实验材料试剂、方法、标准曲线、内容

实验材料与试剂

1.1实验仪器与耗材

实验所用的主要仪器与耗材：

GC-2014型气相色谱仪：日本岛津公司

6890N-5973N型气象色谱-质谱联用仪：美国安捷伦公司

Rtx-5毛细管色谱柱：30m×0.25mm×0.25µm，美国restek公司

HP-5ms毛细管色谱柱：30m×0.25mm×0.25μm，美国安捷伦公司

RE52CS-2型旋转蒸发仪：上海亚龙生化仪器厂

电子分析天平：北京费多利斯天平有限公司

HH-2型数显恒温水浴锅：深圳国华电器有限公司

KQ-250B型超声波振荡器：昆山市超声仪器有限公司

PHS-3C精密pH 计：上海精密科学仪器有限公司

200ml血清瓶、丁基特氟龙半覆膜胶塞及铝盖、压盖器：江阴市华康制造有限公司

250mL索氏提取装置、其他主要玻璃仪器：天津玻璃仪器厂

所有玻璃仪器均经过去污粉洗刷，超声波清洗器清洗，再用自来水冲洗，铬酸洗液浸泡过夜，使用前依次用自来水、去离子水洗净后与烘箱烘干，正己烷淋洗备用。

1.2 实验药品

K2HPO4：国药集团化学试剂有限公司，分析纯；

KH2PO4：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯；

NH4Cl：天津市广成化学试剂有限公司，分析纯；

MgCl2.6H2O：天津市广成化学试剂有限公司，分析纯；

FeCl2.4H2O：天津市广成化学试剂有限公司，分析纯；

CaCl2.2H2O：浙江省兰溪城南化工厂，分析纯；

NaHCO3：天津市大茂化学试剂厂，分析纯；

Na2S.9H2O：天津市大茂化学试剂厂，分析纯；

ZnCl2：天津市广成化学试剂有限公司，分析纯；

MnCl2：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯；

CoCl2.6H2O：天津市广成化学试剂有限公司，分析纯；

H3BO3：天津市大茂化学试剂厂，分析纯；

CuCl2.2H2O：天津市大茂化学试剂厂，分析纯；

NiSO4.6H2O：天津市化学试剂三厂，分析纯；

Na2MoO4.2H2O：天津市化学试剂四厂，分析纯。

生物素：BIO BASIC TNC.，分析纯；

叶酸：BIO BASIC TNC.，分析纯；

维生素B6：BIO BASIC TNC.，分析纯；

核黄素：BIO BASIC TNC.，分析纯；

硫胺素：BIO BASIC TNC.，分析纯；

烟酸：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯；

泛酸：天津市光复精细化工研究所，分析纯；

维生素B12：天津市光复精细化工研究所，分析纯；

对氨基苯甲酸：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯；

硫辛酸：ACROS ORGANICS，分析纯；

α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH单标(100μg/m L甲醇)，国家标准物质研究中心；

α-HCH标准品（98%），Dr. Ehrenstorfer GmbH；

HCH混合标准品(主要成分含量：α-HCH 64.23%、β-HCH 9.56%、γ-HCH 14.52%、δ-HCH 7.34%)，北京合力顺科技有限公司；

正己烷：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯、色谱纯；

丙酮：天津泰兴试剂厂，分析纯；

二氯甲烷：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯；

无水硫酸钠：天津市科密欧化学试剂开发中心，分析纯；

无水葡萄糖：天津市大茂化学试剂厂，分析纯；

铜丝：上海化学试剂厂，分析纯；

98%浓硫酸：上海化学试剂厂，分析纯

甲醇：天津广成化学试剂有限公司，分析纯；

乙醇：天津广成化学试剂有限公司，分析纯；

乙酸钠：天津广成化学试剂有限公司，分析纯；

氯化钠：天津广成化学试剂有限公司，分析纯；

硝酸钠：天津广成化学试剂有限公司，分析纯；

酵母膏：北京奥博星生物技术有限责任公司，分析纯。

2实验操作与实验条件

2.1 实验药品处理与试剂配制

有机溶剂用全玻璃系统蒸馏后使用；无水硫酸钠于马弗炉中500℃灼烧4小时后使用；铜丝用1mol/L的烟酸浸泡中，清除表面的氧化铜，然后用去离子水、丙酮、正己烷依次清洗备用。

HCH标准储备液：用HCH混合标准品配置浓度为9450mg/L甲醇的HCH 储备液备用。

配制培养基所有的微量金属储备液配方见表2-1。

配制培养基所有维生素储备液配方见表2-2。

污泥驯化及实验所用的培养基配方见表2-3。

表2-1 微量金属储备液成分表

成分浓度(g/L)

ZnCl20.50

MnCl20.30

H3BO3 3.00

CoCl2.6H2O 2.00

CuCl2.2H2O 0.10

NiSO4.6H2O 0.20

Na2MoO4.2H2O 0.30

表2-2 维生素储备液

成分浓度(g/L)

生物素0.20

叶酸0.20

维生素B6 1.00

核黄素0.50

硫胺素0.50

烟酸0.50

泛酸0.50

维生素B12 0.01

对氨基苯甲酸0.50

硫辛酸0.50

表2-3 培养基成分

成分浓度(g/L)

K2HPO40.90

KH2PO40.50

NH4CL 0.50

CaCl2.2H2O 0.10

MgCl2.6H2O 0.20

FeCl2.4H2O 0.10

NaHCO3 1.20

Na2S.9H2O 0.50

微量金属储备液 1.00ml/L

维生素储备液0.20ml/L

2.2 厌氧污泥的采集

驯化接种污泥取自济南第一污水处理厂的厌氧消化污泥。用金属筒从厌氧消化池中提取泥水混合物，取出静置沉淀后，倒掉上层清液，将沉淀后厌氧污泥收