氨基葡萄糖的检测方法汇总

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氨基葡萄糖的检测
葡萄糖的一个羟基被一个氨基取代的化合物。

分子式C6H13O5N,俗称氨基糖,简称氨糖。

又名葡萄糖胺,广泛存在于自然界;市面上氨糖主要分为盐酸氨糖与硫酸氨糖两种。

目前,氨糖的分析方法主要有分光光度法、HPLC和HPIC等,最常用的分析方法为高效液相色谱法,近年来离子色谱技术在糖类化合物分析中的应用也越来越广泛。

分光光度法
(《中国药典》2010 年版二部附录IVA)测定。

1 对照品溶液的制备:精密称取经105干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖对照品适量,加水溶解制成每1ml约含25μ 的溶液作为对照品溶液。

2 供试品溶液的制备:精密称取样品约25mg,置100ml 量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,摇匀。

精密量取10ml,置100ml 量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,既得。

3 测定法:分别取对照品溶液及供试品溶液各 5ml 分别置具塞试管中,另取具塞试管蒸馏水5ml作为空白,各加乙酰丙酮试液(取乙酰丙酮2ml,加
0.5mol/L 碳酸钠溶液至50ml,临用前配置成1.0ml,摇匀,置沸水浴中(1分钟后密塞),准确加热25 分钟,取出,用冰水迅速冷却后,加无醛乙醇3.0ml,60水浴中保温10 分钟后,再加对二甲氨基苯甲醛试液(对二甲氨基苯甲醛0.8g,加无醛乙醇15ml 及盐酸15ml,摇匀)1.0ml,强力振摇,并继续在 60水浴中保温1 小时,立即用冷水冷却至室温。

参照分光光度法(《中国药典》2010 年版二部附录IVA)在525nm 波长处分别测定吸光度,计算,既得。

HPLC-ELSD法(高效液相色谱法)
依据:GB/T20365-2006
1、主要使用仪器
高效液相色谱仪, ELSD蒸发光散射检测器,色谱柱
2、标准溶液的配制
准确称取硫酸软骨素和氨基葡萄糖标准品各约0.1g。

分别加1mL乙腈,超声1min后,加纯水定容至10mL。

吸取上述硫酸软骨素和氨基葡萄糖标准溶液各
0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mL ,分别合并于5个10mL 容量瓶中,并加入1:9的乙腈溶液定容,配制成0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mg/mL 的混标溶液。

3、样品处理
准确称取样品约0.5g 与50mL 容量瓶中,加入5mL 乙腈,超声分散1min 。

加纯水定容至50mL ,摇匀,超声15min ×2,静置,取上清液5mL ,加入1:9乙腈溶液定容至25mL ,摇匀,待用。

4、样品测定:取10uL 标准溶液及样品提取液,注入高效液相色谱仪,以保留时间定性,吸收峰高或峰面积与标准比较定量。

5、计算结果
X = 式中:
X —样品中硫酸软骨素或氨基葡萄糖的含量,g/100g
h —样品对应峰高取对数
hs —标准对应峰高取对数
ρ—标准对应浓度取对数,mg/mL
m —样品质量,g
HPIC-PAD 法(离子色谱法)
主要仪器:
离子色谱仪(Dionex ):电化学检测器,Au 工作电极,Ti 对电极,pH/ Ag/ AgCl 复合参比电极,糖类分析柱。

h/hs ×ρ × 75 m
硫酸氨基葡萄糖和盐酸氨基葡萄糖的区别
1.硫酸氨基葡萄糖和盐酸氨基葡萄糖它们作用是相似的,主要成份
是氨基葡萄糖,它能刺激软骨细胞产生有正常多聚体结构的蛋白多糖,抑制损伤软骨的酶如胶原酶和磷脂酶A2,并可防止损伤细胞的超氧化自由基的产生,从而可延缓骨性关节炎的病理过程和疾病的进展,改善关节活动,缓解疼痛。

2.基础研究显示:盐酸根形式氨基葡萄糖的浓度高于硫酸.相对的
生物可利用度较高;盐酸氨基葡萄糖形式每有效剂量中含盐量低于硫酸根形式,其原因是硫酸氨基葡萄糖需要氯化钠作为稳定剂,含盐量可高达30%,这不利于需要减少饮食中钠盐摄入的骨关节炎患者;氨基葡萄糖对骨关节炎的治疗作用主要与已与载体分解了的、可吸收的氨基葡萄糖剂量有关,而与酸根载体处于结合状态的氨基葡萄糖不能被吸收,无法被生物利用。

因此,无论何种形式的氨基葡萄糖,只要能在体内与载体分解,并能被机体吸收,其生物学作用应是相似的。

3.同时,任何种类的氨基葡萄糖由于所结合的酸根载体不同,其氨
基葡萄糖的结合率各不相同,盐酸氨基葡萄糖中含氨基葡萄糖83%。

硫酸氨基葡萄糖中含65%,任何临床研究无论采用何种氨基葡萄糖都必须以所含的纯氨基葡萄糖为剂量标准。

综合临床研究报道,大多数研究结果提示持续应用1500mg氨基葡萄糖8周以上才能显示一定的疗效,而以使用1年以上疗效更为稳定。

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