免疫常用小鼠
实验室常用小鼠简介(同济)汇总
基因表达基本知识
DNA一级结构上调控基因表达的元件 （基因表达盒结构）
5’-UTR promoter
enhancer 3’-UTR
enhancer promoter
UTR exon
Poly A signaling Chromosome sequence
基因敲除小鼠
基因敲除小鼠
基因修饰ES细胞的获得及囊胚注射
转基因小鼠
靶标基因表 达盒DNA
条件性基因表达小鼠
PCAG loxP A
CAT
B
MBD2 cDNA
Cre-loxP系统
pCAG-CAT-X 7100bp PacI Amp HGH PA pBR322 ori
在MBD2 CDS 两端PCR加入 PacI酶切位点 PacI PacI
loxP
PacI酶切，T4 连接酶连接
肿瘤模型
移植瘤实验：将人移植入BalB/C、祼鼠、C57BL/6、Rag1等小鼠体内。
诱导癌/肿瘤模型：使用二乙基亚硝胺 (diethy lnitrosam ine, DEN)等诱 癌剂灌胃及自由饮水，长期诱导可产生肝癌模型。
基因修饰小鼠
1、基因敲除小鼠
2、基因敲入小鼠
3、基因捕获小鼠 4、转基因小鼠 5、条件性基因表达小鼠 6、条件性基因敲除小鼠
MBD2基因敲除小鼠
A w.t. allele
1 2
b-geo
3
targeting vector
mutant allele
1 w.t. sequence Vector sequence
b-geo
3 Typing primer Typing primer exon Sequence not indicated
基于类器官方法构建正常免疫小鼠人胃癌移植瘤模型的方法和应用与流程技术
基于类器官方法构建正常免疫小鼠人胃癌移植瘤模型的方法和应用与流程技术免疫小鼠人胃癌移植瘤模型的构建是一种常用的研究方法，可以用于理解胃癌的发病机制、评估抗肿瘤药物疗效以及筛选新型抗癌药物。
本文将介绍一种基于类器官方法构建正常免疫小鼠人胃癌移植瘤模型的方法和应用与流程技术。
一、方法步骤：1.动物准备：选取适合实验的小鼠品系，例如BALB/c小鼠。
保持小鼠在特定病原体自由的环境中，并确保小鼠的体质健康。
2.细胞培养：选取适合实验的人胃癌细胞系，如AGS细胞系，进行体外培养。
细胞密度应保持在合适的范围内，一般为2x106/mL。
3.移植瘤模型建立：将培养好的人胃癌细胞注射到小鼠体内，可以选择皮下注射或脾脏注射两种方式。
注射剂量根据实验要求进行调整，一般为2x106细胞/只。
4.实验观察：观察小鼠的一般情况、体重变化和肿瘤生长情况。
通常，肿瘤移植3-4周后可以显现，并进一步生长。
5. 终点实验：当肿瘤生长到一定大小时，一般直径达到 1.5-2.0 cm，可以进行终点实验，如活检、药物治疗等。
二、应用与流程技术：正常免疫小鼠人胃癌移植瘤模型的应用非常广泛，可以用于以下方面的研究：1.胃癌发病机制研究：通过观察移植瘤的生长过程，分析胃癌发展的影响因素，如遗传、环境等。
2.药物疗效评估：可以用该模型评估抗肿瘤药物的疗效。
给予小鼠不同的药物处理后，观察肿瘤的生长情况，分析药物的抗癌效果。
3.新药筛选：利用该模型可以筛选新型抗癌药物。
给予小鼠待测药物处理后，观察肿瘤的生长情况，并评估新药的抗癌效果。
4.分子机制研究：可以在该模型中应用分子生物学和免疫学技术，探索胃癌发展的分子机制。
该方法通过种植人胃癌细胞到小鼠体内，构建了一种近似真实的胃癌模型。
在模型的构建过程中，需要严格控制动物的健康状况和细胞培养的质量，以确保实验的可靠性和一致性。
通过该模型的应用与流程技术，可以深入研究胃癌的发病机制，评估抗肿瘤药物的疗效，并筛选新型抗癌药物，对胃癌的治疗和预防具有重要的意义。
疫苗研究中的动物模型
疫苗研究中的动物模型在传染病的研究中，动物模型一直扮演着很重要的角色。
在疫苗研究中，动物模型也是必不可少的工具。
这是因为在研究疫苗的安全性和有效性时，需要通过对动物进行实验来确定疫苗是否可以预防疾病。
一、常用的动物模型1.小鼠模型小鼠是研究疾病的主要动物模型之一，因为它们容易繁殖，容易管理，而且很容易转化为人类研究。
在疫苗研究中，小鼠通常用于评估疫苗的安全性和免疫原性。
小鼠模型的优点在于能够进行大量的筛选，从而较快地找到具有良好效果的疫苗。
2. 非人灵长类动物模型对于一些疾病，人类与其他动物之间的差异比较大，这些疾病就必须使用非人灵长类动物模型来研究。
比如，研究艾滋病、肺结核等需要用猴子等动物模型进行研究。
猴子的解剖结构与人类非常相似，因此疫苗研究结果能够更可靠地转化到人类身上。
3. 大鼠模型大鼠模型通常用于研究细菌和寄生虫等微生物疾病。
大鼠的免疫机制与人类免疫机制存在一些差异，但这种模型对于一些疾病仍然很有效。
大鼠模型更接近人类，因此在疫苗研究中起到非常重要的作用。
二、动物模型在疫苗研究中的应用1. 安全性评估在疫苗未投入市场使用前，必须进行严格的安全性评估。
大量的动物模型研究作为疫苗的安全性评估过程的一部分，用于检测疫苗的剂量，剂型和副作用。
根据疫苗的不同类型，动物模型的选择和实验的内容也有所不同。
2. 疫苗免疫试验疫苗的主要目的是刺激人体的免疫系统来产生抗体对抗特定病原体。
因此，在疫苗研究中，动物模型也用于评估疫苗产生的免疫反应。
在试验中，通常会在动物体内注射特定的病原体并注射疫苗，然后检测动物体内产生的抗体水平。
3. 病原体挑战试验病原体挑战试验是一种通过注射病原体来检验疫苗效果的试验。
在实验中，动物模型先注射疫苗，感染后再注射病原体，通过比较未接种疫苗的动物和接种疫苗的动物之间感染的比较，来评估疫苗对疾病的保护作用。
在此实验中，动物模型是疫苗的关键验证方式。
三、动物模型的意义动物模型的研究可以较为准确地预测一个疫苗在人类中的效果。
小鼠免疫
小鼠免疫免疫是单抗制备过程中的重要环节之一。
即用目的抗原免疫小鼠，抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B 淋巴细胞。
一、血清效价的影响因素小鼠免疫效价的高低直接影响单抗的制备。
单抗免疫程序不同，包括免疫用的动物，抗原的性质、抗原量、免疫途径、免疫间隔时间、是否应用佐剂均会影响免疫效果。
二、免疫材料1．免疫用的动物抗原与免疫动物种属差异越远越好，小鼠、大鼠、亚美尼亚仓鼠和兔中分离的淋巴细胞的杂交瘤技术已经很成熟。
小鼠是极好的免疫接种对象，原因是：1）小鼠易操作；2）多个纯系株易得到且价格合理；3）有很多试剂可用以检测鼠源免疫球蛋白；4）小鼠对外来蛋白质能产生良好的免疫应答；5）小鼠淋巴细胞能够和多种鼠源骨髓瘤细胞系发生有效融合。
2．免疫原（抗原）颗粒性抗原：颗粒性抗原免疫原性强，如肿瘤细胞、淋巴细胞、•细菌等可作为抗原，不加佐剂直接进行免疫，就可获得较好的免疫效果。
可溶性抗原：因其免疫原性较弱，一般要加佐剂，如系半抗原，•应先制备成人工免疫原，再加佐剂。
免疫原的形式会影响宿主体液免疫产生的抗体谱，因此选择免疫原制备抗体时应该考虑到所制备抗体的最终用途，并应该根据其用途决定何种方法筛选抗体更合适。
一般认为，影响免疫血清中lg亚类谱的因素主要包括免疫原、接种途径、佐剂和动物遗传背景等。
且主要由初次基础免疫所决定，加强免疫的作用主要是提高特异性抗体的滴度。
3．佐剂目的：1）增强抗原对机体的免疫原性；2）增强抗体的产生能力；3）为制备出高效价的免疫血清；4）增强可溶性抗原的免疫原性；5）在某种情况下，改变Ag免疫应答类型；6）延长抗原在免疫动物的时间；7）改变抗原的分布；8）增强共刺激信号和激活免疫系统而刺激淋巴细胞增殖。
种类：氢氧化铝佐剂、明矾佐剂（常用于肌肉、皮下注射）、弗氏佐剂。
弗氏佐剂是最主要的免疫佐剂，热处理杀死的分歧杆菌可以引起炎症反应，募集淋巴细胞到抗原沉积部位，但若重复刺激可导致肉芽肿的形成，故不能重复使用。
BALBc 小鼠
BALB/c是一种免疫缺陷的小鼠，是免疫学实验中常用的小鼠种类，是白变种实验室老鼠，与众多常用亚系一样，起源于小家鼠Mus musculus。
从1920年它们在纽约诞生至今，BALB/c小鼠在全球研究机构繁衍了超过200代，广泛用于免疫学、生理学的动物实验。
BALB/c(巴比赛)的外表与“ICR”和“NRH”小鼠很难分辨，都长着一对红宝石般的眼睛，一身光润洁白的皮毛。
只是BALB/c鼠的遗传背景为近交系，由亲兄弟姐妹遗传繁殖，因而它们之间的个体差异就小，遗传基因更纯，整体素质更好BALB/c小鼠乳腺癌发病率低，但随着年龄增长，患其他癌症（如肺癌和肾癌）的几率大为增加。
乳腺肿瘤发生率约为10%~20%。
有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。
肺癌发病率雌性26%，雄性29%。
白血病发病率雌性12%，雄性10%。
血压与其他近交系小鼠相比为最高，有自发高血压症。
老年小鼠心脏有某些病变，雌雄小鼠常有动脉硬化。
几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。
对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感，对麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，对放射线极度敏感。
富于网状内皮细胞的器官（如肝、脾）与体重相比，所占比值很大。
常用于单克隆抗体和免疫学研究。
BALB/c小鼠生产性能好，繁殖期长，一般无相互侵袭习性，比较容易群养。
平均寿命：有的记载雄鼠为509天，雌鼠为561天；有的记载雄鼠为648天，雌鼠为816天。
平均体重252日龄雄鼠为30 g，雌鼠为28g。
(1)遗传背景：①起源：1913年H.Bagg博士获得白化原种。
1923年由Mac Dowcll近交培育而成。
1 932年第26 代引到Snell(加/c，小写字母c是毛色隐性上位recessive epistasis基因，表示白化albino) 。
1935年引到Andervont处。
1951年72代引到NIH。
1985年1 80代从NIH引到IMLAS②近交代数：180(NIH,1985)，186(Hok,1985)。
这些肿瘤免疫小鼠模型,别说你不知道
这些肿瘤免疫小鼠模型，别说你不知道订阅号APExBIO要说当今社会哪种癌症治疗手段最火热，癌症免疫疗法（Cancer Immunotherapy）当之无愧。
科学家们热衷于从免疫系统着手消灭肿瘤细胞。
自美国詹姆斯·艾利森（James P. Allison）和日本免疫学家本庶佑（Tasuku Honjo）因其开创性的癌症治疗方法获得2018年诺贝尔医学奖后，更是为癌症的免疫治疗增添了热度。
虽说免疫检查点抑制剂、癌症疫苗和细胞治疗等方面取得的成就为患者带来了希望，然而建立可以模拟人类疾病的免疫活性小鼠模型仍是一个重大挑战。
免疫疗法的临床前研究需要具有完整功能免疫系统的体内模型。
当前的临床前免疫治疗小鼠模型包括同源肿瘤模型、基因工程小鼠模型和人源化肿瘤模型，本文将浅谈这几种模型。
一、同源肿瘤模型▲同源肿瘤模型（Syngeneic tumor models）。
利用在体外生长和扩增的鼠肿瘤细胞系，将其注射（通常皮下或原位）到免疫活性（Immune-competent）宿主中。
这是最早出现和最常使用的临床前模型。
同源肿瘤模型是将永生化的小鼠肿瘤细胞系接种到近交品系小鼠中形成的同种移植模型。
肿瘤细胞系可以是自发性的、致癌物诱导的或转基因的。
受体小鼠拥有完整的鼠源免疫系统，具有完全的免疫活性（immuno-competent），且该免疫系统与同种移植肿瘤组织相容。
▲常见的同源肿瘤小鼠模型整理（包括鼠肿瘤细胞系、癌症类型、鼠宿主和使用的药物）同源模型易于建立，且有良好的免疫应答。
可以用免疫检查点抑制剂（例如抗PDL-1，抗PD-1，抗-CTLA-4）等药物来评估荷瘤小鼠中肿瘤免疫疗法的效果。
同源细胞系可以在实验室中轻松培养和大量扩增，这种模型价格低廉，操作起来相当简单且重复性强。
同系模型的另一个优点是宿主的免疫系统是正常的，这可能最大化模拟肿瘤微环境的真实生活情况。
缺点是移植的小鼠组织可能无法完全代表临床情况下人类肿瘤的复杂性。
免疫缺陷动物模型
免疫缺陷动物模型一、概述免疫缺陷动物是指由于先天性遗传突变，或用人工的方法，培育一种或多种免疫功能缺陷的动物。
1962年，苏格兰医师Issacson等首先发现无胸腺裸小鼠。
1969年，丹麦学者Rygaard首次成功地将人类恶性肿瘤移植于裸小鼠体内，肿瘤在体内存活并生长。
从此，免疫缺陷动物开创了肿瘤学、免疫学、细胞生物学的新的里程碑。
二、按免疫功能缺陷的种类常分为1、T-淋巴细胞功能缺陷动物：裸小鼠、裸大鼠、裸牛、裸豚鼠等。
2、B-淋巴细胞功能缺陷动物：CBA/N小鼠、Arabin马和Quarter马等马属动物。
3、NK细胞功能缺陷动物：Beige小鼠。
4、联合免疫缺陷动物：Scid小鼠等其他人工定向培育的多种免疫功能缺陷动物。
三、常见的免疫缺陷动物1、裸小鼠是指先天性无胸腺，且无被毛的小鼠，简称为裸小鼠。
其突变基因为裸基因，符号为：nu，是一个隐性突变基因，位于小鼠的第11号染色体上。
目前，此基因已导入到不同品系的小鼠中，常见的有BALB/c-nu、C3H-nu、C57BL/6-nu等。
裸鼠的解剖生理特点：①毛囊发育不良，外观上看几乎没有被毛，故称“裸鼠”;②无胸腺，仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮。
故不能分泌胸腺素，不能使T细胞正常分化，而T细胞室移植排异的主要细胞。
B细胞基本正常但功能欠佳。
有较高的NK细胞数量和活性。
③因为IgG的产生需要T细胞和巨噬细胞的参与，其免疫球蛋白主要是IgM，只有极少量的IgG。
④自发肿瘤现象罕见，可能与NK细胞的活性高有关。
⑤裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎。
⑥纯合裸鼠母性极差，且受孕率低，乳房发育不良。
通常以纯合雄鼠与带有nu基因的杂合雌鼠可获1/2裸鼠。
⑦裸鼠需饲养在屏障环境中。
自裸鼠问世以来，已广泛应用于肿瘤学、微生物学、免疫学、寄生虫学、遗传学、毒理学、临床医学等研究中。
2、裸大鼠1953年，英国科学家首次在大鼠中发现一种外观与裸小鼠相似，只是被毛不想裸小鼠那样全无，通过解剖和免疫学检查发现其也是无胸腺、缺乏T细胞功能，B细胞功能正常，细胞活力增强，繁殖方式与裸小鼠相同，且能接受异种组织和细胞移植，且因其体型大，用一只裸大鼠可为常规血液学和血清生物化学分析实验提供足够的血样，同时大鼠易于进行外科手术，为肿瘤移植和肿瘤供血研究提供了方便。
常用实验动物介绍―小鼠
一、行为和习性1. 小鼠胆小，易于受惊，对外界环境的改变反应敏感。
受惊时,尾巴挺直并猛力甩动，如强光或噪声刺激可导致哺乳母鼠神经紊乱，发生食仔现象。
2. 小鼠在人工驯养条件下,性情温顺易于捕捉，一旦逃出笼外过夜则恢复野性，行动敏捷难以捕捉。
3. 小鼠喜欢阴暗，固定一处睡眠营巢。
傍晚活动加强，夜间更加活跃，其进食、交配、分娩多发生在夜间。
4. 小鼠是典型的啮齿动物，门齿终生生长。
因此小鼠有啃咬习惯，以此来磨损门齿并保持其长短的恒定。
5. 小鼠为群居动物，当群饲时，其饲料消耗量比单个饲养时多，生长发育也快。
6. 小鼠群体中性成熟的雄鼠放在一起易发生互斗。
源于一窝的雄鼠或断奶后同笼饲养的雄鼠间则较少攻击。
外来雄鼠常招致几只雄鼠的集体攻击。
群居优势在雄性很明显，表现为群体中处于优势者保留胡须,被称为“理发师”,而处于劣势者胡须被拔光。
这一现象应与因寄生虫性或真菌性皮炎所致的掉毛相区别。
雄鼠具有分泌醋酸胺臭气的特性，是小鼠饲养室内特异臭气的主要原因。
7. 小鼠对外界温度的变化特别是低温非常敏感，由于运输、环境改变而致低温可很快引起小鼠死亡。
二、解剖学特点1. 外观小鼠体形小，90日龄的昆明种小鼠体长为90～110mm，体重为35～55g 。
近交系如615小鼠体长为85～94mm，体重为24～35g。
一般雄鼠大于雌鼠。
嘴尖，头呈锥体形，嘴脸前部两侧有触须，耳耸立呈半圆形。
尾长约与体长相等，成年鼠尾长约150mm。
尾有四条明显的血管,背腹面各有一条静脉，两侧各有一条动脉。
尾有平衡、散热和自卫等功能。
被毛颜色有白色、野生色、黑色、肉桂色、褐色、白斑等。
健康小鼠被毛光滑紧贴体表，四肢匀称，眼睛亮而有神。
2. 骨骼系统小鼠上下颌各有两个门齿和六个臼齿，齿式为2（1003／1003）=16。
门齿终生不断生长。
下颌骨喙状突较小，髁状突发达，其形态有品系特征，可采用下颌骨形态分析技术进行近交系小鼠遗传质量的监测。
小鼠的脊椎由55～61个脊椎骨组成，包括颈椎7个、胸椎12～14个、腰椎5～6 个、荐椎4个、尾椎27～30个。
小鼠单克隆抗体的制备
小鼠单克隆抗体的制备小鼠单克隆抗体是利用小鼠免疫系统产生的B细胞，经过细胞融合技术获得的单克隆抗体。
这种抗体具有高亲和力和高特异性，可用于治疗和诊断多种疾病，是目前最常用的单克隆抗体制备方式之一。
1. 免疫小鼠选择目标抗原，一般为蛋白质或多肽。
将抗原与佐剂混合后注射给小鼠，以激发小鼠B细胞产生特异性抗体。
免疫方案应根据抗原的种类、大小和来源等因素进行优化，一般需要进行多次免疫。
2. 制备小鼠脾细胞将小鼠处死，取出脾脏，用PBS洗涤并制备单细胞悬液。
可采用机械打碎法、酶消化法等方法提取脾细胞。
3. 合并小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞将小鼠脾细胞与无限增殖的骨髓瘤细胞混合，使用聚乙二醇或电融合等方法融合成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞具有小鼠脾细胞的抗原识别能力和骨髓瘤细胞的无限增殖能力。
4. 限制杂交瘤的生长并筛选细胞可使用一些特定的选择剂或条件限制杂交瘤细胞的生长，如耳蜗毒素（HAT）缺失培养基等。
在特定条件下，只有细胞融合后获得完整染色体的杂交瘤细胞才能存活。
存活的杂交瘤细胞称为单克隆细胞，并通过ELISA等方法筛选出目标抗体的阳性细胞。
5. 扩增单克隆细胞并提取抗体将单克隆细胞进行扩增即可获得大量的目标抗体。
提取抗体可使用乙酸铵等方法，得到纯度较高的抗体液。
小鼠单克隆抗体制备的优点是制备简便、成本低廉，且能够获得高特异性的抗体。
但是，由于小鼠单克隆抗体来源于小鼠免疫系统，因此可能存在的抗原表位的差异、抗体的可溶性和稳定性等问题需要仔细考虑。
此外，还需要注意到小鼠单克隆抗体的制备和饲养过程中可能存在的伦理道德问题。
因此，在抗体制备过程中需注意合理规划实验设计，遵守伦理规范。
小鼠ige正常范围
小鼠ige正常范围
【原创实用版】
目录
1.介绍小鼠 IgE 的正常范围
2.小鼠 IgE 的作用
3.异常值时的应对措施
正文
一、小鼠 IgE 的正常范围
小鼠 IgE，即免疫球蛋白 E，是一种在免疫系统中发挥重要作用的蛋白质。
正常情况下，小鼠 IgE 的水平在一个特定范围内波动，这个范围因小鼠品种、年龄、性别和健康状况等因素而异。
一般来说，小鼠 IgE 的正常范围在 50-200ng/ml 之间。
二、小鼠 IgE 的作用
1.免疫调节：IgE 在过敏反应和寄生虫感染等免疫应答中发挥关键作用。
当机体暴露于过敏原或寄生虫时，IgE 会与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合，导致这些细胞释放组织胺等介质，从而引发过敏反应或对抗寄生虫。
2.黏膜免疫：IgE 在黏膜免疫系统中起到重要作用，例如在呼吸道、肠道和泌尿生殖道等部位。
IgE 可以识别并中和病原微生物，防止它们侵入机体。
三、异常值时的应对措施
1.检测方法：若怀疑小鼠 IgE 水平异常，可以通过酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法进行检测，以确定具体的 IgE 水平。
2.病因分析：根据检测结果，分析可能的病因，如过敏反应、寄生虫感染、免疫系统疾病等。
3.治疗措施：根据病因采取相应的治疗措施，如使用抗过敏药物、驱虫治疗、调节免疫系统等。
同时，注意观察小鼠的临床症状，及时调整治疗方案。
免疫小鼠的基本操作方法
免疫小鼠的基本操作方法免疫小鼠是一种被广泛应用于免疫学研究中的实验动物模型。
以下是关于免疫小鼠基本操作方法的详细介绍。
1. 小鼠品系选择：选择适合免疫学研究的小鼠品系。
常用的免疫小鼠品系有C57BL/6、BALB/c、DBA/2等。
对于特定研究目的，也可以选择具有特定基因突变（如敲除基因、转基因等）的小鼠品系。
2. 小鼠的饲养条件：提供适宜的饲养环境和营养，确保小鼠的健康和免疫状态。
小鼠饲养箱应该具备适当温度和湿度，并保持适当的光照周期。
小鼠的饲料应该是高质量的小鼠饲料，并且要保持洁净，及时更换。
3. 小鼠的免疫准备：为了进行免疫实验，需要在小鼠体内引起免疫反应。
为此，可以通过免疫接种或免疫注射的方式使小鼠免疫。
例如，免疫接种可以使用病毒、细菌或真菌等病原体，通过皮下、肌肉或腹腔注射的方式进行。
免疫注射可以使用蛋白质抗原或多肽，通过皮下或腹腔注射的方式进行。
4. 小鼠的免疫监测：在进行免疫实验后，需要对小鼠的免疫状态进行监测。
可以通过体重变化、疾病症状、抗体产生、细胞免疫等指标进行评估。
常用的监测方法包括酶联免疫吸附测定（ELISA）、流式细胞术等。
5. 小鼠的体外实验：使用免疫小鼠进行免疫学研究时，常常需要进行一系列的体外实验。
这些实验包括细胞培养、细胞增殖、细胞凋亡、细胞因子检测、基因表达等。
体外实验所需的实验材料可以是小鼠淋巴细胞、脾细胞、巨噬细胞等。
6. 小鼠的体内实验：除体外实验外，还可以使用免疫小鼠进行体内实验，以研究免疫应答的机制。
这些实验包括感染模型、移植模型、自身免疫模型等。
体内实验可以通过采集血液、器官组织、淋巴结等样本来进行分析。
7. 小鼠的人道处理：在使用免疫小鼠进行研究时，必须严格遵守实验动物使用的伦理规范。
应该对小鼠给予充分的关爱和保护，合理安排实验操作，避免对小鼠造成不必要的伤害和痛苦。
在实验结束后，应该适时进行安乐死处理，以减少小鼠的痛苦。
以上是关于免疫小鼠的基本操作方法的详细介绍。
几种常用免疫缺陷小鼠的血液学及血液淋巴细胞亚群的测定与比较分析
配套试剂盒，购自日本日立公司；BD FACS Aria II流式细胞仪及配套试剂,购自美国BD公司。 1.3临床血液学、血清生化学指标测定
5种品系的6周龄小鼠各20只（雌雄各半）， 禁食16 h后小鼠眼眶采血800 pL/只。取150 pL 全血加入EDTA-K2抗凝测血常规。650 pL血液 静置30 min后放入离心机，以10 000 r/min离心 2 min,取血清用于生化指标测定。 1.3.1 血常规测定
谈小倩，瞿 伟，李亮，钱珍，顾坚忠，徐 平 (上海吉辉实验动物饲养有限公司，上海201 103 )
［摘要］目的 测定与比较分析几种常用免疫缺陷小鼠的血液学(血常规与血清生化)指标和 血液淋巴细胞亚群百分率，为肿瘤、免疫学等研究和应用提供基础数据。方法(1) BALB/cAnude、SCID、NOD-SCID和NPSG共4个免疫缺陷小鼠品系，每品系取6周龄小鼠各20只(雌 雄各半)，同周龄近交系BALB/cA小鼠作对照，采血后测定血常规(30项)和血淸生化(25项) 指标；(2) 4种免疫缺陷小鼠6周龄，每品系雌雄随机各取2只，用流式细胞仪检测分析淋巴细 胞亚群，同周龄近交系BALB/cA小鼠作对照。结果(1)免疫缺陷小鼠的白细胞数(WBC)、淋 巴细胞数(LYMPH)、淋巴细胞百分率(LYMPH%)和中性粒细胞数(NEUT)低于BALB/cA小 鼠(P< 0.01),屮性粒细胞百分率(NEUT%)和网织红细胞数高于BALB/cA小鼠(P < 0.05, P< 0.01)； SCID、NOD-SCID、NPSG 小鼠的 WBC、LYMPH和LYMPH%显著低于BALB/cA-nude 小 鼠(P< 0.05), NEUT% 高于 BALB/cA-nude 小鼠(P < 0.05)。(2) NOD-SCID 和 NPSG 小鼠 的血糖、三酰廿油水平低于BALB/cA小鼠(P < 0.01),而尿酸水平相对偏高(P < 0.05)。 (3) BALB/cA-nude小鼠T细胞严重缺失，B细胞和自然杀伤(NK)细胞活性降低；SCID和NODSCID小鼠T细胞缺失，B细胞和NK细胞活性降低更加明显；NPSG小鼠T细胞、B细胞和NK 细胞均表现为缺失。结论 BALB/cA-nude、SCID、NOD-SCID和NPSG小鼠的血液学性状和血液 淋巴细胞亚群的百分率均符合相应免疫缺陷小鼠的品系特征。 ［关键词］免疫缺陷小鼠；血液学；血淸生化学；淋巴细胞亚群 ［中图分类号］Q95-33； R-332 ［文献标志码］A ［文章编号］1674-5817(2021)02-0155-06
临床免疫学单选考试模拟题(含参考答案)
临床免疫学单选考试模拟题（含参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、鉴定M蛋白的类型，首选方法是A、Ig定量测定B、免疫选择电泳C、免疫电泳D、血清蛋白区带电泳E、免疫固定电泳正确答案：E2、化学发光反应中，产生发光的重要条件是A、抗原过量B、抗体过量C、足够的触酶D、合适的载体E、足够的激发能正确答案：E3、流式细胞仪光学系统的组成为A、激光光源、分光镜、光束成形器、透镜组和光电倍增管B、激光系统C、激光光源、分光镜与光束成形器D、激光光源、分光镜、光束成形器和透镜组E、激光光源与分光镜正确答案：A4、HLA-DR抗原的检测常用A、阳性分型法B、混合淋巴细胞培养法C、血清学分型法D、纯合子分型法E、双向分型法正确答案：C5、属于Ⅳ型超敏反应的疾病是A、青霉素过敏性休克B、类风湿性关节炎C、接触性皮炎D、支气管哮喘E、输血发硬正确答案：C6、以下哪种情况，AFP不会升高：A、肝癌B、乳腺癌C、孕妇D、肝硬化E、生殖系统肿瘤正确答案：B7、异相液相酶免疫主要用于何种物质的测定A、大分子抗原B、小分子抗原或半抗原C、补体D、PcAbE、McAb正确答案：B8、常用的免疫小鼠的采血方法是A、颈动脉放血法B、静脉采血法C、心脏采血法D、断尾法或摘除眼球法E、股动脉放血法正确答案：D9、胎儿在宫腔内感染，脐带血或新生儿外周血中何种Ig水平升高A、IgMB、IgEC、IgGD、IgAE、IgD正确答案：A10、关于ELISA试验中的封闭，不正确的论述是A、用1％～5％牛血清清蛋白再包被一次B、有助于酶与底物的结合C、防止酶标抗体吸附载体D、可消除非特异显色而导致的本底偏高E、用5％～20％小牛血清再包被一次正确答案：B11、下列哪项不是自身免疫性疾病的特点A、发病女性多于男性、老年多于青少年B、多数患者血清中可检出抗核抗体C、病程一般较长，但多可治愈D、有遗传倾向E、大多数是自发性或特发性正确答案：C12、火箭免疫电泳中，待测抗原的量与下列哪项呈正相关A、沉淀峰宽度B、沉淀峰高度的平方C、沉淀峰高度的对数D、沉淀峰面积E、沉淀峰高度正确答案：E13、下列哪种疾病可引起IgE升高：A、变态反应性疾病B、急性或慢性肝炎C、寄生虫感染D、以上都正确E、以上都不正确正确答案：D14、免疫复合型超敏反应又称为A、Ⅱ型变态反应B、V型变态反应C、I型变态反应D、Ⅲ型变态反应E、IV型变态反应正确答案：D15、AID最基本的特征是：A、均可检出高滴度的自身抗体或与自身抗原起反应的致敏淋巴细胞B、患病组织器官多伴有细菌或病毒性感染C、多数病因明确D、患者血清中均可检测出自身抗体E、发病的姓别和年龄无明显倾向正确答案：A16、一个准备手术的IgA缺陷症的病人，术前检查发现血型A，Rh+；血清中抗IgA抗体1：10，你考虑应让血库准备A、A型Rh+红细胞，B、正常IgA水平冰冻血浆C、新鲜A型Rh+全血D、来自A型，Rh+的IgA缺陷症病人的全血E、AB型，Rh+全血正确答案：D17、下列哪种分子不是MHC基因编码的A、B2mB、C4C、B5D、MHC-I类分子E、MHC-Ⅱ类分子正确答案：A18、血清学鉴定抗原为A、HLA-Ⅰ类抗原和 DQ、DRB、HLA-Ⅰ类抗原和DQ、DPC、HLA-Ⅰ类抗原和DP、DRD、HLA-Ⅰ类抗原和DE、以上都不对正确答案：A19、Ig的绞链区位于A、VL与CH1之间B、VH与CH1之间C、CH1与CH2之间D、CH2与CH3之间E、CH3与CH4之间正确答案：C20、关于中性粒细胞正确的叙述是A、来源于淋巴样前体细胞B、含有嗜天青颗粒C、主要功能为巡视、清除病原微生物D、在慢性炎症中起关键作用E、可与IgE结合正确答案：C21、原发性恶性单克隆丙种球蛋白病不包括A、轻链病B、原发性巨球蛋白血症C、重链病D、多发性骨髓瘤E、特发性血小板减少性紫癜正确答案：E22、目前，分析最理想的研究手段是淋巴细胞亚群A、ELISAB、免疫磁珠分离技术C、E花环分离技术D、流式细胞术多参数分析技术E、流式细胞术细胞分选技术正确答案：D23、定时散射比浊分析时，如果待测标本抗原浓度过高，则应：A、增加抗体的浓度后重新检测B、照常进行反应C、进行全量样本检测D、将待测标本稀释后重新测定E、测量结果更可靠正确答案：D24、与内源性抗原提呈密切相关的分子是A、MHCⅠ类分子B、MHCⅡ类分子C、FcγRD、mIgE、C3bR正确答案：A25、临床上最常见的移植类型是A、自体移植B、同种同基因移植C、同种异基因移植D、异种移植E、以上均不是正确答案：C26、下列哪项不是均相酶免疫测定的特点A、属于竞争结合分析方法B、Ag-与Ab结合形成AbAg-后，其中的酶活性将减弱或增强C、不需将AbAg-与AgIE分离，可直接测定酶活性的变化推算出待测抗原量D、主要用于小分子抗原和半抗原的测定E、灵敏度大于异相酶免疫测定正确答案：E27、目前临床治疗药物监测最常采用的方法为A、FPIAB、荧光酶免疫分析C、TRFIAD、ELISAE、免疫比浊分析正确答案：A28、同种型是指A、免疫球蛋白类型或亚型的重链遗传变化或差异B、由于等位基因的变异所致的抗原性的不同C、X链和γ链的不同性D、位于抗体的结合位点部位的特殊的氨基酸E、以上无正确答案正确答案：A29、Ig测定的方法有A、单向免疫扩散法B、速率散射比浊法C、ELISA法D、免疫电泳法E、以上都可用正确答案：E30、结合肥大细胞和嗜碱性粒细胞的Ig是A、IgMB、IgGC、IgAD、IgDE、IgE正确答案：E31、关于RIA，下列说法正确的是A、标记抗原限量B、标记抗体限量C、所用抗体为多克隆抗体D、标准抗原限量E、待测抗原限量正确答案：C32、目前ELISA中运用最广泛的底物是A、OPDB、4-MUUC、5-ASAD、ABTSE、TMB正确答案：E33、双向扩散试验中，沉淀线可能出现的情况为A、相交或平行B、重叠C、平行或相切D、相切E、相切、相交或重叠正确答案：E34、FITC的最大发射光波长为A、405～450umB、450～490umC、490～495umD、495～520umE、520～530um正确答案：E35、用来去除未结合的游离的荧光素最好用A、盐析法B、搅拌法C、离子交换层析法D、凝胶过滤法E、透析法正确答案：C36、ABO血型的鉴定方法常用A、玻片凝集反应B、间接凝集反应C、试管凝集反应D、抗球蛋白试验E、反向间接凝集反应正确答案：A37、I型超敏反应可通过下列哪一种成分被动转移A、致敏淋巴细胞B、患者的血清C、特异性转移因子D、生物活性介质E、特异性IgE形成细胞正确答案：B38、对蛋白A叙述正确的是A、可以与所有人类免疫球蛋白作用B、从葡萄球菌中纯化而来C、只有在抗原与抗体反应后才能与抗体结合D、不能应用于免疫电镜E、实际上为一种多糖正确答案：B39、下列说法错误的是A、可溶性抗原常用直接凝集试验检测B、粗糙型细菌在生理盐水中易出现自凝现象C、单价抗原与相应抗体结合后不出现沉淀现象D、颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象E、可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀现象正确答案：A40、B细胞特异性分化抗原检测主要是A、CD9B、CD10C、CD19D、CD20E、以上均是正确答案：E41、具有调理作用的主要Ig是A、IgAB、IgMC、IgGD、IgDE、IgE正确答案：C42、下列属于Ⅰ型超敏反应的疾病是：A、接触性皮炎B、支气管哮喘C、自身免疫性溶血性贫血D、新生儿溶血症E、系统性红斑狼疮性肾炎正确答案：B43、将抗体吸附在颗粒载体上检测血清中抗原的试验是：A、直接凝集试验B、正向间接凝集试验C、反向间接凝集试验D、间接凝集抑制试验E、以上均不是正确答案：C44、正常人血清中含量最高的补体成分是A、C1、C2B、C1、C3C、C5、C6D、C3、C4E、C9正确答案：D45、B细胞表面的抑制性受体是A、BCRB、FcγRⅡ-B（CD32）C、FcγRⅡ-AD、C3bR(CD35)E、CD40正确答案：B46、直接法BAB的反应模式为A、Ag-(Ab-B)-A*B、Ag-(Ab-B)-A-B*C、Ag-(Ab-B)-AB*CD、Ag-Ab1-(Ab2-B)-A*E、Ag-Ab1-(Ab2-B)-A-B*正确答案：B47、血清中含量最高的抗体是A、IgMB、IgAC、IgGD、IgDE、IgE正确答案：C48、免疫缺陷病主要包括A、B细胞免疫缺陷B、T细胞免疫缺陷C、吞噬细胞免疫缺陷D、补体缺陷E、以上4个方面正确答案：E49、第二次免疫接种后，再次免疫接种的间隔时间最好为A、1周内B、7～10天C、10～20天D、20～30天E、30天以上正确答案：C50、下列各项用于反映B细胞功能的试验是A、淋巴细胞转化B、血清免疫球蛋白检测C、迟发型超敏反应D、移动抑制试验E、以上都不正确正确答案：B51、能直接杀伤肿瘤细胞的细胞因子是A、IL-2B、IL-4C、IFND、TNFE、IL-1正确答案：D52、抗原分子诱导所产生免疫应答的能力称为：A、宿主反应性B、免疫原性C、免疫反应性D、抗原刺激E、以上均不对正确答案：B53、不属于肿瘤相关抗原的是A、CEAB、AFPC、FERD、PSAE、MARA正确答案：E54、火箭电泳是将（）与电泳相结合的一种检测技术：A、间接凝集反应B、单向免疫扩散C、免疫浊度检测D、双向免疫扩散E、直接凝集反应正确答案：B55、通过理化方法去除病原体中与激发保护性免疫无关的甚至有害的成分，保留有效免疫原成分制作的疫苗，称为A、亚单位疫苗B、亚细胞疫苗C、结合疫苗D、重组抗原疫苗E、合成肽疫苗正确答案：A56、免疫学诊断的依据是A、抗原抗体结合的可逆性B、抗原抗体反应的阶段性C、抗原抗体的比例D、抗原抗体的浓度E、抗原抗体结合的高度特异性正确答案：E57、双向琼脂扩散试验是一种：A、补体结合试验B、直接凝集试验C、间接凝集试验D、中和试验E、沉淀试验正确答案：E58、关于固相分离技术的描述正确的是A、将抗体或抗原通过特殊技术连接在固相载体上B、将标记抗原通过特殊技术连接在固相载体上C、将抗原通过特殊技术连接在固相载体上D、将抗体通过特殊技术连接在固相载体上E、将标记抗体通过特殊技术连接在固相载体上正确答案：A59、在通常的血清学试验中，溶液pH偏高时，下列说法不正确的是A、蛋白质分子带负电荷B、蛋白质分子周围出现极化的小分子C、蛋白质分子问不易靠拢D、蛋白质分子带正电荷E、蛋白质分子间不能形成沉淀正确答案：D60、在局部黏膜抗感染中发挥重要作用的免疫球蛋白是：A、IgMB、IgEC、IgGD、IgDE、IgA正确答案：E61、免疫比浊试验属于A、沉淀反应B、溶血反应C、凝集反应D、补体结合反应E、中和反应正确答案：A62、包膜蛋白部分包括A、跨膜蛋白gp41B、外膜蛋白gp120C、信号肽D、外膜刺突上嵌有与细胞受体结合位点E、以上都包括正确答案：E63、下列哪种组合是B 细胞活化的第二信号A、CD80(B细胞)——CD28(T细胞)B、CD86(B细胞)——CD28(T 细胞)C、CD40L(B细胞)——CD40(活化的T细胞)D、CD40(B细胞)——CD40L(活化的T细胞)E、B7(B细胞)——CD28(T细胞)正确答案：D64、未成熟B淋巴细胞表达的SmIg是A、SmlgAB、SmlgGC、SmlgMD、SmlgDE、SmlgE正确答案：C65、与体外化学发光分析法比较，放射免疫分析法所不具备的是A、特异性强B、自动化分析C、试剂用量小D、灵敏度高E、重复性好正确答案：B66、完全弗氏佐剂比不完全弗氏佐剂多了以下哪种物质A、卡介苗B、液状石蜡C、氢氧化铝D、磷酸铝E、羊毛脂正确答案：A67、关于抗原抗体反应叙述错误的是A、需要四种分子间引力参与B、具有特异性C、形成的复合物是不牢固的D、能形成共价键E、亲和性用平衡常数K表示正确答案：D68、免疫组化技术中固定标本的目的不包括：A、使细胞内蛋白质固定B、终止细胞内酶反应C、防止细胞自溶D、促进组织细胞中抗原的释放E、以上都可以正确答案：D69、某患者血清蛋白区带电泳发现有异常球蛋白区带，进一步免疫电泳发现，患者血清与抗IgA抗血清及抗k轻链抗血清产生明显的沉淀弧，可诊断为：A、IgG k型骨髓瘤B、IgG l型骨髓瘤C、IgAk型骨髓瘤D、IgAl型骨髓瘤E、尚不能做出诊断正确答案：C70、1mg纯的亲和素的活性约为A、10UB、5UC、13-15UD、7UE、20-22U正确答案：C71、吞噬细胞主要包括A、NK 细胞和单核-巨噬细胞B、单核-巨噬细胞和中性粒细胞C、中性粒细胞和树突状细胞D、NK 细胞和中性粒细胞E、中性粒细胞和APC正确答案：B72、哪种物质产生的荧光为长寿命荧光A、FITCB、RB200C、镧系金属离子D、血清清蛋白E、素胆红正确答案：C73、室间质评不包括的内容是A、客观比较某实验室测定结果与靶值的差异B、是对实验室操作和实验方法的回顾性评价C、外单位客观评价实验室的结果D、独立测定结果之间的一致性程度E、可起自我教育的作用正确答案：D74、下列关于肿瘤免疫的叙述错误的是A、细胞免疫是抗肿瘤免疫的主要机制B、抗体在抗肿瘤中并不发挥主要作用C、NK细胞是抗肿瘤的第一道防线D、静止和活化的巨噬细胞均能杀瘤细胞E、嗜酸性粒细胞参与抗肿瘤作用正确答案：D75、下列哪种移植后无需使用免疫抑制剂A、同卵双生肝移植B、亲子间的肾移植C、同种异基因骨髓移植D、同种皮肤移植E、异种心脏移植正确答案：A76、关OCV线，下述哪项说法不正确A、最初用于通讯学领域B、可用于不同检测方法的比较C、可用于对检验项目临床准确性的评价D、决定正常与异常的分界点E、改善测定精密度正确答案：E77、ELISA竞争法检测抗原，加底物后“待测管”中的颜色越浅，表示：A、抗体越多B、抗体越少C、抗原越多D、抗原越少E、抗体适量正确答案：C78、测定淋巴细胞增殖反应常用的同位素是A、51CrB、121IC、22PD、3HE、35S正确答案：D79、下列五类Ig的描述哪项不正确：A、IgG是唯一通过胎盘的免疫球蛋白B、SIgA多为双聚体C、免疫应答过程中产生最早的是IgGD、IgM分子量最大E、正常血清中IgE含量最少正确答案：C80、免疫对机体A、正常情况下有利，某些条件下有害B、有害C、有利又有害D、有利E、无利也无害正确答案：A81、完全抗原的特征是：A、无免疫原性，无免疫反应性B、有免疫原性，有免疫反应性C、有免疫原性，无免疫反应性D、必须与载体结合才具有免疫原性E、无免疫原性，有免疫反应性正确答案：B82、免疫球蛋白各组分的定量测定可采用A、单向琼脂扩散法B、散射免疫比浊法C、ELISA法D、RIA法E、以上都可以正确答案：E83、间接Coombs试验检测何类抗体A、结合在红细胞表面的不完全抗体B、游离的IgGC、结合在红细胞表面的IgMD、游离的不完全抗体E、以上均错正确答案：D84、下列哪型超敏反应又称为速发型超敏反应A、Ⅵ型B、I型C、Ⅳ型D、Ⅲ型E、Ⅱ型正确答案：B85、环孢素A(CsA)抑制排斥反应的机制主要是通过A、抑制T细胞产生IL-2,并抑制活化T细胞表达IL-2受体B、抑制APC的抗原提呈功能C、抑制B细胞对移植物的免疫应答D、抑制CTL细胞对移植物的损伤E、抑制NK细胞对移植物的损伤正确答案：A86、要经酶作用后产生荧光的物质是A、异硫氰酸荧光素B、四乙基罗丹明C、四甲基伞酮-β-D半乳糖苷D、藻红蛋白E、四甲基异硫氰酸罗丹明正确答案：C87、关于温度的说法，下列哪项正确A、温度越高，抗原抗体反应速度越快B、温度越高，抗原抗体反应速度越慢C、温度越低，抗原抗体结合越牢固D、温度低于56℃时，可导致复合物解离E、温度越高，抗原抗体分子运动越慢正确答案：A88、外-斐试验的原理是因为存在有A、共同抗原B、单克隆抗体C、过量抗体D、多克隆抗体E、过量抗原正确答案：A89、哪种动物血清常用于补体结合试验？A、山羊B、大白鼠C、绵羊D、豚鼠E、马正确答案：C90、能用细胞学分型法检测的抗原是A、HLA-A、-BB、HLA-DR、-DQC、HLA-A、-DPD、HLA-D、-DPE、HLA-C、-D正确答案：D91、哺乳动物自身反应性B细胞克隆消除主要发生在A、胸腺B、骨髓C、淋巴结D、脾脏 EE、黏膜淋巴组织正确答案：B92、分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法为A、低速离心法B、高速离心法C、选择性沉淀法D、超速离心法E、凝胶过滤法正确答案：D93、OCV需连续测定同一浓度同一批号质控物A、30批次以上B、25批次以上C、20批次以上D、20批次以下E、15批次以下正确答案：C94、单克隆抗体的应用不包括A、肿瘤的诊断B、肿瘤的治疗C、血清Cl－含量测定D、激素水平测定E、细胞受体测定正确答案：C95、下列哪一种物质与I型超敏反应无关A、白三烯B、激肽C、前列腺素D、组胺E、备解素正确答案：E96、外来抗原刺激机体产生初次免疫应答释放的主要抗体是：A、IgAB、IgMC、IgGD、IgEE、IgD正确答案：B97、下列哪一种检测方法本身即可避免内源性非特异荧光干扰A、FPIAB、TRFIAC、荧光酶免疫分析D、直接法荧光抗体染色E、直接法荧光抗体染色正确答案：B98、亲和素一生物素化碱性磷酸酶(ABAP)复合物的制备是将亲和素溶液与生物素化AP按多少浓度比反应后制得A、1:01B、2:01C、3:01D、4:01E、5:01正确答案：D99、B淋巴细胞和T淋巴细胞分化、发育成熟的场所是A、淋巴结和脾脏B、胸腺和骨髓C、淋巴结和胸腺D、骨髓和粘膜相关淋巴组织E、淋巴结和骨髓正确答案：B100、PAP法中的“桥”是：A、第一抗体B、第二抗体C、第三抗体D、亲和素E、第四抗体正确答案：B。
实验室常用小鼠简介-(同济)
基因表达基本知识
DNA一级结构上调控基因表达的元件 （基因表达盒结构）
5’-UTR promoter
enhancer 3’-UTR
enhancer promoter
UTR exon
Poly A signaling Chromosome sequence
基因敲除小鼠
基因敲除小鼠
基因修饰ES细胞的获得及囊胚注射
器官移植模型
1. 肾移植模型 2. 异位心脏移植模型 3. 小肠移植模型 4. 骨髓移植模型
5. 肝移植模型
6. 皮肤移植模型 7. 胰腺（胰岛）移植模型 8. 慢性排斥（BM12）
自身免疫性疾病模型
1、自发型I型糖尿病动物模型 NOD小鼠 2、诱导型I型糖尿病动物模型： 药物（STZ、Alloxan、环磷酰胺等）诱导破坏小鼠胰岛 3、自发型系统性红斑狼疮小鼠
肿瘤模型
移植瘤实验：将人移植入BalB/C、祼鼠、C57BL/6、Rag1等小鼠体内。
诱导癌/肿瘤模型：使用二乙基亚硝胺 (diethy lnitrosam ine, DEN)等诱 癌剂灌胃及自由饮水，长期诱导可产生肝癌模型。
基因修饰小鼠
1、基因敲除小鼠
2、基因敲入小鼠
3、基因捕获小鼠 4、转基因小鼠 5、条件性基因表达小鼠 6、条件性基因敲除小鼠
ALR：
与NOD小鼠具有共同祖先的小鼠，白色，两者有70%的基因组完全 相同，但MHC不相同。对I型糖尿病具有很强的诱导耐受。常用于 NOD的对照小鼠。 杂交鼠：由两个近交系杂交获得后代，性状不稳定。小鼠遗传操作 未进行彻底的小鼠。
免疫研究常见的小鼠动物模型
1、器官移植模型 2、自身免疫性疾病模型 3、超敏反应模型 4、肿瘤模型
做化合物药代动力学的小鼠品系
做化合物药代动力学的小鼠品系引言化合物药代动力学是药物研发的重要环节之一，可以帮助我们了解药物在生物体内的吸收、分布、代谢和排泄情况。
在药物研发过程中，使用适当的小鼠品系进行药代动力学研究可以为药物的设计和优化提供重要的指导。
本文将介绍一些常用的小鼠品系，并讨论它们在化合物药代动力学研究中的应用。
常用的小鼠品系1. BALB/c小鼠BALB/c小鼠是一种常见的实验动物，被广泛应用于药代动力学研究中。
它们具有较好的免疫应答和稳定的遗传背景，适合用于疫苗和抗体的研究。
此外，BALB/c 小鼠在药物吸收、分布和排泄方面也具有一定的代表性。
2. C57BL/6小鼠C57BL/6小鼠是常用的实验动物中的另一种。
它们具有较好的疾病建模能力和较高的胚胎干细胞耐受性，适用于研究与遗传学相关的药物。
此外，C57BL/6小鼠还广泛应用于肿瘤学、免疫学和神经学等领域的研究。
3. NOD小鼠NOD小鼠是一种自发性糖尿病模型，具有自身免疫性糖尿病的特征。
这种小鼠品系被广泛用于研究自身免疫性疾病和免疫治疗方法的开发。
它们的特殊遗传背景和糖尿病模型使得NOD小鼠在药代动力学研究中具有一定的独特性。
4. SCID小鼠SCID小鼠是一种严重缺乏自然免疫力的小鼠品系。
由于其免疫系统的缺陷，SCID 小鼠广泛用于人类免疫系统的重建和移植研究。
它们对人类来源的细胞和组织具有较好的移植接纳性，因此在人免疫相关的药代动力学研究中很有价值。
小鼠品系选择的考虑因素在选择适当的小鼠品系进行化合物药代动力学研究时，需要考虑以下因素：1. 研究目的不同的小鼠品系对不同药物的反应可能存在差异。
因此，研究目的明确是选择适宜的小鼠品系的首要考虑因素。
2. 药物代谢不同小鼠品系的药物代谢能力可能存在差异。
一些小鼠品系在药物代谢方面具有特殊的特征，例如在药物氧化酶系统中存在特定的突变。
因此，选择适当的小鼠品系可以更好地模拟人体对药物的代谢情况。
3. 免疫反应免疫系统在药物代谢和药物治疗中起着重要的作用。
模式生物——小鼠
c57BL6小鼠生物学特性(1)遗传背景：1921年Little由Abby Lathrop得到动物后开始近亲交配，育成数个近交系。
雌鼠57与雄鼠52交配而得C57BL，用雌鼠58与雄鼠52 交配即得C58，1937年分开C57BL/6及C57BL/10两系。
1974年从JAX引到LAC，1983年从LAC引到OLAC，1985年引到IMLAS。
1985年从Olac引到中国医学科学院实验动物研究所。
毛色：黑色。
近交代数：150(Jax,1984)。
毛色及毛色基因：黑色， aa、BB、CC。
④组织相容性基因：H-2b, H-1c, H-3a。
(2)品系特征：免疫：补体活性高。
IgG在20月龄前缓慢增加，IgG2b为高值，IgG1 为低值。
无菌饲养较普通饲养者IgG 绝对量低。
IgG 为高值，有的个体 12 个月龄后可超过800ug/ml。
无菌饲养的IgM较高。
细胞免疫力随增龄较少降低，可能与自发肿瘤较少有关。
较易诱发免疫耐受性。
干扰素产量高。
对百日咳易感因子(Pertussis HSF)敏感。
肿瘤：18月龄以上小鼠各种肿瘤发病率低。
14～30月龄鼠中肉眼可见粘液瘤发生率为6～61％，乳腺癌少发(0～1％)，用致癌剂难以致癌，老龄鼠淋巴瘤自发率为20～25％，雌鼠白血病为7- 16％，经照射后肝癌发生率高。
微生物和寄生虫：对***球虫最敏感。
对猫后睾吸虫和疟原虫及曼氏血吸虫、白色念球菌、脑心肌炎有抗力。
对狂犬病病毒、Calmette- Guerin杆菌结核杆菌敏感，对鼠痘病毒有一定抗力。
其它敏感性见于M.N.Nesbitt and E.Skamene(J.Leuk.Biol.36:357,1984)。
乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。
12%有眼睛缺损;雌仔鼠16.8%，雄仔鼠3%为小眼或无眼。
用可的松可诱发腭裂，其发生率达20%。
对放射物质耐受力中等;补体活性高;较易诱发免疫耐受性。
小鼠免疫方案
小鼠免疫方案简介小鼠免疫方案是指针对小鼠进行免疫调节和免疫维持的一套方法和步骤。
小鼠作为实验动物，在医学、生物学和药物研发领域发挥着重要的作用。
为了确保实验的可靠性和实验动物的健康，正确的免疫方案对于小鼠的研究至关重要。
免疫方案步骤1. 免疫方案设计在设计小鼠免疫方案时，需要考虑以下几个因素：•免疫目标：确定所需免疫的抗原或疫苗类型。
•免疫途径：选择合适的免疫途径，例如皮下注射、腹腔注射或静脉注射。
•免疫剂量：确定合适的免疫剂量，以确保免疫效果和动物的安全。
•免疫间隔：确定免疫的时间间隔，以确保适当的免疫反应。
2. 实施免疫方案根据免疫方案的设计，开始实施小鼠的免疫方案：•准备免疫材料：根据免疫方案需要准备相应的免疫材料，例如抗原或疫苗。
•注射免疫：根据免疫途径，对小鼠进行注射。
•免疫记录：记录每只小鼠接受免疫的信息，例如注射日期、剂量等。
3. 免疫效果评估在完成免疫方案后，需要评估免疫效果：•血清采集：采集小鼠的血清样本，用于后续免疫效果的检测。
•免疫学分析：将血清样本用于免疫学实验，例如酶联免疫吸附试验（ELISA）或流式细胞术，以评估免疫反应。
免疫方案注意事项在进行小鼠免疫方案时，需要注意以下事项：1. 动物福利确保小鼠在免疫过程中的福利：•隔离：确保小鼠在免疫过程中的隔离，以减少传染病的风险。
•观察：定期观察小鼠的健康状况，如食欲、体重等。
•人道处置：当小鼠出现不适或疾病时，进行适当的人道处置，以减少痛苦和苦闷。
2. 安全操作在操作免疫方案时，要确保自身和动物的安全：•个人保护：佩戴适当的个人保护装备，如实验手套、口罩等。
•消毒操作：在操作前，对培养皿、注射器等进行消毒处理。
•废物处理：将使用过的材料、废液、废物按规定进行处理，以防传染病的传播。
3. 实验方案的规范性确保实验方案的规范性和一致性：•样本编号：对每只小鼠进行编号，确保样本的一致性和可追溯性。
•控制组：设置适当的对照组，以评估免疫效果的影响。
ova蛋白免疫小鼠原理
ova蛋白免疫小鼠原理
细胞质蛋白质点膜篮Vacuolar蛋白是一种常见的有毒组分，其
可通过调节细胞膜电位而诱导细胞毒性。
VacA在肿瘤细胞中被认为是
一种重要的致病因子，因为它可促进癌细胞的生长和侵袭能力。
因此，研究VacA的免疫学机制对于防止和治疗肿瘤有重要意义。
小鼠免疫VacA的原理首先需要研究VacA作用的免疫机制，然后
根据该机制选择合适的表达载体，采用免疫表达技术从蛋白源中克隆VacA基因，插入表达载体，采用原核表达技术从该载体中表达VacA蛋白，并对小鼠进行免疫接种，以使小鼠产生表位抗体，最终获得小鼠
体内抗VacA抗体的抗蛋白技术。
最后将获得的抗体进行检测，验证抗蛋白的特异性，最终评价小
鼠免疫VacA的结果。
在此基础上，利用该方法在诊断和治疗肿瘤方面
可以制定出更加有效的免疫治疗方案，可以有效抑制肿瘤发展，提高
患者的生存率。
综上所述，小鼠免疫VacA的原理是从VacA蛋白源中克隆VacA
基因，将其移植到表达载体中，使用原核表达技术表达VacA蛋白，接
种小鼠获得体内抗VacA抗体，最后检测抗体特异性。
掌握了VacA的
免疫机制，有助于设计更有效的免疫诊断和治疗方案，有助于抗肿瘤
的发展。
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常用小鼠品系
1.BALB/c品系
（1）遗传背景及亚系：1913年Bagg获得的白化株（albino stock）小鼠。
1923年以后由Mac Dowell进行了近亲繁殖，在1932年繁殖到26代，最后Snell将其育成。
亚系：BALB/c、BALB/ced、BALB/cJ、BALB/cAnN等。
（2）毛色基因标记：AA、bb、cc。
（3）主要遗传学特征：
a.免疫学特征：易患慢性肺炎。
初生时摘除胸腺的动物58%可发生侏儒症。
在6月龄时，多数个体非常明显地出现高血球蛋白血症。
免疫球蛋白绝对量的多少又因饲养条件的不同而有差异。
在BALB/c鼠腹腔注射矿物油，可产生多发骨髓瘤，其发生率可高达60%。
其发生率可因亚系的不同或饲养条件的不同而有差异。
b.生理学特性：血压较高，可自发高血压症，大部分雄鼠在20月龄时发生脾的淀粉样边。
对X线照射敏感性高，LD50为500R，与其它品系比较，缺乏毛的光泽，甚至有脱毛现象。
c.癌发生率：乳癌发生率低，为3%；肾上腺癌、肺癌时有发生。
雌鼠的几种癌发生率为：肺癌2%，网状肉瘤8%，血管瘤6%，淋巴肉芽肿4.5%。
d.老化及寿命：老年鼠心脏有某些病变，两性小鼠均有动脉硬化，SPF级雌性小鼠寿命为561日，雄鼠为509日。
（4）饲养方面注意事项：雌鼠繁殖利用周期较长，约1年，是比较容易繁殖的品系。
四周龄以后不同窝的雌鼠有相互咬架的现象，故不同窝的鼠不宜同笼饲养。
繁殖室26℃-27℃为宜，由于易患肺炎，所以不要与其他品系动物同室饲养。
在其他品系的常在菌，对于本品系则可引起发病。
（5）特性和用途:对慢性肺炎敏感,特别对放射线敏感。
乳腺肿瘤发病率低,当用乳腺肿瘤病毒(MTV)诱发时发病率增高。
对促性腺激素有超排卵反应。
两性小鼠均有动脉硬化症。
对弓形体易感。
补体活性高,对矿物油诱发浆细胞瘤敏感。
偶见甲状腺肿瘤。
干扰素产量低,对百日咳组织胺易感因子敏感。
对以下列病原体敏感:鼠伤寒沙门氏菌
C5、麻疹病毒(中等)、利氏曼原虫、斑点热、立克次氏体和曼氏血吸虫。
常用于单克隆抗体研究和生产。
2．C57BL/6品系
（1）遗传背景及亚系：1921年Little用Abbg Lathrop的小鼠株雌鼠57号与雄鼠52号交配，而得C57BL/6。
亚系：C57BL/6、C57BL/6J、C57BL/6N等。
（2）毛色基因标记：aa、BB、CC（黑色）。
（3）主要遗传学特征：
a.免疫学特征：一般饲养条件下免疫球蛋白的量随年龄而增加，而到生后20个月时则IgG 增长缓慢，无菌饲养的绝对量较低。
IgM水平较高，出生12月以后，有的个体超过
80ug/mL。
无菌饲养的动物IgM量比一般饲养的高。
细胞免疫低下者少见，这可能与自发肿瘤少有关。
b.形态学特征：在新生鼠中，雌鼠为16.8%，雄鼠3%为小眼或无眼症。
0.6%后肢可见多趾症，另外水头症占2%-4%，耳头症占0.4%，交合不全占3%。
c.生理学特性：有强嗜酒精性。
对放射性照射为中等强度感应度，LD50为630+4R。
将雄鼠皮肤移植到同系的雌鼠身上，约20日被排斥掉，这是因为在组织相容性抗原中的雄抗原在C57BL中非常显著。
d.癌发生率：乳癌发生率低，为0-1%，白血病为7%-16%，化学致癌成功率低，放射性照射较容易诱发肝癌。
e.寿命：寿命最长为1200日（雌鼠平均：692日，雄鼠平均：676日）。
（4）饲养方面注意事项：繁殖率稍低，如给予高脂肪饲料，繁殖率可提高，刚离乳的幼仔可有原因不名的脱毛现象。
（5）特性和用途:乳腺癌发病率低。
对放射物质耐受力强。
眼畸形、口唇裂发生率达20%。
淋巴细胞白血病发生率为6%。
对结核杆菌、百日咳组织胶易感因子敏感。
嗜酒精性高。
是肿瘤学、生理学、遗传学等方面研究常用的品系。
3．C3H品系
（1）遗传背景及亚系：1921年strong将Baff albino的雌鼠与DBA的雄鼠进行杂交而获得的新品种。
亚系：C3H/Bi、C3H/He、C3H/HeJ、C3H/Lt等。
（2）基因标记基因：AA、BB、CC（野鼠色）。
（3）主要遗传学特征：
a.免疫学特性：随着一般饲养年龄的增加，IgG值随之增加，在生后3个月则开始下降，IgG2a则基本不变。
b.免疫耐受诱导比较容易，C3H/He 8-10周龄鼠对PVP反应敏感。
c.生理学特性：血红细胞均比正常值低。
雄鼠接触氯仿死亡率高。
d.癌发生率：乳癌，用于繁殖的雌鼠占85%-100%，未妊娠的雌鼠占70%-100%；白血病雌鼠为0.5%以下，雄鼠为4%；肝癌雌鼠为0%。
雄鼠为10%。
（4）特性和用途：乳腺癌发病率为97%(10月龄)，对致肝癌因子敏感，对狂犬病毒敏感,补体活性高，干扰素产量低。
主要用于肿瘤学、生理学、核医学、免疫学等方面的研究。
4．ICR小鼠
白色，为封闭群动物。
又称Swiss Hanschka为美国Hanschka研究所饲养的瑞士种小鼠。
后由美国肿瘤研究协会分送各地，取名ICR。
我国1973年从日本国立肿瘤研究所引进。
特征用途：体格健壮，繁殖力强，生长速度快，实验重复性较好。
已广泛用于药理、毒理、肿瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生产和教学。
5.免疫缺陷小鼠
①裸小鼠-BALB/cAnN-malm-(BALBlc Nude)：近交,在隔离器中维持。
起源：在Charles River Japan(CRJ)通过BALB/cABOIl-nu和BALB/cAnNCrj- nu交配和回交得到。
具有严格家系记录的怀孕BALB/CArlNCrj-nu雌鼠在1985年引人CRJ,并在同年进行繁育。
这种小鼠是近交的,遗传监测结果表明是BALB/c裸鼠。
毛色：无毛,白化。
特性和用途：生长发育不良,繁殖力低下,易发生严重感染。
胸腺缺失，为第11对染色体隐性遗传。
由于无胸腺,仅有胸腺残迹或异常上皮，不能使T细胞正常分化,故T细胞免疫缺陷。
B淋巴细胞正常,但功能缺陷，抗体主要为1gM,只有少量1gG。
无接触敏感性。
无移植排斥反应,因此可广泛用于兔疫学、肿瘤学和疾病发生机理的研究。
②SCID小鼠：近交,在隔离器中维持。
起源：该小鼠由Croy等在Guelph大学通过C.b-17sci 6bg/bg小鼠的杂交得到。
毛色：白化。
特性和用途：该突变基因小鼠血清中缺乏免疫球蛋白,其细胞在活体外对测试B或T细胞功能的免疫学实验不发生反应,在组织病理反面表现为淋巴组织重度淋巴细胞减少。
广泛应用于人类生理学、病理学、病毒学、免疫学和血液病学等方面的研究，它也在用于药物筛选和疫苗效应与安全性的试验。
③129小鼠
起源:该品系是杰克逊实验室的L.c-Stevens在研究工作中得到的。
毛色:腹部为浅色的深浅坏纹。
特性和用途:肿瘤发生率高(主要为性腺肿瘤和辜丸畸胎瘤),多用于肿瘤学和生殖生理学等方面的研究。