湖北毒理实验步骤
湖北掌叶覆盆子叶的毒理试验研究
ｗ ｓｆ ｎ ，ａ ｕ ｇ ｙｍ ｕｅｂ ｎ ａ ｏ ｅ ｃｏｕｌ ｓｔ ｔＡ ｓｔ ｔａｄ ｍ ｕｅｓｅ ｂ ｏｍ ｌｙ ｔ ｔ ｎ ｔ ａ ｏ ｄ ｓ ｊｄｅ ｂ ｏ ｓ ｏｅ ｍ ｌ ｗ ｃｌ ｍ ｒ ｃ ｕ ｅ ，ｍｅ ｅ ｏｓ ｐｒ ａ ｎｒ ａ ｔ ｅ ．Ｉ ｈ ｕ ｄ Ｔ ｌｉ ｎ ｅ ｓ ｓｎ ｍ ｉ ｓ ｅ
田 辉 ／ 文祥 ／ 杨 马 弋／ 樊柏 林／ 家发 刘
（ 湖北省疾病预防控制 中心 ， 湖北 武汉 ４０ ７ ） ３ ０９
【 摘要】背景与目的：掌叶覆 盆子 叶是在湖北省 内新发现的一种植物资源 ， 有降糖、 降脂作用 ， 为开发这种资源 ， 对其食用安全性进
行评价。 材料与方法：对湖北掌 叶覆盆子 叶进行小 鼠急性 毒性试验 （ 最大耐受量法 ）遗传毒性试验和 ９ 喂养试验。 结果：湖北掌 、 ０ｄ 叶覆盆子叶对昆明种小鼠急性经 Ｅ毒性试验为无毒级。遗传 毒性试验 （ ｌ 小鼠骨髓 细胞微核试验 ， ｍ ｓ Ａ ｅ 试验和精子畸形试验） 结果均为
阴性。按 ２ ５５ ０ １ ． ／ｓ对 Ｗｉａ 大鼠连续 经 Ｅ灌 胃给予 ９ ， ． 、 ．、００ ｇｋ ｓｒ ｔ ｌ ０ ｄ 动物未见明显的中毒症状和死亡 ， 剂量组大 鼠体重 、 各 进食量 、 食 物利用率 、 血象 、 血液 生化 、 脏器重量 、 体 比值以及病理 组织学等指标与 阴性对照组 比较 ， 脏／ 差异 均无统计学意义 （ Ｐ＞０ ０ ） 结论： ．５ 。 在本实验条件下 ， 未发现湖北 掌叶覆盆子叶有 明显 的毒性作用 。 【 关键词】湖北 掌叶覆盆子叶 ；甜茶甙 ；安全性评价
ｈ ｓ ｅ ｎ ｓ ｔ ｐｅ ｅ ｔ ｎ ｈ ｌ ｔ ａ ｈ ｐ ｒｌ ｃ ｍｉ ａ ｄ ｙ ｅ ｌ ｉ ｅ ａ ｏ ｈ ｎ ｒ ｄ ｏ ｅ ｒ ｂ ｌｃ ｐ ｏ ｌ ａ ｂ ｅ ｕ ｅ ｏ ｒｖ ｎ ａ ｄ ｅｐ ｒ ｔ ｙ ｅｇｙ ｅ ａ ｎ ｈ ｐ ｒ ｐ ｄ ｍ ｆｒ ｕ ｄ ｅ ｓ ｆ ｙ ａ ｓ ｙ ｏ ａ ｅ ｐｅ． ｄ ｅ ｉ ｉ ｌ Ｒｕ ｕ ｏ ｉ ｅ ｉ ｔ ｏ ｇ ｔ ｔ ｅ ｉ ｐ ｃａ ｎ ｒｄ ｅ ｔ Ｉ ｒ ｅ ｏ ｄ ｖ ｌｐ ａ ｄ ｕ ｉ ｚ ｈ ｓ ｎ ｗ ｒ ｓ １ ｅ ｏ ｉｏｏ ｙ ｔｓ ｆ ｂ ｓ ｄ ｓ ｈ ｕ ｈ ｏ ｂ ｔ ｓ ｅ ｉ ｉ ｇｅ ｉｎ ． ｎ ｏｄ ｒ ｔ ｅ ｅｏ ｔ ｉ ｔ ｉ ｅ ｅ ｏｕ ，ｔｘｃ ｌｇ ｅ ｔ ｏ ｓ ｓ ｌ ｎ ｌｅ ． ￣ ｓ ｈ ｓ ｅ ｔ ｉ ｎ ｗ ｈ ｒ ｗ ｒ ｃ ｎ ｕ ｔ ． Ｍ Ｔ Ｒ Ａ ￣ Ａ Ｄ ｅ ｂ ｅ ｅ ｏ ｄ ｃｅ ｄ Ａ Ｅ ＩＩ Ｎ ＭＥ Ｈ Ｄ ： Ｔ ｅ ａ ｅ ｏ Ｈ ｂ ｉ Ｒ． ｃ ｉｇ ｉ Ｔ Ｏ Ｓ ｈ ｓｆ ｔ ｆ ｕ ｅ ｙ ｈｎ ｉ Ｈｕ ｗ ｓ ｅ ａｕ ｔｄ ａ ｖ ａｅ ｌ
毒理学实验技术总结
毒理学实验技术总结毒理学是一门研究外源化学物、物理因素和生物因素对生物体产生有害作用的科学。
而毒理学实验技术则是研究这些有害作用的重要手段。
通过一系列的实验操作和观察，我们能够评估物质的毒性、确定安全剂量范围，为保护人类健康和环境安全提供科学依据。
接下来，让我们详细了解一下毒理学实验技术。
一、急性毒性实验急性毒性实验是毒理学中最常见的实验之一，其目的是测定化学物质在短时间内（通常为 24 小时至 14 天）对生物体造成的损害。
实验通常采用两种方法：经口急性毒性实验和经皮急性毒性实验。
经口急性毒性实验是将化学物质以特定的剂量灌胃给予实验动物，然后观察动物在短期内出现的中毒症状和死亡情况。
通过计算半数致死剂量（LD50）来评估物质的毒性强度。
LD50 越小，说明物质的毒性越强。
经皮急性毒性实验则是将化学物质涂抹在动物的皮肤上，观察其对皮肤的刺激性以及可能产生的全身性毒性反应。
在进行急性毒性实验时，需要严格控制实验条件，包括实验动物的种类、年龄、体重、性别等，以及化学物质的给予方式和剂量。
同时，要对实验动物进行密切观察，记录其症状出现的时间、严重程度和持续时间等。
二、亚慢性和慢性毒性实验与急性毒性实验不同，亚慢性和慢性毒性实验的观察周期较长。
亚慢性毒性实验的观察期通常为 90 天左右，而慢性毒性实验则可能持续一年甚至更长时间。
这些实验旨在评估化学物质在长期低剂量暴露下对生物体产生的潜在危害，如对器官功能的影响、致癌性、致畸性等。
实验过程中，需要定期监测实验动物的体重、饮食、行为、血液生化指标等，并在实验结束时对动物进行解剖，检查各个器官的病理变化。
三、遗传毒性实验遗传毒性实验用于检测化学物质对生物体遗传物质的损害作用，包括基因突变、染色体畸变和 DNA 损伤等。
常见的遗传毒性实验方法有：1、细菌回复突变实验（Ames 实验）：通过检测化学物质对细菌基因突变的诱导作用，来评估其遗传毒性。
2、微核实验：观察细胞中微核的形成，以判断化学物质是否导致染色体损伤。
禁毒学(4.2.1)--毒品检验程序及方法
（四）分离与净化 （五）定性、定量分析 （六）分析鉴定结论
二、毒品检验方法
（一）化学法 （二）物理方法 （三）仪器分析方法 1 、色谱法 2 、原子光谱法 3 、分子光谱法 4 、质普法
三、 常见毒品检验技术
（一）化学法 1 、概念 化学法是利用化学试剂 与毒品检材发生显色、沉 淀、结晶 等化学反应来鉴 定毒品的种类。
凝胶色谱：利用某些凝胶对于不同分子大小的组分 阻滞作用的不同。
4 、色谱法的特点 （ 1 ）分离效率高：一次可分离数百个组分的混合 物。 （ 2 ）灵敏度高：可检出 10—E11—10—E15 克数 量级的痕量物质。 （ 3 ）样品用量少：一般为微克级。 （ 4 ）分析速度快：对于复杂样品分析时间一般只 需几分钟到几十分钟即可完成。 （ 5 ）应有范围广：几乎能发现所有化学物质。
薄层色谱是将硅胶、氧化铝等吸附剂 均匀地铺在玻璃上，形成薄层，把欲分 离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶 剂展开，使混合物得以分离的方法。由 于层析在薄层上进行故而得名。
1.2 基本原理
当待分离的混合物随流动相通过固定相时 , 由于 各组份的理化性质存在差异 , 与两相发生吸附、 溶解、结合等相互作用的能力不同，在两相中的 分配（含量对比）不同。与固定相相互作用力越 弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小 , 向前移动的速度快。反之越小 , 从而达到将各组 份分离的目的。
1.3 薄层色谱的优点
设备简单 ; 操作方便，快速 ; 分析时 间短。
薄层色谱是毒品检验中应用较广定性 方法之一。大多数毒品可用此法进行定 性分析。
1.4 操作步骤
选择适合的薄层板：
根据检材的特性选择适合的薄 层板。薄层板是在玻璃板上铺 一层吸附剂（或者吸干了固定 相的载体）而形成的层析板。 其大小可根据样品量、组分种 类和数目、展开方式来确定。
毒理学及微生物实验
实验一、毒理学实验方法[实验目的] 通过实验，掌握实验动物的一般操作技术。
[实验材料]实验动物：昆明种小鼠实验器材：灌胃器、手术剪等。
[操作方法]1.实验动物物种的选择选择的基本原则是：选择对受试物在代谢、生物化学等与人最接近；自然寿命不太长；易于饲养和操作；经济易获得。
2. 实验动物的被毛去除方法(1)拔毛法将动物固定后，将所需部位的被毛拔去即可。
(2)剪毛法将动物固定后，用手术剪紧贴动物皮肤将所需部位的被毛剪去。
3. 实验动物的处死方法颈椎脱臼法：一只手用力住下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾，用颈稍向后上方一拉，使之颈椎脱曰动物立即死亡。
空气拴塞法；急性大失血法和吸入法致死。
实验二动物染毒方法[实验目的] 通过实验，掌握实验动物的一般染毒方法。
[实验材料]实验动物：昆明种小鼠实验器材：灌胃器、注射器、手术剪等。
三、实验方法1 灌胃：将受试物配制成溶液或混悬液，以注射器经导管注入胃内。
经口多次染毒，一般不禁食，但应每日定时染毒。
2 口服法染毒：将受试物掺入动物饲料或饮水中供实验动物自行摄入。
实验动物以食物消耗量计算其实际染毒剂量。
3 经呼吸道染毒I 静式吸入染毒：将一定数量的啮齿类动物放在密闭的染毒柜中，加入易挥发的液态受试物或气态受试物使成一定浓度。
受试物浓度，以mg/m3表示。
II 动式吸入染毒：由染毒柜、机械通风系统和配气系统三部分构成动式吸入染毒柜中受试物的浓度应实际监测。
4 经皮肤染毒经皮肤染毒的目的有两种。
一种是经皮染毒毒性试验，如经皮LD50测定常用大鼠。
另一种是皮肤刺激和致敏试验。
试验前用机械法或化学法脱毛。
于脱毛后24小时涂抹一定量受试物，盖上一层塑料薄膜，接触规定的时间。
4. 注射染毒注射用药品，应以注射途径染毒，对大小鼠可用静脉注射，对非啮齿类可模拟临床用药途径，如狗可用后肢隐静脉注射，而啮齿类的尾静脉和肌肉注射难以多次染毒，必要时可改为皮下注射。
注射染毒，应调整受试物的pH及渗透压，pH应5～8，最好是等渗溶液，动物对高渗的耐受力比低渗强。
湖北省检测实施管理细则
湖北省检测实施管理细则
一、总则
（二）本细则适用于湖北省的放射性、化学性、物理性和慢性毒物污
染等环境监测。
（三）湖北省环境保护厅负责本细则的解释。
二、定义
（一）环境监测：指从环境物质、物理性质等方面对环境的实际状况
进行检测评价的活动。
（二）放射性、化学性、物理性和慢性毒物污染：指放射性、化学性、物理性和慢性毒物，如重金属、有机污染物等，对环境空气、水质、土壤
等造成的污染。
（三）放射性污染：指放射性物质污染的一种，包括放射性物质在环
境中的各种形态，如粒子污染、气溶胶污染和折射污染等。
三、监测方法
（一）放射性监测：对放射性物质污染的监测主要采用放射性检测方法，如尘埃中放射性核素的检测、空气中放射性核素的活度分析、饮用水
中放射性核素检测等；
（二）化学污染监测：主要采用化学分析、毒理学试验、生物毒理学
实验等方法。
毒理学实验操作规程
毒理学实验操作规程一、实验目的毒理学实验的目的是评估化学物质、生物制剂、物理因素等对生物体的潜在有害影响，为制定安全标准、环境保护政策、药物研发和风险评估提供科学依据。
二、实验准备（一）实验动物的选择根据实验目的和研究对象的特点，选择合适的动物种类、品系、年龄、性别和体重。
常用的实验动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子等。
实验动物应来自具有资质的供应商，并经过检疫和适应性饲养。
（二）实验动物的饲养环境提供适宜的饲养条件，包括温度、湿度、光照周期、通风和清洁卫生。
动物笼具应定期清洗和消毒，给予充足的饮水和营养均衡的饲料。
（三）实验试剂和仪器准备所需的化学试剂、药品、标准品等，确保其质量和纯度符合实验要求。
同时，检查和校准实验所需的仪器设备，如移液器、离心机、分光光度计、显微镜等。
（四）实验人员的培训实验人员应接受毒理学相关知识和实验操作技能的培训，熟悉实验流程、安全注意事项和应急预案。
三、实验设计（一）剂量设计根据预实验结果或相关文献资料，确定合适的剂量范围和剂量组。
通常包括低剂量组、中剂量组和高剂量组，有时还设置对照组。
（二）给药途径根据研究对象的性质和实际应用情况，选择合适的给药途径，如口服、腹腔注射、静脉注射、吸入、皮肤涂抹等。
（三）观察指标确定全面、敏感和特异性的观察指标，包括动物的一般状况（如外观、行为、饮食、体重等）、生理指标（如体温、血压、心率等）、生化指标（如肝肾功能、血液学指标等）、组织病理学检查等。
（四）实验周期根据实验目的和观察指标的变化特点，确定合理的实验周期。
急性毒性实验一般为数小时至数天，亚慢性和慢性毒性实验则可持续数周、数月甚至数年。
四、实验操作流程（一）动物分组和标记将实验动物随机分组，每组动物数量应根据实验要求和统计学原则确定。
采用适当的标记方法对动物进行个体标识，如耳标、染色、纹身等。
（二）给药操作按照预定的给药途径和剂量，准确地给予实验动物受试物。
给药过程中应注意操作的规范性和准确性，避免药物损失和交叉污染。
食品毒理学实验方案
食品毒理学实验方案实验一操作技术学习毒理学试验中有关动物试验的基本操作技术，掌握实验动物的选择，性别鉴定，抓取方法，标记方法，染毒方法，生物材料采集和实验动物处死等技术。
苦味酸酒精饱和溶液、美蓝溶液托盘天平、电子天平、棉签、1mL注射器、烧杯、管、玻璃毛细管鼠笼小鼠操作方法实验动物的选择毒理学研究中，无论应用何种种属品系的实验动物，都必须是健康动物。
动物的选择，重点检查下述项目。
体形丰满，被毛浓密光顺，行动敏捷，反应灵活。
眼睛明亮，瞳孔清晰，双侧等圆，眼内无分泌物，眼睑无肿胀、发红。
耳耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮、糜烂。
鼻无喷嚏，无浆性黏液分泌物。
皮肤无创伤、脓疮、疥癣、湿疹。
头颈部姿势端正。
颈项歪斜提示可能存在内耳疾患，不能用于实验。
消化道无呕吐、便秘、腹泻，粪便成形，肛门附近被毛洁净。
神经系统无震颤、麻痹、运动失调，如有转圈运动或倒提时呈圆圈摆动，不能用于实验。
四肢及尾四肢、趾及尾无红肿溃疡。
食欲及营养良好实验动物的性别鉴定大鼠、小鼠主要观察肛门与生殖孔的间距，雄性间距大，而雌性间距小；雄鼠夏天或卧位可见睾丸，雌鼠腹部有明显乳头，大鼠6对，小鼠5对。
实验动物的称重、编号和标记一般同一组内，同性别动物体重差异应小于平均体重的10％，组间同性别动物体重均值应小于5％。
编号和标记染色法一般采用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位的被毛染色，表示不同号码，此法适用于大鼠、小鼠和豚鼠。
常用的染料有苦味酸酒精饱和液（黄色）、美蓝溶液（蓝色）或甲基紫酒精饱和液、0.5％中性红或品红溶液（红色）等。
具体方法为：按右、右肋、右后肢、尾跟、左后肢左肋、左前肢、；部位涂染另一种颜色染料表示十位，两种颜色可编1~99号。
实验动物的染毒途径和方法灌胃将毒物不经口腔和食道，直接灌入胃内。
急性毒性试验多用此法。
用带有灌胃器的适当容积注射器吸取所需的受试液（溶液、混悬液、乳液）备用。
①小鼠保定，一手紧抓住耳后、颈部皮肤，用无名指、小指和大鱼际肌压紧尾根部将动物固定成垂直体位，腹部面向操作者，使上消化道固定呈一直线。
食品毒理学实验
实验一动物的一般操作技术1. 实验目的和要求*毒理学研究需要用实验动物来进行各种实脸，通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量-反应关系、毒作用机制等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。
通过本次学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。
2. 实验原理做毒理学实验，首先要了解实验动物选择的要求，实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。
3. 实验仪器设备:小鼠若干，手套15副，苦味酸酒精饱和液，0.5%中性红或品红溶液，棉签，解剖剪刀10把，感应量为0.1g的天平一台。
4. 实验内容步骚:(一) 健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验，均要求选择健康的实验动物。
健康动物检查时要求达到：外观体型丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。
选择时重点检查以下几项：1. 眼睛明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物2. 耳耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮3. 鼻无喷嚏，无浆性粘液分泌物4. 皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。
5. 颈部要求颈端端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患，不应选作实验动物。
6. 消化道无呕吐、腹泄，粪便成形，肛门附近被毛洁净。
7. 神经系统无震颤、麻痹。
若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动，应放弃该动物。
8. 四波及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。
(二) 实验动物的性别鉴定小鼠主要依据肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄鼠，小者为雌性。
成年雄鼠卧位可见睾丸，雌性在腹部可见乳头。
(三) 抓取方法正确地抓取固定动物，是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下，确保实验顺利进行。
小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上向后位，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。
药物毒理学实验实验动物一般操作技术
二、实验内容
实验动物的健康状况的判定 实验动物的抓取、固定 实验动物的性别鉴定 实验动物的称重 实验动物的编号 生理指标的测定 生物材料的采集 血红蛋白的测定
实验动物的健康状况的判定
1)发育正常、体态丰满、外观无畸形； 2)被毛浓密、贴顺有光泽、不蓬乱； 3)胸阔宽阔、脊柱不弓不弯； 4)眼睛明亮； 5)表皮无溃疡、无结痂（注意尾巴）； 6)各天然孔干净、无分泌物； 7)行动灵活、反应敏捷。
实验动物的抓取、固定
1. 小鼠抓取和固定
固定方法 手固定法
固定时注意，过Leabharlann 用力会使 小鼠颈椎脱臼，若用力过轻头部 能反转过来咬伤实验者的手。这 种固定方法是灌胃给药和腹腔注 射给药常用的方法。
（此方法一定要在动物安静的状态下测定，不是精确的测量方法。）
生物材料的采集
血液的采集：心脏采血、断头采血、腹主动脉采血、 眼眶静脉从采血、尾静脉采血、剪尾采血（示教）
尿液的采集：通常使用代谢笼（示教）
血红蛋白的测定
用剪尾采血的方法来测血红蛋白含量。 先吸0.38ml0.1N的HCL，加入试管，用上述采血的方法 取20μl血液，快速打入装有盐酸的试管中，弹指法混匀， 10分钟后倒入比色管中比色，要用水冲洗试管， 向比色管 中加蒸馏水，直至颜色与标准色板颜色一致时，读数g/L， （读蓝色侧数值），最后将管冲洗干净。
2. 大鼠抓取固定方法 抓取
固定方法
实验动物的性别鉴定
大、小鼠 主要依肛门与生殖孔间的距离区分， 间距大者为雄性，小者为雌性。
实验动物的称重
现在称重通常使用电子称，将动物放在篮子 或饭盒中，先进行去皮调零后再将动物放入 篮子中记录体重。
湖北掌叶覆盆子叶的毒理试验研究
湖北掌叶覆盆子叶的毒理试验研究唐晓荞;刘瑶;孙凡中;付少华;田辉;杨文祥;马弋;樊柏林;刘家发【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2007(019)005【摘要】背景与目的:掌叶覆盆子叶是在湖北省内新发现的一种植物资源,有降糖、降脂作用,为开发这种资源,对其食用安全性进行评价.材料与方法:对湖北掌叶覆盆子叶进行小鼠急性毒性试验(最大耐受量法)、遗传毒性试验和90 d喂养试验.结果:湖北掌叶覆盆子叶对昆明种小鼠急性经口毒性试验为无毒级.遗传毒性试验(小鼠骨髓细胞微核试验,Ames试验和精子畸形试验)结果均为阴性.按2.5、5.0、10.0 g/kg 对Wistar大鼠连续经口灌胃给予90 d,动物未见明显的中毒症状和死亡,各剂量组大鼠体重、进食量、食物利用率、血象、血液生化、脏器重量、脏/体比值以及病理组织学等指标与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:在本实验条件下,未发现湖北掌叶覆盆子叶有明显的毒性作用.【总页数】4页(P395-398)【作者】唐晓荞;刘瑶;孙凡中;付少华;田辉;杨文祥;马弋;樊柏林;刘家发【作者单位】湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079;湖北省疾病预防控制中心,湖北,武汉,430079【正文语种】中文【中图分类】R994.4【相关文献】1.湖北掌叶覆盆子叶水提取物降血糖作用动物实验和人群研究 [J], 樊柏林;刘家发;龚晨睿;孙凡中;田辉;田洁;王玉娥;张启嫒;李新兰;曹可俊2.湖北掌叶覆盆子叶降血脂作用的动物实验和人群研究 [J], 樊柏林;龚晨睿;孙凡中;王护民;王玉娥;田洁;田辉;宋毅;李骏;张启嫒;李新兰;刘家发3.掌叶覆盆子种子特性与发芽试验研究 [J], 付顺华;吴家森;佘永清;朱玉球;潘明明4.沙棘叶及沙棘制品残渣毒理学试验研究 [J], 刘绪川;张国伟;李雅茹;王建林;王菊香;张梅;张彩芳5.湖北新分布种掌叶覆盆子(湖北甜茶)资源初步调查 [J], 樊柏林;许四元;李新兰;杨文祥;曹可俊;刘家发因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
毒理实验基本操作
实验动物的一般操作技术
预防医学实验教学中心
一、实验目的
1、了解动物实验是毒理学研究的重要手段之一 2、掌握小鼠动物实验的基本操作技术
一、实验器材
电子称、小鼠固定器、注射器、灌胃针、棉签、 电子称、小鼠固定器、注射器、灌胃针、棉签、 镊子、毛细管、龙胆紫、苦味酸、 镊子、毛细管、龙胆紫、苦味酸、生理盐水
单 色 法
大小鼠标记方法（单色法 大小鼠标记方法（单色法n<10） ）
单色法标记原则： 单色法标记原则：单色 法编大于10的号码时， 法编大于10的号码时， 10的号码时 我们规定顺时针旋转， 我们规定顺时针旋转， 后一位必需大于前一位 数，例如：可以编，12， 例如：可以编，12， 13，14……19，但不能 19， 13，14 19 编10，11，20，21，22， 10，11，20，21，22， 30，31，32，33， 30，31，32，33，等， 以此类推。100以内最 以此类推。100以内最 大能编89号 大能编89号。 （可编 89 46个鼠） 46个鼠） 个鼠
三、实验内容
1. 实验动物的选择、性别鉴定、随机分组及标记。 实验动物的选择、性别鉴定、随机分组及标记。 实验动物的抓取和固定 抓取和固定。 2. 实验动物的抓取和固定。 3. 实验动物的染毒：灌胃，肌内、腹腔、尾静脉、 实验动物的染毒：灌胃，肌内、腹腔、尾静脉、 皮下、皮内注射。 皮下、皮内注射。 实验动物的采血：鼠尾尖采血法、 4. 实验动物的采血：鼠尾尖采血法、眼眶静脉丛采血 断头采血法等。 法、断头采血法等。 实验动物的处死：颈椎脱臼法、断头法、 5. 实验动物的处死：颈椎脱臼法、断头法、急性大失 血法（摘取眼球法）、空气栓塞法等。 ）、空气栓塞法等 血法（摘取眼球法）、空气栓塞法等。
尸检毒理检测的流程和注意事项
尸检毒理检测的流程和注意事项
嘿呀！今天咱们就来好好聊聊尸检毒理检测的流程和注意事项哇！
首先呢，1. 收集样本可是关键的第一步呀！这包括血液、尿液、胃内容物等等呢。
哎呀呀，可不能马虎，得小心翼翼地采集，确保样本不受污染，这可太重要啦！
接下来，2. 样本的处理和保存也不能掉以轻心哟！处理样本的时候要按照严格的标准和流程来，不能随意乱来呢。
保存样本的条件也要严格控制，温度、湿度都得恰到好处哇，不然样本变质了，那可就麻烦大啦！
然后呢，3. 分析检测方法的选择也很有讲究哇！不同的毒物可能需要不同的检测方法呀，这就得靠专业的知识和经验来判断啦。
哇，要是选错了方法，得出错误的结果，那可不得了哇！
再说说，4. 数据的解读和报告的撰写也不简单呢！解读数据的时候要仔细再仔细，不能放过任何一个小细节哟。
撰写报告更是要清晰明了，让大家都能看懂，这可不是随随便便就能搞定的哟！
还有哇，5. 整个过程中的质量控制绝对不能忽视呀！要定期检查设备是不是正常工作，检测试剂有没有过期，每一个环节都得严格把关呢！
哎呀呀，在进行尸检毒理检测的时候，注意事项也有好多好多呢！比如说，检测人员必须具备专业的知识和技能，不然怎么能胜任这么重要的工作呢？还有哇，实验室的环境要保持干净整洁，这对检测结果的准确性也有很大影响哟！另外呀，要严格遵守法律法规和伦理规
范，这可是绝对不能触碰的红线哇！
哇塞，尸检毒理检测的流程和注意事项真的是太复杂太重要啦！每一个步骤都需要我们认真对待，不能有丝毫的马虎和大意哟！。
急性毒性实验流程
急性毒性实验流程一、实验前的准备。
要做急性毒性实验啦，那可得好好准备一番呢。
首先得确定实验的对象，是小动物呢，还是其他的什么。
要是小动物的话，像小白鼠之类的，就得找个靠谱的来源，确保它们健康得很。
然后就是实验场地啦，得打扫得干干净净的，不能有什么脏东西或者干扰因素。
那些实验器材也得检查检查，像喂食管啊，注射器之类的，可不能出岔子。
还有啊，实验用到的药品得准备齐全，并且要清楚地知道它们的性质和用法，可别到时候手忙脚乱的。
二、实验动物的处理。
好啦，动物到手了，咱得好好对待它们呢。
要先给它们编号，就像给它们取个小名字一样，这样才能区分开来。
然后呢，要确定给它们喂药或者注射药物的剂量。
这个剂量可是很有讲究的，要根据不同的实验要求和动物的体重之类的因素来计算。
给动物喂药的时候，要小心一点哦。
如果是口服的药，得想办法让它们乖乖吃下去，可不能强来。
要是注射的话，那技术就得过关啦，可不能让小动物太疼了。
在这个过程中，还得观察动物的反应，看它们有没有什么异常的表现，比如是变得特别兴奋呢，还是无精打采的。
三、观察阶段。
这时候就开始认真观察啦。
观察的时间也是有规定的，不是随便看看就了事的。
要时刻盯着这些小动物，看它们的行为有没有变化。
比如说它们的活动量是不是减少了，或者是它们的饮食有没有受到影响。
还要看看它们的身体外观有没有变化，像毛发是不是变得乱糟糟的，眼睛有没有什么异样。
这个时候可不能马虎哦，哪怕是一点点小变化都可能是很重要的线索呢。
而且观察的频率也要合适，不能隔太长时间才看一次，也不能一直盯着让小动物有压力。
四、数据记录。
在观察的过程中，可别忘了记录数据呀。
这个数据记录就像是写日记一样，把看到的动物的各种表现都写下来。
什么时候开始有变化的，变化的程度是多少，这些都要清清楚楚地记录。
数据记录可不能瞎编哦，一定要实事求是。
要是记录错了，那整个实验可就白做了。
而且记录的时候也要有条理，不要写得乱七八糟的，这样以后分析数据的时候才能一目了然。
湖北毒理实验步骤
湖北毒理实验步骤简介湖北毒理实验是一项用于评估化学物质对生物体的毒性作用的实验。
在此实验中，我们将详细介绍湖北毒理实验的步骤和操作方法，以及如何分析和评估实验结果。
实验步骤1. 确定实验目的和研究问题在进行湖北毒理实验之前，首先需要明确实验的目的和研究问题。
例如，我们可能想要确定某种化合物对小鼠的急性毒性，评估其对生殖系统的潜在毒性，或者研究其对肝脏细胞的毒性。
2. 准备实验材料和设备在实验开始之前，需要准备好必要的实验材料和设备。
这些包括：•化学物质：需要测试的化合物或毒物•生物样本：如小鼠、细胞培养物等•试剂：用于实验的各种试剂，如缓冲液、染色剂等•实验设备：如离心机、显微镜、试管架等3. 制定实验方案和试验组设计在进行湖北毒理实验之前，需要制定详细的实验方案和试验组设计。
实验方案包括实验的时间、地点、样本数量、实验的重复次数等。
试验组设计包括对照组和实验组的设定，以及不同剂量或处理方式的安排。
4. 毒物给药和处理根据实验方案和试验组设计，对实验样本进行毒物给药和处理。
给药方式可以是口服、皮肤涂抹、注射等不同途径。
在给药过程中，需要注意剂量的准确性、给药的时间和频次等因素。
5. 观察和数据记录在毒物给药和处理后，需要进行观察和数据记录。
观察可以包括动物的行为、体重变化、皮肤反应等。
同时，需要定期记录这些观察数据，并注意细微差异的记录。
6. 样本采集和处理根据实验的要求，需要定期或在实验结束后采集样本进行进一步分析。
样本可以是血液、尿液、组织等。
采集后，需要根据实验需要进行适当的处理，如离心、冰冻保存等。
7. 实验数据分析和结果评估在完成实验数据的采集后，需要进行数据分析和结果评估。
可以使用统计方法对数据进行处理，计算生物学参数的平均值、标准差等。
根据数据分析结果，可以对实验结果进行评估，并得出相应的结论。
8. 结果呈现和报告撰写最后，根据实验结果和评估，可以进行结果的呈现和报告的撰写。
报告应该详细描述实验的步骤、材料、结果和结论，并进行科学分析和讨论。
甘遂炮制前后不同提取部位急性毒理实验
２２ １ 预实验 ： ．． 取小 鼠， 照估计 剂量分 成若 干组 ， 组 ４只。 按 每 以 ０２ ／Ｏ ．ｍＬ ｌｇ的容量给药 ， 组间给药浓度 以 ｌ ０倍递增 。找 出引
起 ４ ４小 鼠死 亡 的药 物 浓 度 。 进 而 以 此 浓 度 为 准 ， 立 若 干 剂 ／ 设
（） １ 甘遂生品有 毒 ， 泻下作用峻烈 ， 醋炙后泻 下作用缓 和、 毒 性降低 ， 全性 相对 较高 。已有实 验 发现 甘遂 石 油 醚、 安 乙酸 乙 酯、 氯仿部位有较强泻下作用 ， 为甘遂 泻下作用 的有效部位 。本 实验 旨在 寻找甘遂 的毒性部位 ， 进而分离 出毒性成分 ， 阐释降 为
（． １湖北 中 医药大学 ， 湖北 武 汉 ４０ ６ ； ． 北 中医药 大学 药学 院 ２０ ３０ ５ ２湖 ０ ８级硕 士研究 生 ， 北 武 汉 ４ ０６ ） 湖 ３０５
摘
要： 目的 考察 生甘遂和 醋甘遂 乙醇提取 物不 同提 取部位 的毒性 。方 法
甘遂经醋制后毒性显著降低 。
文献标识码 ： Ａ
２１ ００年 １ ０月第 ３ ２卷第 １ Ｏ期
Ｏｃ ． ０１ Ｖｏ ． ２， ｔ ２ ０． １ ３ Ｎｏ． ０ １
湖 北 中 医杂 志
Ｈｕ ｅ ｏ ｒ ａ ｏ ＴＣ ｂ ｉ ｕｎ ｌ ｆ Ｍ Ｊ ・７１ ・
甘遂炮制前后不 同提取 部位急 性毒理实验
李水清 许 康 刘艳 菊 夏 艺 ， ， ，
生药鉴定教研室陈科力教授 鉴定为 大戟科大 戟属植 物甘遂 Ｅ — ｕ
ｐ ｏｂ ｎｕ ． ． ｉ ｘＴ ＰＷａｇ的 干 燥 块 根 ） ｈｒｉ ｋ ｄ ｉ Ｎ Ｌｏ ｅ ． ｎ ａ ｓ Ｔ ｕ 。
１３ 仪 器及 试 剂 ．
毒理学实验操作规程
毒理学实验操作规程一、前言毒理学实验是评估化学物质、生物制品等对生物体潜在危害的重要手段。
为了确保实验的准确性、可靠性和安全性，制定一套科学、规范的实验操作规程至关重要。
本规程旨在为毒理学实验的开展提供详细的指导，涵盖实验设计、动物饲养、样本采集与处理、数据分析等多个环节。
二、实验设计（一）研究目的明确在开展毒理学实验之前，必须清晰地确定研究目的。
是评估物质的急性毒性、慢性毒性，还是致畸、致癌、致突变等特殊毒性？明确的目的将指导后续实验方案的制定。
（二）实验动物选择根据研究目的和物质特性，选择合适的实验动物。
常用的实验动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、兔子等。
要考虑动物的年龄、体重、性别、健康状况等因素，以确保实验结果的代表性和可靠性。
（三）剂量设置合理设置受试物的剂量水平。
通常包括低剂量组、中剂量组和高剂量组，同时设立阴性对照组（给予生理盐水或溶剂）和阳性对照组（给予已知的有毒物质）。
剂量的选择应基于预实验结果、文献资料以及相关法规要求。
（四）实验周期确定根据研究目的和物质的预期毒性，确定实验的周期。
急性毒性实验一般为数小时至数天，慢性毒性实验则可能持续数月甚至数年。
三、实验动物饲养（一）饲养环境实验动物应饲养在符合国家标准的动物房内，保持适宜的温度、湿度、光照和通风条件。
动物笼具应定期清洁和消毒，以防止疾病传播。
（二）饲料和饮水提供符合动物营养需求的饲料和清洁的饮水。
饲料应经过质量检测，不含可能影响实验结果的污染物。
饮水应定期更换，确保水质卫生。
（三）动物健康监测定期对实验动物进行健康检查，观察其外观、行为、饮食和排泄等情况。
发现异常应及时隔离和处理，以避免对实验结果产生干扰。
四、受试物的准备与给予（一）受试物的处理受试物应进行纯度分析和质量检测，确保其性质稳定。
对于固体受试物，需研磨成均匀的粉末；液体受试物应进行浓度调整和均匀混合。
（二）给予途径根据实验要求和受试物的特性，选择合适的给予途径，如经口灌胃、腹腔注射、吸入、皮肤涂抹等。
毒理学实验
试验目的
• 确定化学物对哺乳动物皮肤局部是否有刺 激作用或腐蚀作用及其程度， 激作用或腐蚀作用及其程度，为制定防护 化学物对皮肤的刺激保护措施提供依据。 化学物对皮肤的刺激保护措施提供依据。
• 皮肤刺激性 皮肤刺激性(Dermal Irritation)：皮 ： 肤涂敷受试样品后局部产生的可逆性炎性 变化。 变化。 • 皮肤腐蚀性 皮肤腐蚀性(Dermal Corrosion)：皮肤 ： 涂敷受试样品后局部引起的不可逆组织损 伤。
试验的基本原则
• 将受试物一次 或多次)涂敷于受试动物的 将受试物一次(或多次 涂敷于受试动物的 或多次 皮肤上，在规定的时间间隔内， 皮肤上，在规定的时间间隔内，观察动物 皮肤局部刺激作用的程度并进行评分。 皮肤局部刺激作用的程度并进行评分。 • 采用自身对照，以评价受试物对皮肤的刺 采用自身对照， 激作用。 激作用。急性皮肤刺激性试验观察期限应 足以评价该作用的可逆性或不可逆性。 足以评价该作用的可逆性或不可逆性。
(3)豚鼠：豚鼠胆小易惊，在抓取时要稳、 豚鼠：豚鼠胆小易惊，在抓取时要稳、 豚鼠 迅速。用手掌迅速扣住鼠背， 准、迅速。用手掌迅速扣住鼠背，抓住其 肩胛上方，以拇指和食指环握颈部， 肩胛上方，以拇指和食指环握颈部，另一 只手托住臀部即可。 只手托住臀部即可。 (4)兔：用右手抓住兔颈部的毛皮提起，然 兔 用右手抓住兔颈部的毛皮提起， 后左手托住其臀部或腹部，让其体重的大 后左手托住其臀部或腹部， 部分重量集中在左手上。 部分重量集中在左手上。注意不要抓取双 耳或抓提腹部。 耳或抓提腹部。
近交系： ① 近交系：纯品系 杂交群： 代 ② 杂交群：F1代 ③ 封闭群：5年内，随机交配 封闭群： 年内 年内， 遗传均一性： 遗传均一性： 一种毒物固定使用同种品系
实验室毒品鉴定基本程序
(7)液体。
若为混合品，需混合均匀后取样，若为纯品则直接取样。
液体取样数量为5~ 10ml。
(8)植株。
随机取10~ 15株。
(四)多包装毒品的采集规则先检查各包的外包装、颜色及形态，将其进行分类，按以下原则取样：(1)小于10包，所有包装取样。
然后按单包装取样规则和方法取样。
(2) 10 N100包，任意10包取样。
然后按单包装取样规则和方法取样。
(3)大于100包，总数开平方后取最大整数取样。
然后按单包装取样规则和方法取样。
生物检材的采样：对毒品依赖者，采取其血液、头发、指甲、24小时内的尿液、呕吐物等。
，对口服中毒死亡者，取其全部胃、胃内容、尿及胆汁，肝、脑、肺各100~ 200g，血液50~ 300ml，肾一只。
注射中毒致死者，除按口服中毒死亡提取检样外，还要取注射部位肌肉及非注射部位肌肉各20～30g，后者供对照使用。
要注意采取空白样品和已知样品对照。
(五)检材的包装1.包装材料(器皿)包装检材的容器要洁净。
固体样品要使用公安机关专门的物证袋进行包装，液体样品选用干净无毒的塑料小瓶包装。
无论采用何种包装材料，所用包装材料必须是一次性的，而且密封条件要好，无漏，保证检材的独特性和专一性。
2.包装方法对检材的包装要求主要是，要密闭、不漏和适于储藏，且不能改变检材本身的状态。
在包装时必须注意以下几点：(1)检材的包装必须严密，严格遵守司法程序，在有人监督的情况下完成。
(2)检材包装材料上必须写清标签，注明检材名称、提取时间、重量、案件号、提取人等。
(六)毒品的管理对于查获的可疑物，办案单位除了及时送检的样品外，剩余的可疑物应称量进行封存并及时交由专库进行保存，由两人以上专人共同保管，保证样品的完好无损和司法程序的顺利进行。
(1)在案件现场收缴毒品时，应当严格执行《刑事诉讼法》的有关规定，充分获取、及时固定有关证据。
除特殊情况外，对收缴的毒品一般要当场称量、取样、封存，当场开具《扣押物品清单》，责令毒品犯罪嫌疑人当场签名，并由现场两名以上侦查人员签字。
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湖北毒理实验步骤
一、背景介绍
湖北毒理实验是一项重要的化学实验，旨在测试不同化学物质对生物体的毒性和安全性。
该实验通常在化学课程中进行，以帮助学生了解化学物质对人类和环境的影响。
二、实验材料
1. 不同浓度的化学物质（例如盐酸、氢氧化钠等）
2. 实验动物（例如小白鼠或小鸟）
3. 实验设备（例如试管、滴定管、显微镜等）
三、实验步骤
1. 准备实验动物：将小白鼠或小鸟放入适当大小的笼子中，并给予足够的食物和水。
2. 准备实验样品：制备不同浓度的化学物质溶液，通常使用盐酸和氢氧化钠作为测试样品。
3. 给动物注射样品：将不同浓度的样品注射到动物体内。
每个组应包括至少三个动物，以确保结果准确可靠。
4. 观察动物反应：观察动物在注射后是否出现异常反应，如呕吐、疲惫等。
如果有异常反应，则必须立即停止实验并给予治疗。
5. 收集数据：记录每个组的动物的反应，并计算出每个组的平均反应
时间和死亡率。
6. 分析数据：根据收集到的数据，分析不同浓度的化学物质对动物的
毒性和安全性。
四、实验注意事项
1. 实验过程中必须佩戴适当的防护设备，如手套、护目镜等。
2. 操作化学品时必须小心谨慎，避免溅出或吸入有害气体。
3. 实验动物必须得到妥善照顾，确保其健康和福利。
4. 实验结束后，必须正确处理化学废弃物和实验动物遗体。
五、实验结果分析
1. 根据收集到的数据，可以绘制出不同浓度样品对动物反应时间和死
亡率的图表。
2. 通过分析图表，可以确定不同浓度样品对动物毒性和安全性的影响。
例如，在低浓度下，样品可能只会引起轻微反应；而在高浓度下，则
可能导致严重伤害或死亡。
六、实验意义
湖北毒理实验是一项重要的化学实验，可以帮助人们了解化学物质对
生物体的毒性和安全性。
通过该实验，人们可以更好地理解化学品的
使用和处理方法，以确保人类和环境的健康和安全。