生物化学综合实验---合肥工业大学精品课程
新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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三、遗传密码子
1.密码子 为一个氨基酸编码进入蛋白质多肽链特定线性
位置三个核苷酸单位称为密码子（Coden）或三 联体密码。
密码子发觉
统计学方法 人工合成仅由一个核苷酸组成多聚核苷酸，推测由哪一个
氨基酸合成多肽 核糖体结合试验 1965年，Nirenberg用poly u加入C14
肽链终止因子（EF1α EF1βγ ）及释放因子（RF）
线粒体、叶绿体内蛋白质合成同于原核细胞
新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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蛋白质合成过程小结
肽链合成方向N C（同位素证实） 以mRNA5’-3’方向阅读遗传密码 该合成过程是一个耗能过程
新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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原核生 物核糖 体组成
真核生 物核糖 体组成
新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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2. tRNA
结合氨基酸：一个氨基酸 有几个tRNA携带，结合 需要ATP供能,氨基酸结 合在tRNA3‘-CCA位置。
反密码子：每种tRNA反密 码子，决定了所带氨基 酸能准确在mRNA上对 号入座 。
e.亚胺环己酮（放线菌酮）
只抑制真核60S亚基肽酰转移酶活性
干扰素对病毒蛋白合成抑制
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岛素) 6. 高级结构形成 在分子伴侣帮助下形成正确结构 7.锚定（定位）
新版生物化学合工大蛋白质的生物合成
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七、蛋白质生物合成调整
1. 转录水平调整
生物化学合工大第六章RNA的生物合成ppt课件
DNA携带的遗传信息（基因）传 递给RNA分子的过程称转录 （transcription ）。
在生物界，RNA合成有两种方式：一 是DNA指导的RNA合成，此为生物体 内的主要合成方式。另一种是RNA指 导的RNA合成，此种方式常见于病毒。 转录产生的初级转录本是RNA前体 （RNA precursor），需经加工过程 （processing）方具有生物学活性。
（1）其单链RNA可充当mRNA，利用寄主中的核糖体合成 外壳蛋白和RNA复制酶的β亚基。
（2）复制酶的β亚基可与来自寄主细胞的亚基αδ自动装配成 RNA复制酶，可进行RNA的复制，以分子中单链RNA为模 板（正链），复制出一条新的RNA链（负链），再复制出 正链，与外壳蛋白组装成新的噬菌体颗粒。
RNA+
区域。（2）富含G-C的区域之后是一连串的dA碱基序列， 它们转录的RNA链的末端为一连串U（连续6个）。
三、真核生物的转录作用
1.真核RNA聚合 酶
酶类 分布
产物
活性
分子量 (KDa)
反应条件
Ⅰ 核仁 rRNA（ 5.8S、 50～70％ 500 低离子强度要
18S、28S ）
求Mg2+或
Ⅱ 核质
3
5
3 RNA+ 5
5
3
RNA-
❖RNA-及 RNA+的合成方向均为5‘ 3’ 释放
5 RNA- 3
3
5
RNA+
释放
本章重点:
1. RNA合成的机制 2. RNA的转录后加工
TTGACA
5’
3’
AACTGT
－35序列
Sextama 框
生物化学合工大第十二章核酸的酶促降解和核苷酸代谢
NH3 CO2
4
C
N3
C5
C2
C6
1
N
天冬氨酸
尿嘧啶核苷酸合成途径
嘧啶核苷酸补救合成途径（自学）
尿嘧啶+PRPP 尿嘧啶+1-P-核糖 尿嘧啶核苷+ATP
UMP+PPi 尿嘧啶核苷+Pi UMP+ADP
脱氧核苷酸的合成
1、脱氧核苷酸的合成 2、脱氧胸腺嘧啶核苷酸的合成
核糖核苷酸的还原反应
NADP+
（ 3´端外切3得5）
内切核酸酶对RNA的水解位点示意图
Py Pu Py Py G A C U G A
1´
p
p
p
p
p
p
p
p
p
p
OH
5´
3´
RNAase I RNAase I RNAase T1
RNAase T1
Pu ：嘌呤
Py：嘧啶
限制性内切酶
原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基 对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序 列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类 酶称为限制性内切酶（ristriction endonuclease）。
磷酸核糖转移酶
嘌呤+PRPP
A(G)MP+PPi
嘌呤+1-P-核糖
嘌呤核苷 ATP
ADP A(G)MP
嘧啶核苷酸从头合成途径
a、嘧啶环上原子的来源 b、UMP的从头合成
c、UMP转变为CTP
CTP合成酶
UMP UDP UTP
CTP
ATP Gln H2O
嘧啶环上各原子的来源
生物化学实验
生物化学实验》课程实验大纲一、学时学分总学时：30 学分：1 实验时数：30二、实验目的生物化学是生物技术及生命科学相关专业的专业基础课程，其实验教学是使学生理解和掌握生物化学基本原理的必需环节。
生物化学实验所包含的基本技能涉及生物科学的各个领域，是完成其它专业课程实验的基础，在教学中占有重要地位。
本课程的实验目的主要包括：（1）加深生物化学基本概念和基本原理的理解与掌握；（2）培养学生掌握基本生化实验方法和实验技术，掌握各个实验的基本原理；（3）系统训练专门的实验技能，熟练使用各种常用生化实验仪器；（4）训练学生观察实验现象、准确记录实验数据、正确处理与分析实验结果的技能，培养严谨细致的科学作风。
三、实验基本原理蛋白质的溶解受盐、酸、碱、重金属等因素的影响，发生可逆和不可逆沉淀；在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，加入SDS后由于各种蛋白质分子量大小不同，所以蛋白质在电泳中迁移率也会有不同；蛋白质的分子大小不同，小分子蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而被滞留，大分子被排阻在凝胶颗粒外面而迅速通过层析柱；碱性缓冲液中DNA分子带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动；激活剂、抑制剂、温度等对酶促反应速度有极大影响；电子传递过程中的氧化还原反应可通过伴有颜色变化的化合物作受体来研究；纸层析技术可以用于转氨基作用中不同物质的检测。
四、实验基本要求严格遵守实验室各项规章制度；实验前认真预习实验指导书中有关实验的原理与步骤；认真听取理解教师在实验进行前的重点讲解；分小组进行实验，保持实验室安静，保持实验台整洁有序；正确使用实验仪器；认真观察与分析实验现象，客观真实地填写实验数据并进行结果分析；认真、准确、整洁地撰写实验报告并按时上交。
五、考核与报告考核分笔试和平时成绩两项。
笔试成绩占70%，平时成绩占30%。
平时成绩根据整个课程实验过程中学生的各方面表现和实验报告撰写情况打分。
六、主要仪器与设备组织捣碎机、水浴锅、高速冷冻离心机、台式离心机、柱层析系统、电泳仪、垂直与水平电泳槽、紫外与可见分光光度计、蛋白质检测仪、紫外透射反射仪、冰箱、电子天平、反渗透系统等。
最新生物化学(合工大)第十三章物质代谢的调节控制PPT课件
激素调控往往是局部性的，并且直接或间接受到 神经系统的控制。
通常一种激素只作用于一定的细胞组织，不同的 激素调节不同的物质代谢或生理过程。
激素具有以下几个特点：
1.含量少；在生物体某特定组织细胞产生。 2.通过体液的运动被输送到其他组织中发挥
转录初级产物RNA （Pro－RNA）hnRNA
③转录后加工的调节（RNA Processing control）
④转运调节（RNA transport control）
mRNA
⑤翻译调节 （translational control）
⑥mRNA降解的调控
多肽链
mRNA降解物
⑦翻译后加工及蛋白质活性控制 （protein activity control）
多肽及蛋白质激素
由脑垂体、下丘脑、胰腺、甲状旁腺、 胃肠粘膜以及胸腺等分泌的激素属于多 肽或蛋白质激素。这些激素具有各种各 样的功能。
胰岛素
胰岛素是由胰腺中胰岛的β-细胞分泌的一种 含有51个氨基酸残基的蛋白质激素。
胰岛素由两条多肽链组成胰岛素的生理功能主 要是促进细胞摄取葡萄糖；促进肝糖原和肌糖 原的合成；抑制肝糖原的分解。
lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖存在又需缺
乏葡萄糖。
阻遏物调节机制
结构基因 调节基因 操纵基因
调节基因 操纵基因 结构基因
mRNA
阻遏蛋白原 酶蛋白
色氨酸操纵子的调节机制
辅阻遏物trp
调节基因编码的阻遏蛋白原不与操作基因结合，结构基因转录。 Trp或Trp－RNA与阻遏蛋白结合，使之构象发生变化与操纵基 因结合，结构基因不能表达。
生物化学-合工大第一章 绪论71472ppt课件
Formation of a hydrogen bond between the hydrogen side of one water molecule and the oxygen side of another water molecule.
The presence of polar areas in the amino acids that makeup a protein allows for hydrogen bonds to form, giving the molecule a three-dimensional shape that is often vital to that protein's proper functioning.
生物化学-合工大第一章 绪论 71472教学
第一章 绪论
一、生物化学发展简历 二、生物化学的基本内涵 三、生物化学在专业学习中的地位与作用
四、如何学好生物化学
五、学习本课程的基本要求
二、生物化学的基本内涵
生物化学
是研究生命活动过程中物质基础
及其化学反应规律的一门科学。
1、生命活动的物质基础
几乎所有生物体都使用相同的生物分子，但生 物分子的形式是多样性的，这是生命现象多样
生物分子主要由C、H、O、N、P和 S等6种元素构成。
常 见 的 功 能 基 团
Functional groups
1) Functional groups are clusters of atoms with characteristic structure and functions. 2) Most biomolecules contain more than one functional group. 3) Different families of organic compounds result when hydrogen atoms on organic molecules are replaced by different functional groups. 4) The distinct chemical properties of each functional group contribute to the behavior of any molecule that contains it.
微生物实验 - 合肥工业大学精品课程
三、实验材料
1、仪器
血球计数板、计数器、显微镜、721光电比色计或
751紫外分光光度计、分析天平、定量滤纸、电热干
燥箱。 2、菌种 酿酒酵母菌液，大肠杆菌振荡培养8 h和14 h的培养 物，青霉菌的振荡培养物。
四、实验步骤 1、血球计数板法测定酵母菌数量： 血球计数板加盖玻片→滴加稀释菌液→低倍镜观察 →高倍镜观察→计数 2、比浊法测定大肠杆菌数量： 25×16型：分别计数左上、右上、左下、右下及 3、重量法测
16×25型：分别计数左上、右上、左下、右下四
大格100小格中酵母菌数量。
五、实验报告 1、计算每毫升菌液中的酵母菌细胞数。 2、记录不同稀释菌液的OD值。
3、计算培养液中青霉菌的湿重和干重。
4、在滴加菌液时，为什么要先置盖玻片，然后滴加 菌液？能否先加菌液再置盖玻片? 5、补充哪些实验，可以通过测定OD值便可知样品的 活菌数。
实 验 十 一 微生物生长测定
一、实验目的
1、学习测定微生物数量的血球计数板直接计数法， 并测定样品中酵母细胞数；
2、学习用比浊法测定培养液中的大肠杆菌数量。
3、学习用重量法测定培养液中青霉菌的数量。
二、实验原理 1、血球计数板直接计数法测定微生物生长 2、比浊法测定大肠杆菌数量 3、重量法测定青霉菌数量
生化综合实验报告(合肥工业大学)
生物化学综合实验报告题目：植物不同组织可溶性蛋白提取和多肽组分差异研究姓名：熊天昱学号：20096157 班级：食品09-1班摘要：本实验对甘薯的根茎叶中可溶性蛋白进行提取，用考马斯亮蓝法对其定量分析，并采取聚丙烯酰胺凝胶电泳分离且比较其中的多肽组分，掌握蛋白质的一般研究方法和操作，而且对甘薯的不同组织的可溶性蛋白的性质有所了解。
关键词：甘薯可溶性蛋白考马斯亮蓝聚丙烯酰胺凝胶电泳Abstract:This experiment sweet potatoes at the root of the stems from the protein to extract a soluble Coomassie Brilliant Blue for the quantitative analysis, and even a polyacerylamide gel electrophoresis separation and is one of the protein components, polypeptide of the general method ,and operation of sweet potatoes, and the organization of the protein in nature have been resolved.Key words: sweet potatoes proteinCoomassie Brilliant Blue PAGE前言：蛋白质的性质、结构和功能的研究，以及生物体内蛋白质构象的变化都是建立在蛋白质分离纯化基础上的。
在蛋白质的分离过程中，必须通过分子量大小测定来获得所提蛋白质的大小，并通过SDS-PAGE电泳比较分析有差异的条带。
我国是世界上最大的甘薯生产大国，他的整株均可食用，这主要是由于甘薯叶茎与块根都含有丰富的蛋白质、膳食纤维、维牛素和矿物质。
本实验通过对甘薯植株不同组织可溶性蛋白的提取，含量测定，差异条带研究，从而掌握蛋白质的系列研究方法和操作。
生物化学合工大第九章生物氧化
2
物质在体内外氧化时所消耗的氧量、最终产物（CO2，H2O）和释放能量均相同。
3
*
生物氧化与体外氧化之不同点：
反应是在强酸、强碱、高温、高压条件下进行的。 能量是突然释放的。 产生的CO2、H2O由物质中的碳和氢直接与氧结合生成。
体外氧化
生物氧化
是在细胞内温和的环境中（体温，pH接近中性），在一系列酶促反应逐步进行，能量逐步释放有利于有利于机体捕获能量，提高ATP生成的效率。 进行广泛的加水脱氢反应使物质能间接获得氧，并增加脱氢的机会；脱下的氢与氧结合产生H2O，有机酸脱羧产生CO2。
转运机制主要有： 1.α-磷酸甘油穿梭系统 （主要存在于骨骼肌、神经细胞） 2.苹果酸-天冬氨酸穿梭系统 （主要存在于肝、心肌组织）
*
1. α-磷酸甘油穿梭机制
FADH2
2. 苹果酸-天冬氨酸穿梭机制
NADH +H+
NADH +H+
计算磷酸葡萄糖异构酶反应的自由能变化
达平衡时 =Keq=19
解：
ΔG°′= - RTlnKeq =-2.3038.314 311 log19 =-7.6 KJ / mol
ΔG′=ΔG°′+ RTlnQc (Qc-浓度商) =-7.6+ 2.3038.314 311 log0.1 =-13.6 KJ / mol
02
自由能（free energy）的概念
03
自由能(G)：指一个反应体系中能够做有用功的 那部分能量。
04
2.化学反应自由能的计算
利用化学反应平衡常数计算 基本公式：ΔG′=ΔG°′+ RTlnQc (Qc-浓度商) ΔG°′= - RTlnKeq 例：计算磷酸葡萄糖异构酶反应的自由能变化 利用标准氧化还原电位（E°）计算（限于氧化还原反应） 基本公式：ΔG°′=－nFΔE°′ (ΔE°′=E+°′-E-°′) 例：计算NADH氧化反应的ΔG°′
合肥工业大学 生化综合实验报告
生物化学综合实验黄豆芽总DNA的提取及亲缘关系的研究姓名：逯玉东学号:20106441班级：生物学院食品10-2班实验时间：2012.7.2—2012.7.3实验目的：1、学会和掌握核酸制备的一些基本操作和方法，并通过分光光度法和电泳等实验技术研究核酸的性质；2、学习用紫外分光光度计和水平琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、浓度的原理与方法。
3、掌握利用限制性内切酶酶切DNA的原理和方法,培养学生利用限制性内切酶位点图谱进行实验设计的能力；4、学会通过琼脂糖凝胶电泳法分析不同材料之间DNA的亲缘关系。
关键词：核酸制备，CTAB法，限制性内切酶，分光光度法，电泳Abstract：1.The extraction of plant DNA.2.Determination of plant DNA purity and concentration.3.Plant DNA restriction endonuclease enzymatic.4.DNA agarose gel electrophoresis to separate DNA fragments.5.Studies on the relationships of plant DNA.Key words:Nucleic acid preparation, CTAB, Restriction endonuclease, Spectrophotometry, Electrophoesis.一．黄豆芽DNA的提取1.材料：正在生长的黄豆芽2.主要仪器和用具：高速冷冻离心机（16 000 r/min）;恒温水溶；紫外可见光分光光度计；电泳仪及微型电泳槽；电冰箱；凝胶成像系统或手提式紫外检测仪；微波炉；电子天平；纯水系统；1.5 mL离心管及离心架；微量移液管10 uL、200uL、1 000uL各1支及各量程吸头；常用玻璃仪器及滴管等；一次性塑料手套。
3. 试剂（1）0.1 mol/LTris-HCl (pH8.0)缓冲液（0.607gTris碱溶于40ml灭菌双蒸水。
生物化学综合实验合肥工业大学精品课程_3
《生物化学综合实验》实验指导书适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程生物与食品工程学院生物科学系实验基本情况一、实验题目1. 核酸的分离纯化及性质研究2. 蛋白质的分离纯化及性质研究3. 糖蛋白的分离纯化及性质研究4. 脂的分离纯化及性质研究二、选题要求1.每小组（2个人组成一个小组）选一个实验题目；2.实验中所需生物材料自选，可选用多种生物材料；3.实验内容的安排要有一定工作量，必须包括指导书中要求运用的实验技术。
三、学生准备的要求学生选定实验内容后，要写出实验方案，包括：实验目的和意义；实验方法及操作过程（至少准备两种方案）；各种方法所需仪器（包括设备和玻璃器皿）、药品及其数量。
实验方案必须在综合实验前五周完成，并经过指导教师审阅。
四、综合实验的评分标准学生综合实验成绩由指导教师评定，分为优秀、良好、中等、及格和不及格几类。
评定依据是学生的态度、出勤率、实验准备情况、实验动手能力、实验结果、以及实验的创新性上进行评分（具体见附录1）。
五、实验报告要求综合实验完成后，必须提供一份实验记录和一份实验报告。
实验报告形式见附录2。
实验目的核酸的分离纯化是核酸制备及分析的前提和基础，通过本实验将学会和掌握核酸制备的一些基本操作和方法，通过分光光度法和电泳等实验技术研究核酸的性质，同时掌握用RFLP技术分析不同材料之间亲缘关系的方法。
实验仪器与试剂主要仪器：研钵、高速离心机、紫外分光光度计、涡旋仪、水浴锅、微量加样器、电泳仪、紫外透射反射分析仪、PCR仪、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱。
主要试剂：液氮、SDS、CTAB、Tris、乙醇、巯基乙醇、EDTA、氯仿、异丙醇、HCl、蔗糖、NaCl、苯、PCR 试剂盒等。
要求运用的实验技术紫外分光光度技术、琼脂糖凝胶电泳技术、高速离心技术、限制性内切酶酶解技术、PCR技术等。
参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）1. 生物化学实验，武汉大学出版2. 生物化学实验，中国科学技术大学出版社3. 生物化学实验原理和方法，北京大学出版社实验目的蛋白质（包括酶）的性质、结构和功能的研究，以及生物体内物质代谢途径的阐明等都是建立在蛋白质和酶的分离纯化基础上的。
生物化学合工讲义大第三章酶
2．专一性
即酶只能对特定的一种或一类底物起作用，这种 专一性是由酶蛋白的立体结构所决定的。可分为： 绝对专一性：有些酶只作用于一种底物，催化一个
反应， 而不作用于任何其它物质。 相对专一性：这类酶对结构相近的一类底物都有作
生物化学合工大第 三章酶
精品
第一节 酶通论 第二节 酶促反应动力学 第三节 酶的作用机制 第四节 酶的活性调节
第一节 酶通论
一、酶的研究历史
1857巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。 1分子Glc→2分子乙醇+2分子CO2 从Glc开始，
经过12种酶催化，12步反应，生成乙醇。 • 1897Buchner兄弟证明发酵与细胞的活动无关，
用。包括键专一性和基团专一性。 立体异构专一性：这类酶不能辨别底物不同的立体异构
体，只对其中的某一种构型起作用，而 不催化其他异构体。包括光学专一性
和几何异构专一性。
相对专一性
• 基团(group)专一性。如-葡萄糖苷酶， 催化由-葡萄糖所构成的糖苷水解，但 对于糖苷的另一端没有严格要求。
• 键(Bond)专一性。如酯酶催化酯的水解， 对于酯两端的基团没有严格的要求。
不同的全酶。 • 一般来说，全酶中的辅酶决定了酶所催化的类
型（反应专一性），而酶蛋白则决定了所催化 的底物类型（底物专一性）。
·抗体酶（abzyme）
抗体：与抗原特异结合的免疫球蛋白。 抗体酶：指具有催化功能的抗体分子，在抗体分子的可变区
（即肽链的N端）是识别抗原的活性区域，这部分区 域被赋予了酶的属性。
1986年美国Schultz和Lerner两个实验室同时在Science上 发表论文，报道他们成功地运用单克隆抗体技术制备了具有 酶活性的抗体（catalytic antibody）。
合工大生化实验方案
不同植物样品可溶性蛋白含量和多肽组分的差异一．实验目的与意义1.掌握冷冻离心机的操作使用方法。
2.掌握植物可溶性蛋白的提取方法和原理。
3.掌握分光光度计的使用方法和原理。
4.掌握可溶性蛋白的定量测定方法和原理。
5.掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理和基本操作过程。
二．试剂与仪器试剂：Tris[60g] ，聚乙烯吡咯烷酮（PVP）[5g] ，β-巯基乙醇[2.5ml]，蛋白酶抑止剂（PMSF 苯甲基磺酸氟）；100 μg ／mL 牛血清白蛋白（125mg），考马斯亮蓝G-250（500mg），90 ％乙醇（250mL），85 ％（W ／V ）的磷酸（500mL）；Na2HPO4·12H2O（250g），NaH2PO4·2H2O（50g），SDS（500mg），巯基乙醇（0.5ml），甘油（5ml），溴酚蓝（10mg）， 0.2mol/L pH磷酸盐缓冲液（3L），Acr（150g），Bis（10g），TEMED（10ml），AP（50g），冰乙酸（350ml），甲醇（250ml），50%甲醇（2L），冰乙酸（200ml），仪器：研体，烧杯，玻璃棒，量筒（10ml），移液管，1000ml容量瓶,冰浴，离心机；分光光度计，烧杯，量筒，移液管，试管（8个），100mL容量瓶（2个），1000mL容量瓶（4个），棕色瓶，夹心式垂直板电泳槽（附带凝胶模135×100×1.5mm，1台/组），直流稳压电源（电压300—600V，电流50—100mA），，微量注射器（10或50μL），大培养皿（φ120—160mm 1个），棕色瓶（4个），三．实验材料马铃薯根茎叶四．试验方法与操作过程不同植物样品可溶性蛋白的提取设备：研体，烧杯，玻璃棒，量筒（10ml），移液管，1000ml容量瓶,冰浴；试剂：1.提取缓冲液：（0.0125mol的Tris-Hcl，pH7.0），称取12.5gTris于烧杯，用适量双蒸馏水溶解，HCL 调PH至7.0，定容至1000Ml.2. 聚乙烯吡咯烷酮（PVP）[5g]3. β-巯基乙醇[2.5ml]4..蛋白酶抑止剂（PMSF 苯甲基磺酸氟）操作步骤：1.将买来的新鲜马铃薯整株清洗干净，分别剪取马铃薯的根茎叶。
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生物化学综合实验---合肥工业大学精品课程
《生物化学综合实验》
实验指导书
适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程
生物与食品工程学院生物科学系
实验基本情况
一、实验题目
1. 核酸的分离纯化及性质研究
2. 蛋白质的分离纯化及性质研究
3. 糖蛋白的分离纯化及性质研究
4. 脂的分离纯化及性质研究
二、选题要求
1.每小组（2个人组成一个小组）选一个实验题目；
2.实验中所需生物材料自选，可选用多种生物材料；
3.实验内容的安排要有一定工作量，必须包括指导书中要求运用的实验技术。
三、学生准备的要求
学生选定实验内容后，要写出实验方案，包括：实验目的和意义；实验方法及操作过程（至少准备两种方案）；各种方法所需仪器（包括设备和玻璃器皿）、药品及其数量。
实验方案必须在综合实验前五周完成，并经过指导教师审阅。
四、综合实验的评分标准
学生综合实验成绩由指导教师评定，分为优秀、良好、中等、及格和不及格几类。
评定依据是学生的态度、出勤率、实验准备情况、实验动手能力、实验结果、以及实验的创新性上进行评分（具体见附录1）。
五、实验报告要求
综合实验完成后，必须提供一份实验记录和一份实验报告。
实验报告形式见附录2。
实验1. 核酸的分离提取及性质研究
实验目的
核酸的分离纯化是核酸制备及分析的前提和基础，通过本实验将学会和掌握核酸制备的一些基本操作和方法，通过分光光度法和电泳等实验技术研究核酸的性质，同时掌握用RFLP技术分析不同材料之间亲缘关系的方法。
实验仪器与试剂
主要仪器：研钵、高速离心机、紫外分光光度计、涡旋仪、水浴锅、微量加样器、电泳仪、紫外透射反射分析仪、PCR仪、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱。
主要试剂：液氮、SDS、CTAB、Tris、乙醇、巯基乙醇、EDTA、氯仿、异丙醇、HCl、蔗糖、NaCl、苯、PCR试剂盒等。
要求运用的实验技术
紫外分光光度技术、琼脂糖凝胶电泳技术、高速离心技术、限制性内切酶酶解技术、PCR技术等。
参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）
1. 生物化学实验，武汉大学出版
2. 生物化学实验，中国科学技术大学出版社
3. 生物化学实验原理和方法，北京大学出版社
实验2. 蛋白质的分离纯化及性质研究
实验目的
蛋白质（包括酶）的性质、结构和功能的研究，以及生物体内物质代谢途径的阐明等都是建立在蛋白质和酶的分离纯化基础上的。
在蛋白质的分离过程中，必须通过浓度、纯度和活性的测定来决定分离步骤的取舍。
酶促反应动力学，尤其是抑制剂酶促反应动力学是研究酶的结构与功能关系的一个重要方面。
本实验通过对蛋白质（或酶）的分离纯化、浓度、纯度和活性的测定、动力学进行研究，从而掌握蛋白质和酶的系列研究方法和操作。
实验仪器与试剂
主要仪器：研钵、纱布、离心机、紫外分光光度计、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱、真空泵、透析、层析柱、自动收集器、漏斗等。
主要试剂：pH试纸、乙酸、硫酸、NaOH、HCl、硼酸、Tris、硫酸铵、胰蛋白酶等
要求运用的实验技术
盐析技术、离心技术、柱层析技术、紫外分光光度技术、聚丙烯酰胺凝胶电泳技术、透析技术等。
参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）
1.蛋白质技术手册，科学出版社
2. 现代酶学，华东理工大学出版社
3. 蛋白质电泳实验技术，科学出版社
实验3. 糖蛋白的分离纯化及性质研究
实验目的
糖蛋白在功能性食品功效中有着重要作用，研究糖蛋白的性质、功能都是建立在糖蛋白质分离纯化基础上的。
在糖蛋白质的分离过程中，必须掌握分级柱层析技术，进一步理解生物化学中有关成分分离提纯的基本理论。
本实验通过对糖蛋白质进行分离纯化、相对分子质量测定、简单理化性质测定等，从而掌握和理解糖蛋白研究方法和操作。
实验仪器与试剂
主要仪器：研钵、纱布、离心机、层析柱、微量加样器、水浴锅、可见与紫外分光光度计、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱、旋转蒸发仪等。
主要试剂：苯酚、硫酸、双缩脲试剂、Folin-酚试剂、HCl、Tris、NaOH、乙醇、丙酮、乙醚、牛血清、硫酸、葡萄糖、DEAE-52纤维素、SephadexG-100、透析袋等
要求运用的实验技术
柱层析技术、透析技术、离心技术、分光光度技术等。
参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）
1. 生物化学实验，武汉大学出版
2. 生物化学技术原理及其应用（第二版），武汉大学出版社
3. 生物化学实验方法和技术，科学出版社
实验4. 脂的分离纯化及性质研究
实验目的
研究作为一重要的生物大分子脂的基本性质。
脂类物质的研究也是基于分离纯化的基础上的。
通过对脂的分离，使学生掌握非极性物质的柱层析技术，进一步理解生物化学中有关成分分离提纯的基本理论。
本实验通过对脂类物质进行分离纯化、皂化脂与非皂化脂的分离、脂的简单理化性质测定等，从而掌握和理解脂的研究方法和操作。
实验仪器与试剂
主要仪器：研钵、纱布、离心机、层析柱、索氏抽提仪、冰箱等。
主要试剂：硅胶H、石油醚、乙酸乙酯、KOH、甲醇、乙醇、硫酸钠、磷钼酸、硅胶板、β-谷甾醇等
要求运用的实验技术
索氏抽提技术、薄层层析技术、萃取技术、柱层析技术等。
参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志）
1. 生物化学与分子生物学实验技术，高等教育出版社
2. 生物化学实验，武汉大学出版
3．生化实验方法和技术（第二版），高等教育出版社
附录1：
生物化学综合实验评分标准
附录2：
实验报告形式
封面：
题目
姓名学号班级
内容：
中文题目
英文题目
摘要
关键词
Abstract
Key words
前言：简要介绍本实验研究的意义与目的。
材料与方法：详细说明实验使用的材料及实验
方法，注明各方法的出处。
结果：准确描述实验结果，并进行分析。
讨论：根据实验结果，运用所学知识在结果分
析的基础上，对实验进行理论上的探讨，并得
出科学、合理的结论。
参考文献：列出必要的参考文献。