各种显微镜的讲义.doc
手术显微镜培训讲义
Neurosurgery
显微镜的基本原理和作用
七、主要生产厂家:
Neurosurgery
显微镜的基本原理和作用
八、包装和储运:
一般为纸箱包装,适合于长途运输,麦头、标 记(防潮、防震、向上等)印刷或张贴在 ?易 脱落和脱色。应在库房内储存。
Neurosurgery
显微镜的分类
Neurosurgery
二、按性能分:
1、固定焦距、机械支架: 2、连续变焦、分档变倍、阻尼平衡支架: 3、连续变焦、连续变倍、阻尼平衡支架: 4、连续变焦、连续变倍、半电磁支架: 5、连续变焦、连续变倍、全电磁平衡支架:
6、连续变焦、连续变倍、内置太空平衡支架:
7、连续变焦、连续变倍、外置太空平衡支架:
Neurosurgery
手术显微镜的基本概念
Neurosurgery
手术显微镜的基本结构
Neurosurgery
手术显微镜的基本分类
Neurosurgery
手术显微镜的 主要型号与分类
一、按科室分:
1、神经外科(N外) 2、耳鼻喉科(ENT) 3、骨科 4、眼科 5、实验室显微镜
Neurosurgery
手术显微镜的 主要型号与分类
手术显微镜基础知识 培 训 讲 义
Neurosurgery
显微镜的基本原理和作用
一、概述:
目前,世界各国在手术及诊断方面广泛使用显微镜 ,手术显微镜使医生能看清精细的无法做到的微细 手术,大大提高了手术成功率。
Neurosurgery
显微镜的基本原理和作用
二、基本结构:
1、观察系统:包括小物镜和大物镜两种。其作用是 为了形成立体像,必须有两支?独立对物体成像, 供双眼观察。 2、照明系统:要满足足够的物面照度。
学习使用显微镜ppt课件
【实验•探究】练习使用显微镜 二、双目显微镜的操作提示 2.对光调光
1
打开开关,载物台降到最低处、 低倍物镜对准通光孔。
2
调节两个目镜间距离以适应瞳距, 用光源调节旋钮调节视野亮度。
【实验•探究】练习使用显微镜 3.调焦观察
把玻片标本放在载物台上, 1 压片夹压住并正对通光孔。
顺时针转动粗准焦螺旋,使 2 载物台上升至玻片标本尽量
【实验•探究】练习使用显微镜
方法步骤: 1.取镜和安放
取镜:一只手握住镜臂 一只手托镜座放在前胸
安放:显微镜镜座距实验台 边缘大约7厘米
装好目镜和物镜
【实验•探究】练习使用显微镜 一、单目显微镜的操作提示
2.对光调光 转动转换器
低倍镜对准通光孔
大光圈对准通光孔
注视目镜
转动反光镜
2厘米
出现明亮圆形视野
【实验•探究】练习使用显微镜
3.调焦观察
1 玻片正面朝上
2 压片夹压住并正对通光孔
顺时针转动粗准焦螺旋下降 3 镜筒(侧面观察物镜)
4
左眼看目镜,逆时针转动粗 准焦螺旋(镜筒缓慢上升)
5 看见物象微调细准焦螺旋 (使图像变清晰)
⑥如需用更高倍数的物镜 观察,应将要观察的部位 移至中央,再转动转换器 转换物镜,用细准焦螺旋 调焦后观察。
没有螺纹
有螺纹
目镜
物镜
物镜 目镜焦螺旋:使镜筒大幅度升降。
逆时针旋转上升镜筒; 顺时针旋转下降镜筒。
细准焦螺旋:使镜筒小幅度升降。
逆时针旋转上升镜筒; 顺时针旋转下降镜筒。
2.显微镜的机械部分
通光孔:使光线通过
压片夹:固定玻 片标本
转换器:安放和转换物 镜镜头
浙教版科学七年级上册显微镜的使用讲义
浙教版科学七年级上册显微镜的使用讲义一、显微镜结构及各结构功用:1.目镜〔1〕结构描画:装置在镜筒上端的镜头,由一组透镜组成。
〔2〕结构功用:缩小物像的作用。
目镜越长,缩小倍数越小;目镜越短,缩小倍数越大2.镜筒〔1〕结构描画:显微镜上部圆形中空的长筒,筒口上端装置目镜,下端与物镜转换器相连。
〔2〕结构功用:维护成像的光路与亮度。
3.物镜转换器〔1〕结构描画:与镜筒下端相连,分两层,下层不动,下层可以自在转动。
〔2〕结构功用:物镜转换器上有2~4个圆孔,用来装置不同倍数的低倍或高倍物镜。
4.物镜〔1〕结构描画:装置在物镜转换器的孔上,由一组透镜组成。
〔2〕结构功用:可以把物体明晰地缩小。
物镜越长,缩小倍数越大;物镜越短,缩小倍数越小。
5.载物台〔1〕结构描画:从镜臂向前方伸出的金属平台,呈方形或圆形,其中央有一个圆孔,叫通光孔。
台上左右两边各有一个压片夹。
初级的显微镜在载物台上装有推进器。
〔2〕结构功用:用于放置标本的平台。
6.通光孔〔1〕结构描画:在载物台中央。
〔2〕结构功用:使光线经过。
7.遮光器〔1〕结构描画:载物台下面的圆形板,板上有大小不等的圆孔,叫作光圈。
〔2〕结构功用:光圈对准通光孔,可以调理光线的强弱。
8.压片夹〔1〕结构描画:装置在载物台上,普通左右两边各一个。
〔2〕结构功用:用于固定标本。
9.反光镜〔1〕结构描画:一面为平面镜,一面为凹面镜。
〔2〕结构功用:可以采集光线,光线强时用平面镜,光线弱是用凹面镜。
10.镜座〔1〕结构描画:显微镜最下面呈马蹄形或圆形的局部。
〔2〕结构功用:起动摇和支持显微镜的作用。
11.粗准焦螺旋〔1〕结构描画:位于镜臂的上方,可以转动。
〔2〕结构功用:转动时镜筒升降范围较大,从而调理焦距。
12.细准焦螺旋〔1〕结构描画:位于镜臂的下方,可以转动。
〔2〕结构功用:转动时镜筒升降范围较小,从而细调焦距。
13.镜臂〔1〕结构描画:握镜的中央。
〔2〕结构功用:用于握持显微镜。
显微镜知识总结.docx
显微镜知识总结.docx显微镜知识总结显微镜是一种用来观察微小物体的光学仪器,能够放大物体的图像,使人们可以更清楚地观察和研究微观结构和微观现象。
以下是几个与显微镜相关的重要知识点的总结:1. 显微镜的组成部分:- 物镜:位于样本下方的镜头,主要负责放大样本的图像。
- 目镜:位于物镜上方的镜头,用于进一步放大物镜所产生的图像。
- 眼镜:位于目镜的一端,使观察者能够看到放大的图像。
- 细调节和粗调节装置:用于调节镜头与样本的距离,以获得清晰的图像。
- 光源:提供光线以照亮样本,可以是自然光、透射光或反射光。
- 台:用于支撑和定位样本。
2. 解析力和放大倍数:- 解析力是指显微镜能够显示的最小细节。
它取决于光的波长和物镜的数值孔径。
- 放大倍数是指显微镜放大物体图像的程度。
它取决于目镜和物镜的焦距。
3. 显微镜的工作原理:- 光线通过样本后被物镜放大,然后通过目镜再次被放大。
- 放大后的图像通过眼镜进入观察者的眼睛,形成视觉图像。
4. 类型和应用:- 光学显微镜:使用镜片和光线来放大样本图像。
常用于生物学、医学和材料科学的研究中。
- 电子显微镜:利用电子束代替光线来放大样本图像。
常用于查看纳米级和原子级结构。
- 原子力显微镜:利用探针测量样本表面的原子力变化来放大图像。
常用于表面形貌和物性的研究。
以上是显微镜的一些基本知识,它们对于理解显微镜的工作原理和应用起到了重要的作用。
通过掌握这些知识,人们可以更好地利用显微镜来观察和研究微观世界。
显微镜种类介绍ppt
显微镜得分辨率: 也称为分辨力,她就是指能把两个物点辨清得最小距离, 分辨距离越大,则分辨率越低。所以,分辨率就是以分辨 距离来表示得。
其计算公式为: D=0、61入/N·A N·A·=n ·sina/2 式中D为分辨率,A为光波波长,N·A·为物镜得数值孔径(镜口率)。
在物镜上,有镜口率(N、A、)得标志,她反应该镜头分辨力得大小,其数字越 大,表示分辨率越高,各物镜得镜口率如下表:
(3)转到高倍镜,并调焦到看清标本,然后去掉标本,拔出目镜,眼 睛直接向镜筒观察,并把可变 光栏关小,看其亮点就是否在视野中 心,如果不就是,就要转动聚光器得调节螺旋,把亮点调到视野中 央, 再慢慢开启可变光栏,使视野看到光栏边缘与聚光镜得边缘相接为 止。
3、 观察操作:
(1) 低、高倍镜得使用: 先把低倍得物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片0、 5cm处,然后一边观察视野一边上升物镜,直至看到图像,再将标本移到视野 中心,用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处,若要用高倍镜观察时,把所要进一 步放大观察得部位移至视野中央,直接顺时针转换成高倍物镜,然后用细调 焦螺旋调焦,至看清物像。
③机械装置:用于固定材料与观察方便,
包括镜台(载物台) 、调节器与、
物镜转换器(旋转器)等。
尼康E-600显微镜 基础知识
2、荧光显微 镜
尼康E800荧光DIC显微镜
荧光显微镜照片(微管呈 绿色、微丝红色、核蓝色)源自3、 激光共聚 焦扫描显微镜
LCSM照片 蓝色为细胞核, 绿色为微管
4、暗视野显微镜
暗视野显微镜(dark field microscope)得聚光镜中央有当光片, 使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射与衍射得光线进入物 镜,因而视野得背景就是黑得,物体得边缘就是亮得。利用这种显微
各种显微镜的讲义
几种特殊的光学显微镜(一)暗视野显微镜暗视野显微镜不具备观察物体内部的细微结构的功能,但可以分辨0.004μm 以上的微粒的存在和运动。
因而常用于观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。
暗视野显微镜的基本原理是丁达尔效应。
暗视野显微镜的基本使用方法如下:1.安装暗视野聚光器(或用厚实的黑纸片制成遮光板,放在普通显微镜的聚光器下方,也能得到暗视野效果)。
2.选用强光源,一般用显微镜灯照明,以防止直射光线进入物镜。
3.在聚光器和玻片之间加一滴香柏油,避免照明光线于聚光镜上进行全反射,达不到被检物体,而得不到暗视野照明。
4.进行中心调节,即水平移动聚光器,使聚光器的光轴与显微镜的光轴严格位于一直线上。
升降聚光器,将聚光镜的焦点(图2 中圆锥光束的顶点)对准待检物。
5.选用与聚光器相应的物镜,调节焦距,按普通显微镜的方法操作。
(二)体视显微镜体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜,其成像为正立三维的空间影像,并具有立体感强、成像清晰宽阔、长工作距离(通常为110 mm)以及连续放大观看等特点。
生物学上常用于解剖过程中的实时观察(附图13)。
普通光学显微镜的光源为平行光,因而形成的是二维平面影像;而体视显微镜采用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束具有一定的夹角体视角(一般为 12o15o),因而能形成三维空间的立体图像。
体视显微镜与普通光学显微镜的使用方法相近,但更为便捷。
二者的主要区别在于:1.体视显微镜的镜检对象可不必制作成装片。
2.体视显微镜载物台直接固定在镜座上,并配有黑白双面板或玻璃板,操作者可根据镜检的对象和要求加以选择。
3. 体视显微镜的成像是正立的,便于解剖操作。
4. 体视显微镜的物镜仅一只,其放大倍数可通过旋转调节螺旋连续调节。
(三)荧光显微镜荧光显微镜是利用细胞内物质发射的荧光强度对其进行定性和定量研究的一种光学工具。
细胞内的荧光物质物质有两类,一类直接经紫外线照射后即可发荧光,如叶绿素等;另有一些物质本身不具这一性质,但如果以特定的荧光染料或荧光抗体染色,经紫外线照射后亦可发荧光。
显微镜讲义 3
金牌生物高一专题一显微镜●导入:●知识点精讲:一、显微镜的结构普通光学显微镜由光学系统和机械系统两大部分组成。
光学系统包括物镜、目镜及反光镜等。
机械系统包括镜座、镜柱、镜臂、载物台、压片夹、遮光器、镜筒、粗(细)准焦螺旋。
二、显微镜的基础知识1、显微镜的放大倍数=物镜放大倍数乘以目镜的放大倍数放大倍数是指物体的长度或宽度的放大倍数,不是面积和体积的放大倍数。
2、镜头长度与放大倍数关系:目镜的长度与放大倍数成反比,即:放大倍数越大镜头越短;物镜的长度与放大倍数成正比,即:放大倍数越大镜头越长。
3、物像移动与装片移动的关系:由于显微镜下成的像是倒立的虚像,即上下、左右均是颠倒的,移动时遵循“偏那移那”规律。
4、目镜没有螺纹,直插式:长度和放大倍数成反比。
规格:5倍、10倍、16倍和40倍物镜有螺纹,螺旋式:长度和放大倍数成正比。
规格:10倍和40倍特别说明:放大倍数和与盖玻片之间的距离成反比。
5、放大倍数的变化与视野范围内细胞数量变化的关系。
第一种情况:一行细胞数量的变化,可根据放大倍数的变化与视野成反比的规律计算。
第二种情况:圆形视野范围内细胞数量的变化,可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。
6.放大的倍数不是面积。
而是长和宽!三、使用低倍镜观察的步骤1、取镜与安放右手握镜臂,左手托镜座;把显微镜放在实验台的前方稍偏左。
2、对光(1)反向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升(2)转动转换器,使低倍镜对准通光孔(3)选一较大的光圈对准通光孔,(4)左眼注视目镜,右眼同时睁开。
转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内,通过目镜,可以看到白亮的视野。
3、低倍镜观察(1)把要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心;(2)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本(约0.5cm)为止(眼睛从侧面看着物镜镜头与标本之间,防止两者相撞)(3)左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋,使镜筒上升,直到看到物象为止,再稍稍转动细准焦螺旋,使看到的物象更加清晰四、使用高倍镜观察的步骤1、低倍镜观察;2、移动玻片,将要放大的物象移至视野中央;3、转动转换器,移走低倍镜,换上高倍物镜;4、缓缓调节细准焦螺旋,使物象清晰;5、调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。
联系使用显微镜精讲讲义教案
第一节练习使用显微镜学习导引实物显微镜下物像显微镜的成像有什么特点?首先是物像比实物要大;其次是物像与实物相反,上下倒置,左右反向。
显微镜的放大倍数显微镜的放大倍数=物镜倍数×目镜倍数。
物镜倍数越高,镜头越长;目镜倍数越高,镜头越短(如图)。
物镜倍数由低→高目镜倍数由低→高显微镜的放大倍数越高,视野越暗,所看到的实物范围越小;放大倍数越低,视野越亮,所看到的实物范围越大。
知识创关据图回答问题。
(1)在图中括号内填写显微镜各部分结构的名称。
(2)用显微镜观察时,光线是如何进入眼睛的?(3)利用粗准焦螺旋和细准焦螺旋调节物像时,镜筒上升或下降的幅度有什么不同?调节时应注意什么?(4)在不同强度的光线下,怎样调节反光镜和遮光器?(5)显微镜下看到的“上”字与玻片标本上的“上”字有什么不同?(6)视野中的物像位于右下方,怎样移动玻片标本使物像处于视野的中央?(7)在使用显微镜观察时,视野中有一污点,你如何判断该污点是在玻片标本上,目镜上,还是在物镜上?(8)如果不动显微镜的其他部分,只是转动转换器,将物镜由10×转换成45×,这时显微镜的视野将会有什么改变?探究乐园1.某同学说他将一根头发丝直接放在显微镜下观察时,看到了被放大了的头发丝的内部结构。
你认为这种说法可信吗?如何检验你所作出的判断?2.下图显示显微镜操作的步骤,据图回答问题。
图1 图2 图3 (1)图1所示的是。
该步操作的目的是使在同一直线上。
(2)进行图2所示操作时,眼注视图示部位的目的是:。
(3)三个图所示步骤的操作顺序是:→→。
课堂延伸阅读课本上关于《从古老的光学显微镜到电子显微镜》的资料,并回答问题(1)这段资料介绍了。
(2)显微镜至今已经经历了四代产品。
四代显微镜的放大功能,用具体的事例可以描述为:小昆虫→→细胞内部结构→。
显微镜的使用方法初中讲义
一.观察细胞结构(A)1.显微镜的构造(指认图14个结构,简述功能)2、显微镜的使用5个步骤:取镜和安放→对光→放片→调焦→观察(1)取镜:右手握镜臂,左手托镜座。
安放:放距台边缘7cm,略偏左。
安装好目镜和低倍物镜。
(2)对光:(A)光线强时,平光镜,小光圈;光线弱时,凹面镜,大光圈;目镜、物镜、通光孔、光圈在一条直线上。
对光成功:看到白亮的圆形视野。
(3)观察:双眼都要睁开;先低倍再高倍,先调粗准下降,再调细准上升。
大调粗准看见,再调细准看清,下降偏头看物,上升低头看镜。
(4)收镜维护:把物镜偏转到两旁,把镜筒下降到最低处。
★3、要点:(A)(1)显微镜的放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数(2)放大倍数大,细胞个体大,数目少,视野暗;放大倍数小,细胞个体小,数目多,视野亮;(3)目镜越长,放大倍数越小;物镜越长,放大倍数越大。
(物同目反)(4)移片问题:物像在哪里就往哪里移;(5)成像问题:将试卷转180°即可;(6)光线:反光镜→光圈→通光孔→载玻片→物镜→镜筒→目镜;(7)材料必须薄而透明;不透光的材料是看不到内部结构的。
(例头发)二、观察洋葱表皮和人口腔上皮细胞实验(A)12、擦:清除灰尘滴:清水(洋葱表皮实验):保持植物细胞的形态(A)0.9 %的生理盐水(口腔上皮实验)取:撕1厘米大小一层内表皮(洋葱呈紫色:液泡中的细胞液含有紫色物质)展:将表皮在清水中展平,防止细胞重叠盖:一侧先接触水滴,另一侧缓缓放下目的:避免产生气泡染、吸:一侧滴加红墨水/稀碘液,另一侧用吸水纸吸引(染色最深的部位是细胞核)。
各类光学显微镜课件
荧光的性质: 吸收光,必需有激发光源 荧光波长>激发波长(损失热能) 荧光强度极小于激发光的强度 有不同程度的衰减 荧光强度取决于激发光强度、被检物浓度、:又叫自发荧光或固有荧光,经过紫外光照射 直接发出荧光。 二次荧光:又叫继发荧光,被观察物体经过荧光染料处 理之后,经过紫外光照射才能发出荧光。 荧光染料种类很多:
在日常生活中,室内飞扬的微粒灰 尘是不易被看见的,但在暗的房间 中若有一束光线从门缝斜射进来, 灰尘便粒粒可见了,这是光学上的 丁达尔现象。 暗视野显微镜就是利用此原理设计 的。
丁达尔现象
暗视野显微镜是在普通光学显微镜中去除明视野集光器, 换上一个暗视野集光器而成。 它的结构特点主要是使用中央遮光板或暗视野聚光器, 常用的是抛物面聚光器,使光源的中央光束被阻挡,不 能由下而上地通过标本进入物镜。从而使光线改变途径, 倾斜地照射在观察的标本上。
荧光显微镜利用一个高发光效率的点光源,经过滤色系 统发出一定波长的光(如紫外光365nm或紫蓝光 420nm)作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各 种不同颜色的荧光后,再通过物镜和目镜的放大进行观 察。 这样在强烈的对衬背景下,即使荧光很微弱也易辨认, 敏感性高,主要用于细胞结构和功能以及化学成分等的 研究。
4、光学显微镜分类、原理及应用
4.1 光学显微镜分类:
1、普通眀场光学显微镜 2、暗视野显微镜 3、荧光显微镜 4、体式显微镜 5、倒置显微镜 6、金相显微镜 7、相差显微镜 8、偏光显微镜 9、微分干涉显微镜 10、激光共聚焦显微镜
应用:微小粒子、细菌 形态、细菌记数,透 明标本观察等。
1.2 放大镜:约在四百年前眼镜片工匠们开始磨制 放大镜。当时的放大镜的放大倍数只有3—5x 1.3 显微镜: 1590年,荷兰和意大利的眼镜制造者造出类似显 微镜的放大仪器。 1673~1677年期间,列文胡克制成单组元放大镜 式的高倍显微镜 19世纪70年代,德国人阿贝奠定了显微镜成像的 古典理论基础。 1850年出现了偏光显微术; 1893年出现了干涉显微术; 1935年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术,
最新显微镜讲义2000
显微镜组成部分简介:显微镜是一种精密的光学仪器,是将微小物体或物体的微细部分高倍放大,以便观察的仪器或设备。
光学显微镜即以可见光为光源的显微镜。
创始人:光学显微镜是在1590年由荷兰的杨森父子所首创。
物镜粗动手轮目镜转换器镜臂载物推进器聚光镜微动手轮聚光镜升降手轮镜座亮度调节开关光源载物台图1-1 复式显微镜结构图显微镜的成像原理:光学显微镜是利用光学的成像原理观察植物体结构的。
利用可见光(自然光或灯光)反射到聚光器中,把光线会聚成束,穿过生物制片(样品),进入到物镜的透镜。
因此所观察的制片都要很薄,光线才能穿透。
经物镜将制片的结构放大,为倒的实像,再经过目镜放大,映入眼球内最后形成的为放大的倒的虚像。
一、光学显微镜包括机械装置、光学系统和照明系统。
(一)机械部分:是由精密而牢固的零件组成,主要包括镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。
镜座:是显微镜的底座,位于最下端,常呈马蹄形用以支持镜体的稳定性。
镜柱:是镜座上面直立的部分,为镜座上面的短柱,它支撑镜臂和载物台。
镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。
上置目镜下与接物镜相连,中部为握取部分,上端镜筒相连,并附有小调节器。
镜筒:为一中空长桶,上接目镜下与接物镜相连。
整个有镜筒附着器与镜臂相连。
调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。
①大螺旋,移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。
②小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。
载物台:在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,显微镜其镜台上装有玻片标本推进器,推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
显微镜讲义
有关显微镜练习1. 有一台显微镜,它有两个目镜和两个物镜,目镜的放大倍数分别为5×和15×,物镜的放大倍数分别为10×和40×。
请问,这台显微镜的最大放大倍数是 , 最小放大倍数是 ,假如现在观察一个标本,需要放大150×,应选用的目镜为 ,物镜为 。
2. 在光学显微镜下,选用10倍目镜和40倍物镜观察一直径为0.1mm 的小圆点,则视野中小圆点像的直径为 ,面积放大 倍。
3.在使用低倍镜观察头发直径时,发现视野内头发粗细大约为3.0厘米,如果你用的目镜是10倍,物镜是40倍,那么你的头发实际直径大约为( )A 、7.5微米 C 、75微米B 、750微米 D 、300微米4. 实验时,先用显微镜的10倍目镜和10倍物镜观察,在视野直径范围内看到一行相连的8个细胞,现目镜不变,换上40倍物镜观察,则在视野中看到这行细胞中的几个?( )A 、8个B 、32个C 、2个D 、无法确定5. 实验时,先用显微镜的10倍目镜和10倍物镜观察,在视野中看到8个细胞,现目镜不变,换上40倍物镜观察,那么看到的细胞数目为( )A 、8个B 、32个C 、2个D 、无法确定6. 用下列四组镜头看同一块血液的玻片标本其中看到血细胞数目最多的一组为 ( )A. 目镜5×,物镜10×B. 目镜5×, 物镜40×C. 目镜10×,物镜10×D. 目镜10×,物镜40×7. 组合,视野中看到细胞体积最大,组合,看到细胞数目最多。
8. 用显微镜观察时,所要观察的生物材料必须是透明的,其原因( )A.便于放置在显微镜上B.能让光线通过C.不易污染物镜D.易于染色9 .当光线过强时,可进行( )操作A.用平面反光镜,将光圈放大B.用平面反光镜,将光圈缩小C.用凹平面反光镜,将光圈放大D.用凹平面反光镜,将光圈缩小10.在光线较弱的情况下观察物象,最好使用( )A 、低倍物镜、较小光圈、平面反光镜;B 、高倍物镜、较小光圈、凹面反光镜;C 、低倍物镜、较大光圈、凹面反光镜;D 、高倍物镜、较大光圈、平面反光镜;11.用显微镜观察黑藻叶细胞的细胞质流动时,为使视野变暗,可采取的措施是 ( )A.缩小光圈B.扩大光圈C.换用低倍物镜D.换用凹面镜a b c d12.观察没有染色体的玻片标本时,用暗视野往往可以看得更清楚,能得到暗视野的操作()A、用高倍镜B、用凹面反光镜和大光圈C、用低倍镜D、用平面镜和小光圈13. 在使用显微镜观察装片的过程中,当调节镜筒下降时,眼睛应注视的部位是()A.物镜B.目镜C.反光镜D.镜筒14. 在使用显微镜观察细胞时,对光结束后,将临时装片放在载物台上,此时需从侧面看着物镜,旋转粗准焦螺旋,将镜筒放下。
原子力显微镜原理及操作流程讲义
原子力显微镜原理及操作流程讲义一、原子力显微镜的原理1.相互作用力的测量AFM利用一个非弹性的探针来感知样品表面和探针之间的相互作用力,这种力包括引力、斥力、摩擦力等。
通常情况下,探针通过压电晶体驱动,使其随着样品表面的形貌变化而移动,然后通过探针的振动分析探针与样品之间的相互作用力。
2.记录相互作用力的变化AFM中的扫描头会在样品表面进行移动,同时实时记录探针在各个位置处的相互作用力的变化,在计算机中生成一个力曲线。
通过对这些力曲线的分析,可以获得样品的表面形貌信息。
3.形成图像最后,利用计算机对力曲线进行处理和分析,并在一个图像平面上显示出样品表面的形貌,形成原子级分辨率的图像。
这种图像可以清晰地显示出样品表面的凹凸不平,甚至可以分辨出单个原子的位置。
二、原子力显微镜的操作流程1.准备工作首先需要对AFM进行准备,包括打开设备电源,检查探针是否安装正确,并校准扫描仪的各个参数。
2.选择扫描区域根据需要观察的区域,使用光学显微镜或者扫描电子显微镜来确定样品表面的位置,并将其对准到扫描范围内。
3.定义扫描参数通过在控制软件中设置扫描参数,包括扫描速度、扫描范围、采样点数等。
4.扫描样品将样品放置在AFM扫描台上,并通过控制软件开始扫描。
在扫描过程中,探针将会在样品表面进行移动,并测量相互作用力的变化。
5.数据分析与图像处理扫描结束后,将会得到一组原子级分辨率的数据,通过计算机软件对数据进行处理和分析,包括平均滤波、高斯滤波、拟合等处理方法。
然后将处理后的数据转化为图像,用于观察和分析。
6.数据展示将处理后的图像进行保存、打印或导出,以便进一步的研究和分析。
总结:原子力显微镜通过测量探针与样品表面之间的相互作用力的变化,实现了对样品表面的高分辨率成像。
其操作流程主要包括对设备进行准备、选择扫描区域、定义扫描参数、扫描样品、数据分析与图像处理以及数据展示。
通过这一系列的操作步骤,可以获得原子级分辨率的样品表面形貌图像,对于表面形貌的研究具有非常重要的意义。
实验06 偏光显微镜-实验讲义
实验6 偏光显微镜观察化合物的晶态及液晶态结构一、实验目的1.了解偏光显微镜的结构及使用方法。
2.观察化合物的结晶形态及液晶态结构。
二、实验原理用偏光显微镜研究化合物的结晶形态是目前实验室中较为简便而实用的方法。
根据振动的特点不同,光有自然光和偏振光之分。
自然光的光振动(电场强度E的振动)均匀地分布在垂直于光波传播方向的平面内如图1所示;自然光经过反射、折射、双折射或选择吸收等作用后,可以转变为只在一个固定方向上振动的光波。
这种光称为图1平面偏光,或偏振光如图1(2)所示。
偏振光振动方向与传播方向所构成的平面叫做振动面。
如果沿着同一方向有两个具有相同波长并在同一振动平面内的光传播,则二者相互起作用而发生干涉。
由起偏振物质产生的偏振光的振动方向,称为该物质的偏振轴,偏振轴并不是单独一条直线,而是表示一种方向。
如图1(2)所示。
自然光经过第一偏振片后,变成偏振光,如果第二个偏振片的偏振轴与第一片平行,则偏振光能继续透过第二个偏振片;如果将其中任意一片偏振片的偏振轴旋转90°,使它们的偏振轴相互垂直。
这样的组合,便变成光的不透明体,这时两偏振片处于正交。
光波在各向异性介质(如结晶化合物)中传播时,其传播速度随振动方向不同而发生变化,其折射率值也因振动方向不同而改变,除特殊的光轴方向外,都要发生双折射,分解成振动方向互相垂直,传播速度不同,折射率不等的两条偏振光。
两条偏振光折射率之差叫做双折射率。
光轴方向,即光波沿此方向射入晶体时不发生双折射。
晶体可分两类:第一类是一轴晶,具有一个光轴,如四方晶系、三方晶系、六方晶系;第二类是二轴晶,具有两个光轴,如斜方晶系、单斜晶系、三斜晶系。
二轴晶的对称性比一轴晶低得多,故亦可称为低级晶系。
聚合物由于化学结构比低分子链长,对称性低,大多数属于二轴晶系。
一种聚合物的晶体结构通常属于一种以上的晶系,在一定条件可相互转换,聚乙烯晶体一般为正交晶系,如反复拉伸、辊压,发生严重变形,晶胞便变为单斜晶系。
《显微镜》 讲义
《显微镜》讲义一、显微镜的简介显微镜是一种用于观察微小物体的重要工具,它能够帮助我们看到肉眼无法直接看清的细节。
显微镜的发明和不断改进,极大地推动了生物学、医学、材料科学等众多领域的发展。
显微镜的基本原理是利用透镜对光线的折射和聚焦作用,将物体放大并成像在观察者的眼中或通过其他成像设备进行记录。
二、显微镜的类型1、光学显微镜这是最常见的一种显微镜。
根据其结构和功能的不同,又可以分为多种类型。
(1)明视野显微镜:利用直射光照明,观察的物体与背景有明显的亮度差异。
(2)暗视野显微镜:通过特殊的装置,使照明光线不能直接进入物镜,只有被标本散射的光线才能进入,从而提高了对比度,适合观察微小的颗粒和细胞器。
(3)相差显微镜:利用光的干涉现象,将物体的相位差转换为振幅差,能够观察未经染色的活细胞。
(4)荧光显微镜:用特定波长的激发光照射标本,使标本中的某些物质发出荧光,从而进行观察和分析。
2、电子显微镜(1)透射电子显微镜(TEM):电子束穿透样品后成像,能够观察到细胞内部的超微结构,如细胞器的膜结构、核糖体等。
(2)扫描电子显微镜(SEM):电子束在样品表面扫描,产生二次电子并成像,能够呈现样品的表面形貌,具有很高的分辨率。
3、其他类型的显微镜(1)共聚焦显微镜:通过逐点扫描和共聚焦成像,能够获得更清晰的三维图像。
(2)原子力显微镜:利用微小探针与样品表面原子间的相互作用力来成像,适用于研究纳米级别的表面结构和性质。
三、显微镜的结构1、光学显微镜的结构(1)目镜:位于显微镜的顶部,通常用于观察放大后的图像。
(2)物镜:安装在转换器上,不同倍数的物镜可以切换,以获得不同的放大倍数。
(3)载物台:用于放置待观察的标本。
(4)调焦装置:包括粗调焦旋钮和细调焦旋钮,用于调整焦距,使图像清晰。
(5)照明系统:提供光线,使标本能够被照亮。
2、电子显微镜的结构(1)电子枪:产生电子束。
(2)电磁透镜:用于聚焦电子束。
(3)真空系统:保证电子束的正常运行。
显微镜基础课件
主讲人:
一
结构
结 构(Structure)
3
01 光学显微镜由光学系 统和机械系统组成
光学系统是核心部件
02 成像系统:物镜、目镜
照明系统:聚光器、光源
,
机械系统
03 支撑
固定 调节
物 镜(Objective lens)
4
02
01 由几个透镜组合集成在金属筒内构成 02 焦距较短、靠近标本、成实像的透镜组
8
– 光源 • 自然光源:靠反光镜采光,受外界光源的影响较大 • 电光源:卤素灯或LED,随时照明、亮度可调
– 滤光片 • 选择入射光的光谱成分和改变光的强度
光学系统(Lighting system)
9
– 聚光器 • 由数个透镜组合而成 • 位于光源和样品间 • 会聚光束,使光束均匀并增强照明亮度
– 载玻片 • 光路的一部分,光学性能会影响成像质量
光学系统(Lighting system)
10
– 聚光器 • 由数个透镜组合而成 • 位于光源和样品间 • 会聚光束,使光束均匀并增强照明亮度
– 载玻片 • l System)
11
目 镜(Eyepiece)
7
分类: • 惠更斯目镜:主要应用于观测型显微镜 • 冉斯登目镜:常用于测量型显微镜 • 补偿目镜:补偿校正复消色差物镜的放大率色差缺陷 • 平场目镜:视野平坦,视场较大 • 无畸变目镜:可消除畸变,令观察舒适 • 广角目镜:可增大视场 • 摄影负目镜:有利于摄影
光学系统(Lighting system)
分类
物 镜(Objective lens)
5
01 依据放大率:低倍、中倍和高倍物镜 02 依据是否浸入液体媒介:干式和浸液式物镜 03 依据镜筒长度:筒长有限远、筒长无限远物镜 04 依据对像差与色差的消除能力:Ach、Apo、Plan
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几种特殊的光学显微镜
(一)暗视野显微镜
暗视野显微镜不具备观察物体内部的细微结构的功能,但可以分辨
0.004μm 以上的微粒的存在和运动。
因而常用于观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。
暗视野显微镜的基本原理是丁达尔效应。
暗视野显微镜的基本使用方法如下:
1.安装暗视野聚光器(或用厚实的黑纸片制成遮光板,放在普通显微镜的聚光器下方,也能得到暗视野效果)。
2.选用强光源,一般用显微镜灯照明,以防止直射光线进入物镜。
3.在聚光器和玻片之间加一滴香柏油,避免照明光线于聚光镜上进行全反射,达不到被检物体,而得不到暗视野照明。
4.进行中心调节,即水平移动聚光器,使聚光器的光轴与显微镜的光轴严格位于一直线上。
升降聚光器,将聚光镜的焦点(图2 中圆锥光束的顶点)对准待检物。
5.选用与聚光器相应的物镜,调节焦距,按普通显微镜的方法操作。
(二)体视显微镜
体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜,其成像为正立三维的空间影像,并具有立体感强、成像清晰宽阔、长工作距离(通常为110 mm)以及连续放大观看等特点。
生物学上常用于解剖过程中的实时观察(附图13)。
普通光学显微镜的光源为平行光,因而形成的是二维平面影像;而体视显微镜采用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束具有一定的夹角体视角(一般为 12o15o),因而能形成三维空间的立体图像。
体视显微镜与普通光学显微镜的使用方法相近,但更为便捷。
二者的主要区别在于:
1.体视显微镜的镜检对象可不必制作成装片。
2.体视显微镜载物台直接固定在镜座上,并配有黑白双面板或玻璃板,操作者可根据镜检的对象和要求加以选择。
3. 体视显微镜的成像是正立的,便于解剖操作。
4. 体视显微镜的物镜仅一只,其放大倍数可通过旋转调节螺旋连续调节。
(三)荧光显微镜
荧光显微镜是利用细胞内物质发射的荧光强度对其进行定性和定量研究的一种光学工具。
细胞内的荧光物质物质有两类,一类直接经紫外线照射后即可发荧光,如叶绿素等;另有一些
物质本身不具这一性质,但如果以特定的荧光染料或荧光抗体染色,经紫外线照射后亦可发荧光。
荧光显微镜的原理为利用一个高发光效率的点光源(如超高压汞灯),经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光3650λ或紫蓝光4200λ)作为激发光,激发标本内的荧光物质发射出各色的荧光后,再通过物镜后面的阻断(或压制)滤光片的过滤,最后经由目镜的放大作用加以观察。
阻断滤光片的作用有二:一是吸收和阻挡激发光进入目镜以免干扰荧光和损伤眼睛;二是选择并让特定的荧光透过,表现出专一的荧光色彩。
荧光显微镜按照光路原理可分为两种:
1.透射式荧光显微镜较为旧式的荧光显微镜,其激发光源通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光。
其优点是低倍镜时荧光强,而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱。
所以它仅适用于观察较大的标本材料。
2.落射式荧光显微镜激发光从物镜向下落射到标本表面,即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜(附图1-5)。
光路中需加上一个双色束分离器(分色镜),它与光轴呈45o 角,激发光被反射到物镜中,并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,返回到双色束分离器,使激发光和荧光分开,残余激发光再被阻断滤片吸收。
如换
用不同的激发滤片/双色束分离器/阻断滤片的组合插块,可满足不同荧光反应产物的需要。
此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀,成像清晰,放大倍数愈大荧光愈强。
(四)相差显微镜
相差显微镜是能将光通过物体时产生的相位差(或光程差)转变为振幅(光强度)变化的显微镜。
主要用于观察活细胞、不染色的组织切片或缺少反差的染色标本。
人眼只能鉴别可见光的波长(颜色)和振幅的变化,不能鉴别相位的变化。
而大多数生物标本高度透明,光波通过后振幅基本不变,仅存在相位的变化。
相差显微镜基本把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了1/4λ(波长),如果再增加或减少1/4λ,则光程差变为1/2λ,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减下,提高反差(见图6)。
从结构上看,相差显微镜与普通光学显微镜不同之处在于:
1.环形光阑具有环形开孔的光阑,安装在光源与聚光器之间,作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥,聚焦到标本上。
2.相位板相差显微镜在物镜内部增加了涂有氟化镁的相位板,作用是将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。
相板上有两个区域,直射光通过的部分叫“共轭面”,衍射光通过的部分叫“补偿面”。
相位板按工作效果分为两种类型:
(1)A+相板:将直射光推迟1/4λ,两组光波合轴后光波叠加,振幅加大,标本结构比周
围介质更加明亮,形成亮反差(或称负反差)。
(2)B+相板:将衍射光推迟1/4λ,两组光线合轴后光波相减,振幅变小,标本结构比周围介质更加暗淡,形成暗反差(或称正反差)。
带有相板的物镜叫相差物镜,常在物镜外壳上标以“Ph”字样。
3.合轴调节望远镜
相差显微镜配备有一个合轴调节望远镜(在外壳上标有“CT”符号),用于调节环状光阑的像与相板共轭面完全吻合,以便实现对直射光和衍射光的特殊处理。
使用时拨去一侧目镜,插入合轴调节望远镜,调节合轴调节望远镜的焦点,视野中会呈现两个圆环,分别是明亮的环状光阑圆环与较暗的相板上共轭面圆环。
再转动聚光器上的环状光阑的两个调节螺旋,使两环完全重叠。
如明亮的光环过小或过大,可调节聚光器的升降旋钮,使两环完全吻合。
如果聚光器已升到最高点或降到最低点而仍不能矫正,说明玻片太厚了,应更换。
调好后即可取下合轴调节望远镜,换回目镜。
4.绿色滤光片
用于调整光源的波长。
照明光线的波长不同,会引起相位的变化,为了获得良好的相差效果,相差显微镜要求使用波长范围比较窄的单色光,通常是用绿色滤光片来调整。
相差显微镜的使用步骤如下:
①根据待检标本的性质及要求,挑选适合的相差物镜。
②将标本玻片放到载物台上,进行光轴中心的调整。
③使用合轴调节望远镜,调整环状光阑与相板上的共轭面圆环完全重叠吻合后,换回目镜。
在观察过程中,每次更换物镜倍数时,必须重新进行环状光阑与相板共轭面圆环吻合的调整。
④加绿色滤光片,按普通光学显微镜的操作步骤进行观察。
(一)透射式电子显微镜
透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)的组件包括:
1. 电子枪发射电子,由阴极、栅极、阳极组成。
2. 聚光透镜即电子透镜,将电子束聚集,可用于控制照明强度和孔径角。
3. 样品室放置待观察的样品,并装有旋转台,用以改变试样的角度,还有装配加热、冷却等设备。
4. 物镜为放大率很高的短距透镜,作用是放大电子像。
物镜是决定透射电子显微镜分辨能力和成像质量的关键。
5. 中间镜为可变倍的弱透镜,作用是对电子像进行二次放大。
通过调节中间镜的电流,可选择物体的像或电子衍射图来进行放大。
6. 透射镜为高倍的强透镜,用将二次放大后的中间像进一步放大后在荧光屏上成像。
7. 二级真空泵对样品室抽真空。
8.照相装置用以记录影像。
由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,样品的密度、厚度等都会影响到最后的成像质量,必须制备更薄的超薄切片,通常为50~100 nm。
所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。
通常用薄切片法或冷冻蚀刻法制备:
(1)薄切片法通常以锇酸和戊二醛固定样品,以环氧树脂包埋,以热膨胀或螺旋推进的方式推进样品切片,切片厚度20~50 nm,采用重金属盐染色,以增大反差。
(2)冷冻蚀刻法亦称冰冻断裂法。
将标本置于100?C 的干冰或196?C 的液氮中冰冻后,以冷刀急速断开标本。
断裂的标本升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出断面结构,称为蚀刻。
蚀刻完成后,向断面以45o 角喷涂一层蒸气铂,再以90o 角喷涂一层碳,加强反差和强度。
然后用次氯酸钠溶液消化样品,剥下碳和铂的膜,称为复膜,能显示标本蚀刻面的形态。
在电镜下观察得到的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。
(二)扫描式电子显微镜
扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)于20 世纪60 年代问世,目前分辨力可达6~10 nm。
其工作原理是由电子枪发射的精细聚焦电子束经两级聚光镜、偏转线圈和物镜射到样品上,扫描样品表面并激发出次级电子,次级电子的产生量与电子束入射角有关,即与样品的表面结构有关。
次级电子经探测体收集后,由闪烁器转换为光信号,再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度,显示出与电子束同步的扫描图像。
图像为立体形象,反映了标本的表面结构。
扫描电镜的标本在检验前,需进行固定、脱水处理,再喷涂上一层重金属微粒,重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号。