USP药典培训--注射剂微粒检查(曾长金)

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要点
1、推荐用层流台； 2、人员流动控制在最小； 3、专用的玻璃器皿； 4、为产品容量和类别而开发的稀释和汇集系统； 5、已经建立仪器标准化测试（IST）与实验室控制； 6、供应商提供校准支持或者自己建立有关程序文件支持的内部体系。
测定微粒的光阻计数仪器可能不同； 通常仪器生产商在校准、验证和技术支持上能给予强烈支持； 试验人员（需要培训和资质确认，必需熟悉粒子计数的原理和测试操作） 目标是对注射剂中的微粒的大小和数目测定和良好的重现性。 光阻法微粒测定仪器的校准必需通过手动校准的方式进行，仪器应有标准 化校准的硬件和软件。
Байду номын сангаас14
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第二节 光阻法与膜显微镜法
简述内容
可见度
visuality
光阻法
Light Obscuration Particle Count Test
膜显微镜法 对比 Others
contrast
Microscopic Particle Count Test
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具，稀释和汇集系统，文件化系统等）；
7、某些物质不能用该法测试。
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三、膜显微镜法计数测试
原理：将一个或多个容器中的产品中的固体物质截留在过滤膜上，计 算在膜表面上的亚可见的到可见的，固体或半固体颗粒。通过计算100倍 复合双眼光学显微镜上扫描截留表面上的颗粒计数。 该方法高度依赖操作员，操作员对微粒和可接受性做出决策。此外， 该法要求全部计数，也即对滤膜上的微粒一个接一个的数。但是部分计数 是允许的，也即只数网格中的一部分，然后估算整个滤膜上的微粒数目， 不过<788>和<1788>没有定义。建议：如果少于1000个微粒则应当 全部计数，如果计数标尺视野（GFOV）中央和边缘的微粒计数小于2个 那么就计算20个GFOV 25mm膜的总计数或计算100个GFOV 47mm膜 的总计数。
校准
方法2：显微镜法
≥10 μm 3000个（每个 容器）
此主要针对研发和有 实力的单位。
≥25 μm 300个（每个 容器） 2个（每ml）
12个（每ml）
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五、微粒评估
1、终产品100%通过目视检查 （微粒的限度：50~100μm） 2、容器含有的显微可见微粒应受控并满足最低标准（主要通过光阻法&膜 显微镜法）。
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3、双重法
不溶性微粒检查的两种方法均适用于批放行检验或者稳定性试验检测 ，一般说来，首先采用光阻法，如果必要才采用膜显微镜法，每次检查可 以结合两种方法一起用。
条件： 1、必需保证供试品溶液不被污染； 2、通过药品的生产进度建立合适的批取样检测计划； 3、在整个试验过程中采用纯水清洗容器、纯水稀释样品和纯水作为 空白； 4、不溶性微粒检查可以适用于大容量和微量注射液；
Zeng Changjin
曾长金（Asher Charles）
Shanghai Tofflon Science and Technology Co.,Ltd.
Contents 目录
1
第一节
概述
光阻法与膜显微镜法介绍
2
3
第二节
第三节
光阻法测试
膜显微镜法测试 总结
4
5
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第四节
第五节
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膜显微镜法
1、采用过滤的方式将单个容器或多个容器中的样品中的不溶性微粒过滤在滤 膜上； 2、对于滤膜（孔径小于1μm）上收集的显微可见微粒、固体和半固体微粒进 行计数； 3、将滤膜放在视野放大100倍的显微镜下观察进行微粒计数； 4、试验人员在计数的同时确定微粒的大小，同时对是否符合标准要求做出判 断。
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仪器标准化测试（IST）:
1、流速的确认； 2、传感器的确认和校准（ 确定传感器的测试浓度范围、传 感器的灵敏度及检测最小微粒的 粒径）； 3、供试品取样体积的准确 性确认； 4、系统适用性试验（微粒 计数的准确性，系统确认和实验 室控制）。
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1. 2. 3. 依赖于实验员； 膜显微镜法最理想的操作条件是在两个靠得很近的单向气流工作台上进行 操作，湿的层流罩专用于过滤操作，干层流操作工作台专用于显微镜检查 。 膜显微镜法可适用于大小容量的注射液的不溶性微粒检查，但是也可以适 用于非常规机型的检查（乳剂，悬液）； 对于较小量的供试品而言，可以不进行稀释至最小检验体积就可以直接进 行测定。
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光阻法
1、显微可见的固体微粒、液体和气体微粒 都被计数（缺点：造成测定值比较大）； 2、样品测试液需被量化(严格的取样程序)； 3、有相应的日常校准和取样程序（仪器系统化 标准化测试）； 4、测试人员数目和环境要求受控； 5、要有空白对照； 6、有专门的测试供应系统（水，专用的器皿工
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微粒来源反映产品配方的不稳定性：
1、过程控制的失败；
2、配方的设计不好，影响了产品的使用、储存和相容； 3、就生物制剂而言，特别考虑产品的稳定性； 4、容器和密封系统的问题； 5、包装的问题（有的包装随时间的增加，会改性产生污染）； 6、泄露或过量的气体泄露； 7、不可控或未知的辅料因素； 8、活性成分（某些成分分解）。
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二、什么是不溶性微粒？
不溶性微粒是指在注射剂或溶液中
不应该出现的、外来的、流动的物质 （不是气泡）。任何半固体或固体， 无论软硬、透明与否，都可被作为微 粒来计算。
subject
本质： 1、不溶的、流动的固体或半固体；
2、单体或集合物； 3、单品种或多品种； 4、化学作用形成。
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四、微粒检测要求
静脉注射液和滴眼液都是无菌 液体，在产品放行前，在物理外观 和稳定性应该符合一定的要求，它 们在放行前必须符合两个关于微粒 限度的测试。
1、可见微粒必须‘基本没有’； 2、显微可见微粒含量必须很低。
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方法1：光阻法（LO）
注射液体积 小容量注射液（体积小 于100ml） 大容量注射液（体积大 于100ml） ≥10 μm 6000个（每个 容器） 25个（每ml） ≥25 μm 600个（每个 容器） 3个（每ml）
第一节 概述
1、微粒检查介绍
2、不溶性微定义
3、微粒检查的意义
4、微粒检查的要求
5、微粒评估
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一、微粒检查介绍
在美国标准USP中，就静脉注射液和滴眼液 进行微粒检查，主要涉及光阻法和膜显微镜法。这 些方法并不是最好的，不一定对每一种配方和剂型 都最合适（乳剂就不合适），但是它代表了微粒测 定的基础和标准的方法，可以理解成最常用的方法 。就这些方法而言，许多公司积累了许多宝贵的和 丰富了经验和历史数据。此外，分析方法和限度是 随着技术进步而演化，标准和规定并不是不变的， 但是方法和限度的改变 受监管机构、市场、商业 等方面的影响。
一、微粒的可见度
影响可见度的因素： 1、实验人员的视力/实验仪器的灵敏度； 2、微粒的物理特性； 3、实验环境（背景和光线设置）。 许多药品生产企业采用仪器和人联合进行系列检查，同时培训质量控制内 审人员，以提高检验的可靠性。
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二、光阻法
原理：当液体中的微粒通 过一窄小的检测区时，与液 体流向垂直的入射光，由于 被微粒阻挡而减弱，因此由 传感器输出的信号降低，这 种信号变化与微粒的截面积 大小相关，光阻法检查注射 剂中不溶性微粒即依据此原 理。
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四、比较
微电子计数，重复性较高
目视计数，依赖于操作员的判断，重复性较差。
容易受气体，不溶性油滴等的影响， 测得数据往往较高，准确度不是很好！
光阻法其局限性在于微粒的形状，优势在于 球形颗粒。其将所有的微粒模拟成球形，当 微粒的外形与球形有差异时，就会出现偏差。
很大程度上依赖于操作员操作，企业要有严格的操 作员培训和考核机制。
膜显微镜法直接将膜上的微粒与校准过的直径为10μm 和25μm的圆进行比较，同时还有一个镜台标尺。 操作者还可以在操作的时候将视野中的微粒与直 径为10μm和25μm的圆进行比对计数。
对于乳剂或某些剂型不合适
可以对注射剂直接测量，适用性较广，对于小剂量昂 贵的产品可以直接测量，不必汇集和稀释到测量水平。
光阻法
膜显微镜法
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第三节 光阻法测试
详细介绍内容
1. Introduction 2. 条件 3. 测试方法和步骤 4. 结果判定
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一、Introduction
注射剂及非口服输液中的悬浮微粒是非故意存 在于溶液中的可移动的不溶性的粒子（非气泡）。 下文将陈述光阻法和膜显微镜法对注射剂及非口服 输液中的悬浮微粒进行测试。光阻法已经较好的应 用于注射剂及非口服输液中的悬浮微粒的测试，但 是有必要在光阻法测试基础上结合膜显微镜法测试 来确认测试结果的可靠性和合理性。 这两种方法并不是适用于对所有的非口服的注 射或输液进行悬浮微粒测试。如：乳剂、胶体和脂 质体供试液不适合用光阻法测试，而用膜显微镜法 比较合理。相类似，当置入传感器，会产生气体或 气泡的产品，不适合用光阻法而选用膜显微镜法。 如果供试品的粘度比较高，需要对其进行稀释后才 能用两种方法进行分析测试。 随机的一个或一组样本测试的结果并不能推测 未被测试的产品微粒情况，因此可靠的符合统计学 采样的程序开发时非常重要的。