.6.1 举例
RX =lgNO-lgNX
log值 RX
大肠在样品中的 初始浓度（N0） 4.1×106 CFU/mL
6.61
第7天大肠菌落数 （NX）
2.8×103 CFU/mL
3.45
3.16
第14天大肠菌落数 （NX）
1.2×102 CFU/mL
2.08
4.53
第28天大肠菌落数 （NX） <10
混合菌
单一菌
工作量较小，模拟自然界中微生物混生杂 居的特点，更符合污染时的实际情况
3 防腐挑战实验及其评价
白色假丝酵母 ATCC10231
金黄色葡萄球菌ATCC6ห้องสมุดไป่ตู้38
巴西曲霉 ATCC16404
PS：
菌株
菌株代数均不超过5代
可以使用加入世界菌种保藏联合会的菌种保藏机构
大葱防腐实验作文
大葱防腐实验作文篇一大葱防腐实验嘿，你听说过大葱防腐实验吗？也许你觉得这事儿挺奇怪，不就是根大葱嘛，能有啥好实验的。
可我觉得吧，这事儿还真挺有意思的！有一天，我突发奇想，要是能让大葱保存得更久，那不是很棒吗？说不定还能发现什么神奇的秘诀呢！于是，我就风风火火地开始了我的大葱防腐实验。
我先把一堆大葱分成了好几组。
第一组，我啥也没做，就把它们扔在那，看看正常情况下能撑多久。
第二组呢，我给它们裹上了保鲜膜，心里想着：“这样是不是就能把细菌啥的挡在外面啦？”第三组，我居然脑洞大开，给它们喷上了我自制的“神秘药水”（其实就是加了点醋和盐的水），想着说不定能有奇效。
实验刚开始的时候，我那叫一个信心满满，觉得自己肯定能搞出个大发现。
可没过几天，第一组的大葱就开始有点蔫儿了，叶子都发黄啦。
我心里那个急呀，“哎呀，不会我的实验就这样失败了吧？” 再看看第二组，情况稍微好点，但也没好到哪去。
等到看第三组的时候，我简直不敢相信自己的眼睛，它们居然也开始有变坏的迹象！我就纳了闷了，这是咋回事呢？难道我的想法全错啦？也许是我太天真了，以为随便搞搞就能成功。
但这一路的实验，真的让我学到了好多。
我觉得吧，科学实验还真不是那么容易的事儿，可能需要更多的知识和耐心。
不过，我可不会就这样放弃，说不定下一次我就能成功呢！你觉得呢？篇二大葱防腐实验哎呀妈呀，说起这个大葱防腐实验，可真是让我又爱又恨呐！一开始，我那叫一个雄心勃勃，想着自己要成为大葱防腐界的“大神”！我准备得那叫一个齐全，什么量杯、试剂瓶，还有各种杂七杂八的东西，堆满了我的小桌子。
我把大葱像宝贝似的摆弄来摆弄去，一会儿试试这个方法，一会儿试试那个方法。
我想着，要是能让大葱放上几个月都不坏，那我可就牛了！可是，现实总是残酷的。
我以为把大葱放在低温环境里就能防腐，结果呢？它们还是很快就变得软塌塌的。
我就奇怪了，难道温度不够低？还是说大葱根本就不“吃”这一套？还有一次，我听人说在大葱上涂一层食用油能防腐。
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第一部分防腐挑战实验调研结果
1 实验样品
样本要求新鲜，没有被微生物污染，一般每个样本为300g。
2 微生物挑战性实验
2.1实验菌株
不同国家、组织、企业对挑战实验选择的测试菌种有一定差异（如表1），国内参照美国化妆品、香精和洗涤剂协会（CTFA）推荐的菌种（因其较具代表性，如表2所示），所以更为恰当。
（注意菌株来源问题：同属一个种的细菌来源不同，菌株不同，MIC值不同）表1 某些国家、组织、企业用于化妆品微生物挑战试验的测试菌株
菌株
美国
(药典)
美国
(ISP公司)
英国
(药典)
德国
(Henkel公司)
德国
(S&M公司)
白假丝酵母√√√√√黑曲霉√√√√√红色青霉√
绿色木霉√
绳状青霉√大肠埃希氏菌√√√√镉绿假单胞菌√√√√金黄色葡萄球菌√√√√√粪肠球菌√
产气肠杆菌√
表皮葡萄球菌√日勾维肠杆菌√洋葱假单胞菌√√
肺炎克雷伯氏菌√恶臭假单胞菌√荧光假单胞菌√
表2 CTFA化妆品微生物挑战试验的菌株选择
种类菌株数量
革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌
至少选一种表皮葡萄球菌
发酵革兰氏阴性杆菌肺炎克雷伯氏菌
至少选两种阴沟肠杆菌
大肠埃希氏菌
变形菌属
日勾维肠杆菌
非发酵革兰氏阴性杆菌铜绿假单胞菌
至少选一种洋葱假单胞菌
荧光假单胞菌
恶臭假单胞菌
黄杆菌属
不动杆菌属
酵母
白假丝酵母
至少选一种近平滑假丝酵母
霉菌
黑曲霉
至少选一种黄绿青霉
产芽孢菌枯草芽孢杆菌供选用生产现场分离菌适当菌株一种以上
2.2 培养基
牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂培养基
2.3 试验用菌液的配置
（1）标准悬液的配制
1%硫酸9.9ml与1%氯化钡0.1ml，混合后配制成的悬液浓度为3×108cfu/ml，此悬液再做3倍稀释。
（2）细菌菌悬液的配制
实验前将菌株接种到各个培养基斜面上，36摄氏度恒温培养48小时。
将已培养好的活性菌种，用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀。
用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释，浊度和标准悬液的浊度（3×108cfu/ml）相同为止；
此时的稀释菌液再做3倍稀释，即为所需的1×108cfu/ml的菌悬液，做细菌总数确定细菌数。
（3）霉菌菌悬液的配制
将已培养好的活性菌种，用灭菌的生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀；用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作依次的10倍稀释，每次的稀释用血球计数板计数，必须5个中格的霉菌总数在190～210，落在此范围内的菌悬液为我们所需的1×108cfu/ml的霉菌菌悬液，做霉菌总数确定霉菌数。
2.4 接种
2.4.1接种方式
（1）单菌接种：每种测试菌株单独做一个挑战试验。
这种方法的优点是容易了解每种微生物对防腐体系的敏感性，在筛选产品的防腐体系时有较好的参考价值，但工作量大、费时、费工，和产品的实际污染菌情况也有差距（因来自自然界的微生物常常不是单一的种类）。
（2）混合菌接种：西欧、德国等的许多国家和企业多采用这种方式，除了
因工作量相对较小外，这种接种方法更能代表污染的状况。
2.4.2接种次数和时间
（1）一次接种：只是在试验开始时接种一次，整个试验周期28天。
（一次加菌的28天微生物挑战实验）
（2）多次接种：在试验开始接种一次后（重复加菌的微生物挑战实验）a法：第21天再接种一次，试验周期为28天。
（有实验表明，第21天接菌和不接菌时，第28天时的微生物含量并无显著的差别，评定结果也相同）b法：每隔两周接种一下，连续三次（即第1、3、5周接菌，每两周接菌前分离一次），试验周期为49天；
c法：每周接种一次，连续5次，试验周期为35天。
（S&M公司的资料介绍，采用此种方法评价认可的防腐体系，可保证产品30个月内的防腐安全）
2.4.3操作方法
称取待测样品30g，对应加入0.3ml浓度为1×107～1×108cfu/ml的细菌悬液及霉菌悬液，用干净的无菌勺子搅拌均匀后盖上保鲜膜，细菌在32.5±2.5℃的培养箱中培养，霉菌在22.5±2.5℃的培养箱中培养。
a.水溶性样品
10g加入90ml无菌生理盐水，稀释后取1ml样品液，加入9ml灭菌生理盐水中，做依次稀释，分别为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7等稀释度；取三个合适稀释度的样液，分别吸取1ml样液加入已灭菌的平皿中，做菌落计数，并做两个平行。
b.油溶性样品
取10g样品，加入10ml无菌吐温-80和10ml无菌白矿油，再加70ml无菌生理盐水，用无菌玻棒充分混匀；
吸取1ml已稀释的样品液，加入9ml灭菌生理盐水中，做依次稀释，分别为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7等稀释度；取三个合适稀释度的样液，分别吸取1ml加入已灭菌的平皿中，做菌落计数，并做两个平行。
2.5培养
细菌放在32.5±2.5℃的培养箱中培养；
霉菌在22.5±2.5℃的培养箱中培养；
混合菌在28℃的培养箱中培养。
2.6菌落计数
分别在0、7、14、21、28天分离计算样品中活的细菌、霉菌；每次计算完细菌总数、霉菌总数后将平皿放回培养箱，以待下次观察用，观察中切勿打开平皿，以免燃菌而使下次无法观察。
菌落计数的标准方法：
①先选取平均菌落数在30～300之间的平皿作为细菌菌落总数测定范围，选取平均菌落数在5～50之间的平皿作为霉菌菌落总数测定范围；
②有两个稀释度在30～300之间，求比值。
若比值≤2，报告平均数；若比值>2，以其中较小的稀释度计算细菌总数；
③所有稀释度都大于300，以稀释度最高的平均菌落数计算；
④所有稀释度都小于30，以稀释度最低的平均菌落数计算；
⑤所有稀释度均在30～300之外，其中一个大于300，而相邻的加一稀释度小于30，则以最接近30或300的平均菌落数计算；
⑥若平皿中有连成片状或花点样菌落蔓延生长时，不宜计算；
⑦若片状菌落不到平皿中的一半，而另一半中菌落均匀，则可将此平皿菌落计数后×2，以报告全皿菌落数。
2.7评价标准
2.7.1 CTFA推荐的一次加菌防腐挑战性试验及评价标准
CTFA的方法初始的霉菌和细菌的接种量分别为10000cfu/g（ml）和1000000cfu/g（ml）（CFU为菌落单位），要求在第7天时霉菌降低90%，细菌降低99.9%，并且在28天内菌数持续下降。
2.7.2 美国评价标准
在CTFA评价方法的基础上提出的标准，如表3所示。
表3 美国所用一次加菌的微生物防腐挑战实验评价标准
2.7.3国内评价标准
国内参照CTFA加菌防腐挑战性评价标准。
表4 国内所用微生物防腐挑战实验评价标准
第二部分实验室可采取的方案
1 实验样品
2 微生物挑战性实验
2.1实验菌株
金黄葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母、枯草芽孢杆菌
2.2 培养基
牛肉膏蛋白胨培养基
2.3 试验用菌液的配置
实验前，将各菌株接种于合适的培养基中，于37℃（细菌）和28℃（霉菌）培养箱中培养。
细菌培养2天，霉菌培养5天后，挑选典型的菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌（10^8CFU/ml）和霉菌悬液（10^6CFU/ml），置于4℃冰箱储藏备用。
2.4一次加菌的28天微生物挑战实验
量取样品30ml分别加0.3ml混合菌悬液，使得细菌浓度为10^6~10^7CFU/ml，霉菌浓度为10^4~10^5CFU/ml，充分混匀。
将样品在28摄氏度下保存，在接菌0、7、14、21、28d取样品分析含菌量（培养计数法）。
2.6评价标准
附：实验中所需的仪器和药品。