6第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析

775cm-1
C=C
Ar-H
32
对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱
C=C
1580cm-1 1500cm-1
C-O
1188cm-1
1640cm-1
3700~2900c m-1
1300cm-1
N-H
N-H、 O-H
C-N
33
八、TLC法
制剂辅料有干扰，采用色谱法分离后鉴别。如： 二氟尼柳胶囊。
苯甲酸及其盐
甲芬那酸
COOC2H5
COOH
羟苯乙酯
OH
SO2
丙磺舒
N(CH2CH2CH3)2
6
（二）主要性质
酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游离的 羧基 ，可用NaOH直接滴定测定其含量。 具有苯环和特征官能团,有UV和IR特征吸收。 化学性质：苯甲酸（钠）的中性溶液与 FeCl3 反应可生成赭色沉淀；丙磺舒受热可分解为 Na2SO3或SO2。
甲芬那酸 盐酸-乙醇 对氨基水 磷酸盐缓冲液 杨酸钠

七、红外吸收光谱法
典型化学键的红外特征吸收峰
峰位（cm-1） 3750～3000
峰强度 强
归属基团或化学键 O-H、N-H (胺基,羟基)
3000～2700
3300～3000 2400～2100
弱～强
弱～中等 弱～中等
C-H（烷基）、-CHO
≡CH、=CH、Ar-H C≡N
3
共性：既有苯环，又有羧基，或另有取代基 分类：

羧基直接与苯环相连
------苯甲酸类和水杨酸类

羧基为磺酸基或通过烃氧基与苯环相连
------其他芳酸及其酯类 本类药物多为固体，有一定熔点，难溶于水，
易溶于乙醇、乙醚等有机溶剂，但其钠盐易溶 于水,含游离羧基的药物可溶于NaOH。
4
第 一 节 分 类
10
三、其他芳酸类药物
（一）典型药物
CH3 Cl O C CH3 COOC2H5
氯贝丁酯
CH3 CH3 CHCH2 CH CH3 COOH
布洛芬
11
（二）主要性质
氯贝丁酯：油状液体，遇光不稳定；具有酯结构， 易水解。
布洛芬：酸性较弱；可用中性乙醇溶解，用NaOH滴定。 都有苯环和特征基团,具有UV和IR特征吸收光谱
计算tR内/tR杂，应为0.66
间氨基酚的含量%=10（C对/C样）（R样/R对） 限量0.25%
43
44
为何采用ion-pair HPLC法？
对氨基水杨酸钠具碱性，在水溶液中易离解；离子型化 合物或能解离的化合物用常规HPLC分离时，常会出现色谱 峰拖尾和保留值不稳定等问题，用离子对色谱则能解决以上 问题。离子对色谱是将离子对提取与色谱技术相结合，适用 于pKa在2-8的弱酸和弱碱性化合物的分离，其机理尚在研 究发展中。通常使用反相ion-pair 色谱，因离子对试剂在极 性流动相中易于溶解，并易于调整控制反离子的浓度和流动 相的pH值。
苯 甲 酸 类 水 杨 酸 类 其 他 芳 酸 类
苯甲酸（钠） 丙磺舒 羟苯乙酯 甲芬那酸 阿司匹林
COOH
水杨酸 对氨基水杨酸钠 双水杨酯 贝诺酯
氯贝丁酯 布洛芬
Cl
COOH OH
CH3 O C CH3 COOC2H5
5
一、苯甲酸类药物
（一）典型药物
COOH (Na)
COOH NH CH3 CH3
氯贝丁酯
异羟肟酸铁 （紫色）
22
二、重氮化-偶合反应： 具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基药物的反应

COONa OH + NaNO2 HCl COOH OH
NH2
对氨基水杨酸钠
OH + OH
贝诺酯有该 反应吗？如 何进行？
-
N
+
N . Cl
COOH OH-
COOOH OH N
N
+
N .Cl -
-萘酚
橙红色↓
COOH OH
COOOFe 2 Fe 3
FeCl3
pH4-6
紫红色 络合物
19
三氯化铁反应（苯甲酸类）： 中性 有色沉淀 R-COOH + FeCl3

COO
6
Fe3(OH)2 OOC
锗色↓
苯甲酸（钠）
(CH3CH2CH2)2NSO2 C OO 3 Fe
丙磺舒
米黄色↓
20
直接：水杨酸、对氨基水杨酸钠、双水杨酯、水 杨酸二乙胺、酚磺乙胺、对乙酰氨基酚
深蓝色
棕绿色
甲芬那酸+H2SO4
黄色 △ 绿色荧光
26

四、水解反应（酯结构可被水解）
COOH OCOCH3 + Na2CO3 COONa OH
阿司匹林
COONa OH + H2SO4
COOH OH 白色
CH3COONa + H2SO4
CH3COOH
醋酸臭气↑
27
双水杨酯 NaOH 水杨酸白色 （测定熔点）， 可溶于醋酸铵
1900～1650
1670～1500 1300～1000 1000～650
强
中等～强 强 中等～强
C=O(醛,酮,羧酸及衍生物)
C=C、C=N、N-H C-O（醇,酚,醚,酯,羧酸） 不同取代形式双键、苯环
31
水杨酸的红外吸收图谱
C=O
3300~2300cm-1
1660cm1
O-H
1610,1570 1480,1440
九、HPLC法
34
第三节 特殊杂质检查

一、阿司匹林中特殊杂质检查
COONa ONa CO2 COOH H+ OH
合成工艺
ONa
COOH （CH3CO）2O OCOCH3 + CH3COOH
35
COOH
溶液的澄清度

OCOCH 3
检查——酚、苯酯类杂质。
原理——根据这些杂质与阿司匹林的酸性强弱，利用 它们在碳酸钠溶液中的溶解度差异，规定一定量样品 在碳酸钠溶液中应澄清。
酚磺乙胺 NaOH 二乙胺臭气， 且可使湿润的红色石蕊试纸变兰色


稀盐酸
28

五、分解产物的反应
苯甲酸（白色升华物）
苯甲酸盐 ＋H2SO4 丙磺舒＋ NaOH
(含硫)

Na2SO3 ＋HNO3 → 硫酸盐 显硫酸盐反应
29

六、紫外吸收光谱法
溶剂 无水乙醇 max/ min E值 240 730-760 A值 A1/A2
42

系统适用性试验：
杂质对照液10ml + 内标溶液10ml100ml（1） 供试品溶液10ml + 内标溶液10ml100ml（2） R——取溶液（1）重复进样6次，间氨基酚与内标磺胺峰 的分离度应大于2.5； RSD——小于7%（按A杂/A内比值计算）； 测定方法： 取溶液（1）和（2）分别进样，记录色谱图
NH2
降解
HO O [O] O HO
OH
OH
OH O OH
NH2
氧化成联苯醌
红棕色
39
间氨基酚
——为反应中间体和降解产物 方法1——双相滴定法ChP(2010) 原理——利用杂质易溶于乙醚，用乙醚 提取，使两者分离，再用盐酸滴定，以 甲基橙为指示剂。

NH2 + HCl OH
NH2 . HCl
17
一、FeCl3反应 具酚羟基或水解后能产生酚羟基
的药物
OH R
Ar OH FeCl3
pH4～6
紫堇色铁配位化合物
18
三氯化铁反应（水杨酸类）： R-OH + FeCl3→紫色络合物 R-OCOCH3 +H+ → R-OH + FeCl3→紫色

COOH OCOCH3 + H 2O
15
取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测 定。如具有酚羟基的药物可用 FeCl3 反应鉴别；具芳伯氨基 的药物可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含 量。 UV IR 色谱法—制剂分析
16
第二节 鉴别试验



与铁盐的反应 重氮化-偶合反应 水解反应 分解产物的反应 紫外吸收光谱 红外吸收光谱
7
二、水杨酸类药物
（一）典型药物
COONa OH
COOH OCOCH3
COONa OH
水杨酸钠
COOH O O C OH
乙酰水杨酸
OCOCH3 COO
NH2
对氨基水杨酸钠
NHCOCH3
双水杨酯
贝诺酯
8
水杨酸类药物
F F COOH OH
二氟尼柳 diflunisal
9
（二）主要性质
酸性：基本结构为邻羟基苯甲酸，具有酸性。 水杨酸＞阿司匹林＞苯甲酸。可用酸碱滴定法测 定含量。 芳伯氨基特性 酚羟基特性：与FeCl3生成紫色配合物 水解特性：ASA、贝诺酯、双水杨酯及其制剂应 检查水杨酸；水杨酸、对氨基水杨酸钠和贝诺酯 分别检查苯酚、间氨基酚和对氨基酚
于形成分子内氢健，酸性大为增强 。
14
芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱， 所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。 芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别； 利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物
可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查
因水解而引入的特殊杂质。
第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
COOH
R
1
目的要求
1、掌握水扬酸类、苯甲酸类药物的结构 与性质、鉴别和含量测定的基本原理与方 法。 2 、熟悉芳酸类药物杂质结构、危害、检 查方法与含量限度。 3、了解本类药物的体内分析方法。
返 2回
内容提要
一、化学结构与性质 二、鉴别试验 三、特殊杂质检查 四、含量测定
12
本类药物的性质小结

溶解度： 游离酸不溶于水，溶于有机溶剂 碱金属盐溶于水，不溶于有机溶剂 酸性： pKa 3～ 6 无机强酸﹥芳酸﹥碳酸 ﹥酚 pKa 6.3 pKa 10
酸 + 碱 盐 酸 + 醇 酯
13
—X、—NO2、—OH等吸电子取代基存在使酸性增强
—CH3、—NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱 邻位取代 >间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由
37



限量
原料：0.1%； 阿司匹林片：0.3%； 阿司匹林肠溶片：1.5%； 阿司匹林栓、肠溶胶囊、泡腾片：3.0%（HPLC法）
38
二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查
合成工艺与降解反应
NH2 NH2 NH2 - CO2 H2O OH COONa
HO [O] OH O H2N
合成
OH
CH3COO
COO OH
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OH
COO OCOCH3
酚
乙酸苯酯
水杨酸苯酯
乙酰水杨酸苯酯
36
水杨酸

——为反应中间体和水解产物 乙酰化不完全、储藏过程中水解 原理——水杨酸有游离酚羟基，可与高铁离子反应， 产生紫堇色，而阿司匹林不含游离酚羟基，无此反 应。 方法——取一定量样品和水杨酸对照品与硫酸铁铵 反应，比较紫色深浅，规定样品液颜色不得较对照 品颜色深。 方法灵敏，可检出1μg水杨酸 应用范围——原料，片剂
41

方法2——离子对HPLC法USP(29)
色谱条件：
分析柱——C18；
流动相——磷酸盐缓冲液-甲醇-氢氧化四丁基铵 流速——1.5ml/min 检测波长——254nm 内标溶液——磺胺溶液（5g/ml）
杂质对照液——间氨基酚溶液（12g/ml）
供试品溶液——对氨基水杨酸钠样品液（6.9mg/ml）
N
23
直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡 因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、 贝诺酯
24
甲芬那酸
COOH NH H3C COOH NH H3C N CH3 + N NO2
+
CH3
+ N N
NO2
NaOH
对-硝基苯 重氮盐
橙红色
25
三、氧化反应
+K2Cr2O7
水杨酸 [鉴别] ChP（2000） （1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫
堇色。
间接：阿司匹林、贝诺酯
阿司匹林 [鉴别] ChP（2000） （1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三
氯化铁试液1滴，即显紫堇色。
21

与羟胺、铁盐反应（其他芳酸类）：
氯贝丁酯（布洛芬）
CH3 Cl O C COOC2H5 + NH2OH HCl + 2KOH CH3 CH3 O Cl O C CH3 CH3 Cl O C CH3 C NH O O Fe/3 C NHOK + Fe3+
药物 贝诺酯
氯贝丁酯 甲醇(0.001%) (0.01%)
羟苯乙酯 乙醇(5 g/ml) 丙磺舒 盐酸-乙醇 (20g/ml)
226; 280,288
259 225,249
460; 44,31
0.48 0.67
布洛芬
0.4%NaOH
265,273; 245,271
279, 350 265, 299 0.69-0.74, 1.150.59-0.60 1.30 1.501.56
NH2
OH
乙醚相
水相
OH COONa
40
双相滴定法〔ChP（2010年版）〕
取本品，研细，称取3.0g，置50ml烧杯中 加入用熔融氯化钙脱水的乙醚25ml，用玻璃棒 搅拌1分钟，注意将乙醚溶液滤入分液漏斗中， 不溶物再用脱水的乙醚提取2次，每次25ml，乙 醚溶液滤入同一分液漏斗中，加水10ml与甲基 橙指示液1滴，振摇后，用盐酸滴定液 （0.02mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白实 验校正，消耗盐酸滴定液（0.02mol/L）不得超 过0.3ml。