黑色素脂褐素染色液(尼罗蓝法)
生物学常用染色液汇总
生物学常用染色液汇总在生物学研究和实验中，常常需要使用染色液来观察和分析细胞和组织的结构和功能。
染色液可用于染色细胞核、细胞膜、细胞器、染色蛋白质等。
下面是一些生物学常用的染色液：1.血液染色液：常用的血液染色液有嗜酸性染色液、嗜碱性染色液和中性染色液。
嗜酸性染色液一般用于染色细胞核和染色体，如淡紫色的伊红染色液；嗜碱性染色液一般用于染色细胞质和细胞器，如紫色的甲基蓝染色液；中性染色液则可以同时染色细胞核和细胞质，如黑褐色的赛红染色液。
2.组织切片染色液：常用的组织切片染色液有赛红染色液、伊红染色液、溴甲蓝染色液等。
赛红染色液可染色细胞核和胞质，适用于观察组织细胞的形态和结构；伊红染色液主要染色细胞核和染色体，适用于观察细胞分裂过程和遗传物质的分布；溴甲蓝染色液可染色细胞膜和细胞器，适用于观察细胞内结构和分子分布。
3.核酸染色液：常用的核酸染色液有伊红染色液、乙酰胆碱酯酶染色液等。
伊红染色液可染色DNA和RNA，适用于观察细胞核的形态和结构；乙酰胆碱酯酶染色液可染色DNA片段或蛋白质-DNA复合物，适用于观察转录因子的结合情况和基因表达。
4.蛋白质染色液：常用的蛋白质染色液有银染色液、共染色液等。
银染色液可用于染色蛋白质条带，适用于蛋白质电泳分析；共染色液则可以同时染色蛋白质和核酸，适用于口腔上皮细胞的核蛋白检测和分析。
5.细胞膜染色液：常用的细胞膜染色液有吖啶橙染色液、荧光素DAPI染色液等。
吖啶橙染色液可染色细胞膜，适用于观察细胞膜的形态和分布；荧光素DAPI染色液可染色细胞核和细胞膜，适用于观察细胞形态和细胞数量。
6.细胞器染色液：常用的细胞器染色液有细胞色素染色液、酶染色液等。
细胞色素染色液可染色细胞色素，适用于观察细胞呼吸作用；酶染色液可染色特定酶的活性，适用于观察细胞器功能和代谢情况。
总的来说，不同的染色液在生物学研究中有不同的应用，可以通过染色观察细胞和组织的形态、结构和功能，帮助揭示生物学现象的机制和过程。
病理学技术士《专业实践能力》考前点题卷一
病理学技术士《专业实践能力》考前点题卷一[单选题]1.地衣红显色的HBsAg中有丰富的双（江南博哥）硫键，被氧化形成磺酸后而着色，使用的氧化液是A.高锰酸钾B.过碘酸C.磷酸D.铬酸E.重铬酸钾参考答案：A参考解析：地衣红显色的HBsAg中的双硫键能被高锰酸钾氧化形成磺酸后而着色。
[单选题]2.下列哪项抗原热修复方法叙述不正确A.热处理后应保持自然冷却B.任何抗原的检测都要使用该方法C.注意细胞形态结构的改变D.热处理液应保持充足E.一批抗原的检测其温度和时间应保持一定参考答案：B参考解析：并不是所有的抗原需要热修复，有的不用修复，有的需酶消化。
[单选题]3.癌和肉瘤的主要不同点在A.病人年龄B.肿瘤质地C.染色特征D.组织来源E.转移途径参考答案：D参考解析：癌和肉瘤的区别是组织来源。
[单选题]4.槟榔肝内可见A.肝小叶周边部肝细胞萎缩B.肝小叶结构破坏C.肝血窦扩张淤血，肝细胞脂肪变性D.出血性梗死E.门静脉分支扩张淤血参考答案：C参考解析：槟榔肝内可见肝血窦扩张淤血，肝细胞脂肪变性。
[单选题]5.不符合小叶性肺炎特点的是A.可由多种细菌引起B.病变多为化脓性炎症C.支气管旁淋巴结有急性炎性反应D.病灶融合多发展为肺肉质变E.可导致支气管扩张症参考答案：D参考解析：小叶性肺炎一般不会发展为肉质变。
[单选题]6.下列哪项不是坏死的结局A.溶解吸收B.分离排出C.机化包裹D.钙化E.癌变参考答案：E参考解析：癌变不是坏死的结局。
[单选题]7.尸检组织标本做化学毒物检查时标本处理方法是A.标本不洗放入干净玻璃瓶中送检B.标本用4%甲醛固定C.标本用70%酒精固定D.标本要洗干净E.标本用干净纱布包裹送检参考答案：A参考解析：标本不洗放入干净玻璃瓶中送检可以防止毒物被稀释，污染等影响检查。
[单选题]8.不符合透射电镜取材要求的是A.动作迅速B.及时固定C.机械损伤要小D.所取组织的体积要小E.取材时最好加温到60℃以上参考答案：E参考解析：电镜取材不要加温。
生物显微技术 第三章 细胞化学和组织化学
❖ 常用方法： 苏丹黑B法、油红O法、硫酸尼 罗蓝法 、苏丹Ⅲ染色法等
❖ 基本要求 ⑴ 不用石蜡切片. ⑵ 固定剂一般用Formalin保存磷脂较好. ⑶ 方法: ① 物理法:脂溶性染料,不溶于水,属 偶 氮染料.常用苏丹Ⅲ,Ⅳ,苏 丹黑 ,油红O等. ② 化学方法:硫酸尼罗蓝显示脂肪酸. ③ 选择 性提取法(对照)
❖ 差不多与此同时(1900-1935年)，发现疾病组织中出 现的物质变化，更促进了化学技术在病理学染色方法 中的应用，也丰富了在显微镜下显示无机物、色素、 脂类、糖类、蛋白质、核酸等物质的组织化学内容， 此后又出现了酶的组织化学等。由此可见，“组织化 学”一词的含意是随时代而变化的，由定位趋向于与 定量相结合的研究。
❖ 3、灌注固定法：从心血管途径将固定剂灌注到全 身或某一个器官，使细胞保持生活时的状态而不发 生移位，固定后再迅速取材。
三、制 片
❖ 涂片法、石蜡切片法、冰冻切片法 ❖ 最常使用的为恒冷箱冰冻切片法。
四、注意事项
❖ 1、实验所用的器械、器皿都必须清洁无污染。 ❖ 2、配制试剂时应使用双蒸馏水。 ❖ 3、固定、取材都应在冷的环境下进行。 ❖ 4、各种试剂的pH值都要调准，否则影响反应结果。 ❖ 5、所用试剂要纯，都必须达到分析纯(A·R级)。 ❖ 6、同时、同条件情况下做阴性和阳性对照。 ❖ 7、了解和掌握被检组织中所要测定的化学物质或
❖ 以下介绍McGee-Ruseell核固红法。 ❖ 1、操作步骤 ❖ (1) 石蜡切片常规脱蜡至水。 ❖ (2)核固红染液染色2一10分钟。 ❖ 核固红染液的配制：核固红2g，蒸馏水100ml洗涤2次，剩
脂褐素染色液(Long Ziehl-Neelsen法)
脂褐素染色液(Long Ziehl-Neelsen 法)简介：脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素，由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成，被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的。
脂褐素可见于肝脏、肾脏、心肌、肾上腺、神经细胞与神经节细胞等，多分布在细胞核周围。
由于脂褐素是由脂质和脂蛋白缓慢氧化逐步形成的，色素所处的氧化程度不同，因此应用技术证实时，组织化学反应会有所不同，因此建议应用多种不同的技术来验证色素是脂褐质。
常用的方法有PAS 法、Schmorl 高铁-铁氰化物还原法、Long Ziehl-Neelsen 法、Gomori 醛复红法、Masson-Fontana 银法等。
组成：操作步骤(仅供参考)：2、 组织固定，常规脱水包埋。
3、 常规脱蜡至水。
4、 组织切片裱贴于载玻片上。
5、 载玻片入蒸馏水轻轻清洗。
6、 入复红染色液加盖浸染，60℃水浴3h 或室温过夜。
7、 自来水洗净。
8、 入Long 酸性分化液中分化，直至背景染色被去除。
9、 流动自来水洗净。
10、 入亚甲蓝染色液复染胞核。
11、 入乙酸溶液轻轻清洗。
12、 常规脱水，常规透明，合成树脂封片。
染色结果：脂褐素、蜡样物质 棕黑色 细胞核蓝色编号 名称DJ0031 4×50mlStorage试剂(A): 复红染色液 50ml RT,避光 试剂(B): Long 酸性分化液 50ml RT 试剂(C): 亚甲蓝染色液 50ml RT,避光 试剂(D): 乙酸溶液 50mlRT 使用说明书1份背景淡红紫或淡蓝色注意事项：1、恒温控制的水浴条件下进行染色，可以得到更可靠的结果。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
黑色素脂褐素染色液(尼罗蓝法)
北京雷根生物技术有限公司
黑色素脂褐素染色液(尼罗蓝法)
简介：
黑色素属于非血源性内生色素，是一组颜色从浅棕色到黑色的色素。
这种色素通常出现在皮肤、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。
脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素，由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成，被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的。
脂褐素氧化过程是缓慢的、逐步发生的，因此色素会呈现出不同的染色反应、不同的颜色，形状和大小也变化不一。
黑色素脂褐素染色液(尼罗蓝法)利用尼罗蓝显示黑色素和脂褐素，该染色液可能对部分样本染色效果不佳，但该法操作简单。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 将实验切片及对照切片入蒸馏水清洗。
2、 入硫酸亚铁溶液浸染。
3、 蒸馏水洗4～5次。
4、 水性封固液(如甘油明胶)封固。
染色结果：
黑色素、脂褐素
深绿色 胞核 蓝色或无着色
注意事项：
1、 该染色方法对部分样本染色效果不佳。
2、 冰冻切片染色时，甘油三酯、胆固醇酯、类固醇等中性脂类染成红色或粉红色，脂肪酸、
磷脂等酸性脂肪染成蓝色。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DJ0023 Storage Lillie 尼罗蓝染色液 100ml RT 避光 使用说明书 1份。
病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结
单纯固定液甲醛：能固定类脂和脂类，但必须冷冻切。
也可固定高尔基体、线粒。
是糖的保护剂。
体除去甲醛色素的方法：Verocay法，乙醇配氨水；Schride法。
重铬酸钾Zenker，Helly，Maximov，Regaud。
苦味酸：易燃易爆，强酸，糖类；可以软化皮肤，易于切片。
不宜用火棉胶包埋。
70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。
三氯醋酸：SUSa液的主要成分，使蛋白沉淀，良好的脱钙剂。
升汞：针状结晶，组织收缩明显。
不能固定类脂和糖类。
可固定蛋白，固定后需用碘液脱汞乙醇：固定兼有脱水作用，糖原的固定，纤维蛋白和弹性纤维固定。
浓度80-95%。
醋酸：固定染色体，清楚的显示细胞核，但组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。
铬酸避光保存。
不能固定脂肪。
固定后流水冲洗大于24h。
饿酸延长固定时间，脆性增加，对染色不力。
1%高锰酸钾脱碘，固定后流水冲洗12-24h。
丙酮：酶组织化学。
丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇，对糖原无固定作用。
异丙醇：是乙醇良好的替代品，组织收缩小，硬化作用较弱；不能再用于火棉胶的包埋。
叔丁醇：脱水后可不经透明，直接浸蜡。
电镜标本中常用作中间脱水剂。
环氧己烷：不引起组织收缩和硬化，常用于植物标本制作，价格贵。
四氢呋喃：既是脱水剂，又可以作为封片溶媒。
环己酮：代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。
混合固定液B-5固定液：固定淋巴组织，配方无水醋酸钠-升汞-甲醛，染色前脱汞处理；Muller液：媒染和硬化神经组织，需常更换液体，固定作用缓慢。
Bouin液：结缔组织比较差。
不适宜长期固定（12-24h）。
固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。
Orth：胚胎，神经，脂肪均可。
需在暗处固定24h。
Carnoy液：胞质和胞核，染色体，糖原保存，尼氏体；不能保存脂类。
Helly固定液：含有氧化剂和还原剂，临时配制，久置失效。
PFG：肽类抗原固定，用于免疫电镜研究。
PLP和PLPD（含有过碘酸钠）Rossman：Zenker固定液：形态学研究常用固定液。
脂褐素——精选推荐
脂褐素
对于即含有脂质成分，又显示为棕褐色的色素称为脂褐素，常在老年人的心肌细胞，肝细胞，肾上腺皮质的网状带等地方见到，脂褐素的形成可能是由于细胞中的吞噬体的形成是由于细胞中的自噬溶酶体酶未能将某些细胞碎片消化掉，而这些细胞碎片发生了某些化学物理变化而形成了一种不溶性的小体，在上述的细胞中沉淀下来。
脂褐素可分为早期和晚期两种，早期的脂褐素由于保持了脂类的染色特性可用Ｓudan黑Ｂ法来给予显示，晚期的脂褐素由于被氧化后失去了苏丹染色的特性，固而不能用苏丹染色法来进行显示，但却可用ＰＡＳ反应或Ｓchmorl反应来显示。
（一）ＰＡＳ反应：
１、０.５％高碘酸水溶液
２、Ｓchiff氏试剂的配制
配法：取一个５００ml的三角烧瓶，装入２００ml的蒸馏水，加热至沸腾。
取出后加入１g的碱性品红，摇晃片刻，让其溶解，此时溶液为深红色。
待冷却至５０℃左右时，过滤该溶液，然后加入１Ｎ的盐酸２０ml或浓ＨＣＬ２ml，再加入１.５g的偏重亚硫酸钠，混合后塞紧瓶塞，放于暗处过夜，第二天可见溶液为淡黄色，即可加入１g活性炭，摇晃之后静置３０min过滤，此时溶液应完全无色，闻之有一股刺激气味，存放于４℃冰箱中。
步骤：
１、切片脱蜡至水，
２、０.５％或１％的高碘酸处理１０min，
３、水洗，继用蒸馏水洗，
４、于Ｓchiff氏液中避光浸染１０-２０min，
５、０.５％的偏重亚硫酸钠水溶液染３次，每次３０s，
６、流水冲洗5~１０min，
７、用明矾苏木素浅染３-５min，
８、水洗，常规处理。
结果：脂褐素呈大小不一的粉红至红色颗粒，位于细胞浆中，细胞核呈蓝色。
规培考试笔记｜特殊染色技术总结
规培考试笔记｜特殊染色技术总结【常用染色方法】•各类间叶组织染色1、结缔组织多色染色：Masson三色染色法。
2、胶原纤维染色：Van Gieson苦味酸酸性品红染色法。
3、网状纤维染色：醋酸氨银染色法。
4、弹力纤维染色：Verhoeff铁苏木素染色法。
5、横纹肌染色：Mallory磷钨酸-苏木素（PTAH）染色法。
•神经组织染色1、尼氏小体染色：硫堇染色法。
2、神经元和神经纤维染色：Bielschowsky改良法。
3、神经髓鞘染色：Weil染色法。
4、神经胶质细胞染色：Cajal神经胶质细胞染色。
5、能同时显示髓鞘和尼氏小体的染色方法是Luxolfastblue染色法。
•各类聚集物质染色1、脂类物质染色：苏丹Ⅲ染色法。
2、黏液物质染色：过碘酸雪夫染色（PAS染色），又称糖原染色。
3、黑色素染色：氨银染色法（Masson-Fontana染色法）。
4、淀粉样物质染色：刚果红特殊染色法。
•病原菌染色1、抗酸杆菌染色：改良的Ziehl-Neelsen染色法。
2、真菌染色：Grocott六胺银染色法。
3、螺旋体染色：Warthin-Starry染色法。
【染色结果及用途】•各类间叶组织染色1、结缔组织多色染色用苯胺蓝复染时，胶原纤维、软骨、黏液呈蓝色；用亮绿色复染时，胶原纤维、软骨、黏液呈绿色。
肌纤维、红细胞、神经胶质呈红色，胞核呈清晰的蓝黑色。
主要用于肝脏和肾脏穿刺病理的诊断和鉴别。
2、胶原纤维染色镜下胶原纤维呈鲜红色，肌纤维胞质、神经胶质及红细胞呈黄色。
主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别诊断。
3、网状纤维染色镜下网状纤维呈黑色。
在免疫组化开展前用于癌与肉瘤、血管内皮肿瘤与血管外皮肿瘤的鉴别诊断，目前用于观察病变组织纤维化程度。
4、弹力纤维染色镜下弹力纤维呈黑蓝色。
用于显示真皮弹力纤维增生和变性等多种皮肤疾病，观察心内膜和血管壁中弹力纤维增生程度，显示肿瘤组织中的弹力纤维等。
5、横纹肌染色横纹肌纤维呈紫蓝色，胶原纤维和网状纤维呈棕红色。
染色法
各种染色方法苏木精—伊红染色法（HE染色法）石蜡切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。
细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。
胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。
例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。
胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。
活体染色活体染色是指一个获得动物或植物的细胞活组织被染色。
至于体外活体染色是指也获得动物或植物分离出来的一部分细胞活一部分组织被一种活体染色剂染色而不影响细胞活组织的生命。
活体染色与体外活体染色的主要区别：活体染色是在有机体内部，因此不在空气中而是在还原的环境中进行的，至于体外活体染色是在空气中，在氧化的环境中进行的。
所以一种真正的活体染色剂就是在一种生物的活细胞的某种构造上面的染料，但对于细胞、对于组织和对于生命本身不发生任何有害的作用。
活体染料多为碱性染料，如中性红、健那绿、次甲基蓝、甲苯胺蓝、亮焦油紫等，它们解离后带正电，其中有的染料与胞内某些结构有专一性接合。
例如，中性红染液泡系，健那绿染线粒体。
DNA-Feulgen染色方法是DNA定量测定的主要染色方法之一。
其具体反应原理是，标本经稀盐酸水解后，DNA 分子中的嘌呤碱基被解离，从而在核糖的一端出现了醛基。
Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应，形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为发色团，故可呈现出紫红色。
也就是说, DNA经稀酸水解后产生的醛基，具有还原作用，可与无色品红结合形成紫红色化合物，从而显示出DNA的分布。
脂褐素
现代医学已经证实衰老的“元凶”就是自由基——在人体的新陈代谢过程中不断产生的带有不对称电子的原 子或分子。自由基侵害人体细胞产生致衰因子MDA，致衰因子MDA进一步侵害细胞生成脂褐素，脂褐素沉积在人体 细胞，造成细胞损伤。
谢谢观看
其积累随年龄增长而增多，是衰老的重要指征之一。见于浅表皮肤者俗称“老年斑”。能用苏丹黑染色，西 夫氏过碘酸反应阳性，紫外线照射时发射的荧光波长最大值在430～490nm，可显示微弱溶酶体酶活性。
简介
简介
脂褐素的命名由来是具有颗粒状的褐黄色色素，由含有脂肪的残存物与溶酶体消化物所组成。被认为是一种 随着年纪增长或细胞操劳而增加的色素，可见于肝脏、肾脏、心肌、肾上腺、神经细胞与神经节细胞。主要分布 在细胞核周围，是脂色素的一种。
脂褐质色素与营养
脂褐质色素与营养
服用维生素E和维生素C。能有效地防止脂褐质色素氧化所产生的老年斑，也是公认的抗衰老剂。据专家研究， 每天服100国际单位维生素E和300———500毫克维生素C，连服2年，便可明显减缓动脉硬化斑和老年斑的发展。
多吃蔬菜水果。特别是常吃洋葱效果更好。因为洋葱中含有硫质和必需维生素成分，能清除体内不洁废物， 使机体保持洁净。另外，萝卜、芹菜、菠菜、杏仁、大枣，都有助于减少老年斑，延缓皮肤衰老。
坚持锻炼身体。经常锻炼能明显推迟衰老，因而也能推迟老年斑的形成。
细嚼慢咽多咀嚼。据专家调查，演员和歌唱家面部老年斑的发生，比普通人要推迟8———10年。专家称， 这应归功于他们有更多面部肌肉运动，因此，人们只要每天咀嚼口香糖10———15分钟，或在进餐时细嚼慢咽， 也可以改善面部血液循环和皮肤代谢，推迟老年斑的发生。
百度文库-黑色素染色液(硫酸亚铁法)说明书
过程说明： 1.组织常规脱水包埋，切片脱蜡至蒸馏水。 2.标本入硫酸亚铁液内恒温水浴（37℃）处理 20-30min，
蒸馏水洗 3 次，每次 1 分钟。 3.标本入铁氰化钾醋酸液恒温水浴（37℃）处理 20-30 分
钟。
4.用移液抢吸取冰醋酸溶液稍冲洗标本。 5. Van Gieson 染液滴染 2-3 分钟（Van Gieson 染液临用 前 Van Gieson A：Van Gieson B=1:9 混合，临用前混合） 6.蒸馏水速洗，无水乙醇迅速脱水，二甲苯透明。中性树 胶封固。
染色结果：
产品组成：
货号 S-1526
广州市外显子生物技术有限公司
黑色素染色液（硫酸亚铁法）
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产品说明： 黑色素属于非血源性内生色素，是一组颜色从浅棕色到
黑色的色素。这种色素通常出现在皮肤、眼睛、大脑的黑质 和毛囊中。黑色素有一个显著的物理性质，即完全不溶解于 大多数有机溶剂——几乎可以肯定是由于黑素体中已形成 的黑色素可与蛋白质紧密结合。黑色素另一个物理性质是能 够被强氧化剂漂白，尽管这个过程是缓慢的。在病理情况下， 这种色素也可出现在良性痣细胞瘤中和恶性黑色素瘤中。许 多方法可用于识别黑色素和黑色素生成细胞，该染色方法为 亚铁离子吸附法，黑色素能摄取亚铁离子，即把亚铁离子吸 附在黑色素上，形成黑色素亚铁复合物，其后铁氰化钾与亚 铁离子结合，在酸性环境下生成铁氰化亚铁即滕氏蓝反应。
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产品
硫酸亚铁液 铁氰化钾醋酸液
冰醋酸液 Van Gieson 染液
说明书
规格 储存条件
20ml RT 避光 20ml RT 避光 20ml RT 避光 20ml RT 避光
1份
皮肤组织 ×400 结果判定：黑色素呈绿色或墨绿色，胶原纤维呈红色，肌 纤维呈黄色。
Heinz小体染色液(耐尔蓝法)使用说明
Heinz小体染色液(耐尔蓝法)使用说明
货号：G1761
规格：100mL
保存：RT避光，6个月。
产品说明：
变性珠蛋白小体又称为血红蛋白包涵体，实际上是一种变性血红蛋白颗粒，一般附着在细胞膜上。
多发生在敏感个体服用药物或接触化学物质后，这些药物可导致Hb变性。
该包涵体也可见于某些不稳定的Hb患者，因此对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症以及不稳定Hb病有一定的确定意义。
该染色液染色后，呈蓝黑色小点。
该染色液仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤（仅供参考）：
1.滴加Heinz小体染色液(耐尔蓝法)1滴于载玻片一端。
2.晾干。
3.滴加待检血液1滴于干燥的染液膜上，用另一玻片角轻轻混匀。
4.加盖盖玻片，静置5～10min。
5.油镜观察。
6.计算：计数500～1000个红细胞，并计数Heinz小体阳性红细胞个数，进而计算出Heinz小体阳性率。
染色结果：
Heinz小体蓝黑色小点
红细胞黄绿色
注意事项：
1.正常人无Heinz小体或偶尔见几个细小Heinz小体。
2.一般情况下，Heinz小体存在于红细胞膜上或散在于红细胞内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
组织学研究方法(1)
组织学研究方法(1)二、组织学研究方法（一）一般光学显微镜术应用一般光学显微镜（简称光镜）观察组织切片是组织学研究的最基本方法。
取动物或人体的新鲜组织块，先用固定剂（fixative）固定（fixation），使组织中的蛋白质迅速凝固，防止细胞自溶和组织腐败。
常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等，一般常将几种固定剂配制成混合固定液，以抵消或减弱单种固定剂对组织的收缩或膨胀等缺点，达到更好固定效果。
固定后的组织块（约3～5mm3大小）用石蜡、火棉胶或树脂等包埋（embedding）成硬块，以切片机（microtome）切成5～10μm厚的组织切片（tissue section），切片贴在载玻片上经脱蜡等步骤后进行染色。
组织块也可立即投入液氮（－196℃）内快速冻结，用恒冷箱切片机（cryostat）制成冷冻切片（frozen section），这种方法制片迅速，细胞内酶活性保存较好，常用于酶组织化学染色。
血细胞和分离培养的细胞可直接涂在玻片上，制成涂片（smear）。
疏松结缔组织和肠系膜等软组织可撕成薄片铺在玻片上（铺片），牙和骨等坚硬组织可磨成薄片（磨片）。
组织切片等标本经染色、透明后，以封固剂和盖片封固，即可长期保存，镜下观察。
图1－1 坚牢绿（酸性染料）与亚甲蓝（碱性染料）的化学结构及其染色反应示意染色（staining）是用染料使组织切片着色，便于镜下观察。
天然和人工合成的染料甚多,它们都是含发色团的有机化合物，当染料具有助色团成为盐类物质，即可溶解于水并具电荷，与组织有亲合力，使组织着色。
含氨基（－NH2）、二甲氨基〔－N（CH3）2〕等碱性助色团的染料，称碱性染料（basic dye），它的盐溶液具阳电荷；含羧基（－COOH）、羟基（－OH）或磺基（－SO3H）等酸性助色团的染料，称酸性染料（acid dye），它的溶液具阴电荷（图1－1）。
组织的染色原理一般认为基于化学结合或物理吸附作用。
尼氏染色液(甲苯胺蓝法)
南京森贝伽生物科技有限公司 网址：/第1页仅供科研 版本号：180917尼氏染色液(甲苯胺蓝法)【产品组成】【保存条件】室温,避光,12个月【产品概述】神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。
在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。
尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。
染色的变异、pH 和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。
尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。
各种神经细胞内都含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。
尼氏体也存在于树突中，但不在于轴突和包体的轴丘。
尼氏体会因为生理状态的变化而变化，尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。
尼氏染色液(Nissl Stain ，甲苯胺蓝法)采用甲苯胺蓝(Toluidine blue)作为核心染料，可以用于石蜡组织切片的尼氏体染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。
【使用方法】1、新鲜组织固定于乙醇、Carnoy 固定液或10%中性福尔马林溶液后，常规脱水包埋。
2、切片厚6-8µm ，常规脱蜡至水。
3、蒸馏水冲洗。
4、切片入Toluidine blue Stain ，将染色缸置于恒温箱50-60℃浸染25-50min 。
5、蒸馏水稍冲洗。
6、入70%乙醇冲洗。
7、95%乙醇迅速分化。
分化不易控制，如果分化失败，可重复步骤4。
8、无水乙醇迅速脱水。
二甲苯透明，中性树胶封固。
【染色结果】【注意事项】1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。
生物学常用染色液汇总
常用染料介绍（一）天然染料1、苏木精苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用乙醚浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。
2、洋红洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。
单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
（二）人工染料人工染料，即苯胺染料或煤焦油染料，种类很多，应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色，苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度，并避免日光直射，也能经几年不褪色。
1、酸性品红酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
他是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
几种常用特殊染色操作过程中的要点
＋蒸馏水，洗涤沉淀（50-100ml蒸馏水） <反复/3次，沉淀不浑浊>
留下沉淀及少许上清液（4ml）
<保留沉淀物质>
逐滴＋氢氧化铵（一次1-2滴加入）
பைடு நூலகம்<边加摇晃>
至沉淀逐渐完全溶解
<无色溶液>
逐滴＋10%硝酸银，至刚出现浑浊 加氢氧化铵一至数滴，使沉淀消失
＋蒸馏水至40ml，2-8°C冰箱
<浑浊状态>
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3.高锰酸钾氧化时间不可过长，过长容易影响组织细胞形态的观 察。 4.原法中甲醛还原后用0.2%氯化金调色、5%硫代硫酸钠固定及VG 液复染，实际工作中可省略。（不进行复染结果对比同样清晰） 5.根据诊断的需要，可进行与其他（如+Masson）染色套染。
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（七）染色结果
网状纤维—黑色 胶原纤维—黄色至棕黄色 胞核—褐色
9
（五）染液的配制及保存
①0.25%高锰酸钾：（定期更换）
②2%草酸：
③2%硫酸铁铵： ④Gomori银氨液：（使用、保存几周）
棕色瓶 2-8°C冰箱保存
（染色成败的关键）
⑤4%中性甲醛：（定期更换）
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Gomori银氨液-1
10%硝酸银(3ml)+10%氢氧化钾(1ml)
<出现棕黑色颗粒沉淀>
（溶解度0.4%），溶于酒精（溶解度7.6%）。
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（四）染液的配制及保存
①5%苯酚水溶液：（临时配制）
先在恒温箱中加热溶解，吸取5ml与95ml蒸馏水混合配制。
②苯酚碱性品红液：（保存期1年）
碱性品红 无水乙醇 5%苯酚水溶液
0.5-1g 溶解
脂褐素染色
胶原纤维染色一、胶原纤维的分布和组成成分胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一，分布最为广泛，含量最多。
主要分布于真皮、腱、韧带、骨、透明软骨、动脉、肠壁、子宫和基底膜等。
胶原纤维具有韧性大，抗拉力强的特点。
胶原纤维单位主要由纤维母细胞合成。
二、胶原纤维染色的应用胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭形、纤维形细胞肿瘤的组织来源；常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出选择。
还能使用于其他的情况下，如观察动脉硬化的心脏，在HＥ切片中，心肌内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色，而作胶原纤维染色可将胶原组织和上肌明显地区分开来。
早期肝硬化用胶原纤维染色，也可使小叶之间少量增生的胶原纤维突出地显示出来。
三、胶原纤维染色的方法1.Van Gieson苦味酸酸性复红法2.Siriured染色法3.Lillie改良Van Gieson法4.Clark改良Van Gieson法5.Biebric猩红染色法6.显示胶原纤维、细胞和肌肉的新染法四、胶原纤维的常用染色：胶原纤维在HE染色法被染成粉红色，除此之外，它还可以用一些阴离子的染料来进行染色，如用淡绿可把它们染为绿色，用甲苯胺蓝可将其染为蓝色，在网状纤维染色中，如不加以处理，它又可被染为棕黄色。
常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。
在免疫细胞化学染色中，胶原纤维由于含的负电荷过多，常导致某些非特异性的染色，应特别注意。
Van Gieson（V.G）染色法I. 试剂的配制：weigert氏苏木素A液：苏木素 1g （haematoxylin）无水酒精100mlB液：30%三氯化铁4ml （ferric chloride）蒸馏水95ml盐酸1mlII．Van Gieson氏液A液：酸性品红1g（acid fuchsin）蒸馏水100mlB液：苦味酸饱和水溶液，（1.22%）（picric acid）注意事项：1、Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合，几个小时内用完，最长不得超过一天。
脂褐素三种染色方法比较
脂褐素三种染色方法比较
董愉;张芬芬;吴惠群;梁英杰
【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》
【年(卷),期】2016(025)006
【摘要】目的比较显示脂褐素的3种特殊染色方法,探讨哪一种方法更适合应用于临床病理诊断.方法分别采用三氯化铁-铁氰化钾、醛品红和PAS 3种特殊染色方法,检测HE染色石蜡切片中呈浅棕色或金黄色的颗粒是否为脂褐素.三氯化铁-铁氰化钾染色的脂褐素呈蓝黑色颗粒,醛品红染色的脂褐素呈深紫色颗粒,PAS染色的脂褐素呈红色颗粒.结果通过3种染色结果的比较,发现三氯化铁-铁氰化钾染色对比清晰,定位准.结论三氯化铁-铁氰化钾、醛品红、PAS三种染色均可用于显示脂褐素,但三氯化铁铁氰化钾染色方法优于其他两种.
【总页数】3页(P559-561)
【作者】董愉;张芬芬;吴惠群;梁英杰
【作者单位】中山大学附属第一医院病理科,广州510080;中山大学附属第一医院病理科,广州510080;中山大学附属第一医院病理科,广州510080;中山大学附属第一医院病理科,广州510080
【正文语种】中文
【中图分类】R331
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尼罗红染色
尼罗红染色目前脂类染色使用zui广泛的染料是苏丹染料，zui常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等，这种脂肪染色方法，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色的过程，经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果非常棒，根据这一原理，适当提高温度(37℃-60℃)会对组织切片产生较好的染色效果。
苏丹染料主要针对于组织切片的脂质染色，同时灵敏度也较低，且存在操作过程中试剂挥发过多，易形成背景沉淀，无法兼容活细胞等局限。
鉴于脂质化学染料有上述诸多弊端，今天给大家介绍一下尼罗红这种比较实用的脂质荧光染料。
尼罗红(也被称为尼罗蓝恶嗪酮)是一种亲脂性染料，它对环境非常敏感。
尼罗红在脂质丰富的环境中具有强烈的荧光，在以水为介质的环境中，其荧光强度非常弱。
它是非常好的活体染料，通过荧光显微镜和流式细胞术来检测细胞内脂质。
尼罗红将细胞内脂质体染成红色。
它对细胞质中的脂质体具有更好的选择性，在细胞中看见的是金黄色荧光(450-500 nm激发；>528 nm发射)而不是红色荧光(515-560 nm激发；>590 nm发射)。
这是一种很强的荧光，但是只有在疏水性环境中。
尼罗红染色IAA处理的褐藻(黄色是叶绿体，红色是脂滴)。
除了广泛使用的尼罗红，升级版脂质染色工具：Nile Green和Droplite Red跟尼罗红性质类似，它们也是在富含脂质的环境中具有强烈荧光的，而在水性介质中具有zui小的荧光。
可用荧光显微镜，流式细胞术或荧光微孔板阅读器检测细胞内脂液滴，是一类优异的活细胞脂质染料。
其中Nile Green仅染色细胞内脂液滴，具有绿色荧光，它可以与其他荧光染料一起使用，用于多重染色，弥补了尼罗红染色的缺陷。
AAT Bioquest Inc。
是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。
公司致力于光谱学检测领域，包括显色、荧光和生物发光技术。
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第1页，共1页黑色素脂褐素染色液(尼罗蓝法)
货号：G2030
规格：100ml
保存：室温避光，6个月。
产品简介：
黑色素属于非血源性内生色素，是一组颜色从浅棕色到黑色的色素。
这种色素通常出现在皮肤、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。
脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素，由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成，被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的。
脂褐素氧化过程是缓慢的、逐步发生的，因此色素会呈现出不同的染色反应、不同的颜色，形状和大小也变化不一。
黑色素脂褐素染色液(尼罗蓝法)利用尼罗蓝显示黑色素和脂褐素，该染色液可能对部分样本染色效果不佳，但该法操作简单。
操作步骤(仅供参考)：
1、将实验切片及对照切片入蒸馏水清洗。
2、入Lillie 尼罗蓝染色液浸染20-30min。
3、蒸馏水洗4～5次，每次2min。
4、水性封固液(如甘油明胶)封固。
染色结果：
黑色素
深绿色脂褐素
深蓝色或蓝绿色胞核
蓝色或无着色注意事项：
1、该染色方法对部分样本染色效果不佳。
2、冰冻切片染色时，甘油三酯、胆固醇酯、类固醇等中性脂类染成红色或粉红色，脂肪酸、磷脂等酸性
脂肪染成蓝色。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。