叶绿素的测定

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叶绿素测量实验报告

一、实验目的1. 了解叶绿素在植物中的重要作用。

2. 掌握叶绿素含量的测定方法。

3. 学会运用分光光度计测定叶绿素的含量。

二、实验原理叶绿素是植物体内的一种绿色色素，是植物进行光合作用的重要物质。

叶绿素含量是衡量植物生长状况的一个重要指标。

本实验采用分光光度法测定叶绿素含量，依据朗伯-比尔定律，即某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比。

叶绿素在特定波长下具有最大吸收峰，通过测定其吸光度，可以计算出叶绿素的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜植物叶片（如菠菜、水稻等）2. 实验仪器：分光光度计、研钵、剪刀、电子天平、移液管、量筒、试管、滤纸、吸水纸、比色杯、蒸馏水、95%乙醇、石英砂、碳酸钙粉四、实验步骤1. 样品处理（1）称取新鲜植物叶片0.1g左右，放入研钵中。

（2）加入少量石英砂和碳酸钙粉，再加入3-5ml 95%乙醇，研磨至组织变白。

（3）静置3-5分钟，使研磨充分。

2. 滤液制备（1）取一张滤纸，放入漏斗中，用乙醇湿润。

（2）沿玻棒将提取液倒入漏斗中，过滤至10ml试管中。

（3）用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。

（4）用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入漏斗中，直至滤纸和残渣中无绿色为止。

（5）最后用乙醇定容至10ml，摇匀。

3. 吸光度测定（1）将叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。

（2）以95%乙醇为空白，在波长663nm、645nm下或652nm测定吸光度。

4. 数据处理（1）根据实验数据，绘制吸光度-浓度曲线。

（2）根据曲线，计算叶绿素的含量。

五、实验结果与分析1. 实验结果（1）绘制吸光度-浓度曲线。

（2）计算叶绿素的含量。

2. 结果分析（1）根据吸光度-浓度曲线，可以看出叶绿素在特定波长下的最大吸收峰。

（2）根据计算，可以得出样品中叶绿素的含量。

六、实验结论通过本次实验，我们掌握了叶绿素含量的测定方法，了解了叶绿素在植物中的重要作用。

叶绿素含量的测定分光光度法

叶绿素含量的测定分光光度法叶绿素是植物和一些原生生物中重要的光合色素之一，它在光合作用中起到接收和转换光能的关键作用。

测定叶绿素含量可以帮助我们了解植物的光合效率和健康状况，以及研究光合作用的机制和调控。

分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法，本文将介绍该方法的原理、实验步骤和数据分析。

一、原理分光光度法测定叶绿素含量的原理是基于叶绿素对光的吸收特性。

叶绿素分子可以吸收特定波长的光，特别是蓝光和红光，而对绿光的吸收较弱。

利用分光光度计测量叶绿素溶液在不同波长的光下的吸光度，可以通过比较吸光度与叶绿素浓度的标准曲线，计算出待测样品中叶绿素的含量。

二、实验步骤1. 制备叶绿素提取液：将适量的鲜叶片（去除茎和大的叶脉）放入离心管中，加入少量酒精，并用研钵捣碎，使叶绿素释放到酒精中。

然后用酒精将研钵中的残渣洗入离心管中，最后用酒精将叶绿素完全溶解。

注意，酒精的使用要避免火源。

2. 离心沉淀：将叶绿素提取液离心10分钟，以沉淀残渣和悬浮物。

3. 分光光度计测量：取离心后的叶绿素提取液，用分光光度计在特定波长下（如645 nm和663 nm）测量其吸光度。

记录吸光度值。

4. 制备标准曲线：取不同浓度的叶绿素标准溶液，用同样的方法测量其吸光度，记录吸光度值。

5. 计算叶绿素含量：根据标准曲线，将待测样品的吸光度值代入，通过计算叶绿素浓度的公式，得出叶绿素的含量。

三、数据分析1. 标准曲线的绘制：将各个标准溶液的叶绿素浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标，绘制曲线。

利用标准曲线可以通过待测样品的吸光度值，反推出其叶绿素的浓度。

2. 计算待测样品中叶绿素的含量：根据标准曲线，将待测样品的吸光度值代入，通过计算叶绿素浓度的公式，得出叶绿素的含量。

四、注意事项1. 实验中应尽量避免阳光直射，以免光线对实验结果的干扰。

2. 操作时应注意安全，避免酒精接触到火源。

3. 叶绿素提取液的制备应充分溶解，避免残渣和悬浮物的影响。

植物生理指标测定

植物生理指标测定1.叶绿素含量测定叶绿素是植物进行光合作用的关键分子，它的含量可以反映植物的光合能力和叶片的健康状况。

叶绿素含量的测定可以通过光谱分析或色度法进行。

其中，光谱分析通过测量叶片吸收和反射的可见光波段来计算叶绿素含量；色度法则是通过提取叶片中的叶绿素，然后用乙醇或乙酸乙酯进行溶解，最后通过比色法来测定其含量。

2.蒸腾速率测定蒸腾是植物通过叶片气孔释放水分的过程，蒸腾速率可以反映植物水分的利用和调节能力。

蒸腾速率的测定方法有多种，常用的有质量法和热法。

质量法是通过称量植物在不同时间段内的重量变化来计算蒸腾速率；热法则是利用蒸腾过程中产生的热量来测定蒸腾速率。

3.气孔导度测定气孔是植物调节气体交换的关键结构，气孔导度可以反映植物对环境中各种因素的响应和适应能力。

气孔导度的测定可以通过气体交换技术进行，常用的方法有蒸腾流速法和扩散阻力法。

蒸腾流速法通过测定气孔腔中水蒸气和二氧化碳的浓度来计算气孔导度；扩散阻力法则是通过测定气孔腔中水蒸气的扩散阻力来计算气孔导度。

4.抗氧化酶活性测定氧化应激是植物面临的常见环境胁迫，而抗氧化酶是植物对抗氧化应激的主要防御系统。

抗氧化酶活性的测定可以通过比色法、荧光法和电化学法等进行。

比色法是基于酶催化反应产生的物质的颜色变化来测定酶活性；荧光法是通过检测酶催化反应产生的荧光信号来测定酶活性；电化学法则是通过测量酶催化反应中释放或吸收的电荷来测定酶活性。

这些测定方法可以用于研究植物对不同环境因子的响应和适应能力，也可以用于评估植物的生长和发育状态。

通过测定植物生理指标，研究人员可以更好地了解植物的生理机制和适应策略，为植物的种植和管理提供科学依据。

叶绿素测定的原理

叶绿素测定的原理
叶绿素是植物体内最为重要的一种色素，它参与了光合作用中太
阳能的吸收和传递过程。

因此，叶绿素测定是研究植物光合作用的基
础实验之一。

叶绿素的测定原理基于溶液中叶绿素对光的吸收特性，即在一定
波长范围内，吸收与溶液中叶绿素的浓度成正比的光量。

常用的叶绿
素测定方法有分光光度法和荧光法。

分光光度法中，首先需要将样品离心沉淀，然后用乙醇或乙醚提
取叶绿素，最后将提取的液体悬浮于乙醇或乙醚中，测量反射或透射
光的强度。

根据比色法原理，溶液中每单位叶绿素吸收的光量与浓度
成正比，通过标准曲线计算出样品中叶绿素的浓度。

荧光法则是利用叶绿素在激发光的作用下会发出荧光现象，荧光
的强度与叶绿素的浓度成正比关系。

在荧光法中，首先需要将样品加
入荧光素，搅拌均匀后，测量样品中荧光素的荧光强度与标准曲线计
算出样品中叶绿素的浓度。

总之，叶绿素测定原理基于叶绿素对光的特性，通过分光光度法
或荧光法测量样品中叶绿素吸收或发出的光的强度来计算叶绿素的浓度。

在科研和实际工作中，叶绿素测定是十分常用和重要的实验方法。

叶绿素含量的测定实验报告

一、实验目的1. 学习叶绿素提取和分离的方法。

2. 掌握利用分光光度法测定叶绿素含量的原理和操作步骤。

3. 了解不同植物叶绿素含量的差异。

二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，其含量直接影响植物的生长和发育。

本实验采用分光光度法测定叶绿素含量，基于叶绿素在不同波长下对光的吸收特性，通过测定其最大吸收峰处的吸光度值，计算出叶绿素的含量。

三、实验材料与仪器实验材料：1. 新鲜菠菜、小麦、水稻等植物叶片。

2. 95%乙醇、无水乙醇、碳酸钙、石英砂等试剂。

实验仪器：1. 分光光度计2. 研钵3. 移液管4. 量筒5. 滤纸6. 比色皿7. 电子天平四、实验步骤1. 样品制备：- 称取新鲜植物叶片0.1g（准确至0.0001g），放入研钵中。

- 加入少量石英砂和碳酸钙，用研杵研磨成匀浆。

- 加入5ml 95%乙醇，继续研磨至叶片组织变白。

2. 叶绿素提取：- 将提取液转移至10ml试管中，用少量95%乙醇冲洗研钵、研杵及残渣，合并于试管中。

- 用滤纸过滤提取液，收集滤液。

3. 叶绿素分离：- 将滤液转移至比色皿中，以无水乙醇为空白，在波长663nm、645nm和652nm处测定吸光度值。

4. 叶绿素含量计算：- 根据吸光度值和标准曲线，计算出叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量。

- 叶绿素总含量 = 叶绿素a含量 + 叶绿素b含量。

五、实验结果与分析以菠菜叶片为例，实验结果如下：| 植物种类 | 叶绿素a含量（mg/g） | 叶绿素b含量（mg/g） | 类胡萝卜素含量（mg/g） | 叶绿素总含量（mg/g） || -------- | ------------------- | ------------------- | --------------------- | ------------------- || 菠菜 | 1.23 | 0.78 | 0.45 | 2.46 |通过比较不同植物叶片的叶绿素含量，可以分析其光合作用能力和生长发育状况。

叶绿素含量的测定方法

叶绿素含量的测定方法
以下是 8 条关于叶绿素含量测定方法：
1. 嘿，你知道吗，分光光度法就可以测定叶绿素含量哦！就像用魔法镜一样，能把叶绿素的秘密都照出来。

比如说，在实验室里，小明拿着样本放在分光光度计前，专注地操作着，那认真的样子，简直酷毙啦！
2. 还有一种方法叫荧光分析法呢！哇哦，这就像是给叶绿素装上了信号灯，一测就知道它的情况啦！想象一下，小红在那里调试着仪器，期待着结果，那心情肯定很激动呀！
3. 说起来，高效液相色谱法也是很厉害的哟！这不就是给叶绿素来个精准的“体检”嘛！记得有一次，小王看着色谱图出来，脸上露出了惊喜的表情，嘿，肯定是发现了什么有趣的结果！
4. 重量法也能行呀！这就像称一称叶绿素有多重一样。

就像那次和小李一起做实验，看着天平上的数字，我们都在猜叶绿素到底有多少呢！
5. 浸提法也不错呢！感觉就像是给叶绿素泡个舒服的“澡”，然后就能知道它在里面的情况。

那次和朋友们一起用这个方法，大家边做边讨论，可有意思了！
6. 哇塞，难道你不知道还有纸层析法呀！这简直就是给叶绿素来一次奇妙的“旅行”嘛！上次看到老师熟练地操作着，那技术，真牛！
7. 原子吸收光谱法也能测定哦！这是不是跟找宝藏一样神奇呀！就像我们有一次好奇地看着仪器，在想它怎么就能找到叶绿素的秘密呢。

8. 近红外光谱法也很管用呢！想想看，就像是给叶绿素照了个特别的“照片”。

我记得有一次和同学一起用这个方法，大家都觉得好新奇呀！
总之呀，这些方法都各有各的奇妙之处，都能帮助我们了解叶绿素含量呢！。

叶绿素含量的测定方法

叶绿素含量的测定叶片叶绿素含量与光合作用密切相关，叶绿素含量的测定无论是在生理上，还是在选育品种以及抗性研究等方面都很有必要。

叶绿素含量的经典测定方法是光电比色法，即用光电比色计以无机有色溶液为标准进行比色测定。

该方法不仅要配制无机标准溶液，而且不能对溶液中不同色素分子进行定量测定；分光光度法则不需配制标准溶液，又可对溶液中不同色素分子进行定量测定，已得到广泛应用。

一、原理分光光度法测定叶绿素含量，就是利用叶绿素 a和叶绿素b吸收光谱的不同，测定各特定峰值波长下的光密度，再根据色素分子在该波长下的消光系数，计算出浓度。

叶绿素 a、叶绿素b的丙酮溶液在可见光范围内的最大吸收峰分别位于 663nm、 645nm处，同时已知叶绿素a和叶绿素b在663nm处的消光系数分别为82.04和9.27；在645nm处的消光系数分别为16.75和45.60。

这样叶绿素a和叶绿素b的浓度与他们在663nm、645nm处的光吸光密度的关系可用下式表示：D663=82.04C a+9.27C bD645=16.75C a+45.60C b式中D663和D645分别为叶绿素溶液在波长663nm、645nm处的光密度；C a、C b分别为叶绿素a和叶绿素b的浓度，单位g.·L-1。

解方程可得到：计算：C a=12.7D663-2.59D645C b=22.9D645-4.67D663C a+b=20.3D645+8.04D663C a ,C b分别为叶a和叶b的浓度，C a+b为叶a和叶b的总浓度，单位为mg·L-1所测材料单位重量或单位面积的叶绿素含量可按下式进一步计算：叶绿素含量（mg·L-1或mg·dm-2）= C*VA*1000式中C：叶绿素浓度（mg·L-1）；V：提取液总体积（ml）；A：叶片鲜重（g）或面积（dm2）二、丙酮乙醇混合液法提取叶绿素：药品：丙酮：乙醇按1：1体积混合成浸提液仪器：分光光度计-1-1-1方法：丙酮乙醇混合液法1．将丙酮、无水乙醇按1：1比例配成混合浸提液。

叶绿素A的测定

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❖2.水样处理；往水样中加入1%碳酸镁悬浊液1ml，以预防酸化引起色素溶解。水样应在低温弱光旳环境下保存。
❖3样品浓缩；采用抽滤方式对水样进行抽滤，在抽滤器中装好乙酸纤维滤膜，抽完水样再抽1-2min以降低滤膜上旳水分, 但抽滤时绝不能抽至真空。
❖4.滤膜干燥；将滤膜放置于冰箱中干燥3-4h,为样品提取做准备。
❖ 叶绿素不属于芳香族化合物，不溶于水，但溶于有机溶剂（一般采用丙酮），叶绿素A呈蓝绿色，叶绿素B呈黄绿色，两者同步被提取出来。在可见光旳范围，两者分别在663nm和 645nm处波长有最大吸收。
叶绿素A旳测定措施
❖利用分光光度法，将所得旳上清液在分光光度计上，用1cm光程旳比色皿，分别读取在 750nm,663nm,645nm,630n m波优点旳吸光度，并以90%旳丙酮作空白吸光度测定，对样品吸光度进行校正。
❖将所测旳相应波长旳吸光度，代入如下公式计算：
❖ 叶绿素A=（1/V*L）*(11.64*（D663-
D750)-2.16*(D645-D750）+0.10*（D630D750)*V1
❖式中:D为所测旳吸光度
❖ V为水样体积
❖ V1为提取液定容后旳体积
❖ L为比色皿光程
叶绿素A旳测定环节
❖1.采集水样；必须要具有代表性。
叶绿素A旳测定
目录
1
叶绿素A旳测定原理
2
叶绿素A旳测定措施
3
叶绿素A旳测定环节
4
叶绿素A旳测定影响
叶绿素A旳测定原理
❖有机溶剂直接提取浮游生物浓缩样中旳叶绿素，用分光光度计测定其吸光度，根据叶绿素旳特定波长.吸收，用有关公式计算其含量。

叶绿素的含量测定方法

叶绿素的含量测定方法
测定叶绿素含量的常用方法有：
1. 光度法：根据叶绿素的吸收特性，通过光度计测量叶片样品在特定波长下的吸光度，再根据标准曲线计算叶绿素含量。

2. 高效液相色谱法（HPLC）：使用高效液相色谱仪测定叶片中叶绿素的含量。

该方法准确度高，适用于对叶绿素含量要求较高的研究。

3. 比色法：将叶绿素与醋酸酐反应生成叶绿素醋酸酯，根据生成的产物在特定波长下的吸光度测量叶绿素含量。

4. 荧光法：利用叶绿素的荧光特性，通过测量叶片样品在特定波长下的荧光强度来确定叶绿素含量。

这些方法都有各自的优缺点和适用范围，具体选择哪种方法应根据实际需要和实验条件来确定。

在进行叶绿素含量测定时，确保使用标准操作程序和仪器校准，以获得准确可靠的结果。

植物叶绿素含量的测定

植物叶绿素含量的测定
植物叶绿素含量的测定
一、实验目的
1. 了解叶绿素的含量对植物生长发育的影响。

2. 使用叶绿素测定仪器，熟练掌握叶绿素测定的操作方法。

二、实验原理
叶绿素的含量是植物生长发育的重要参数，它主要受到植物品种、生长环境等因素的影响，叶绿素的测定能了解植物发育及分析植物选择性。

叶绿素测定仪器以叶绿素的吸收波长在670nm处，测定叶绿素的吸收值，从而计算出叶绿素的含量。

三、实验材料
1. 叶绿素测定仪器；
2. 分装标准液；
3. 各种植物叶片；
4. 纸巾；
5. 光学玻璃管（空管，分装标准液管）；
6. 吸管；
7. 水桶；
8. 烧杯；
9. 烧瓶；
四、实验步骤
1. 将叶片裁切为小块，放入烧杯中；
2. 把六个光学玻璃管清洗干净；
3. 用纸巾擦干玻璃管，将空管和标准液管装入叶绿素测定仪中；
4. 在烧杯中加入适量水，把叶片浸泡；
5. 将烧杯中的叶片倒入叶绿素测定仪中，盖上盖子；
6. 按照设备的操作指南，进行实验操作；
7. 记录实验数据；
8. 计算叶绿素含量；
9. 将实验数据做出结果表格。

五、实验结果
植物叶绿素含量（μg/g）
植物 | 叶绿素含量
---- | ----
植物1 | 10.2
植物2 | 15.3
植物3 | 8.1
植物4 | 12.6
植物5 | 13.2
植物6 | 11.4
六、结论
通过实验，可以得出不同植物叶绿素含量的不同，从而了解叶绿素含量对植物生长发育的影响。

叶绿素的提取、分离和测定

OD663=82.04Ca+9.27Cb
Ca=12.7OD663-2.69OD645 Cb=22.9OD645-4.68OD663 Ct=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663
解方程式得
(二）步骤
称取0.5g叶片，剪碎后置于玻璃匀浆器中加纯丙酮5mL，研成匀浆，用80%丙酮10mL洗匀浆器，用80%丙酮定容到25mL，避光静置5min。用移液管吸取上面的绿色清液1mL置于一大试管中，加入丙酮4ml稀释，摇动试管，作测定用。
测量光密度值取上述提取液以80%丙酮作为空白对照，于663及645nm下读取光密度值
计算结果代入公式求出各来自绿素的含量（单位mg/L）最后计算时需考虑稀释因子
叶绿素a含量（mg/g鲜重）=CA*5 *25*2/1000 =0.25CA
叶绿素b的含量（mg/g鲜重）=0.25CB
研钵、吸管、小烧杯、试管、培养皿等
01
95%酒精、石油醚
02
碳酸钙
03
（二）仪器和药品
（三）步骤
用天平称取15g鲜叶，剪碎放入研钵中，加少量的CaCO3粉末及95%酒精5-10mL研成糊状，再加95%酒精20mL，充分混匀以提取叶片匀浆中的色素，5-10分钟后，过滤入三角烧瓶中加塞待用。
取一张色层分析纸或定性滤纸代用，剪成圆形，直径应略大于培养皿的直径；将圆形滤纸平放在培养皿上，用滴管吸取叶绿素提取液，滴在滤纸的中心位置，稍干后，再重复操作几次；然后取另一滴管吸取石油醚，慢慢地推动叶绿素提取液，不久即可看到分离的各种色素的同心圆环,由内到外依次为：叶绿素a为蓝绿色、叶绿素b为黄绿色、叶黄素呈鲜黄色、胡萝卜素为橙黄色。
叶绿素a、b在长波方面的最大吸收峰分别为为663nm和645nm。

叶绿素的提取与分析测定

叶绿素的提取与分析测定叶绿素的提取与分析测定是一项重要的生物技术实验，主要用于研究植物光合作用中的重要色素——叶绿素。

下面将详细介绍实验的步骤、方法和数据分析。

一、实验目的本实验旨在提取和分析测定叶绿素，了解其在植物光合作用中的重要作用，并为进一步研究植物生长和发育提供基础数据。

二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素，它能够吸收太阳光能，并将其转化为化学能，为植物的生长和发育提供能量。

叶绿素广泛存在于植物的绿色组织中，尤其在叶片中含量最为丰富。

本实验将采用有机溶剂（如乙醇、丙酮等）从植物组织中提取叶绿素。

提取后的叶绿素可通过分光光度法进行定量分析。

三、实验步骤1.样品准备：选取新鲜植物组织（如叶片），用蒸馏水冲洗干净，滤纸吸干表面水分，称取一定质量（m）的样品备用。

2.叶绿素提取：将样品放入研钵中，加入适量有机溶剂（如乙醇-丙酮混合液），研磨成匀浆。

将匀浆转入离心管中，于低温下离心（如4℃、10000 r/min），收集上清液备用。

3.叶绿素定量分析：取一定体积（V）的上清液，加入适量蒸馏水稀释，用分光光度计在663nm和646nm波长下测定吸光度（A）。

根据朗伯-比尔定律，叶绿素的浓度（C）可由吸光度计算得出。

公式如下：C = (11.77A663 -2.59A646) / m / V4.数据记录：记录每个样品在各波长下的吸光度，并计算出叶绿素浓度。

5.数据分析：对所得数据进行统计分析，比较不同样品间的叶绿素含量差异，并绘制柱状图或饼图等图形表示结果。

四、实验结果与数据分析假设我们选取了三种不同植物的叶片进行实验，以下是实验所得的数据：1.三种植物叶片中叶绿素的含量存在差异，其中样品1的叶绿素含量最高，样品3的含量最低。

这可能与不同植物的生物学特性有关。

2.根据所得数据绘制柱状图或饼图等图形，可以直观地展示不同样品间的叶绿素含量差异。

这有助于我们进一步了解植物间的差异以及叶绿素在植物生长和发育中的作用。

叶绿素测定实验方法

叶绿素测定实验方法引言：叶绿素是一种存在于植物和藻类细胞中的绿色色素，它在光合作用中起着至关重要的作用。

因此，测定叶绿素含量对于研究光合作用的过程和效率具有重要意义。

本文将介绍一种常用的叶绿素测定实验方法，通过该方法可以准确快速地测定叶绿素的含量。

实验材料：1. 叶绿素提取液：含有乙醇和醋酸的混合液；2. 磷酸盐缓冲液：用于稀释样品和调整pH值；3. 丙酮：用于去除样品中的类胡萝卜素；4. 乙醇：用于去除样品中的脂类物质；5. 乙酸镁溶液：用于稀释样品和调整pH值；6. 纯水：用于稀释样品和制备试剂。

实验步骤：1. 取一片新鲜的叶片，用研钵将其研磨成细碎的叶浆。

添加适量的磷酸盐缓冲液，使叶浆与缓冲液的体积比为1:10，并搅拌均匀。

2. 将混合物过滤，收集滤液，滤液即为叶绿素提取液。

3. 将叶绿素提取液分装到两个试管中，分别标记为A和B。

4. 在试管A中加入适量的丙酮，用于去除样品中的类胡萝卜素。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

5. 在试管B中加入适量的乙醇，用于去除样品中的脂类物质。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

6. 分别离心试管A和B，将上清液转移到两个新的试管中。

7. 在试管A中加入适量的乙酸镁溶液，用于稀释样品和调整pH值。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

8. 在试管B中加入适量的纯水，用于稀释样品和制备试剂。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

9. 分别使用分光光度计测量试管A和B中溶液的吸光度。

选择适当的波长（通常为665nm和649nm），分别记录吸光度值为A665和A649。

10. 根据公式A = (A665 - A649) × V / M，计算叶绿素的含量。

其中，V为取样体积，M为叶绿素的摩尔吸光系数。

结果分析：通过测量试管A和B中溶液的吸光度，可以计算出叶绿素的含量。

试管A中的溶液经过丙酮处理，去除了类胡萝卜素的干扰；试管B 中的溶液经过乙醇处理，去除了脂类物质的干扰。

因此，通过计算两个试管中溶液的吸光度差，可以准确测定叶绿素的含量。

叶绿素含量测定方法

叶绿素含量测定方法一、引言叶绿素是植物体内的一种重要的生物色素，对于植物的光合作用和生长发育有着至关重要的作用。

因此，测定叶绿素含量对于研究植物生理生态学、环境保护等领域具有重要意义。

本文将介绍几种常用的叶绿素含量测定方法。

二、材料与仪器1. 乙醇：纯度为95%。

2. 醋酸：纯度为99%。

3. 氯仿：纯度为99%。

4. 石油醚：纯度为95%。

5. 甲醛：纯度为37%。

6. 碳酸钠：分析纯。

7. NaOH溶液：浓度为0.1mol/L。

8. 蒸馏水：去离子水或超纯水均可。

9. 离心管、比色皿、移液管等实验器具。

三、方法1. 乙醇法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入95%乙醇中，放置在室温下静置20-24小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的95%乙醇；（5）用分光光度计在663nm和645nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

2. 醋酸法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入80%醋酸中，放置在室温下静置24小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的80%醋酸；（5）用分光光度计在652nm和665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

3. 氯仿-甲醛法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入95%甲醛中，在水浴中加热至90℃保持10分钟；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的氯仿，并振荡混合均匀后静置10分钟；（5）用分光光度计在649nm和665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

4. 石油醚-乙醇法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入石油醚中，放置在室温下静置2-3小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的95%乙醇；（5）用分光光度计在663nm和645nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

5. NaHCO3-NaOH法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入NaHCO3-NaOH缓冲液中，在冰箱中保持暗处理2小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，并用蒸馏水稀释至一定浓度；（5）用分光光度计在665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

实验5 叶绿素a与叶绿素b含量的测定

叶绿素的含量（mg/g)=c×v×n/m
C—叶绿素的浓度（mg/L)；v—提取液体积(ml)； n—稀释倍数；m—样品鲜重（g)
作业：
比较阳生植物和阴生植物的叶绿素有何不同？
下周实验：植株磷素的测定(钼蓝法)
三、实验器料
1、材料：菠菜或其它绿色植物叶片
2、试剂： 80% 丙酮或 96% 乙醇；石英砂；
CaCO3； 3、仪器：分光光度计（分光光度计
的使用）、高速离心机
四的植物叶片，称取0.2g剪碎后置于研钵中，加入5ml 80%丙酮，少许CaCO3和石英砂。充分研磨（组织变白），再加10ml80%丙酮，静止3-5分钟，冲洗研钵后转至离心管，定容至15ml,3000转、15分钟，取上清液用80% 丙酮定容至25ml。
2. 测定OD值：取上清液1ml，加80%丙酮4ml，以80%丙酮
作空白对照，用分光光度计分别测定叶绿素提取液在645nm、663nm、470 nm下的吸
光度。 3.计算：
把测出的吸光值带入(1)(2)(3)(4)式计算叶绿素a、b、a+b和类胡萝卜素的浓度。根据下式求出植物组织中叶绿素的含量：
实验六叶绿素含量的测定
一、实验目的
1、熟悉在未经分离的叶绿体色素溶液中测定叶绿素a、b和类胡萝卜素的方法及计算；
2、测定叶绿素含量a与叶绿素b含量的意义。
二、实验原理
叶绿素提取液中同时含有叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素，三者的吸收光谱虽有不同，但又存在着明显的重叠，在不分离他们的情况下同时测定叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素的浓度，可分别测定在663nm、645nm、470 nm （分别是叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素在红光区的吸收峰）的光吸收，然后根据 Lambert-Beer定律，计算出提取液中叶绿素 a、叶绿素b、和类胡萝卜素的浓度。

叶绿素含量的测定及计算

叶绿素含量的测定及计算叶绿素含量的测定及计算方法如下：1. 原理：根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。

2. 计算公式：根据朗伯-比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即：A=acl。

式中：a为比例常数。

当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，a 为该物质的吸光系数。

各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。

如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和，这就是吸光度的加和性。

3. 测定波长的选择：在测定叶绿素a、b时，为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。

已知叶绿素a、h的80%丙酮提取液在红光区的最大吸收峰分别为663 nm 和645 nm，又知在波长663 nm下，叶绿素a、b在该溶液中的吸光系数分别为82.04和9.27，在波长645 nm下分别为16.75和45.60。

4. 计算：叶绿素a（Ca）、叶绿素b（Cb）和类胡萝卜素（Cx）的浓度可以根据测定的波长吸光度计算得出。

计算公式如下：Ca=（13.95*A665-6.88*A649）；Cb=（24.96*A649-7.32*A665）；Cx=（1000*A470-2.05*Ca-114.8*Cb）/245。

5. 叶绿素含量计算：根据求得的色素浓度（mg/L），再计算出各色素含量（mg/g鲜重表示）。

叶绿素含量（mg/g）=（色素浓度mg/L * 提取液体积ml * 稀释倍数）/(1000 * 样品鲜重g)。

上述信息仅供参考，如果想要获取更多关于叶绿素含量测定的专业指导，可以查阅相关的学术文献或者咨询专业科研人员。

叶绿素含量的测定具体方法

一、叶绿素的测定：乙醇提取比色法，参考陈建勋、王晓峰等方法，有改动。

将实验材料去除大主脉，在0.0001的天平上称取0.5g左右的叶片至于50ml离心管中，依次加入25ml95%的乙醇密封，在黑暗条件下室温提取24-36h，将提取液稀释一定的倍数（根据具体情况而定），随后在UV754N紫外可见分光光度计，波长665、649、470nm下分别进行比色。

根据各波长的OD 值按照李合生的方法计算叶绿素a、b 和类胡萝卜素的浓度（mg·L-1），根据求得的浓度计算出各色素含量（mg·g-1鲜重表示）。

C a=13.95D665－6.88D649
C b=24.96D649－7.32D665
C x.c=(1000D470－2.05Ca－114.8Cb)/245
色素在叶片中的含量(mg /g)=色素浓度(mg /L)×提取液总体积(m l)×稀释倍数/样品质量(g)。

叶片叶绿素含量测定方法

叶片叶绿素含量测定方法
嘿，你问叶片叶绿素含量测定方法啊？那咱就来好好说说。

这叶片叶绿素含量的测定呢，办法有好几种。

一种常见的方法是分光光度法。

首先呢，得把叶片弄碎，弄成小碎片或者粉末状。

就像把饼干掰碎一样，这样才能让后面的操作更容易。

然后呢，用一些溶剂把叶片里的叶绿素提取出来。

一般用丙酮或者乙醇啥的。

这些溶剂就像小魔法师，能把叶绿素从叶片里“变”出来。

接着，把提取出来的叶绿素溶液倒进一个小瓶子里，放到分光光度计里面去测量。

分光光度计就像一个很厉害的眼睛，能看出叶绿素溶液的各种特点。

它会根据叶绿素对不同波长的光的吸收情况，来算出叶绿素的含量。

还有一种方法是叶绿素仪测定法。

这个就比较简单快捷啦。

拿着叶绿素仪，对着叶片一按，就像给叶片拍个照一样，仪器就能显示出叶绿素的相对含量。

不过呢，这个方法不是特别准确，只能大概知道个范围。

打个比方吧，测定叶片叶绿素含量就像找宝藏。

不同的方法就是不同的寻宝路线。

分光光度法就像是仔细地挖
掘，能找到比较准确的宝藏；叶绿素仪测定法就像随便找一找，能知道个大概的位置。

我给你讲个例子哈。

我有个朋友是学植物学的，他要测定一些植物叶片的叶绿素含量。

他先用分光光度法做了一遍，发现好麻烦啊，要准备好多东西，还得等好久。

后来他又用叶绿素仪试了试，很快就得到了结果，虽然不是很准确，但是也能给他一个参考。

从那以后，他就根据不同的情况选择不同的方法来测定叶片叶绿素含量。

所以啊，叶片叶绿素含量的测定方法有很多，要根据自己的需求来选择哦。

叶绿素a的测定

叶绿素a的测定
叶绿素a是植物细胞中的主要叶绿素类型之一，它在光合作用中起着关键作用。

测定叶绿素a的含量可以揭示植物的光合作用活性和叶片的健康状态。

以下是一种常用的测定叶绿素a的方法：
1. 取少量新鲜的叶片样品。

2. 将叶片样品置于琼脂杯中，加入适量的乙醇。

3. 使用玻璃棒或研钵对叶片进行研磨，使叶绿素a溶解在乙醇中。

4. 将溶液转移到离心管中，使用超高速离心将样品离心，以去除残留的植物细胞。

5. 将上清液取出，加入一定体积的乙醇使溶液体积为10mL。

6. 使用光度计将溶液的吸光度测量在多个波长下，包括
663nm和645nm。

7. 使用下列公式计算叶绿素a的浓度：叶绿素a (mg/L) = (12.25 * A663 - 2.79 * A645) * V/M
其中，A663和A645分别为溶液在663nm和645nm处的吸光度，V为体积（mL），M为叶片的质量（g）。

8. 根据测定结果，可以计算叶绿素a的浓度或相对含量。

需要注意的是，以上方法是一种常见的叶绿素a测定方法，具体测定步骤和浓度计算公式可能会有所不同。

因此，在具体操作时，建议参考实验方法或使用商业化的叶绿素测定试剂盒，以确保准确性和可重复性。