土壤中有机磷的测定

土壤中有机磷的测定

实验方案设计

土壤中磷知识总结

I、土壤中磷的来源及分布：土壤中的磷素来源于成土矿物、有机物质和含磷化学肥料。土壤全磷量不能作为当季作物的土壤供磷的水平指标，但可作为表示土壤潜在肥力的一项指标。土壤磷素分为无机形态和有机形态。无机形态的磷约占全磷的50%〜90%,主要包括磷酸钙类化合物（Ca-P）、磷酸铁类化合物

（Fe-P）、磷酸铝类化合物（AI-P ）和表面为氧化铁胶膜所封闭的闭蓄态磷（O-P）。风化程度较高的土壤，如红壤以O-P和Fe-P为主，风化程度较低的土壤以Ca-P 和AI-P 为主。有机形态的磷约占全磷10%〜50%,主要以磷脂、植素、核酸和核蛋白形式存在。土壤有机磷含量与土壤有机质含量密切相关。土壤有效磷是指当季作物所能吸收的磷。土壤中磷移动性很小。作物吸收的磷主要是土壤溶液中的H2PO- 4和HPO2 4-。

U、磷的营养功能：1、磷是植物体内重要化合物的组成元素；2、磷能加强光合作用和碳水化合物的合成与运转；3、促进氮素代谢；4、磷能促进脂肪代谢；5、提高作物对外界环境的适应性

川、作物磷素营养失调的症状

缺磷时，各种代谢过程受到抑制，植株生长迟缓、矮小、瘦弱、直立、根系不发达，成熟延迟、籽实细小、植株叶小、叶色暗绿或灰绿、缺乏光泽，主要是细胞发育不良致使叶绿素密度相对提高，同时，Fe的吸收间接地促进叶绿

素合成，使叶色暗，严重缺磷时，在不少作物茎叶上明显地呈现紫红色的条纹或斑点（花青苷）甚至叶片枯死脱落，症状一般从基部老叶开始。逐渐向上部发展。

缺磷造成玉米果穗秃顶，油菜脱荚，棉花和果树落蕾、落花，甘薯及马铃薯薯块变小，耐贮性变差。磷素过剩，谷类无效分蘖，秕粒增加，叶肥厚而密，植株早衰。由于磷过多，而引起的病症，通常以缺Zn、Fe、Mg 等的失绿症表现出来。

W土壤中磷的测定方法：测定土壤速效磷的方法选择，酸性土壤一般采用盐酸氟化铵或氢氧化钠一草酸钠法来提取，石灰性土壤或中性土壤采用碳酸氢钠来提取。用NaHCO 3 溶液(pH8.5) 提取土壤速效磷，在石灰性土壤中提取液中的HCO 3 -可和土壤溶液中的Ca2+形成

CaCO 3 沉淀，从而降低了Ca 2+的活度而使某些活性较大的Ca—p 被提取出来。在酸性土壤中因pH 提高而使Fe-p ，A1-P 水解而部分被提取。

实验部分

一、实验目的

1、了解光度法测定土壤中有效磷的原理及方法

2、熟悉分光光度计的使用

二、实验原理

1、土壤中的磷大部分不能被植物直接吸收利用，易被吸收利用的有效磷通常含量很低。土壤中的有效磷是指能为当季作物吸收的磷量。

2. 土壤中有效磷的测定方法有：生物方法、同位素方法、阴离子交换树脂方法及化学方法等。其中应用最普遍的是化学方法。它是用浸取剂提取土壤中的一部分有效磷。浸取剂种类很多，它的选择主要根据各种土壤的性质而定。酸性土壤中磷酸铁和磷酸铝形态的有效磷可用酸性氟化铵提取，形成氟铝化铵和氟铁化铵配合物，少量的钙离子形成氟化钙沉淀，磷酸根离子被提取到溶液中来，石灰性土壤则采用碳酸氢钠溶液浸取。

3. 在含磷的溶液中，加入钼酸铵，在一定酸度条件下，溶液中的磷酸与钼酸络合形成黄色的磷钼杂合酸——磷钼黄。

H3PO4+12H2MoO4==H3[PMo12O40]+12H2O

三、主要仪器和试剂

1、仪器：723分光光度计，10mL吸量管，振荡机，漏斗，滤纸。

2 个滴瓶，50mL带塞比色管4个，50mL三角瓶4个，50mL容量瓶6个,25mL容量瓶4个。

2、试剂：

(1)

HCI 溶液(0.5mol/L ) 50mL : 4.5mL 浓盐酸+100mL水

（2）NH4F溶液（1moI/L ）30mL称取3.7g氟化铵，溶于100mL蒸馏水中

（3）提取剂：分别移取15mL 1moI/LNH4F溶液和25mL 0.5moI/LHCI溶液，假如460mL 蒸馏水中，配制成0.03moI/L NH4F-0.025mol/L HCI溶液（500ml）。

（4）H s BO溶液（100g/L）100mL : 10g硼酸溶解于水中，稀释至100mL.

（5）15g/L钼酸铵-3.5moI/L盐酸溶液：溶解15g钼酸铵于300mL蒸馏水中，

加热至60E左右，如有沉淀，将溶液过滤，待溶液冷却之后，慢慢加入350mL

10moI/L HCI溶液，并用玻璃棒迅速搅动，待溶液冷却至室温，用蒸馏水稀释至1L,充分摇匀，储存于棕色瓶中。放置时间不得超过两个月。

（6）氯化亚锡溶液（25g/L）:称取氯化亚锡2.5 g溶于10mL浓盐酸中，溶解后加入90mL蒸馏水，混合均匀置于棕色瓶中，此溶液现配现用。

（7）磷标准溶液（50卩g/mL）:准确称取105C烘干的KHPQ （A.R）0.2195g，溶解于

400mL水中加浓H2SO45m防止溶液长霉菌），转入1L容量瓶中，加水稀释至刻度，要匀。准确移取上述磷标准溶液25.00mL于250mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即为5 11 g • /m L -1 （此溶液不宜久存）。

四、实验步骤

1、吸收池配套性检验

用拇指和食指捏住洗手池毛面，分别在4个吸收池内注入蒸馏水3/4，用滤

纸吸干池外壁的水滴，再用擦镜纸擦拭光面至无痕迹，垂直放在吸收池架上，盖上样品室盖，将在参比位置上的吸收池推入光路调零调百。拉动样品槽拉杆，依

次将被测溶液推入光路，读取相应的透射比或吸光度。若所测得各吸收池透射比偏差小于0.5%，则这

些吸收池可以配套使用

用吸量管吸取磷标准溶液（5pgmL-1）5.0 mL分别放入25 mL容量瓶中，

加入0.03mol L-1NH4F-0.025mol L-1HC1溶液5-10 mL（按所取滤液毫升数而定），用吸量管加钼酸铵-盐酸溶液5mL，加蒸馏水至瓶颈刻度，并滴加25g L-1氯化亚锡3滴，摇动后，至溶液有深蓝色出现，用水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟，与土样溶液同时显色，用1cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于722E型分光光度计中，在440—700nm波长范围内分别测定其吸光度A值。当临近最大吸收波长附近时应间隔波长10nm测A值，其他各处可间隔波长20nm测定。然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。

3、在不同显色剂用量条件下测定标准溶液的吸光度：按步骤2进行操作，加入不同量的显色剂0、1,00、3.0mL、4.0mL、5.0mL、7.0mL、9.00mL摇匀。用1cm 吸收池，以试剂空白为参比溶液，在选定的波长下测吸光度。记录各吸光度。在最大吸光度附近每隔0.10mL测吸光度。

、有色配合物稳定性试验

取两个洁净的容量瓶，用步骤（2）方法配制氯化亚锡有色溶液和试剂空白溶液，放置约2min，立即用1cm吸收池，以试剂空白溶液为参比溶液，在选定的波长下测定吸光度。以后隔10min、20min、

5、工作曲线的制作

分别准确移取5卩g • mL磷标准溶液0, 1.0 , 2.0, 3.0, 4.0, 5.0mL

于6 个25mL容量瓶中，加入0.03mol ・L-1NH4F-0.025mol •L-IHCl 溶液5-10 mL