组培实验室标准操作流程
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组培室标准操作程序
一生产环境
1、试验人员进入组培室要将手用肥皂洗净,必须穿工作服,包括更换拖鞋、
穿白大褂,接种人员要带帽,戴口罩。
2、工作期间,接种间要关闭房门,工作人员出入要随手关门。
3、工作过程中所产生的垃圾要及时清理,尤其是接种间,其内垃圾停留时间
不得超过4小时。
二接种程序
1、准备工作:接种人员在正式接种之前要做好准备工作,包括准备灭菌用脱脂
棉以及准备接种工具、分取培养基、接种用苗和工作台灭菌等。
1)工作台灭菌包括两步:一是上台前用紫外灯照射20分钟,前一天晚上照射即可,前提条件是保证灭菌后不再有人员进入;二是开机鼓风,正式接种前再用75%酒精仔细擦一遍。
操作人员双手也要用75%酒精擦拭。
2)培养皿的取放:从报纸里取培养皿时,一定要注意,手不能接触培养皿的边沿,同时要尽可能减少与培养皿的接触面,一般规定只能用双手的拇指和食指取放。
2、接(转)苗:包括取苗、切苗和接苗三步。
1)取苗:先拧开培养瓶的瓶盖(封口膜),最好一次将苗取出,取苗时,瓶口不要斜向外;双手尽量避免再瓶子或者培养皿的正上方移动,若瓶中苗数太多,一次不要全部取出,以免风干。
2)切苗:培养皿在操作台里放置不可太往外;镊子和剪子(手术刀)都不可太热,最好晾凉的,且在操作过程中,剪子(手术刀)和镊子,不可在培养瓶及培养皿正上方操作;在切苗过程中产生的垃圾可堆放在培养皿内的一侧位置上,不可弄到培养皿外。
3)接苗:培养瓶盖要倒放在操作台里,注意手不要接触到盖子及瓶子的内侧,接苗时,镊子最好不要与瓶口接触,若不小心接触到外边缘,苗弃之,接种用具重新放在灭菌器里灭菌。
一瓶内一般接5~6棵苗,不要放得太多;
组培苗在瓶内要排放均匀、整齐、美观。
3、封口、记录:瓶盖要拧紧,下台前要把品种代号、培养基类型、以及接种日
期标示到瓶上。
离开之前还要把工作台收拾干净,把接种过程中产生的垃圾清理掉,台上的物品也要摆放整齐。
Ps:接种人员每天都要统计自己的接种数量,包括转前瓶数和转后瓶数。