4种糖化血红蛋白检测系统的IFCC二级参考方法认证

4种糖化血红蛋白检测系统的IFCC 二级参考方法认证刘文彬，居　漪，唐立萍，王美娟，欧元祝，虞啸炫，李　卿（上海市临床检验中心，上海 200126）摘要：目的　通过溯源至国际临床化学和检验医学联合会（IFCC ）糖化血红蛋白（HbA 1c ）一级参考方法，为上海市临床检验中心建立二级参考方法，完善HbA 1c 量值溯源体系。

方法　分别采用HA-8180糖化血红蛋白分析仪（简称HA-8180）、Hb-9210糖化血红蛋白分析仪（简称Hb-9210）、Capillarys 2 Flex Piercing 毛细管电泳仪（简称Cap2）、MQ2000-PT 糖化血红蛋白分析仪（简称MQ2000-PT ）及各自的配套试剂组成的4种检测系统检测IFCC HbA 1c 工作组提供的24份样本，将检测结果与IFCC 公布的靶值比较，并根据IFCC 的评价规则评价4种检测系统的性能。

结果　HA-8180、Hb-9210、Cap2和MQ-2000PT 的变异系数（CV ）分别为1.1%、2.0%、2.2%、2.0%，不精密度分别为0.6、1.0、1.1、1.0 mmol/mol ；根据回归方程得出的结果与50 mmol/mol 水平的|偏移|分别为1.0、1.1、0.4、1.0 mmol/mol ；全年整体总误差（TE ）分别为 2.2、3.1、2.6、3.2 mmol/mol 。

HA-8180的评价结果为“Sliver ”，Hb-9210、Cap2和MQ-2000PT 的评价结果均为“Bronze ”。

结论　HA-8180、Hb-9210、Cap2和MQ-2000PT 4种检测系统均符合HbA 1c IFCC 二级参考方法的认证要求。

关键词：糖化血红蛋白；参考方法；总误差；生物医学变异IFCC Secondary Reference Measurement Procedure for 4 HbA 1c determination systems LIU Wenbin ，JU Yi ，TANG Liping ，WANG Meijuan ，OU Yuanzhu ，YU Xiaoxuan ，LI Qing. （Shanghai Center for Clinical Laboratory ，Shanghai 200126，China ）Abstract ：Objective To improve the traceability of glycated hemoglobin A 1c （HbA 1c ） in Shanghai Center for Clinical Laboratory with establishing the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine （IFCC ） Secondary Reference Measurement Procedure ，through tracing from the IFCC Primary Reference System. Methods Using 4 HbA 1c determination systems ，including HA-8180，Hb-9210，Capillarys 2 Flex Piercing （Cap2） and MQ2000-PT with their original reagents and calibrators ，the results of 24 samples sent by IFCC were compared with the target values assigned by the IFCC Primary Reference System. The performance of the 4 determination systems were evaluated by the IFCC rules. Results The coefficients of variation （CV ） of the 4 determination systems were 1.1% for HA-8180，2.0% for Hb-9210，2.2% for Cap2 and 2.0% for MQ2000-PT. The imprecisions were 0.6，1.0，1.1 and 1.0 mmol/mol ，respectively. The |biases| at the level of 50 mmol/mol were 1.0，1.1，0.4 and 1.0 mmol/mol ，respectively. The total errors （TE ） of whole year were 2.2，3.1，2.6 and 3.2 mmol/mol ，respectively. According to the rules ，HA-8180 got a "Sliver " score ，and Hb-9210，Cap2 and MQ2000-PT got "Bronze " score. Conclusions The 4 determination systems demonstrate traceability to the IFCC Secondary Reference Measurement Procedure.Key words ：Glycated hemoglobin A 1c ；Reference measurement procedure ；Total error ；Biological variation基金项目：上海市社区糖尿病防治公共卫生体系（15GWZK0301[0]）；上海市卫生和计划生育委员会公共卫生三年行动计划（15GWZK0301）作者简介：刘文彬，男，1983年生，学士，主管技师，主要从事临床化学检验研究。

通信作者：居　漪，E-mail ：juyi@ 。

文章编号：1673-8640（2019）05-0443-04 中图分类号：R446.1 文献标志码：A DOI ：10.3969/j.issn.1673-8640.2019.05.0132011年，上海市临床检验中心建立的糖化血红蛋白（glycated hemoglobin A 1c ，HbA 1c ）参考实验室获得了由国际临床化学和检验医学联合会（the International Federation of ClinicalChemistry and Laboratory Medicine，IFCC）HbA1c标准化工作组颁发的认可证书，成为当时全球13家HbA1c一级参考方法网络实验室成员之一。

上海市临床检验中心利用一级参考方法开展了大量与HbA1c检测质量持续改进相关的工作[1]。

经过几年的发展，IFCC允许具备一级参考方法资质的实验室建立HbA1c二级参考方法[2]，作为一级参考系统向常规检测系统进行量值传递的重要环节。

从2015年起，上海市临床检验中心申请参加了二级参考方法的认证，并连续获得了由IFCC颁发的2016、2017年度合格证书，成为全国第1家获得IFCC认证的HbA1c二级参考方法的临床实验室[3]，从而进一步完善了国内HbA1c量值溯源体系[4]。

本研究对HbA1c二级参考方法的建立与认证进行探讨。

1　材料和方法1.1　主要仪器与试剂将HA-8180糖化血红蛋白分析仪[简称HA-8180，爱科来国际贸易（上海）有限公司]、Hb-9210糖化血红蛋白分析仪[简称Hb-9210，普莱默斯医疗器械（上海）有限公司]、Capillarys 2 Flex Piercing毛细管电泳仪（简称Cap2，法国赛比亚公司）、MQ-2000PT糖化血红蛋白分析仪（简称MQ-2000PT，上海惠中医疗科技有限公司）分别与各自的配套试剂、校准品组成4种检测系统。

所有仪器均由厂家检定合格，试剂和校准品均在有效期内使用。

1.2　样本来源I F C C提供的样本为乙二胺四乙酸二钾（ethylenediaminetetraacetic acid-K2，EDTA-K2）抗凝人全血，靶值由IFCC参考实验室网络采用一级参考方法确定。

1.3　校准品IFCC提供的校准品来源为EDTA-K2抗凝人全血（批号：Shanghai 2016.116），共有8个浓度，分别为31.4、38.7、49.6、58.5、69.0、78.3、88.6、99.2 mmol/mol，每个校准品的靶值由IFCC参考实验室网络采用一级参考方法确定。

由于血红蛋白浓度的差异可能导致HbA1c 检测结果出现误差，每个校准品的总血红蛋白浓度被控制在8.0～10.0 mmol/L。

分别用HA-8180、Hb-9210、Cap2、MQ-2000PT检测以上8个浓度的校准品，每个校准品重复检测2次，将2次检测结果的均值作为实测值，以实测值为X，校准品靶值为Y，建立校准品的回归方程Y=bX+a。

本实验室2016年每3个月检测1次校准品，共检测4次。

若发生更换试剂批号、更换色谱柱、仪器损坏维修等情况，则需另外再检测校准品。

1.4　样本分别用4种检测系统按照各自的操作规程检测IFCC提供的2016年二级参考方法认证正式样本24份。

除Cap2使用全血模式外，其他3种检测系统均使用手工稀释模式，平均每2周检测1次。

1.5　结果报告将检测结果分别输入各检测系统的校准回归方程，其输出结果作为校准后的拟合值。

若采用美国国家糖化血红蛋白标准化计划（the National Glycohemoglobin Standardization Program，NGSP）单位（%），可通过NGSP-IFCC结果转换公式IFCC（mmol/mol）=[NGSP （%）-2.15]/0.091 5[5]进行转换。

由于本实验室参加认证的4种检测系统均采用NGSP（%）单位报告结果，最终上报结果需转换为IFCC（mmol/mol）单位，最后上报至IFCC网站（http：//）。

1.6　统计学方法根据IFCC公布的样本靶值结果，24份样本按照次序被分成12对，本研究用不精密度评价12对样本中每2个重复样本在不同检测时间内检测结果的平均差异，用变异系数（coefficient of variation，CV）和不精密度描述。

不精密度体现了50 mmol/mol水平下该差异的具体数值。

按照IFCC规定的计算方法进行计算，公式如下：√∑（Δ）2nCV=√2x×100%不精密度=CV×50 mmol/mol式中Δ为2个重复样本的差值、n为2个重复样本的组数、x为24份样本的均值。