实验一 普通光学显微镜的使用ppt

3．做实验前，要认真检查所用仪器药品等是否完好、齐全， 如有缺损应及时向任课教师报告，自己不得随意调换标本、 仪器等。
4．实验时要遵守纪律，听从教师指导，保持肃静。有问题
举手提问，严禁在实验室谈笑喧哗、随意走动和进行与实
验无关的活动。
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5．实验时要严格按操作规程进行，操作要正规，观察、记 录要认真，自觉养成一丝不苟的科学作风。
• ③_加___大__镜__口__角______来提高分辨力。
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（2）放大率 • 显微镜的放大率（V）等于物镜放大率（V1）
和目镜放大率（V2）的乘积，即： V=V1×V2
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3、显微镜的使用步骤
安放
对光
放片
调焦
观察
对光：以视野明亮均匀为宜。 调焦：先在低倍镜下，以粗准焦螺旋调，再以细准焦螺旋调。看清楚物象后再
• 紫外线作光源的显微镜和电子显微镜就是利用短 光波来提高分辨力以检视较小的物体的。
• 物镜分辨力的高低与造象是否清楚有密切的关系。 目镜没有这种性能。目镜只放大物镜所造的象。
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练习 • R值愈___小____，分辨力愈高，物象愈清楚。 • 可通过：
• ①_减___低__波__长__；
• ②__增__大__折__射___率____；
（3）胞间连丝 （4）草履虫（显示大、小核）
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实验室规则和注意事项
1．每次实验前，必须认真预习实习指导，明确本次实验 的 目的、要求和注意事项，熟悉实验内容、方法和步骤。对 于比较复杂的实验还应写出简要的实验操作程序
2．上实验课时必须携带讲义、实验指导、实验报告及绘图 文具等。进入实验室要穿好白大衣，按规定座位入座。
实验一 普通光学显微镜的使用
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一、实验目的
1、掌握普通光学显微镜的构造及原理 2、学习并掌握正确的使用方法 3、通过永久装片及新鲜切片观察，掌握一些细胞结构或
细胞活动的特点
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二、实验内容
（一）显微镜的使用 （二）永久标本片的观察 （三）制作新鲜标本片 （四）作业
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（一）显微镜的使用
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显微镜是观察微小物体的精密仪器
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胞间连丝切片 (柿胚乳)
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２、有丝分裂
• 植物细胞有丝分裂 • 洋葱根尖（16条染色体）
• 动物细胞有丝分裂 • 马蛔虫受精卵（4条染色体）
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1
2
3
4
洋葱根尖细胞-有丝分裂图
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卵壳 围卵腔
受精卵
马蛔虫子宫切片400×- 铁苏木精染色
1
3
2
4
马蛔虫受精卵- 有丝分裂图
３、血细胞
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中性粒细胞
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（1）分辨力 R • 显微镜能分辨两物点间的最小距离。 • R=0.61λ/NA
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数值孔径 NA • 也叫做镜口率（或开口率），在物镜和聚
光器上都标有它们的数值孔径，数值孔径 是物镜和聚光器的主要参数，也是判断它 们性能的最重要指标。
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• 数值孔径可用下式表示：NA=n·sinθ • 式中： • n—物镜与标本之间的介质折射率 • θ—物镜的镜口角的1/2，即半孔径角。
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1、光学显微镜的组成 光学、照明、机械
2、显微镜的性能指标 3、显微镜的使用步骤
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显微镜的组成
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2、显微镜的性能指标
（1）分辨力 （2）放大率
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• 显微镜分辨能力的高低决定于光学系统的 各种条件。被观察的物体必须放大率高， 而且清晰，物体放大后，能否呈现清晰的 细微结构，首先取决于物镜的性能，其次 为目镜和聚光镜的性能。
6．要爱护仪器、标本和设备，注意节约实验材料、药品和 水电等。如有损坏，必须向任课教师说明情况，按学校有 关规定处理。
7．根据自己的观察或操作按时完成实验报告和作业，不得 抄袭他人作业。绘图要求用HB或2B铅笔，文字描述和列 表字迹要工整。
8．实验结束后，应清理实验台面，认真清点整理好用品， 整齐地放回原处。轮流值日清扫室内卫生，关好门窗水电， 经教师允许后方可离开实验室。
细胞骨架
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（三）制作新鲜标本片
1、胞间连丝的观察 试材：红椒（青椒）
2、叶绿体的观察 试材：菠菜叶
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（四）作业
1、说明普通光学显微镜的构造 2、试分析提高显微镜分辨力的方法 3、绘图
（1）有丝分裂细胞（前、中、后、末四个时期中的 三个）
（2）玉米根尖纵切（示根尖结构，每个区域绘几个 代表性的细胞。）
转至高倍镜下，调细准焦螺旋。注意：高倍镜不要使用粗准焦螺旋调焦。
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（二）永久标本片的观察
1. 胞间连丝 2. 有丝分裂 3. 血细胞 4. 肝细胞 5. 人染色体ＮＯＲ 6. 草履虫 7. 人口粘膜上皮细胞 8. 植物根尖纵切
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１、胞间连丝
贯穿两个相邻的植物细胞的细胞壁，并连接 两个细胞的原生质细丝。胞间连丝中有连丝微管 (desmotubule)通过,它是由两个细胞的光面内质 网衍生而来。胞间连丝不仅使相邻细胞的细胞质 膜、细胞质、内质网交融在一起, 而且也是植物细 胞间物质运输和传递刺激的重要渠道。
血细- 胞
４、肝细胞切片
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肝细胞切片——线粒体
肝板和肝血窦（示肝细- 胞、肝血窦、巨噬细胞）
肝细Hale Waihona Puke Baidu 胞
５、人染色体NOR
NOR
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人染色体- NOR
６、草履虫
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７、人口粘膜腔上皮细胞
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８、植物根尖纵切
分生区 根冠
植物根尖根-冠、分生区
植物根尖-纵切（示伸长区）
植物根尖纵切（示成熟区） -
镜口角是指从物镜 光轴上的物点发出 的光线与物镜前透 镜有效直径的边缘 所张的角度，见图。
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• 镜口角总是小于180°。因为空气的折射率为1， 所以干燥物镜的数值孔径总是小于1，一般为 0.05—0.95；油浸物镜如用香柏油（折射率为 1.515）浸没，则数值孔径最大可接近1.5。虽然理 论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率， 但实际上从透镜的制造技术看，是不可能达到这 一极限的。通常在实用范围内，高级油浸物镜的 最大数值孔径是1.4。
• 几种物质的介质的折射率如下： • 空气为1.0，水为1.33，玻璃为1.5，甘油为1.47，
香柏油为1.52。
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• 可见光的波长为0.4—0.7微米，平均波长为0.55 微米。若用数值孔为0.65的物镜，则 R=0.61×0.55微米/0.65=0.52微米。这表示被检 物体在0.52微米以上时可被观察到，若小于0.52 微米就不能视见。如果使用数值孔径为1.25的物 镜，则R=0.27微米。凡被检物体长度大于这个数 值，均能视见。