《血库操作规程》word版

北川羌族自治县人民医院血库标准操作规程

文件编号：BC-2-2013

编制：吕强

审核：施伟

批准：施伟

生效日期：2013年4月14日

目录

ABO 血型鉴定（正定型）

1、实验原理

根据红细胞上有或无A 抗原或（和）B 抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定A B O 血型。所谓正定型，是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B红细胞来测定血清中有无相应的抗A 或（和）抗B。

2、使用的标本种类和收集方法

2.1、受检者5％红细胞悬液

红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。

2.2、受检者血清

采取受检着静脉血2-3ml，置水浴箱中至完全凝固，3000转/分钟离心5分钟，分离上层血清备用。

2.3、标本接收

2.3.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.3.2规定内容）。

2.3.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。

2.4、标本容器要求：洁净一次性塑料试管

3、使用的试剂

3.1、抗A 、抗B定型试剂（单克隆抗体）

3.1.1、批准文号：国药准字S1*******

3.1.2、生产厂家：上海血液生物医药有限公司

3.1.3、保存条件：2-8℃避光保存，有效期内使用。

2．5 ％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液

2.5.1、制备方法

分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3 次，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。

2.5.2、保存条件：配制好的5％的红细胞悬液在试管上注明红细胞血型及配制时间，2-8℃避光保存，有效期3天。

4、仪器：

4.1、仪器型号：ＴＤＬ－５Ｃ型医用离心机

4.2、仪器厂家：北京菲恰尔医疗器械有限公司

4.3、许可证号：京药管械（试）字2001第2030436号

4.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序。

5、操作步骤、报告结果

5.1、正定型：取清洁试管2支作好标记，分别加入抗A（蓝色）和抗B（黄色）标准血清各2滴。每管加入被检者5％红细胞悬液各2滴，混匀，1000转/分钟离心一分钟或在室温放置1小时，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。

5.2、反定型：取清洁试管2支作好标记。用滴管分别加入被检者血清各2滴，A 和B型5％标准红细胞悬液各2滴。混合。立即以1000转/分钟离心1分钟，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。

5.3、结果见下表：

抗A 抗B 血型 A细胞 B细胞

+ - A - +

- + B + -

- - O + +

+ + AB - -

注：（＋）凝集（－）不凝集

6、注意事项

6.1、标准血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。

6.2、试剂红细胞以3 个健康者同型新鲜红细胞混合，用生理盐水洗涤3 次，以除去存在于血清中的抗体及可溶性抗原。

6.3、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

6.4、操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。

6.5、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。

6.6、观察时应注意区别真假凝集。

6.7、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。

7、临床意义

输血已成为临床上必不可少的治疗手段，输血必须输入A B O 同型血，如输入异型血，输入的红细胞可能迅速破坏，导致严重的溶血反应，常常威胁生命甚至造成死亡。

8、方法的局限性：本方法不能检测出亚型。

Rh（抗D）血型鉴定

1.原理：

Rh血型系统通过输血或妊娠可产生免疫性抗体，当遇有相应抗原，可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治，可导致患者残废或死亡。有条件者应作此检查。目前，一般应用5种分型血清来检查红细胞抗原。临床上，凡带有D抗原者，称为Rh阳性，不带D抗原者，称为Rh阴性。

2、使用的标本种类和收集方法

2.1、受检者2-3％红细胞悬液

红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水32滴（1.6ml）配成2-3％的红细胞悬液。

2.2、标本接收

2.2.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.

3.2规定内容）。

2.2.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。

2.3、标本容器要求：洁净一次性塑料试管

3. 仪器和试剂：

3.1、仪器型号：ＴＤＬ－５Ｃ型医用离心机

3.2、仪器厂家：北京菲恰尔医疗器械有限公司

3.3、许可证号：京药管械（试）字2001第2030436号

3.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序

3.5、Rh抗血清本科使用上海血液生物医药有限公司生产的Rh抗血清试剂产品注册号:国食药监械(准)字2009第3400648号

4. 操作

4.1 取小试管2支,用蜡笔标记，分别加上述Rh抗血清1滴,再加2-3%受检者红细胞盐水悬液2滴,混匀。离心：3200-3400转/min,15--30秒

4.2结果判断:轻摇试管，观察结果：如受检管凝集,即表示阳性；受检管不凝集,即表示阴性。

5、注意事项

5.1、Rh抗血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。

5.2、。试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。

5.3、操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。

5.4、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。

5.5、观察时应注意区别真假凝集。