现在生物技术概论(第一章和第二章习题) (1)

第一章：基因工程

一、名称解释：

基因克隆载体：把能够承载外源基因，并将其带入受体细胞得以稳定遗传的DNA 分子称为基因克隆载体。

基因组文库：把某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌克隆子群体中，这个群体即为这种生物的基因组文库。

cDNA文库：某种生物基因转录的全部mRNA经反转录产生的各种cDNA片段分别与克隆载体重组，储存在一种受体菌克隆子群体之中，这样的群体称为cDNA文库。

基因工程：又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。

转化：通过生物学、物理学和化学等方法使外源裸露DNA分子引入受体细胞，并在受体细胞内稳定维持和表达的过程称之为转化。

二、简答题：

1、克隆载体应具备哪些特点？

答：①能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力。②容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好。③容易插入外来核酸片段，插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。④容易从宿主细胞中分离纯化出来，这才便于重组操作。⑤有容易被识别筛选的标志，当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作

2.简述基因工程操作的基本路线?

答：目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和鉴定。

3.简述在基因工程中获得目的基因的方法？

答：从基因文库中获取，利用PCR技术扩增，人工合成。

4.简述基因工程研究的理论依据

答：不同基因具有相同的物质基础；基因是可以切割的；基因是可以转移的；多肽与基因之间存在对应关系；遗传密码是通用的；基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代。

第二章：细胞工程

一、名称解释：

外植体：植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。在继代培养时，将培养的组织切段移入新的培养基时，这种切段也称外植体。

愈伤组织：愈伤组织（callus）原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。

脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下恢复细胞分裂能力,失去原有分化状态的过程叫做脱分化。

植物原生质体：脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体，是一生物工程学概念。原生质体是由质膜所包围的具有生活力的”裸露细胞“。

细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株。

二、简答题

1、动物细胞培养有什么特点？

答：1.细胞贴壁 2.有丝分裂3.接触抑制4.原代培养一般传代1～10代

2、什么是细胞的全能性?为什么细胞的全能性最强？

答：细胞全能性指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。

3、什么是体细胞克隆技术？

答：体细胞克隆技术是指把动物体细胞经过抑制培养，使细胞处于休眠状态。采用核移植的方法，利用细胞拆合或细胞重组技术，将卵母细胞去核作为核受体，以体细胞或含少量细胞质的细胞核即核质体作为核供体，将后者移入前者中，构建重组胚，供体核在去核卵母细胞的胞质中重新编程，并启动卵裂，开始胚胎发育过程，妊娠产仔，克隆出动物的技术，又可称之为体细胞核移植技术。

4、植物细胞融合的基本步骤？

答：用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁形成原生质体，用聚乙二醇作为促融剂，使原生质体融合。

（4）.什么叫植物原生质体？如何进行植物原生质体的融合？

脱去细胞壁的细胞叫原生质体，两亲本菌株的选择和遗传标记的制作（选择不同的营养缺陷型；原生质体的制备（高渗条件）；原生质体再生（测定再生率）；融合（PEG、离心沉淀、电脉冲等）；融合子的检出（直接检出法和间接检出法）；实用性菌株的筛选

5、如何获得单克隆抗体简述其基本步骤？

答：单克隆抗体的制备步骤：1、抗原制备；2、免疫动物；3、免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备；4、细胞融合；5、杂交瘤细胞的选择培养；6、杂交瘤细胞的筛选； 7、杂交瘤细胞的克隆化；8、单克隆抗体的检定；9、分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立；10、单克隆抗体的大量制备

七、生物技术与农业

名词解释：

1.转基因动物：是指体内基因组中稳定地整合有外源基因的动物。此外源基因整合到动物基因组后，随细胞分裂增殖，在体内得以表达并传给后代。

2.核移植：将动物早期的胚胎细胞核或卵裂球通过人工操作，移植到去核卵细胞中，重组成新的胚胎并发育成与供体胚胎基因相同的后代的过程

3.胚胎干细胞：一种全能干细胞，是从着床前胚胎内细胞团经过体外分化抑制培养的一种全能干细胞系，可以分化为任何一种组织类型的细胞

4.动物的性别控制：指通过人为的干预或操作，使动物按人们的愿望繁殖所需性别后代的技术。

1.现代植物生物技术与传统农业技术相比有何突出优越性？试举例说明。

(1) 传统的有性杂交等育种方式是一个缓慢而艰辛的过程（育成一个新品种需要15年左右时间），而且存在许多难以超越的瓶颈；而蓬勃发展的现代生物技术，如组织培养、单倍体育种、细胞融合以及基因工程等将在培育作物新品种中发挥越来越重要的作用。（2）微生物学和生物技术的发展，为生物农药生产和作物病虫害的防治提供了更有效的途径，对提高作物产量和质量将做出巨大贡献。（3）现代生物技术在养殖业方面的广泛应用，将从更本上改变传统农业的技术手段、运作方式和经济效益。例如，培养出抗逆性强的植株，使得农作物能够少受天灾的影响。

2.基因工程抗虫棉已大面积应用与生产，同时也造成食棉昆虫的耐食性，如何看待这个问题？并提出解决问题的途径。

大面积种植抗虫棉，初期会有较好的杀虫效果，即大部分害虫吃了抗虫棉的叶子后，被毒蛋白杀死，但是还是有极少数的害虫具有对毒蛋白的抗性，这些具有抗性的害虫繁殖的后代也普遍具有抗性，那么长此以往，具有抗性的害虫在群体中的比例越来越大，抗虫棉的抗虫效果就不如以前了，也即造成食棉昆虫的耐食性，所以在大面积种植抗虫棉的同时，还要种植不抗虫的棉花，这样就可以延缓昆虫群体中抗性基因频率的增大速度。*耐食性这个是个必然的结果，昆虫也有优胜劣汰，剩下来的都不是省油的灯，一般难以解决，毕竟是生物间的问题，顺其自然，才是回到自然的最好方法。

3.简述开展水稻基因组计划的意义。

人类赖以生存的农作物，水稻是一主要植物，水稻共有12条染色体，它们记录着与水稻的高产优质、美味香色以及与生长期、抗病抗虫、耐旱耐涝、抗倒伏等所有性状相关的遗传信息。因此，解析水稻基因组序列，是改进水稻品质、提高水稻产量的前提和基础。

4.简述生物农药的意义，并列出几种常用的生物农药。

生物农药的意义在于选择性强，对人畜安全。目前大范围使用的生物农药，只对病虫害有作用，对人、畜及水生生物都比较安全。其次，生物农药对生态环境影响小，环境安全。生物农药的活性成分源于自然生态系统，极易被日光、植物及各种土壤微生物分解。常用的生物农药有苏云金杆菌、井冈霉素、浏阳霉素、阿维菌素等。*生物农药更适合于扩大在未来有害生物综合治理策略中的应用比重。而且它选择性强，对人畜安全，对生态环境影响小，并可以诱发害虫流行病。

5.动物转基因常用的外源基因导入方法有哪些？各有何优缺点？

显微注射法：优点：准确、快捷。缺点：成本很高。

体细胞核移植方法：优点：经济、有效。缺点：耗时。

6.动物胚胎工程的主要技术包括哪些方面？

胎移植相关技术、动物克隆技术、转基因动物技术、胚胎干细胞技术

7.生物技术在动物饲料工业上有哪些应用？

1.DNA重组生长激素的研究与应用；

2.发酵工程研究与应用；

3.寡肽、寡糖添加剂研究与应用；

4.天然植物提取物的研究与应用；

5.有机微量元素添加剂研究与应用；

6.营养重分配剂研究与应用。

8.畜禽基因工程疫苗有哪些类型？