组织培养育苗
组培育苗
出约 万倍。 年
和
发现了生长素与激动
素之间的不同比例的配合对生长和分化的作用，即激动素／
生长素之比高时易形成芽，比例低时则形成根。 世纪 年代以后，由于组织培养技术日趋成熟和完
善 ，世 界 各地 的植 物 组织 培 养研 究 和产 业 化应 用进 入 了迅 速 发 展 阶 段 ，无 论 在 茎 尖（ 器 官 ）培 养 ，花 粉（ 药 ）培 养，胚 胎 培 养、 愈 伤组 织 培养 、原 生 质体 培 养乃 至 细胞 器 移植 和外 源 基因 导 入等各方面均有许多成功的报道。并且，在组织培养快速繁 殖兰花，发展成兰花试管苗工业的引导下，使组织培养技术广 泛地走向产业化应用。
质的引入，产生遗传上经修饰的细胞。对开辟新的育种途径
和遗传工程研究方面有着巨大潜力。
诱变与筛选借助细胞、组织培养（包括愈伤组织培
养）进行诱变育种，可以提高诱变效果。如重松（
年 ）用
秋海棠叶片在
培养基上再生出长约 毫米的不定芽
时用 射线处理，得到了银白色斑点叶的变异株。利用组织
培养技术常常更便于有目的地筛选突变株系。特别是对抗性
代。最早应用组织培养法进行快速繁殖的是兰花，用一个兰
花外植体，一年可以繁殖 万个原球茎。又如一个草毒芽
一年内可繁殖 个芽，一个苹果芽在 个月内可繁殖 万
条苹果幼茎等等。这对加速繁殖珍稀树种、品种、优系或芽变
株系极为有用。目前已有不少果树、蔬菜、花卉等经济作物逐
步采用组织培养技术，利用具有规模生产条件的试管苗生产
脱分化如果初始接种在培养基上的外植体，不是通 过芽原基萌发的途径直接生长，而是首先形成愈伤组织，再行 分化为不定芽或无性胚时，这种初始培养被称为脱分化，所用 的培养基被称为脱分化培养基。
草莓组织培养育苗技术
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２０２１．
０２．
０１８
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草莓组织培养育苗技术
王 禹
(黑龙江省农科院园艺分院,哈尔滨 １５００６９)
摘 要:草莓育苗方式一般采用田间匍匐茎分株方法,此方法在生长过程中易感 染 病 毒 病,从 而 造 成 草 莓 品 种 的 种
性退化,出现植株矮化、叶片变小及繁殖系数降低 等 现 象,致 使 草 莓 种 苗 质 量 下 降,经 济 效 益 降 低. 组 织 培 养 具 有
温度 ２５ ℃±２ ℃ ,光照时间 １２h/d.
参
植物组织培养有什么应用[详细讲解]
![植物组织培养有什么应用[详细讲解]](https://img.taocdn.com/s3/m/abfe2ccd51e2524de518964bcf84b9d528ea2ca9.png)
植物组织培养有什么应用一、农业上的应用1. 快速繁殖种苗(rapid propagation)用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。
快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。
快速繁殖可用下列手段进行：⑴通过茎尖、茎段、鳞茎盘等产生大量腋芽；⑵通过根、叶等器官直接诱导产生不定芽；⑶通过愈伤组织培养诱导产生不定芽。
试管快速繁殖应用在下列生产或研究中：(1)繁殖杂交育种中得到的少量杂交种，以及保存自交系、不育系等。
(2)繁殖脱毒培养得到的少量无病毒苗。
(3)繁殖生产上急需的或种源较少的种苗。
由于组织培养周期短，增殖率高及能全年生产等特点，加上培养材料和试管苗的小型化，这就可使有限的空间培养出大量的植物，在短期内培养出大量的幼苗。
2.无病毒苗(virus free)的培养植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。
自从Morel l952年发现采用微茎尖培养方法可得到无病毒苗后，微茎尖培养就成为解决病毒病危害的重要途径之一。
若再与热处理相结合，则可提高脱毒培养的效果。
对于木本植物，茎尖培养得到的植株难以发根生长，则可采用茎尖微体嫁接的方法来培育无病毒苗。
组织培养无病毒苗的方法已在很多作物的常规生产上得到应用。
如马铃薯，甘薯，草莓，苹果，香石竹，菊花等。
而且已有不少地区建立了无病毒苗的生产中心，这对于无病毒苗的培养、鉴定、繁殖、保存、利用和研究，形成了一个规范的系统程序，从而达到了保持园艺植物的优良种性和经济性状的目的。
3. 在育种上的应用(breeding)植物组培技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行。
⑴倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显。
石斛兰育苗的方法
石斛兰育苗的方法
石斛兰育苗的方法主要有组织培养和扦插繁育两种。
组织培养的方法是将石斛兰的组培苗放在特制的瓶子中进行培育。
由于石斛兰对自然环境的要求比较苛刻，组培苗在瓶子中并未实实在在接触自然环境，因此需要进行炼苗。
实际操作是把组培苗迁移到炼苗室，使种苗能够慢慢适应自然环境的一些变化。
直到组培苗的叶子变得绿油油了以后就可以进行栽培了。
扦插繁育的方法是选择较为粗壮、色泽嫩绿、根系发达的植株作为种株，然后将其中的一些枯枝、断枝剪掉，并将种株切开，分成7根左右的小丛种植。
以上是石斛兰育苗的基本方法，如需了解更多信息，建议咨询植物学家或查阅植物学书籍。
2022至2022年八年级人教版下册7.1植物的生殖同步测试生物题带答案和解析(广西钦州市第二中学)
2022至2022年八年级人教版下册7.1植物的生殖同步测试生物题带答案和解析（广西钦州市第二中学）选择题香蕉是海南省主要热带水果之一，为了满足大面积种植需要，海南省大力推行香蕉组织苗。
用组织培养的育苗方式属于（）A. 有性生殖B. 无性生殖C. 种子繁殖D. 杂交育种【答案】B【解析】组织培养指的是在无菌的情况下，将植物体内的某一部分器官或组织，如茎尖、芽尖、形成层、根尖、胚芽和茎的髓组织等从植物体上分离下来，放在适宜培养基上培养，经过一段时间的生长、分化最后长成一个完整的植株。
组织培养的繁殖速度很快．没有经过两性生殖细胞的结合，因此属于无性繁殖。
选择题一朵桃花中能产生花粉的结构是（）A. 雄蕊B. 雌蕊C. 花瓣D. 花托【答案】A【解析】雄蕊包括花药和花丝，其中花药里面含有花粉；雌蕊包括柱头、花柱和子房，雌蕊和雄蕊与果实和种子的形成有直接关系，是花的主要结构。
选择题一朵桃花中，与果实和种子的形成有直接关系的结构是（）A. 花托和花柄B. 花冠C. 雄蕊和雌蕊D. 花萼【答案】C【解析】试题分析：本题考查被子植物花的结构模式图和种子结构的有关知识．结合植物的受精及果实和种子的形成过程理解本知识．解：一朵完整的花的结构：花柄、花托、萼片、花瓣、雌蕊（柱头、花柱和子房）、雄蕊（花药和花丝），雄蕊的花药中含有许多花粉粒，雌蕊的子房中含有胚珠，花要经过传粉和受精过程后才能结出果实，最终雌蕊的子房发育成果实，胚珠发育成种子，因此，雄蕊和雌蕊与果实和种子的形成有直接关系是花的主要结构．故选：C选择题不是每一朵花都能结出果实，能结出果实的花一定（）①长有雌蕊和雄蕊②长有雌蕊③经历了自花传粉④经历了传粉⑤经历了受精A. ①④⑤B. ①③⑤C. ②④⑤D. ②③⑤【答案】A【解析】试题分析：雄蕊的花药中含有许多花粉粒，雌蕊的子房中含有胚珠，雄蕊和雌蕊与果实和种子的形成有直接的关系，是花的主要结构，一朵花要经过传粉受精过程后，雌蕊的子房继续发育，最终发育成果实，子房中的胚珠发育成种子，因此②④⑤正确。
灰毡毛忍冬组织培养育苗技术规程
灰毡毛忍冬组织培养育苗技术规程1 范围本文件规定了灰毡毛忍冬（Lonicera macranthoides Hand. -Mazz.）组织培养育苗技术的外植体采集、外植体处理、培养基制备、组织培养、移栽、容器苗培育、苗木管理、苗木出圃、档案管理等要求。
本文件适用于适用于灰毡毛忍冬组织培养育苗。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6001 育苗技术规程LY/T 1000 容器育苗技术LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
毡毛忍冬 Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.为忍冬科忍冬属植物，俗称山银花、金银花。
壮苗培养 strong seedling culture将增殖的丛芽分成单芽茎段接种到壮苗培养基上，使其生长粗壮。
4 外植体采集采集时间在3～4月晴天叶片表面露水干后采集外植体。
外植体选择选择生长健壮、无病虫害的3～5年生植株采集外植体。
从当年生嫩枝上剪取带顶芽或腋芽的茎段，留叶柄基部，去掉叶片。
将采集的嫩枝低温保湿带回实验室，取嫩枝顶端4 cm～6 cm作为外植体。
5 外植体处理清洗先用自来水冲洗外植体3次～5次，每次5 min～7 min，然后用软毛刷蘸中性洗洁精溶液轻轻刷洗，再用流水冲洗外植体至洁净。
消毒在超净台上将外植体在75%酒精浸泡10 s，无菌水冲洗2次～3次，用0.1%升汞溶液（添加2滴～3滴吐温80）浸没外植体5 min，无菌水冲洗4次～5次，用灭菌滤纸吸干外植体表面水分。
6 培养基制备培养基配方初代培养基、继代培养基、壮苗培养基与生根培养基的配方见规范性附录A。
培养基配制、灭菌与保存参照LY/T 1882执行。
7 组织培养培养条件培养温度为25 ℃±2 ℃，每天光照时间为12 h，光照强度为1 500 lx～2 000 lx。
山药育苗的几种方法
山药育苗的几种方法山药是一种常见的蔬菜，具有丰富的营养价值和药用价值。
为了确保山药的产量和质量，育苗是必不可少的环节。
以下是山药育苗的几种方法：1. 分段育苗法分段育苗法是一种常见的山药育苗方法，适用于大规模的山药种植。
首先，选择优质的山药藤蔓，剪成50-100厘米的段，每段保留2-3个芽眼。
然后将这些段放入湿润的沙土中，保持温度在20-25摄氏度，以利于芽眼的生长。
沙土的选择非常重要，它需要有良好的排水性，以防止根部的腐烂。
同时，沙土的保水性也要适中，以防止水分的过度蒸发。
在沙土中埋入山药段后，需要定期浇水，保持土壤的湿润。
同时，也需要注意防止土壤的过度湿润，以防止根部的腐烂。
在山药段的长出芽眼后，可以进行移栽。
分段育苗法的优点是可以在短时间内大量育苗，适合大规模的山药种植。
但是，需要注意的是，由于山药段的切割部位容易感染病菌，因此在切割过程中要做好消毒处理，以防止病菌的传播。
同时，由于山药段的切割部位容易失水，因此在保存和育苗过程中要做好保湿工作，以防止山药段的失水。
2. 块茎育苗法块茎育苗法是山药育苗的另一种常见方法，尤其适合在春季进行。
首先，选择无病害、饱满的山药块茎，切成厚度为1-2厘米的薄片。
切好的块茎应该在阳光下晾晒一段时间，以杀死可能存在的病菌和害虫。
然后，将这些薄片放在湿润的沙土中，保持温度在20-25摄氏度，以利于芽眼的生长。
沙土的选择和分段育苗法相同，需要有良好的排水性和保水性。
在块茎长出芽眼后，可以进行移栽。
移栽时，将块茎和幼苗一起移植到田间，这样可以保证山药的生长一致性。
块茎育苗法的优点是可以充分利用山药块茎的营养物质，提高育苗的成功率。
但是，需要注意的是，切好的块茎容易感染病菌，因此在晾晒和育苗过程中要做好消毒处理。
同时，切好的块茎也容易失水，因此在保存和育苗过程中要做好保湿工作。
3. 种子育苗法种子育苗法是山药育苗的一种常见方法，尤其适合在新品种繁育时使用。
首先，选择优质的山药种子，在温水（25-30摄氏度）中浸泡24小时，以促进种子发芽。
彩叶朱蕉组织培养育苗技术研究
右， 达到 了工厂织培 养 培 养基 中图分类 号 ：￥ ２ ． ７ ７ ２３ 文献标 识码 ： Ａ
文章 编号 ：０ ６— ４ ７ ２ １ ） ２— ０ ８— ４ １０ ４ ２ （ ０ １ ０ ０ ７ ０
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五味子无性繁殖育苗方法-组织培养
幼苗处理
将幼苗的叶片、茎段等组 织进行分离，去除不需要 的组织，留下具有分生能 力的组织。
外植体消毒
将幼苗组织进行彻底消毒 ，以防止细菌和真菌污染 培养基。
无菌培养基的制备
基础培养基
选择适合五味子组织培养 的基础培养基，如MS、 1/2MS等。
添加成分
在基础培养基中添加适量 的激素、糖、琼脂等成分 ，以调节组织的生长和分 化。
02
通过组织培养，可以获得大量的 无性系繁殖材料，如幼苗、小植 株或细胞培养物等。
组织培养的技术原理
植物细胞具有全能性，即每个细胞都 包含发育成完整植株的遗传信息。
通过将植物组织或细胞放在人工环境 中，提供适宜的营养、生长调节剂等 条件，可以诱导细胞脱分化形成愈伤 组织，进而分化形成完整的植株。
组织培养的应用范围
五味子的产业发展和应用。
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THANKS
组织培养技术在植物育种、种质资源保存、植物快繁、脱毒苗生产等方面得到了 广泛应用。
通过组织培养技术，可以快速繁殖优良品种，提高农作物的产量和品质，同时还 可以生产珍稀濒危植物的种苗，保护生物多样性。
02
五味子组织培养技术
外植体选择与处理
01
02
03
种子萌发
选择成熟、健康的五味子 种子进行萌发，获取种子 萌发后的幼苗。
根。
控制光照条件
适当的光照条件也是诱导生根的 重要因素。一般来说，在黑暗条
件下有利于诱导生根。
调整培养基湿度
培养基的湿度也是影响生根的关 键因素。适当地降低培养基的湿
度可以促进生根。
试管苗移植的技术要点
准备移植床
选择适宜的移植床，床 土应松软、透气、排水 良好。
设施园艺（复习题）
设施园艺（复习题）一、名词解释：1.设施园艺：指在露地不适于园艺作物生长的季节或地区，利用温室等特定设施。
人为创造适于作物生长的环境，根据人们的需求，有计划地生产安全、优质、高产、高效的蔬菜、花卉、水果等产品的一种环境调控农业。
我国现有设施园艺业大的经营品种可分为（设施蔬菜）、（设施花卉）、（设施果树）、（设施药用植物）、（设施种苗业）、（芽苗菜生产）。
2.相对湿度：指某一温度下实际水蒸气密度（或水蒸气分压）占饱和水蒸气密度（或饱和水蒸气分压）的百分比（%）；相对湿度，表示空气潮湿的程度。
3.春化:指在一段时间低温时期才能诱导花芽分化的现象。
4.脱春化:春化阶段完成之前，如果遇到较高温度时前段低温效果可以被消除的过程，脱春化的温度一般为（250C-400C）。
5.耐候性（防老化性）：指覆盖材料经年累月之后表现不易老化的性能。
6.风障:冬春季节在隔一定距离的蔬菜等栽培畦的北侧树立起可挡风的屏障。
7.阳畦(冷床)：一种以太阳辐射作为热源的简易保护设施。
8.温室效应：由于大棚覆盖能使太阳绝大部分短波辐射透入，能阻止地面绝大部分长波辐射透出，而是棚内气温升高，称为温室效应。
9．现代温室：主要指大型的环境基本不受自然气候的影响，可自动化调控，能全天候进行园艺作物生产的连接屋面温室。
10.人工补光：高纬度冬季日照长度和强度不足时，为了促进温室作物的光合与生育，以人工照明来补足光量的不足，称为人工补光。
11逆温：有风的晴朗夜间，温室大棚的表面辐射散热很强，棚室内气温反应比外界气温低，此现象即逆温现象。
12.绝对湿度：单位体积空气内水汽的含量。
相对湿度：在一定温度条件下空气中水汽压与该温度下饱和水汽压之比。
13.饱和差：在一定温度条件下空气中水汽压与该温度下饱和水汽压之差。
14.露点温度：当空气中水汽含量和气压不变时，气温逐渐降低到水汽达到饱和状态时的温度。
15.无性繁殖：指不经生殖细胞结合的受精过程，由母体的一部分直接产生子代的繁殖方法。
简述组织培养育苗的意义
组织培养育苗的意义概述培养育苗是一项关键的农业活动，它是指通过人为干预和管理来提高作物幼苗的品质和数量，从而增加农作物的产量和质量。
组织培养育苗作为一种重要农业生产技术手段，对于实现农业现代化、粮食安全和农民增收具有重要意义。
促进农作物产量提高1.梯田种植：通过合理的培养育苗，可以确保农作物的生长环境更加适宜，使其有效利用光照、土壤和水分资源。
同时，科学的培养育苗还可以有效防止病虫害的发生，减少农药使用。
这样不仅能提高农作物的产量，还可以减少农业生产对环境的污染。
2.高效利用耕地：通过有序的组织培养育苗，可以合理规划作物的配置和轮作，使得每块耕地都得到充分利用，提高耕地利用效率，最大限度地提高农作物的产量。
3.提高作物品质：通过合理的培养育苗技术，可以提高作物的品质。
例如，在蔬菜种植中，通过精细的育苗管理，可以使蔬菜的瓜果大小、形状、口感和味道更加优良，提高市场竞争力，增加农民的收益。
增加农民收入1.农作物的高产和优质，不仅可以提高农民的产量，还可以提高作物的售价。
高产高质的农产品更受市场欢迎，农民通过销售高价农产品可以增加收入。
2.组织培养育苗技术的推广，可以提高农民的农业生产技能和管理水平，提高农民的从业素质，使其拥有更多的就业机会和创业机会。
不仅可以增加农村居民的收入，还可以促进农村的经济发展，缩小城乡收入差距。
保障粮食安全1.通过组织培养育苗技术的应用，可以提高农作物的产量和质量，增加农产品供应，保障国家的粮食安全。
在人口增长和城市化加快的背景下，粮食安全是国家的战略需求，培养育苗作为提高农作物产量和质量的重要手段之一，具有极其重要的意义。
2.组织培养育苗技术还可以降低农作物的种植风险，缓解冰雹、干旱、洪涝等极端天气事件对农作物的影响。
在面对自然灾害时，高质量的育苗可以提高农作物的抗灾能力，减少灾害损失。
推进农业现代化1.农业现代化是农业发展的必然趋势，培养育苗作为现代农业的重要技术手段之一，对于推进农业现代化具有重要意义。
白及组织培养育苗技术规程
白及组织培养育苗技术规程白及是一种常见的中药材，其根茎具有清热解毒、润肺止咳等功效，因此备受中医界的青睐。
为了保证白及的品质和数量，需要采用科学的培育技术，其中培养育苗技术是关键之一。
一、选种选种是培育优质白及的第一步。
应选择生长健壮、无病虫害、根茎肥大的母株作为种源，同时要注意保证种子的纯度和活力。
选种时应选择在生长期末期的母株，因为此时根茎中的有效成分含量最高。
二、育苗1.基质选择白及育苗的基质应具有良好的透气性、保水性和保肥性，同时要保证无病菌和杂草。
常用的基质有腐叶土、腐熟的鸡粪、珍珠岩等。
2.播种将选好的种子均匀撒在基质上，然后轻轻压实，覆盖一层薄土，再用喷雾器喷水保持湿润。
播种后应保持适宜的温度和湿度，一般在20℃左右，相对湿度在70%左右。
3.管理育苗期间应注意保持基质湿润，避免过度干燥或过度湿润。
同时要注意通风，避免病虫害的发生。
在苗期末期，应逐渐减少浇水，以促进根茎的生长。
三、移栽当白及苗长到5-6片叶子时，就可以进行移栽了。
将苗子取出，用剪刀修剪根部，然后将苗子移植到预先准备好的土壤中。
移栽后应保持适宜的温度和湿度，避免过度干燥或过度湿润。
四、管理移栽后的白及苗需要适当的管理，包括浇水、施肥、除草、松土等。
在生长期间，应注意及时发现和处理病虫害，以保证白及的健康生长。
五、收获白及的收获时间一般在生长期末期，即秋季。
收获时应注意不要损伤根茎，同时要及时清洗和晾干，以保证品质。
综上所述，白及的培养育苗技术是一项复杂的工作，需要科学的选种、育苗、移栽和管理。
只有通过科学的技术和管理，才能培育出优质的白及，为中医药事业做出贡献。
金银花组织培养育苗技术规程
DB41/T 2188—2021金银花组织培养育苗技术规程1 范围本文件规定了金银花组织培养育苗的术语和定义、设施设备、组织培养和温室驯化。
本文件适用于金银花组织培养育苗。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
LY/T 1882—2010 林木组织培养育苗技术规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1金银花忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica Thunb.）。
3.2组织培养在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，在人工培养基和人工控制的环境中，使其再生新植株的过程和技术。
3.3外植体用于植物组织培养的离体植物器官、组织、细胞以及原生质体。
3.4初代培养在组织培养过程中,最初建立的外植体无菌培养阶段。
3.5继代培养将初代培养获得的茎段或愈伤组织，通过分离切割接种在新的培养基中，从而获得大量无菌幼苗的培养阶段。
4 设施设备组织培养设施设备4.14.1.1 基本要求组织培养室选址应环境清洁，远离微粒和烟雾等污染源，水电供应充足，交通运输便利。
DB41/T 2188—2021组织培养室包括洗涤室、灭菌室、培养基配制室、缓冲室、无菌接种室和无菌培养室等。
4.1.2 洗涤室设备配备自动或半自动洗瓶机、水槽、收纳箱、量瓶架等。
4.1.3 灭菌室设备配备高压蒸汽灭菌锅、器械消毒器、紫外线灯、烘干箱、微孔过滤器等。
4.1.4 培养基配制室设备配备电子天平（0.0001 g,0.01 g）、酸度计、微波炉、冰箱等。
4.1.5 缓冲室设备配备衣帽柜、风淋装置等。
4.1.6 无菌接种室设备配备超净工作台、器械消毒器、酒精灯等。
4.1.7 无菌培养室设备配备培养架、紫外灯、臭氧发生器、空气加湿器、除湿机、时控装置等。
4.2温室驯化设施设备日光温室，配备温湿度调节装置、光照控制装置、灌溉设备、栽培床、穴盘等。
工厂化育苗的方式方法
“塞子苗”（plug seedling）
一般流程：
• 工厂化穴盘育苗：
在人工控制的最佳环境条件 下，采用科学化、标准化的 技术措施，运用机械化、自 动化的手段以及现代化的管 理方法，使穴盘苗生产实现 快速、优质、高效和规模化。
第四节 其它无土育苗方式
一、扦插育苗
①概念：将植物的部分营养器官插入基质中，在适宜环境条件下使 其生根长芽，然后培育成苗的技术。
是果树、花卉繁殖成苗的主要方法，蔬菜上也有应用。
②扦插育苗具有以下优点： • 有利于保持原品种的优良特性 • 节省种子，操作简便 • 发根及生长快，开花结果早，可缩短育苗周期，提高繁殖系数 • 易于实行多层立体和工厂化育苗
概念：是在无菌条件下分离植物体的一部分（器官、组织、细胞或原生质 体），接种到培养基上，在人工控制条件下离体培养，促使其分裂分化并 诱导成苗的技术。
优点：
能够保持原品种的优良性状，获得无病毒幼苗 大幅度提高繁育速度和繁殖系数 有利于实现育苗的自动化、工厂化和周年生产
缺点：
要求条件严格，成本较高，技术难度较大
1.穴盘育苗
• 穴盘是按照一定规格制成的带有许多小型钵状穴的塑料盘，按材质和加 工工艺分为聚乙烯注塑穴盘、聚丙烯薄板吸塑穴盘和聚苯乙烯发泡穴盘
• 常见穴盘的孔穴形状有方锥形和圆锥形，穴孔数目50、72、128、200、 288孔不等；国产穴盘一般长54cm，宽27cm左右。
表 穴盘规格及其用料量（司亚平等，蔬菜穴盘育苗技术，1999）
• 基质的选择
要求通气、持水和排水性能好，不带病原菌。并非所有无土栽培基质都适合作扦插基质，一般软 枝扦插要求的基质条件比硬枝扦插更为严格。
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组织培养育苗
1.无菌操作室
- 缓冲室（间）： - 接种室（间）：
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组织培养准备实验室 组织培养育苗
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缓冲室
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培养室
组织培养育苗
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无菌室（一）
组织培养育苗
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无菌室（二）
①消毒剂种类 ②消毒剂使用浓度 ③消毒处理时间
4.培养过程中污染原因及对策
- 污染的病原类型 - 污染发生原因 - 防污染对策
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组织培养育苗
三、 外植体的接种
1 定义 2 外植体接种操作前的准备工作
- 接种室的清洁和灭菌 - 超净工作台的清洁和灭菌准备 - 操作人员无菌操作前的准备
② 灭菌剂配制好并整齐摆放在超净工 作台上。
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- 外植体表面灭菌的一般过程
外植体取材
预处理
无菌条件下，70%酒 精表面消毒30S～60S
无菌条件下，消毒剂处理
- 预处理：
无菌水充分漂
洗3～5次
备用
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组织培养育苗
3.影响外植体消毒效果的因素：
- 培养基灭菌方法
-------湿热灭菌法
培养基湿热灭菌最少时间
液体容积（ml） 121℃所需时间（min）
20---50
15
75
20
250---500
25
1000
30
1500---2000
35---40
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组织培养育苗
- 培养基高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）操作 P20
锅内加水 放入消毒桶 装入培养基 盖好锅盖
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组织培养育苗
硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的 关系
铜是某些氧化酶的成分，能够促进离体 根的生长
锰参与植物的光合、呼吸代谢 钼参与氮素的代谢 氯是光合作用水光解的活化剂
微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激 活剂参与代谢的调节。
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缺铁症状：叶面呈绿色网纹状失绿。随病势发展， 叶片失绿程度加重，出现整叶变为白色，叶缘枯焦 ，引起落叶。严重缺铁时，新梢顶端枯死。
或
胚状体
完整植物
⊙ 茎尖、茎段、胚及子房等器官做外植体可不经 脱分化直接形成试管苗。
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组织培养育苗
⊙植物组织培养原理：一是细胞的全能性； 二是再生作用，与植物体分离的器官具有 恢复完整植株的能力。 ⊙ 组织培养类型：愈伤组织培养、器官培 养、茎尖培养、原生质体培养、悬浮细胞 培养。如花药培养：培养离体花药易获得 单倍体植物。
温室
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培
养
储藏室
准备室
室 灭菌室
缓接 冲种 室室
植物组织培养实验室布局示意图
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⒊药品贮存和配制仪器设备 - 冰箱 - 天平 - 酸度计 ⒋观察分析仪器设备 - 体视显微镜 - 普通光学显微镜 - 倒置显微镜 ⒌其它仪器设备 - 离心机 - 恒温水浴锅
3 外植体接种的具体步骤
切割外植体
培养瓶倾斜靠近 瓶盖外部在火焰上 旋开瓶盖，扣放
酒精灯火焰
旋转灼烧数秒钟
在酒精灯旁边
瓶盖在火焰 上灼烧两圈
用无菌镊子将外植体 均匀放置在培养基上
盖紧瓶盖
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0.1～10mg/L
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组织培养育苗
3、组织培养时，植物激素的使用规律 在生长素存在的条件下，细胞分裂
素的作用有加强的趋势，但二者在使用 上有一定的顺序关系，处理顺序不同， 培养物的分化状态也不同。规律如下：
⑴ 先用生长素处理，后用细胞分 裂素处理，有利于细胞分裂，但细胞不 容易分化,容易产生多倍体细胞。
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组织培养育苗
非洲紫罗兰叶片 培养
优化培养基
无蔗糖
1%蔗糖
5%蔗糖
无BAP
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BAP 0.1mg/l
BAP 5.0mg/l
组织培养育苗
无NAA
固体培养： 液体培养
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1、 培养基的构成
水 无机盐类 - 大量元素化合物 - 微量元素化合物
有机营养成分 - 糖类 - 维生素类 - 氨基酸类
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组织培养育苗
⑵ 先用细胞分裂素处理，后用生长 素处理，细胞分裂也分化。
⑶ 用生长素和细胞分裂素同时处理， 细胞脱分化后分化频率提高。但二者的 使用浓度比值可以决定器官分化方向： 生长素/细胞分裂素比值高时，有利于 根分化，抑制芽形成。反之，有利于芽 分化，抑制根形成。比值适中时，促进 愈伤组织的形成和生长。
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组织培养育苗
天然有机添加物质
- 椰汁：CM 100～150ml/L - 酵母提取液：YE 0.01%～0.5% - 番茄汁：5% ～ 10% - 马铃薯汁：100g/L ～ 200g/L - 香蕉泥（汁）：150mg/L ～ 200mg/L
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组织培养育苗
培养基的配制
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组织培养育苗
4.仪器设备 无菌操作设备 - 超净工作台
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组织培养育苗
3、无菌操作设备
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超 净 工 作 台
组织培养育苗
无菌接种箱
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组织培养育苗
- 电热烘箱 - 接种器具消毒器
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组织培养育苗
5.培养设备
- 空调 - 加湿器和去湿机 - 定时器 - 培养架 - 摇床或旋转床 - 培养箱
组织培养育苗
培养室
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组织培养育苗
2、灭菌设备
蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、 过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯 。
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组织培养育苗
- 高压蒸汽灭菌器
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组织培养育苗
3.组培实验室的基本设备 器皿和器械类
⒈玻璃器皿 ⒉器械 - 镊子类 - 解剖刀 - 剪刀 - 接种针 - 细菌过滤器
3.玻璃器皿的清洗 新购置的玻璃器皿的清洗 用过的培养器皿的清洗 已经污染的玻璃器皿的清洗
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组织培养育苗
二、灭菌
器具的灭菌方法 - 干热灭菌法 - 高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法） - 火焰灼烧灭菌法 培养基的灭菌方法 - 高温蒸汽灭菌法 - 过滤除菌法
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组织培养育苗
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组织培养育苗
培养基的配制
水 准备 母液 混合定容
糖
调pH 加入琼脂 加热溶解
培养器皿 清洗 干燥 分装 封口
高压蒸汽灭菌 冷却 凝固
培养基配制程序
- 培养基具体配制操作过程：P21
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接种
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组织培养育苗
组培实验基本操作技术
器皿和器具的洗涤 P19
1.洗涤剂：无磷中性的肥皂粉、洗衣粉和洗洁精 2.常用清洗方法 - 洗涤剂清洗法 - 超声波清洗法
恒
温
光
振
照
荡
培
培
养
养
箱
箱
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7、细胞学鉴定设备 光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜
倒置显微镜
光 学 显 微 镜
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组织培养育苗
三、培养器皿及实验用具
1、玻璃器皿
三角瓶 培养皿 培养瓶
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组织培养育苗
2、金属材质用具
接种针 镊子 解剖刀
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组织培养育苗
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菜豆
组织培养育苗
缺钼典型症状： 叶较小，叶脉间失绿,有坏 死斑点，且叶边缘焦枯， 向内卷曲。 十字花科植物缺钼时叶片 卷曲畸形，老叶变厚且枯 焦。
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白菜
组织培养育苗
缺硼典型症状： 受精不良,籽粒减少 ，“
花而不实”， “蕾而不花” ；
根尖、茎尖的生长点停止 生长，而形成簇生状；
桃 树
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组织培养育苗
缺铜症状： 新梢顶端叶片的叶尖失绿
变黄，叶片出现褐色斑点至 扩大变成深褐色，引起落叶 。
枝顶端生长不良，其下部 的芽开始生长，形成丛生的 细枝。
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菊花
组织培养育苗
缺锰典型症状： 叶脉间失绿褪色，但
叶脉仍保持绿色，脉间 出现坏死斑，缺素症状 由幼叶开始。
常引起各种腐烂病。
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马铃薯
组织培养育苗
植物生长调节剂
1、生长素类 - 常用类型：NAA,2,4-D,IBA,IAA - 功能 - 培养基中常用浓度：10-7～10-5mol/L或 0.1～10mg/L
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组织培养育苗
2、细胞分裂素类 - 常用类型：6-BA,KT.TDZ,2-ip - 功能 - 培养基中常用浓度： 10-7～10-5mol/L或
1、基本培养基母液的配制 ⑴ 单配法 ⑵ 混配法 ① 按照避免难溶性沉淀形成的原
则和物质种类的不同，将基本培养基 配方所包括的物质进行分组；