大鼠劲动脉球囊损伤模型步骤及说明

二种球囊导管建立大鼠颈动脉损伤模型的对比研究

周音频，黄岚，李爱民，宋耀明，晋军，崔斌
（三军医大学新桥医院全军心血管病研究所，庆第重４０３）００７
【要】目的探讨二种不同球囊导管建立大鼠颈动脉损伤模型效果的对比。法雄性ｗｉａ大鼠３摘方ｓｒｔ６只随机分成３组：照组、ＴＡ组和Ｆｇｒｙ组。改制的ＰＡ球囊导管和Ｆｇｒｙ球囊导管分别建立二组大鼠颈动脉球囊损对ＰＣｏａｔ用ＴＣｏａｔ伤模型，后１损伤血管段标本分别进行扫描电镜、镜和免疫组化检查，较３组的内皮剥脱效果、术４天光比内膜／中膜面积和ＰＮＡ阳性细胞指数。结果与Ｆｇｒｙ球囊导管损伤的效果比较，制的ＰＣ球囊导管建立大鼠颈动脉损伤模Ｃｏａｔ改ＴＡ
ｇｏｐａｄｏａｔｇｏｐＷｈｎｔｅｒｓｌｓｎｏｈｒｕｓｒｕｎＦｇｒｙｒｕ．ｅｈｅｕｔｉｂｔｇｏｐｗｅｅｏｐｒｄｒｃｍａｅｗｉｔｅｃｎｒｌｒｕｔｈｏｔｏｇｏｐ，ｓｇｉｃｎｈｉｎｆａｔｉ
维普资讯
３２４
西部医学２００７年５月第１卷第３期ＭｅｓＣｉａＭａ０７Ｖ１１，ｏ３９ｄＪＷｅｔｈｎ，ｙ２０，ｏ．９Ｎ．
二种球囊导管建立大鼠颈动脉损伤模型的对比研究

国产球囊导管制作大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型及特性的研究(精)

国产球囊导管制作大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型及特性的研究摘要：目的探讨国产2.0F球囊导管取代进口2F Fogarty球囊导管致大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型的特点及可行性。

方法用国产2.0F球囊导管建立大鼠主动脉内皮剥脱模型，分别采用组织形态学和免疫组织化学方法，观察大鼠血管内皮剥脱后内膜增生的情况及血管平滑肌细胞(VSMC)表型标志基因SM-肌动蛋白(SMα-actin)、增殖细胞核抗原(PCNA)及Ⅰ型胶原(collagenI)的表达活性。

结果与假手术组比较，术后模型7天组内膜增生不明显，SMα-actin及PCNA表达也均不明显；14天内膜有轻度增厚，SMα-actin及PCNA表达均明显增强；21天内膜呈进行性弥漫性增厚，SMα-actin表达仍明显增高，但PCNA表达不明显。

模型7天、14天、21天组collagenⅠ表达与假手术组比较，差异无显著性(p＞0.05)。

结论国产2.0F球囊导管致大鼠主动脉损伤后，血管内膜增生引起再狭窄以14～21天较为明显，细胞增殖也明显，表明其可以取代进口2F Fogarty球囊导管运用于血管内膜实验。

关键词：球囊导管；血管平滑肌细胞；形态计量学；SM-肌动蛋白；增殖细胞核抗原；Ⅰ型胶原经皮冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty, PTCA)能明显减轻心血管疾病的症状，给患者带来福音。

但术后的再狭窄(restenosis, RS)发生率仍然居高不下，影响了PTCA的远期疗效。

球囊扩张后再狭窄的发生机制包括血管弹性回缩，损伤部位血栓形成，血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)增殖、迁移和细胞外基质积聚等[1]，这些都是PTCA后再狭窄重要的病理生理学基础。

目前，有关防治PTCA后再狭窄的发生发展是心血管疾病领域的热点问题。

由于进口的球囊导管价格十分昂贵，且很难匹配应用于小动物模型，为建立可靠、价廉的方法，我们采用国产2.0F球囊导管取代进口的球囊导管，建立大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型，并对该模型的特点及可行性进行了研究。

大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞增生性衰老的实验研究

苏海门市碧云天生物技术研究所；全反式维甲酸片，东良福山制药有限公司；皮冠状动脉球囊成形球囊导管，ｏｄｓ司；经Ｃｒｉ公显微摄影系统，日本ＯＹＭＰＬＵＳ公司；ＭＩＡＳ一２０００图像分析系统，ＪＪ大智胜软件股份有限公司。四ＩＩＩＩ
盐酸酒精分化；自来水冲洗１ｎ１ｎ脱水、明、 ⑩ ０ｍｉ～５ｍｉ；透封片、检。镜
剂盒，海肯强仪器有限公司；老相关性８乳糖（ｅｅｃｎｅ上衰半ｓｎｓｅｃ —
ａｓｃａｅｓｏｉｔｄ—ｐ—ｇｌｃｏｉａｅＳ一口一Ｇａａａｔｓｄｓ，ＡＤ免疫组化试剂盒，江
１材料与方法
ａｍ，石蜡包埋。
１５免疫组织化学染色．
采用ＳＰ法实验：脱蜡、化，ＰＳ ① 水Ｂ
洗２次或３次，次５ｍｉ；３ＨＯ（０甲醇）加在ＴＭＡ每ｎ ② ８滴上，温静置１ｎ ③ ＰＳ洗２次或３次，次５ｍｉ，原修室０ｍｉ；Ｂ每ｎ抗复；ＰＳ洗２次或３次次５ｒｉ，加正常山羊血清封闭 ④ Ｂ每ｎ滴ａ
液，室温２ｎ甩去多余液体；０ｍｉ。 ⑤滴加一抗５Ｉ室温静置１Ｏ”，，
ｈ或者４℃ 过夜或者３ ℃ １ｈ４ ℃ 过夜后需在３ ℃复温４７，７５ｍｉ；ＰＳ洗３，次５ｍｉ，加二抗４Ｌ５Ｌ，温ｎ⑥ Ｂ次每ｎ滴Ｏ～Ｏ室静置，３或７℃ １ｈ ⑦二抗中可加入００的ｔｅｎ一２。ＰＳ；．５ｗｅ０Ｂ

球囊损伤术建立血管再狭窄鼠模型

ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｖａｓｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ３６ｍａｌｅＷｉｓｔａｒｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｓｈａｍ —ｏｐｅｒ —
ａｔｅｄｇｒｏｕｐ（ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ），１ｄａｙａｆｔｅｒｉｎｉｕｒｙｇｒｏｕｐ，３ｄａｙｓａｆｔｅｒｉｎｊｕｒｙｇｒｏｕｐ，７ｄａｙｓａｆｔｅｒｉｎｊｕｒｙｇｒｏｕｐ，１４
（Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅｃｅｎｔｅｒ，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａ
Ｍｅｄｉｃａｌｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｏｈｈｏｔ０１００５０Ｃｈｉｎａ）
到最大。结论
窄的需要。
利用ＰＴＣＡ球囊导管成功建立血管再狭窄鼠模型，方法科学，能满足研究血管损伤后再狭
［关键词］颈动脉损伤；疾病模型；再狭窄；大鼠
［中图分类号］Ｒ５４３［文献标识码］Ａ［论文编号］１００４ — ０９５１（２０１４）ｌＯ一１１５９ — ０４
型，用光学显微镜观察损伤后不同时间血管的形态学变化。结果球囊导管损伤术使颈动脉内皮剥脱、

构建颈动脉损伤模型大鼠早期生长反应因子1及组织因子的表达

构建颈动脉损伤模型大鼠早期生长反应因子1及组织因子的表达张希;苗驰【摘要】BACKGROUND: DNA enzyme targeting early growth response factor 1 (Egr-1) mRNA (ED5) can inhibit expression of downstream target genes by specificaly inhibiting expression of early growth response factor 1. OBJECTIVE:To investigate the effects of ED5 on the expression of plasma tissue factor after vascular baloon injury in rats and the mechanism of inhibiting neointimal hyperplasia. METHODS: Intimal injury models of the left carotid artery were made in rats. Then, ED5, MgCl2 and FuGene6 were injected into the injured vascular segment. RESULTS AND CONCLUSION:At days 3, 7, 14, 21, the expression levels of Egr-1 and tissue factor in plasma were significantly down-regulated in the ED5 transfection group compared with the MgCl2 and FuGene6 groups (P < 0.01); and neointimal hyperplasia was significantly inhibited by ED5 at days 7, 14 and 21 after modeling (P < 0.01). ED5 may inhibit neointimal hyperplasia folowing baloon injury of rat common carotid artery through down-regulation of tissue factors.%背景：脱氧核酶 ED5可通过特异性抑制早期生长反应因子1的表达来阻遏下游靶基因的表达。

慢病毒载体在大鼠颈动脉球囊损伤模型中的应用及观察

慢病毒载体在大鼠颈动脉球囊损伤模型中的应用及观察杨简;江洪;李万强;陈思思;陈静;徐盛开;王继春【期刊名称】《心肺血管病杂志》【年(卷),期】2010(029)002【摘要】目的:研究携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的慢病毒转染球囊损伤大鼠颈动脉的效率和可行性,为利用慢病毒载体介导的基因治疗预防血管再狭窄奠定基础.方法:将携带GFP的慢病毒载体(pGC-LV-GFP载体)和慢病毒包装质粒供转染293T细胞,完成慢病毒颗粒包装及滴度测定.包装产生的慢病毒Lenti-GFP转染至球囊损伤的大鼠颈动脉.术后28 d,损伤及病毒转染血管段标本分别行荧光显微镜、光镜检查,评估慢病毒的转染效率及内膜增生情况,并与假手术组(Sham组)、PBS对照组进行比较.结果:经包装产生的Lenti-GFP滴度为2×109Tu/mL;术后28 d,Sham组与PBS组血管中膜弹力层仅见微弱的自发性绿色荧光,而Lenti-GFP组动脉壁全层可见较强的绿色荧光分布;PBS组与Lenti-GFP转染组大鼠损伤的颈动脉均可见明显内膜增生,内膜和中膜面积之比差异无统计学意义.结论:Lenti-GFP成功转染至球囊损伤的大鼠颈动脉,并能维持目的基因稳定长期的表达,是血管再狭窄基因治疗的理想载体.【总页数】4页(P145-147,156)【作者】杨简;江洪;李万强;陈思思;陈静;徐盛开;王继春【作者单位】430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学泌尿外科;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所【正文语种】中文【中图分类】R543.4【相关文献】1.颈动脉球囊损伤模型大鼠核转录因子κB变化与颈动脉血管内膜增生的关系 [J], 姜昕;董少红;廖玉华;刘华东2.人参皂苷Rg3对大鼠颈动脉球囊损伤模型PCNA、CyclinD1及CDK4表达的影响 [J], 陈文明;蹇明辉;赵然尊;石蓓3.大鼠颈动脉球囊损伤模型内膜增生过程中连接蛋白的变化 [J], 潘乐门; 陈帆风; 苏翔; 杨法镜4.低分子肝素对颈动脉球囊损伤模型大鼠AngⅡ、HB-EGF表达及内膜增生的影响[J], 赵治涛;肖珂青5.大鼠颈动脉球囊损伤模型的建立和损伤血管的组织学观察 [J], 王晓军;崔连群;刘继东;王敏;盖玉生;李峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

17--AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响的开题报告

17--AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增
殖的影响的开题报告
题目：17-AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响
研究背景：颈动脉球囊损伤是一种常见的心血管疾病，会导致血管狭窄、血栓形成等症状，严重时甚至会引起中风。

目前，治疗该疾病的主要方法是使用血管内支架，但是该方法会导致血管再狭窄和血栓形成等并发症。

因此，寻找一种新的治疗方法对于治疗颈动脉球囊损伤非常重要。

研究目的：探究17-AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制。

研究方法：采用体外培养颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞，并添加不同浓度的17-AAG，使用MTT法检测细胞增殖情况。

同时，采用Western blot法检测17-AAG对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。

预期结果：研究结果预计表明17-AAG可以抑制颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞的增殖，同时通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的活性实现其抑制作用。

结论和意义：本研究有望为寻找一种新的治疗方法提供实验基础，为治疗颈动脉球囊损伤提供理论和实践依据。

球囊损伤术

大鼠动脉粥样硬化模型的复制——腹主动脉球囊损伤术1．模型目的和背景目的：动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是危害人类健康的一类疾病，是导致人类死亡的头号杀手，因此，国内外医学界对AS关注程度也日益增长。

长期以来，国内外学者对AS 的发病机制进行研究，学说甚多，但确切病因尚未完全阐明。

传统的学说如脂质渗入学说、血栓源学说、中层平滑肌细胞增生学说、巨噬细胞受体缺失学说、血流动力学学说、内皮细胞损伤学说及损伤应答和炎症学说等，其中任意一种学说均不能全面解释AS的发生与发展。

AS发病机制和治疗对策的探究成了医学研究的热点。

选择合适的动物成功建立动物模型是研究AS发病机制及探讨治疗措施的重要条件。

因此，在本模型的建立过程中，力求更贴切的模拟临床病变，为AS发病机制探讨和治疗方法的改进研究提供与临床病例最为相似的实验对象。

背景：AS是一种全身性疾病，主要累及大中动脉，基本病变是动脉内膜的脂质沉积、内膜灶状纤维化及平滑肌细胞和结缔组织增生，引起内膜灶性纤维性增厚及粥样斑块形成，使动脉壁变硬，管腔狭窄，并引起继发性病变，特别是心、脑血管等器官的缺血性病变。

动脉内膜损伤是促使AS形成的最重要危险因素，所以可以用机械性损伤动脉内膜联合高脂饮食来建立AS模型。

目前报道的机械性内膜损伤方法有两种：球囊损伤术及空气干燥术。

球囊损伤术主要造成内皮细胞的即刻剥脱，弹力板及中膜严重损伤。

2．材料与设备SD大鼠，眼科剪，眼科镊，手术剪，辅料镊，玻璃分针，手术缝合线，缝合针，止血钳，持针器，2mm球囊，大鼠手术台，棉球，纱布块，注射器，碘酒棉球，酒精棉球。

3．手术概述1）术前准备：选择健康大鼠作为实验对象，手术器械和敷料均经过121℃，30min高压灭菌，球囊采取75%酒精浸泡消毒。

2）麻醉用药：麻醉选择10%水合氯醛，剂量为0.35ml/100g体重，给药途径为腹腔注射。

3）自制拉钩：将订书钉一端和橡皮筋钩在一起并固定，订书钉另一端做45度弯曲，用于钩挂组织，将橡皮筋另一端以蛙钉固定在手术台上，可以任意调节蛙钉位置而改变牵拉的力度。

脑缺血大鼠模型具体步骤及详细说明

脑缺血大鼠模型具体步骤及详细说明实验分组随机分组：对照组，模型组，阳性药物组，受试药物组(三个浓度梯度组)实验周期24 hours, 3 days or 7 days建模方法1.15%水合氯醛麻醉大鼠，颈部备皮，消毒，插入肛温探头，保持体温在37±0.5℃。

2.颈部正中切口，暴露右侧颈总动脉，颈内动脉和颈外动脉。

使用6-0丝线在距离颈总动脉分叉4mm处结扎颈外动脉远心端，在颈外动脉穿入另一根6-0丝线，在靠近颈总动脉分叉处打一个活结。

3.使用动脉夹夹闭颈总动脉。

在距离颈总动脉分叉处3mm处的颈外动脉上剪一个小口，将一根头端处理过的0.33mm直径的尼龙线从小口中插入，进入颈内动脉，并向内插入大脑中动脉，尼龙线的插入深度距离颈总动脉分叉处约16±1mm。

4.缺血后90min拔掉线栓，用6-0丝线结扎外动脉近心端，用3-0丝线缝合颈部伤口，活力碘消毒伤口，将大鼠放在加热垫上，待清醒后放入恒温抚养箱饲养。

5.术后24h，对小鼠进行神经功能评分，然后腹腔注射15%水合氯醛麻醉大鼠，取大脑进行TTC染色和病理染色应用用于研究脑梗死的发病机制、病理生理过程和溶栓治疗1.神经功能缺失体征评分参考Longa及Bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行评分，分值越高,说明动物行为障碍越严重。

0分:无神经损伤症状1分:不能完全伸展对侧前爪2分:向对侧转圈3分:向对侧倾倒4分:不能自发行走,意识丧失2.TTC染色麻醉大鼠后，取大鼠脑组织，放入-20℃冰箱冷冻30min。

用PBS配置1% TTC（W/V），37℃水浴至TTC溶解，将冻好的脑组织切片，置于10ml TTC 溶液中，37℃恒温孵育10min。

不时翻动脑片，使组织均匀染色。

正常脑组织染色后呈鲜红色，而梗死区呈苍白色。

取脑后用4%多聚甲醛溶液固定，蔗糖溶液脱水后，经OCT包埋做冰冻切片，切片10um，做尼氏染色，可做梗死面积的评价。

尼可地尔对大鼠颈总动脉球囊拉伤模型损伤血管再内皮化的影响

尼可地尔对大鼠颈总动脉球囊拉伤模型损伤血管再内皮化的影响王宁远;赖图雅;王鑫焱;李慧颖;王威【期刊名称】《实验动物科学》【年(卷),期】2024(41)2【摘要】目的研究尼可地尔对大鼠颈总动脉球囊拉伤模型损伤血管再内皮化的影响。

方法将18只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组,分别为假手术组、对照组、实验组,每组6只,对照组和实验组行颈总动脉球囊拉伤,假手术组仅分离颈总动脉,术后对照组给予0.9%氯化钠溶液(0.5 mL/100 g),每日1次;实验组和假手术组给予尼可地尔(2 mg/100 g)灌胃,每日1次,连续14 d,取大鼠颈总动脉血管标本。

伊文氏蓝染色观察各组血管内膜损伤面积及血管再内皮化的情况,HE染色观察各组血管内膜增生及管腔狭窄程度。

结果假手术组血管内膜光滑,内皮层完整,血管内膜未见增生。

对照组球囊损伤14 d后内膜增生明显,新生内膜面积显著高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05)。

实验组球囊损伤14 d后新生内膜面积显著低于对照组,损伤血管再内皮化区域占比显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。

结论尼可地尔可能抑制大鼠颈总动脉球囊拉伤后的内膜增生,促进损伤血管再内皮化。

【总页数】5页(P1-5)【作者】王宁远;赖图雅;王鑫焱;李慧颖;王威【作者单位】中国人民解放军总医院第六医学中心心血管病医学部;内蒙古自治区鄂尔多斯市乌审旗蒙医综合医院心脏病科;中国人民解放军93658部队;中国人民解放军总医院第二医学中心心血管内科;中国人民解放军医学院【正文语种】中文【中图分类】Q95-3【相关文献】1.粒细胞集落刺激因子对高脂血症大鼠颈总动脉球囊损伤后再内皮化的影响2.缺氧预处理间充质干细胞对兔颈动脉球囊损伤后血管内皮生长因子水平及再内皮化的影响3.大鼠颈总动脉球囊拉伤所致血管狭窄模型的建立4.依维莫司对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管再狭窄的影响5.^(188)铼液体球囊血管内照射对血管损伤后再内皮化影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠新型颈总动脉球囊损伤后狭窄模型的建立及其动态病理学观察

大鼠新型颈总动脉球囊损伤后狭窄模型的建立及其动态病理学观察刘彬;程伟【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2007(17)5【摘要】目的为经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄的研究提供新型的造模方法.方法 SD大鼠24只,假手术组6只,模型组18只(分3个时相点5 d、14 d和28 d,每个时相点6只动物).用2.0 Fogarty球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型.每组动物于相应时相点麻醉心脏放血处死后,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色、TR-A02弹力纤维染色和Masson三色染色,在光学显微镜下病理观察.结果球囊损伤大鼠颈总动脉后, 5 d可见内皮细胞脱落,表面炎性细胞浸润,附壁少量血栓形成,随着时间的延长,14 d动脉内膜逐渐增厚,VSMC增殖,胶原和弹力纤维组织大量增生,28 d可见内膜明显不规则增生,管腔明显变窄.结论本实验成功的复制了球囊损伤术后血管狭窄动物模型,其病理改变与临床经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄的病理改变相似.而且该造模方法与自颈外动脉插管建立颈总动脉再狭窄模型相比失血少,创面小,操作简便迅速,有利于提高手术成功率.【总页数】4页(P269-271,前插1)【作者】刘彬;程伟【作者单位】湖南中医药高等专科学校,株洲,412012;湖北中医学院附属医院心内科,武汉,430061【正文语种】中文【中图分类】R541.4【相关文献】1.益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预 [J], 刘彬;程伟;刘华峰2.大鼠颈总动脉球囊拉伤所致血管狭窄模型的建立 [J], 杨波;吴冰;唐俊明;杨建业;曹腾;王家宁3.大鼠颈总动脉球囊损伤模型建立及其动态病理学和P27的变化 [J], 钟一鸣;钟华平;廖伟;曾祥辉4.依维莫司对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管再狭窄的影响 [J], 宁宏洁;张金盈;王小芳;冯日昇5.益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预 [J], 刘彬;程伟;刘华峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HO-1减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生

㊀㊀作者单位:１０００５０㊀首都医科大学附属北京天坛医院血管外科(杨根欢㊁汪岩㊁廖鹏志㊁贾玉龙)ꎻ１０００８４㊀北京ꎬ清华大学医学院基础医学系(姚荣彦)通讯作者:贾玉龙ꎬ电子信箱:ｄｒｊｉａ＠ｓｉｎａ.ｃｏｍＨＯ－１减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生杨根欢㊀姚荣彦㊀汪㊀岩㊀廖鹏志㊀贾玉龙摘㊀要㊀目的㊀探讨血红素加氧酶－１(ＨＯ－１)能否减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生ꎮ方法㊀２０只雄性ＳＤ大鼠随机分为正常并注射生理盐水组㊁球囊损伤并注射生理盐水组ꎬ球囊损伤并注射氯化血红素组㊁球囊损伤并注射锌原卟啉组ꎮ建立大鼠颈动脉球囊损伤模型ꎬ１４天后取各组大鼠的颈动脉ꎮ弹力蛋白染色并计算各组大鼠颈动脉的内膜面积与中膜面积的比值(ｉ/ｍ)ꎮＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测各组大鼠颈动脉内ＨＯ－１㊁ＮＦ－κＢ㊁ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α的表达情况ꎮ结果㊀球囊损伤能够明显诱导大鼠颈动脉ｉ/ｍ值的增加(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射氯化血红素组的颈动脉ｉ/ｍ值明显低于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射锌原卟啉组的颈动脉ｉ/ｍ值明显高于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射生理盐水组颈动脉的ＮＦ－κＢ㊁ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α的表达明显高于正常并注射生理盐水组ꎮ球囊损伤并注射氯化血红素组ＮＦ－κＢ㊁ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α的表达明显低于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０５)ꎮ球囊损伤并注射锌原卟啉组ＮＦ－κＢ㊁ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α的表达明显高于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ结论㊀球囊损伤能够诱导大鼠颈动脉的炎性反应及内膜增生ꎬＨＯ－１能够减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生ꎮ关键词㊀血红素加氧酶－１㊀球囊损伤㊀炎性反应㊀内膜增生中图分类号㊀Ｒ３６４㊀㊀㊀㊀文献标识码㊀Ａ㊀㊀㊀㊀ＤＯＩ㊀１０.１１９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７３￣５４８Ｘ.２０１８.１０.０２５ＨｅｍｅＯｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｃａｎＩｎｈｉｂｉｔｔｈｅＩｎｔｉｍａＨｙｐｅｒｐｌａｓｉａｉｎＲａｔＣａｒｏｔｉｄＡｒｔｅｒｉｅｓａｆｔｅｒＢａｌｌｏｏｎＩｎｊｕｒｙ.㊀ＹａｎｇＧｅｎｈｕａｎꎬＹａｏＲｏｎｇｙａｎꎬＷａｎｇＹａｎꎬｅｔａｌ.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＶａｓｃｕｌａｒＳｕｒｇｅｒｙꎬＢｅｉｊｉｎｇＴｉａｎＴａｎＨｏｓｐｉｔａｌꎬＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＢｅｉｊｉｎｇ１０００５０ꎬＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１(ＨＯ－１)ｏｎｉｎｔｉｍａｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａｉｎｒａｔｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｉｅｓａｆｔｅｒｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｙ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｔｗｅｎｔｙｍａｌｅｓｐｒａｇｕｅ－ｄａｗｌｅｙｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｉｎｔｏｇｒｏｕｐｓｏｆｎｏｒｍａｌｗｉｔｈｓａｌｉｎｅｉｎｊｅｃｔｅｄꎬｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｅｄｗｉｔｈｓａｌｉｎｅｉｎｊｅｃｔｅｄꎬｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｅｄｗｉｔｈｈｅｍｉｎｉｎｊｅｃｔｅｄꎬａｎｄｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｅｄｗｉｔｈＺｉｎｃｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎｉｎｊｅｃｔｅｄ.Ａｎｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂａｌｌｏｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｙｉｎｊｕｒｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄ.Ａｎｄｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｉｅｓｗｅｒｅｈａｒｖｅｓｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ１４ｄａｙｓｌａｔｅｒ.Ｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｉｎｔｉｍａｔｏｍｅｄｉａ(ｉ/ｍ)ａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＦ－κＢꎬＩＬ－１βꎬＩＬ－６ａｎｄＴＮＦ－αｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀ＴｈｅｈｅｍｉｎｏｒＺｉｎｃｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎｃｏｕｌｄｉｎｄｕｃｅｏｒｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨＯ－１ｉｎｒａｔｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｉｅｓ.Ｔｈｅｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｙｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｉ/ｍａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＦ－κＢꎬＩＬ－１βꎬＩＬ－６ａｎｄＴＮＦ－α.ＨｅｍｉｎｃｏｕｌｄｍｉｎｉｍｉｚｅｔｈｉｓｅｆｆｅｃｔｃａｕｓｅｄｂｙｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｙꎬｗｈｉｌｅＺｉｎｃｐｒｏｔｏｐｏｒ￣ｐｈｙｒｉｎｃｏｕｌｄａｇｇｒａｖａｔｅｔｈｉｓｅｆｆｅｃｔ.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＨＯ－１ｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｉｎｔｉｍａｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａｉｎｒａｔｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｉｅｓａｆｔｅｒｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｙｔｈｒｏｕｇｈａｌｌｅｖｉａｔｔｉｎｇｔｈｅｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ꎻＢａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｙꎻＩｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎꎻＩｎｔｉｍａｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ㊀㊀动脉硬化闭塞症是目前中老年人群中的常见病及多发病ꎬ主要表现为动脉管腔的狭窄甚至闭塞ꎮ其主要治疗方法是血管腔内成型术ꎬ包括球囊扩张和支架置入[１]ꎮ但是血管腔内成型术后血管的再次狭窄或闭塞却始终制约着其长期疗效[２]ꎮＨＯ－１是血红素在体内代谢的限速酶ꎬ具有重要的抗炎及抗氧化作用[３ꎬ４]ꎮ已有研究表明ＨＯ－１对血管内皮有重要的保护作用[５]ꎮ本研究阐明了ＨＯ－１能够抑制血管的炎症反应ꎬ能够减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生ꎮ材料与方法１.材料与试剂:ＳＰＦ级ＳＤ大鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司)ꎬ氯化血红素(Ｈｅｍｉｎꎻ美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司)ꎬ锌原卟啉－９(ＺｎＰＰꎻ美国Ｓｉｇ￣ｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司)㊁２Ｆ动脉取栓球囊(美国ＥｄｗａｒｄｓＬｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ公司)ꎬ弹力蛋白染色试剂盒褪黑素(美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司)ꎬＨＯ－１抗体(美国ＢＤ公司)㊁ＮＦ－κＢ抗体(美国ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司)ꎬＩＬ－１β抗体(美国ＢｏｓｔｅｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司)ꎬＩＬ－６抗体(美国ＢｏｓｔｅｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司)ꎬＴＮＦ－α抗体(美国ＢｏｓｔｅｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏ￣２９ｇｙ公司)ꎮ２.动物实验及大鼠颈动脉球囊损伤模型的制备:将２０只平均体重３５０ｇ的ＳＰＦ级雄性ＳＤ大鼠随机分为正常并注射生理盐水组㊁球囊损伤并注射生理盐水组㊁球囊损伤并注射氯化血红素组㊁球囊损伤并注射锌原卟啉组ꎬ每组５只ꎮ腹腔注射２％的戊巴比妥麻醉后ꎬ肌肉注射青霉素４０万单位ꎬ皮下注射肝素１００Ｕ/ｋｇꎮ仰卧位并固定ꎬ于颈部行正中切口ꎬ解剖出颈总动脉及颈内外动脉并套带ꎬ结扎颈外动脉的远端及其分支ꎮ分别阻断颈总动脉及颈内动脉ꎬ显微剪刀剪开颈外动脉前壁约２ｍｍꎬ通过切口插入２Ｆ的取栓球囊ꎬ至进入颈总动脉约２ｃｍꎮ将球囊内注入００５ｍｌ生理盐水ꎬ待球囊充盈后ꎬ将其拉至颈总动脉远端ꎬ如此反复操作３次ꎬ最后结扎颈外动脉的近端并缝合切口ꎮ按照实验设计方案各组分别腹腔注射氯化血红素(ＨＯ－１诱导剂ꎻ５０ｍｇ/ｋｇ)㊁锌原卟啉(ＨＯ－１抑制剂ꎻ１５ｍｇ/ｋｇ)及同体积的生理盐水ꎬ隔日１次[６]ꎮ１４天后解剖并取出各组大鼠的颈动脉ꎮ用生理盐水冲洗干净后ꎬ部分保存于液氮中ꎬ部分保存于４％的多聚甲醛中ꎬ留待后续实验用ꎮ３.弹力蛋白染色:将颈动脉在４％的多聚甲醛中固定７２ｈ后ꎬ按照常规方法行石蜡包埋并切片ꎮ将切片脱蜡并水化ꎬ然后置于弹力蛋白染色工作液中１０ｍｉｎꎬ蒸馏水冲洗３次ꎬ每次１０ｍｉｎꎮ再将切片置于三氯化铁工作液中分化１~２ｍｉｎꎬ自来水冲洗ꎬ显微镜下观察ꎬ弹力蛋白被染至黑色ꎮ再将切片置于９５％乙醇中脱碘１ｍｉｎꎬ蒸馏水冲洗３次ꎬ每次２ｍｉｎꎮ然后置于ＶａｎＧｉｅｓｏｎ溶液中染色３~５ｍｉｎ后用９５％的乙醇冲洗ꎮ常规进行脱水㊁透明及封片ꎮ将弹力蛋白染色切片置于光学显微镜下拍照(ˑ１００)ꎮ用Ｉｍ￣ａｇｅ－ＰｒｏＰｌｕｓ６.０软件(美国ＭｅｄｉａＣｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ公司)测量其内膜面积和中膜面积ꎬ内膜面积与中膜面积的比值(ｉ/ｍ)代表血管内膜的增生程度ꎬ用于统计学分析ꎮ４.Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测:将液氮中保存的大鼠颈动脉标本置于研钵中ꎬ加入６００μｌＳＤＳ组织裂解液并研磨成匀浆ꎬ提取组织蛋白后并测定蛋白浓度ꎮ将２０μｇ总蛋白上样ꎬ１２０Ｖ恒压电泳约９０ｍｉｎꎬ３２０ｍＡ恒流转膜ꎬ５％脱脂牛奶室温封闭６０ｍｉｎꎬ４ħ一抗孵过夜(ＨＯ－１１ʒ２０００ꎻＮＦ－κＢ１ʒ２０００ꎻＩＬ－１β１ʒ５００ꎻＩＬ－６１ʒ５００ꎻＴＮＦ－α１ʒ５００)ꎬ洗膜后室温下二抗(浓度１ʒ５０００~１ʒ１００００)孵育６０ｍｉｎꎬ然后辣根过氧化物酶化学发光法检测目的蛋白ꎮＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测结果用ＡｌｐｈａＥａｓｅＦＣＳｙｓｔｅｍ软件(美国ＡｌｐｈａＩｎｎｏｔｅｃｈ公司)进行分析ꎬ计算出目的蛋白与相应内参的灰度值比值ꎬ用于统计分析ꎮ５.统计学方法:应用ＳＰＳＳ１７.０统计学软件进行统计分析ꎬ计量资料以均数ʃ标准差(ｘʃｓ)表示ꎬ两样本均数间的比较采用ｔ检验ꎬ多样本均数间的比较采用方差分析ꎬ以Ｐ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ结㊀㊀果１.各组大鼠颈动脉ｉ/ｍ值情况:球囊损伤并注射生理盐水组颈动脉的ｉ/ｍ值显著高于正常并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射氯化血红素组颈动脉ｉ/ｍ值显著低于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射锌原卟啉组颈动脉ｉ/ｍ值显著高于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<００１ꎬ图１)ꎮ图１　不同处理组大鼠颈动脉的弹力蛋白染色和内中膜比值Ａ.正常＋生理盐水组ꎻＢ.球囊＋生理盐水组ꎻＣ.球囊＋氯化血红素组ꎻＤ.球囊＋锌原卟啉组ꎻ与正常＋生理盐水组比较ꎬ∗Ｐ<０.０１ꎻ与球囊＋生理盐水组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０１２.各组大鼠颈动脉内ＨＯ－１的表达情况:球囊损伤并注射生理盐水组颈动脉ＨＯ－１的表达高于正３９常并注射生理盐水组(Ｐ<０.０５)ꎮ球囊损伤并注射氯化血红素组颈动脉ＨＯ－１表达显著高于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射锌原卟啉组颈动脉ＨＯ－１的表达显著低于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１ꎬ图２)ꎮ图２㊀不同处理组大鼠颈动脉ＨＯ－１表达情况与正常＋生理盐水组比较ꎬ∗Ｐ<０.０５ꎻ与球囊＋生理盐水组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０１３.各组大鼠颈动脉内ＮＦ－κＢ的表达情况:球囊损伤并注射生理盐水组颈动脉的ＮＦ－κＢ表达显著高于正常并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射氯化血红素组颈动脉的ＮＦ－κＢ表达显著低于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０５)ꎮ球囊损伤并注射锌原卟啉组颈动脉的ＮＦ－κＢ表达显著高于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１ꎬ图３)ꎮ４.各组大鼠颈动脉内ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α的表达情况:球囊损伤并注射生理盐水组颈动脉的ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α表达显著高于正常并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射氯化血红素组颈动脉的ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α表达显著低于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１)ꎮ球囊损伤并注射锌原卟啉组颈动脉的ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α表达显著高于球囊损伤并注射生理盐水组(Ｐ<０.０１ꎬ图４)ꎮ讨㊀㊀论血管腔内成型术治疗动脉硬化闭塞症的同时又对血管内皮造成了二次损伤 ꎮ这种二次损伤便图３㊀不同处理组大鼠颈动脉ＮＦ－κＢ表达情况与正常＋生理盐水组比较ꎬ∗Ｐ<０.０１ꎻ与球囊＋生理盐水组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０５图４㊀不同处理组大鼠颈动脉ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α表达情况与正常＋生理盐水组比较ꎬ∗Ｐ<０.０１ꎻ与球囊＋生理盐水组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０１可诱导血管内皮的增生ꎬ导致血管腔内成型术后管腔的再次狭窄[７]ꎮ本研究中应用球囊损伤大鼠的颈动４９脉便模拟了血管腔内成型术治疗动脉硬化闭塞症的过程ꎮ目前研究证实多种因素参与了血管内皮的增生ꎬ主要包括炎性细胞的浸润㊁平滑肌细胞的增值和迁移㊁血小板的黏附等[８]ꎮ而研究证实炎性损伤是血管内皮增生过程中的核心环节[９ꎬ１０]ꎮＨＯ－１是血红素在体内代谢的限速酶ꎬ也是内源性的细胞保护酶[１１]ꎮＨＯ－１属于诱导型的血红素氧化酶ꎬ细胞在氧化应激㊁内毒素㊁缺氧㊁重金属等刺激下其表达会增高[１２]ꎮ已有研究表明ＨＯ－１具有重要的抗炎㊁抗氧化㊁抗凋亡等生物学功能[１３]ꎮ它在很多血管相关性疾病中发挥着重要的保护作用ꎬ如动脉粥样硬化㊁高血压等[１４]ꎮ氯化血红素是ＨＯ－１的诱导剂ꎬ目前临床上主要用于治疗卟啉病及贫血等ꎬ无明显毒性不良反应[１５]ꎮ本研究中球囊损伤明显导致了大鼠颈动脉的内膜增生ꎬ注射氯化血红素后内膜增生明显减轻ꎬ而应用锌原卟啉后则加重了内膜增生ꎮ同时氯化血红素成功诱导了ＨＯ－１的合成ꎬ锌原卟啉明显抑制了ＨＯ－１的合成ꎮ这表明ＨＯ－１能够显著减轻球囊损伤诱导的大鼠颈动脉内膜增生ꎮ进一步的炎性因子ＮＦ－κＢ㊁ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α表达的检测ꎬ表明ＨＯ－１是通过抑制炎性反应而减轻球囊损伤诱导的大鼠颈动脉内膜增生ꎮＮＦ－κＢ是一重要的炎性介质ꎬ它的表达增多能够激发一系列的炎性反应并诱导包括ＩＬ－１β㊁ＩＬ－６㊁ＴＮＦ－α在内的大量炎性因子的表达ꎬ这与本研究结果一致[１６ꎬ１７]ꎮ另外本研究观察到球囊损伤能够诱导正常颈动脉中ＨＯ－１的表达ꎬ这可能是因为球囊对颈动脉的损伤能够引起颈动脉内ＨＯ－１代偿性的表达增高以修复此损伤ꎮ同时本研究尚表明ꎬ氯化血红素在预防血管腔内成形术后管腔的再狭窄上可能具有潜在的应用价值ꎮ参考文献１㊀ＬｉａｎｇＧＺꎬＺｈａｎｇＦＸ.Ｎｏｖｅｌｄｅｖｉｃｅｓａｎｄｓｐｅｃｉａｌｉｚｅｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｉｎｒｅ￣ｃａｎａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｅｒｉｐｈｅｒａｌａｒｔｅｒｙｃｈｒｏｎｉｃｔｏｔａｌｏｃｃｌｕｓｉｏｎｓ(ＣＴＯｓ)－Ａｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＩｎｔＪＣａｒｄｉｏｌꎬ２０１３ꎬ１６５(３):４２３－４２９２㊀ＹａｎｇＧＨꎬＬｉＹＣꎬＷａｎｇＺＱꎬｅｔａｌ.Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍｅｌａｔｏｎｉｎｏｎｃｉｇａｒｅｔｔｅｓｍｏｋｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｉｎｒａｔｃａｒｏｔｉｄａｒｔｅｒｉｅｓａｆｔｅｒｂａｌｌｏｏｎｉｎｊｕｒｙ[Ｊ].ＪＰｉｎｅａｌＲｅｓꎬ２０１４ꎬ５７(４):４５１－４５８３㊀ＹａｎｇＧＨꎬＷｕＷꎬＬｉＹＣꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｎｔｅｆｆｅｃｔｏｆｈｅｍｅｏｘｙｇｅ￣ｎａｓｅ－１ｏｎｃｉｇａｒｅｔｔｅｓｍｏｋｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｖａｓｃｕｌａｒｉｎｊｕｒｙ[Ｊ].ＭｏｌＭｅｄＲｅｐꎬ２０１５ꎬ１２(２):２４８１－２４８６４㊀ＲｙｔｅｒＳＷꎬＣｈｏｉＡＭ.Ｔａｒｇｅｔｉｎｇｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ａｎｄｃａｒｂｏｎｍｏｎ￣ｏｘｉｄｅｆｏｒｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ[Ｊ].ＴｒａｎｓｌＲｅｓꎬ２０１６ꎬ１６７(１):７－３４５㊀ＬｉＴꎬＴｉａｎＨꎬＺｈａｏＹꎬｅｔａｌ.Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ｉｎｈｉｂｉｔｓｐｒｏｇｒｅｓ￣ｓｉｏｎａｎｄｄｅｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｐｌａｑｕｅｓｉｎａｒａｂｂｉｔｍｏｄｅｌｏｆａｔｈ￣ｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＥｕｒＪＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１１ꎬ６７２(１３):１４３－１５２６㊀ＮｉＬꎬＷａｎｇＺＱꎬＹａｎｇＧＨꎬｅｔａｌ.Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ａｌｌｅｖｉａｔｅｓｃｉｇ￣ａｒｅｔｔｅｓｍｏｋｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓａｆｔｅｒｖａｓｃｕｌａｒａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙｂｙａｔｔｅｎｕａ￣ｔｉｎｇｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｉｎｒａｔｍｏｄｅｌ[Ｊ].ＴｏｘｉｃｏｌＬｅｔｔꎬ２０１６ꎬ２４５(１２):９９－１０５７㊀ＥｌｍｏｒｅＪＢꎬＭｅｈａｎｎａＥꎬＰａｒｉｋｈＳＡꎬｅｔａｌ.Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｏｆｔｈｅｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｉｅｓ:ｐａｓｔꎬｐｒｅｓｅｎｔꎬｆｕｔｕｒｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｖＣａｒｄｉｏｌＣｌｉｎꎬ２０１６ꎬ５(３):２８１－２９３８㊀ＫｕｓｈｉｍａＨꎬＭｏｒｉＹ.Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｉｎｔｈｅａｎｔｉ－ｒｅｓｔｅｎｏｔｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｆｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅｉｎａｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ[Ｊ].ＣａｒｄｉｏｖａｓｃＤｉａｂｅｔｏｌꎬ２０１７ꎬ１６(１):１２２－１３９９㊀ＷａｎｇＦꎬＬｉＣꎬＤｉｎｇＦＨꎬｅｔａｌ.ＩｎｃｒｅａｓｅｄｓｅｒｕｍＴＲＥＭ－１ｌｅｖｅｌｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｉｎ－ｓｔｅｎｔｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓꎬａｎｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＴＲＥＭ－１ｐｒｏ￣ｍｏｔｅｓｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎꎬｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｍｉｇｒａｔｉｏｎｉｎｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ[Ｊ].Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓꎬ２０１７ꎬ２６７(４):１０－１８１０㊀ＷｕＢＪꎬＬｉＹꎬＯｎｇＫＬꎬｅｔａｌ.Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｉｎ－ｓｔｅｎｔｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｂｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｌｅｓｔｅｒｔｒａｎｓｆｅｒｐｒｏｔｅｉｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒＴｈｒｏｍｂＶａｓｃＢｉｏｌꎬ２０１７ꎬ３７(１２):２３３３－２３４１１１㊀ＲｏｃｈｅｔｔｅＬꎬＺｅｌｌｅｒＭꎬＣｏｔｔｉｎＹꎬｅｔａｌ.Ｒｅｄｏｘｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｈｅｍｅｏｘｙ￣ｇｅｎａｓｅ－１ａｎｄｂｉｌｉｖｅｒｄｉｎｒｅｄｕｃｔａｓｅｉｎｄｉａｂｅｔｅｓ[Ｊ].ＴｒｅｎｄｓＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌＭｅｔａｂꎬ２０１８ꎬ２９(２):７４－８５１２㊀ＤｏｌｉｎａｙＴꎬＣｈｏｉＡꎬＲｙｔｅｒＳＷ.Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１/ＣＯａｓｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｍｅｄｉａｔｏｒｓｉｎｃｉｇａｒｅｔｔｅｓｍｏｋｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｌｕｎｇｃｅｌｌｉｎｊｕｒｙａｎｄｃｈｒｏｎｉｃｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].ＣｕｒｒＰｈａｒｍＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌꎬ２０１２ꎬ１３(６):７６９－７７６１３㊀ＫｏｚａｋｏｗｓｋａꎬＭꎬＤｕｌａｋＪꎬＪｏｚｋｏｗｉｃｚＡ.Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１－ｍｏｒｅｔｈａｎｔｈｅｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＰｏｓｔｅｐｙＢｉｏｃｈｅｍꎬ２０１５ꎬ６１(２):１４７－１５８１４㊀ＯｔｔｅｒｂｅｉｎＬＥꎬＦｏｒｅｓｔｉＲꎬＭｏｔｔｅｒｌｉｎｉＲ.Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ａｎｄｃａｒ￣ｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅｉｎｔｈｅｈｅａｒｔ:ｔｈｅｂａｌａｎｃｉｎｇａｃｔｂｅｔｗｅｅｎｄａｎｇｅｒｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｐｒｏ－ｓｕｒｖｉｖａｌ[Ｊ].ＣｉｒｃＲｅｓꎬ２０１６ꎬ１１８(１２):１９４０－１９５９１５㊀ＮｅｕｂａｕｅｒＪＡꎬＳｕｎｄｅｒｒａｍＪ.Ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ａｎｄｃｈｒｏｎｉｃｈｙｐｏｘｉａ[Ｊ].ＲｅｓｐｉｒＰｈｙｓｉｏｌＮｅｕｒｏｂｉｏｌꎬ２０１２ꎬ１８４(２):１７８－１８５１６㊀ＺａｂａｌｇｏｉｔｉａＭꎬＣｏｌｓｔｏｎＪＴꎬＲｅｄｄｙＳＶꎬｅｔａｌ.Ｃａｒｂｏｎｍｏｎｏｘｉｄｅｄｏｎｏｒｓｏｒｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１(ＨＯ－１)ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｌｏｃｋｓｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１８－ｍｅｄｉａｔｅｄＮＦ－ｋａｐｐａＢ－ＰＴＥＮ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｈｕｍａｎｃａｒｄｉａｃｅｎｄｏ￣ｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｄｅａｔｈ[Ｊ].ＦｒｅｅＲａｄｉｃＢｉｏｌＭｅｄꎬ２００８ꎬ４４(３):２８４－２９８１７㊀ＧｒａｓｓｉａＧꎬＭａｄｄａｌｕｎｏＭꎬＭｕｓｉｌｌｉＣꎬｅｔａｌ.ＴｈｅＩ{ｋａｐｐａ}Ｂｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ－{ｋａｐｐａ}Ｂｅｓｓｅｎｔｉａｌｍｏｄｕｌａｔｏｒ－ｂｉｎｄｉｎｇｄｏ￣ｍａｉｎｐｅｐｔｉｄｅｆｏｒｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｉｎｊｕｒｙ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｅｏｉｎｔｉｍａｌｆｏｒｍａｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒＴｈｒｏｍｂＶａｓｃＢｉｏｌꎬ２０１０ꎬ３０(１２):２４５８－２４６６(收稿日期:２０１８－０２－１０)(修回日期:２０１８－０３－０４)５９。

球囊损伤加高脂喂养建立大鼠髂动脉粥样硬化模型

动脉粥样硬化( Atherosclerosis, AS) 是造成心脑血管疾病的主要原因。随着对 AS 的发病机制及预防方面研究的不断深入, 迫切需要建立一种简单易行、重复性好、有效典型髂动脉 AS 动物模型。郭延松[1]等在大鼠高脂加 VD 饮食基础上行大鼠主动脉内膜损伤术获得较典型的主动脉粥样硬化模型取得成功。我们试用该方法建立大鼠髂动脉粥样硬化模型取得成功 , 现报道如下。 1 材料与方法 1. 1 实验动物分组
Establishing an Iliac Atherosclerosis Model of Rats with Balloon Injury and High- Cholesterol Diet
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组别tcmmolltgmmoll正常喂养组12502086032高脂喂养组4390031121018模型组1002121205028caea9010hetrtmnt中外医疗中外医疗中外医疗2008no21chinaforeignmedicaltreatment模型组髂动脉管腔变小内膜明显增厚内膜下大量平滑肌细胞增脂质斑块弥漫可见泡沫细胞积聚斑块底部泡沫细胞发生变性坏死内弹力层和中弹力板发生变性断裂和崩裂在内膜和中膜均出现了大量的斑块和炎性细胞浸润说明该动脉粥样硬化模型复制成功

大鼠颈总动脉球囊损伤模型建立及其动态病理学和P27的变化

大鼠颈总动脉球囊损伤模型建立及其动态病理学和P27的变化钟一鸣;钟华平;廖伟;曾祥辉【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2014(24)13【摘要】目的建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,观察损伤后动态组织病理学及P27的变化.方法应用PTCA球囊导管损伤大鼠颈总动脉,分别取术后即刻以及第7、14和28天损伤处及正常血管组织进行对照,行HE染色,观察损伤后不同时间点颈动脉的组织学变化,Western blot检测不同时间点蛋白P27的含量变化.结果建模成功率较高,达86.7％;球囊导管损伤使大鼠颈总动脉内膜剥脱和新生内膜增生,导致管腔狭窄;内皮细胞在第7天时有散在覆盖,第14天时内皮呈片状覆盖,第28天时完全覆盖;损伤后第7天,内膜已开始增生,第14～28天增生最快;P27蛋白在损伤后7d 含量最低,而后表现缓慢上升过程.结论大鼠颈总动脉球囊损伤模型成功建立,成功率显著提高;改良的方法建立颈总动脉球囊损伤模型可行,可为研究建模方法提供参考;球囊损伤后出现一系列的内膜细胞增生反应.【总页数】5页(P13-17)【作者】钟一鸣;钟华平;廖伟;曾祥辉【作者单位】赣南医学院第一附属医院心内科,江西赣州341000;赣南医学院第一附属医院心内科,江西赣州341000;赣州市卫生局,江西赣州341000;赣州市立医院,江西赣州341000【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.L-精氨酸对大鼠血管球囊损伤后病理学变化的影响 [J], 李靖若;聂晓敏;张蕾;张金盈;马冰2.大鼠新型颈总动脉球囊损伤后狭窄模型的建立及其动态病理学观察 [J], 刘彬;程伟3.双侧颈总动脉结扎致大鼠脑血流低灌注不同时程的神经功能障碍和病理学变化[J], 孙成成;刘剑刚;刘美霞;李浩;罗增刚4.大鼠胸主动脉球囊损伤后平滑肌细胞PCNA和P27表达的变化 [J], 钟志欢;褚现明;董果雄;杜日映;张社华5.环氧合酶2在高脂饮食兔颈总动脉球囊损伤后的动态变化及其与内膜增生的关系[J], 胡信群;沈向前;周胜华;祁述善;方臻飞;刘启明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞mTOR

大鼠颈动脉球囊损伤后平滑肌细胞表达(一)作者：朱政孙守刚许广莉王琼英白锋【摘要】目的探讨姜黄素对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白质S6激酶(P70S6K)在血管平滑肌细胞增殖中的作用。

方法54只雄性SD大鼠随机分为对照组、损伤组和药物干预组。

颈动脉HE染色和组织病理图像分析;免疫组织化学观察PCNA与P70S6K组织表达中的病理变化;实时定量PCR检测及PCNA的mRNA表达;ELISA测定血清白介素水平变化。

结果实验术中死亡大鼠1只，取材过程中发现动脉闭塞5只(分别为3d药物干预组和7d损伤组各1只，14和28d药物干预组各2只)。

HE染色显示14d药物干预组与损伤组相比内膜与中膜增殖厚度明显减低，组织图像分析三组之间内膜厚度差异无统计学意义，而中膜厚度差异具有统计学差异(P=0.000);免疫组化结果示对照组与损伤组及药物干预组存在差异(P=0.045);实时荧光定量及PCNA的mRNA损伤组与对照组相比具有统计学意义(P0.05);ELISA示与对照组相比姜黄素能抑制第3、7、14天药物干预组血清浓度，具有统计学意义(P均0.05)。

结论姜黄素能够抑制、及PCNA在损伤血管平滑肌细胞中的表达，并能抑制平滑肌细胞增殖，可能成为预防再狭窄的新药物。

【关键词】姜黄素;血管平滑肌细胞;白介素雷帕霉素靶蛋白;核糖体蛋白质S6激酶近年来，心血管病特别是冠心病的高发病率、高致残率和高死亡率给社会及居民造成沉重负担。

经皮冠脉介入(PCI)已成为治疗冠心病的最有效手段之一，但是其长期获益受到了血管再狭窄的限制，Odell和Garg 等〔1，2〕研究表明，支架植入术后9个月再狭窄率为5%～8%以上。

药物涂层支架使再狭窄率明显下降，但晚期支架内血栓引起了人们的关注〔3〕。

尽管临床上给予PCI术后双联甚至三联抗血小板药物，但再狭窄仍是支架置入术后预防的重点和难点。

球囊机械损伤，冠脉再狭窄的主要原因是由于血管平滑肌细胞(VSCM)的异常增殖、迁移和纤维化。

HO-1减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生

HO-1减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生杨根欢;姚荣彦;汪岩;廖鹏志;贾玉龙【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2018(047)010【摘要】目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)能否减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生.方法 20只雄性SD大鼠随机分为正常并注射生理盐水组、球囊损伤并注射生理盐水组,球囊损伤并注射氯化血红素组、球囊损伤并注射锌原卟啉组.建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,14天后取各组大鼠的颈动脉.弹力蛋白染色并计算各组大鼠颈动脉的内膜面积与中膜面积的比值(i/m).Western blot法检测各组大鼠颈动脉内HO-1、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达情况.结果球囊损伤能够明显诱导大鼠颈动脉i/m值的增加(P＜0.01).球囊损伤并注射氯化血红素组的颈动脉i/m值明显低于球囊损伤并注射生理盐水组(P＜0.01).球囊损伤并注射锌原卟啉组的颈动脉i/m值明显高于球囊损伤并注射生理盐水组(P＜0.01).球囊损伤并注射生理盐水组颈动脉的NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达明显高于正常并注射生理盐水组.球囊损伤并注射氯化血红素组NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达明显低于球囊损伤并注射生理盐水组(P＜0.05).球囊损伤并注射锌原卟啉组NF-κB、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达明显高于球囊损伤并注射生理盐水组(P＜0.01).结论球囊损伤能够诱导大鼠颈动脉的炎性反应及内膜增生,HO-1能够减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生.【总页数】4页(P92-95)【作者】杨根欢;姚荣彦;汪岩;廖鹏志;贾玉龙【作者单位】100050 首都医科大学附属北京天坛医院血管外科;100084 北京,清华大学医学院基础医学系;100050 首都医科大学附属北京天坛医院血管外科;100050 首都医科大学附属北京天坛医院血管外科;100050 首都医科大学附属北京天坛医院血管外科【正文语种】中文【中图分类】R364【相关文献】1.褪黑素减轻大鼠颈动脉球囊损伤后的内膜增生 [J], 杨根欢;姚荣彦;汪岩;廖鹏志;贾玉龙2.跨膜蛋白66过表达减轻大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生 [J], 杨炯;王挺;杨怡;李枚岭;王强;陈垦;杨大春3.黄芪甲苷通过抑制血小板源性生长因子表达减轻大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生[J], 尉希清;刘帅;牛珩;胡玲爱;张金国4.淫羊藿次苷Ⅱ通过下调TGF-β1/Smads信号通路抑制球囊损伤后大鼠颈动脉内膜增生 [J], 罗超;李意奇;王俊逸;李叶丽;吕俊远;杨丹莉5.斑蝥素对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的影响 [J], 邱立强; 李雯静; 夏豪; 江洪; 徐昌武因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

上调HIF-1对球囊损伤后大鼠颈动脉舒张反应的影响

伤模型，于术后第１ｄ开始，ＭｉＬ— ｍ组给予含羞草素１０ｍ／ｋｄ灌胃，０ｓ（ｇ・）假手术组和模型组给予等量生理盐水代替。干预
１后，４ｄ取颈动脉损伤段，检测乙酰胆碱和硝酸甘油诱导的血管舒张反应。结果管对硝酸甘油的舒张反应无显著差异。结论
Ｅｅｔｏｐ－ｅｕａｎｙｏｉｉｄｃｌｆｃｏ１ｏ Байду номын сангаас ｔｔｎｏａｏｉｒｅｅｆｒｓｃｕｅｉｊｒａｓｆｃｆｕｒｇｌｔｇｈｐｘａ－ｎｕｉｅａｔｒ－ｎｄｌａｉｆｒｔａｔ— ｓｔａｃｌｎｕｙｉｒｔｓｉｂａｏｃｄａｅｎ
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西南国防医药２１０２年４月第２第４期２卷
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论著・
上调ＨＦ— Ｉｌ对球囊损伤后大鼠颈动脉舒张反应的影响
姜大春，唐旭东，张志清，尹刚，虞慎也，吴
［摘要］目的
鹏，国芹石
３Ｏ只雄性健康
ＰＡ，ａｎ，ｉｈａ６５０ＣｉａＬＹｈＳｃｕｎ，２００，ｈｎ
［ｂｔａｔＯｂｅｔｅｏｉｖｓｇｔｔｅｅｅｔｏｐ—ｒｇｌｔｇｈｐｘｎｕｉｅｆｔＡｓｃ］ｒｊｃｖＴｎｅｔａｆｃｓｆｕｉｉｅｈｆｅｕａｎｙｏｉｉｃｌａｏｉａｄｂｃｒ一１ＨＦ一１ｏｉｔｉｆ（Ｉ）ｎｄｌａｏｏａｔｎ
探讨上调缺氧诱导因子一（Ｉ１对大鼠球囊损伤后颈动脉舒张反应的影响。方法１ＨＦ一）