滤器和超滤管..

使用超滤管的优势
• 高回收率> 90% • 垂直结构的膜减少了浓差极化，加快离心速度， 快达 5 分钟 • 热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低 • 100% 完整性检测确保性能可靠 • 透明外壳和体积刻度方便样品察看 • 直接吸取样品减少处理步骤 • 高浓缩倍数：80–100 倍
应用
• 生物样品浓缩：包括抗原、抗体、酶、核 酸或微生物 • 组织培养提取物或细胞裂解液中大分子组 分的纯化 • 对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进 行浓缩 • 脱盐和缓冲液更换
如何界定超滤管失效
• 在正常使用下，滤膜没有被戳破时，浓缩 蛋白液中不含有蛋白或量很低（包括目的 蛋白），而第一次的滤下液中含有目的蛋 白，则说明滤膜失效，需要换新的超滤管。
滤器和超滤管
赵慧彬 2015年6月3日
• 针头式过滤器采用透明级高分子材料丙烯 腈－丁二烯－苯乙烯（ABS）或聚丙烯 （PP）制成，与一次性注射器配套使用， 为实验室常规使用的快速、方便、可靠的 小体积样品的过滤处理装置，
• 主要应用： • 样品的预滤， • 实验室生物流体（血液、尿液等）、培养 基和媒介添加剂的除菌过滤
减少超滤管对蛋白的吸附损失
• 超滤管的滤膜能吸附蛋白，会导致目的蛋 白减少可达30％左右；为减少蛋白损失， 在吸尽目的蛋白液后，再用蛋白Buffer吹 洗超滤管的管底，可以将滤膜吸附的蛋白 洗下大部分而减少目的蛋白的损失；如纯 化的蛋白较浓时，注意浓缩的体积不可过 小；一般无论如何离心，底部会保留有200 µ l左右的蛋白液；
• 蓝色的MCE、紫色的Nylon、 白色的PTFE膜等在化学兼容 性方面更为宽泛，适合含有 特殊（有机）化学成分和酸 碱性较强的样品。
• 白色的有PES膜，也 有PTFE膜，具体规 格根据客户需要。
• 处理量分别是15ml 、 4ml，、2ml、 0.5ml
• 再生纤维素膜具有一系列截留分子量，有 3KD，10KD，30KD，50KD，100KD。
• 2种直径规格可选：13和30cm • 5种膜类型：MCE、NYLON 、PVDF、 PES 、PTFE
• 混纤膜（MCE） 由硝酸纤维素和醋酸纤维素混合而成,亲水性, 化学兼容性强，蛋 白吸附量高。用于颗粒分析，颗粒去处，生化分析，HPLC样品制备 和溶剂过滤 • 尼龙膜（NYLON） 化学相容性好，能在PH值1~12的条件下使用，适用于生物制 品、培养基、溶液的除菌过滤。 • 聚偏氟乙烯膜（PVDF） 亲水性PVDF膜结合的蛋白远远少于硝酸纤维素,尼龙和PTFE过 滤膜，可与水溶液和多种有机溶剂兼容，适用性广泛，耐氧化性和耐 热性好，极适用于HPLC、GC的制备。 • 聚醚砜膜（PES） 低蛋白吸附，高流速，PH值范围广，化学相容性好，适用于样 品的制备 、水溶剂过滤 、微生物研究 、环境分析 、 生物分析 、 HPLC 流动相过滤等。 • 聚四氟乙烯（PTFE） 化学稳定性和惰性，适用于化学腐蚀性较强的有机溶剂、水溶液 和气体，对大多的酸性、碱性和溶液都有耐受性
超滤管使用的离心转速
• 离心转速一般采用4000rpm（一般建议为 3000g，最大不能超过4000g）离心5－8 分钟，即可将4ml样品浓缩至1ml以下至几 十微升；速度过高，目的蛋白会离下，导 致目的蛋白丢失；速度过低，耗时，工效 低；
枪头伸入超滤管中时注意事项
• 加蛋白液或Buffer到超滤管时，可以用蓝 枪头；但从超滤管底吸取浓缩好的目的蛋 白时，必须用黄枪头；用枪头伸入超滤管 中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜；
换浓缩蛋白时超滤管的处理
• 超滤管可以重复使用，用0.1M的NaOH浸 泡1－2h，用水清洗，再在离心机上用相关 溶液（灭菌水或PBS）清洗3次，即可用于 浓缩新的蛋白；
长时间放置超滤管的处理
• 较长时间不来自百度文库用的超滤管，在用0.1M的 NaOH浸泡1－2h，用水清洗，用20％的 乙醇浸泡保存，务必保持滤膜润湿，不能 长菌；
黄色的是PVDF Durapore 膜的，是又一款hero产品，其亲水型PVDF 膜是所有膜中蛋白吸附最低的，如果是含有蛋白成分的样品，用黄色的 Millex ，样品活性成分损失最小！
• 绿色的是PES膜的，Millipore Express PLUS商品名代 表的是“最快流速”，这个得益于密理博对PES膜的特别 工艺改造，漏斗形的膜孔结构带来业界标杆性的使用效 果——既快又好。200mL的样品轻松搞定！