槲皮素,芦丁的提取
新试验一 芦丁的提取、分离与鉴定
实验一 芦丁的提取、精制与鉴定一、实验目的与要求l 、以芦丁为例学习黄酮类化合物的提取方法；2.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷, 苷元和糖部分的鉴定方法。
R=-glu-rha 芦丁 R=H 槲皮素芦丁溶解度: 冷水1: 8000 热水1: 200冷乙醇1: 300 热乙醇1: 30难溶于乙酸乙酯、丙酮, 不溶于苯、氯仿、乙醚、及石油醚等溶剂。
槲皮素溶解度: 冷乙醇1: 650 热乙醇1: 60可溶于甲醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮、吡啶, 不溶于石油醚、乙醚、氯仿和水中。
二、实验原理本实验是利用芦丁在热水中和冷水中溶解度相差较大的性质, 用热水提取和精制；芸香苷属于苷类化合物, 可被稀酸水解成槲皮素（苷元）, 葡萄糖和鼠李糖。
芦丁和槲皮素通过化学反应, 色谱法和光谱分析进行检识与鉴定。
三、实验内容（一）提取分离和纯化l 、芦丁的提取:2.精制（重结晶）:3、芦丁的水解:OO OHOH OROH HO流程图如下:槐米（20g）研碎, 于500ml烧杯中,加350, 250ml水煮沸15min,10min棉花过滤150ml, 1%H2SO4 80倍水加热溶解, 趁热抽滤直火加热水解30min放冷抽滤, 沉淀水洗至中性不溶物（弃去）滤液放置 1-1.5h, 抽滤精品芦丁（水浴浓缩至2ml）(二)鉴定l、化学检识取芦丁和槲皮素少量, 置2支试管中分别加乙醇8ml使溶解(1)盐酸—镁粉反应: 取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml, 置2支试管中分别加浓盐酸5滴, 再加少量镁粉, 观察颜色变化。
(2)Molish反应: 取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml, 置2支试管中分别加10%α—萘酚0.5ml摇匀, 倾斜试管, 沿管壁缓缓滴加浓硫酸0.5ml, 静置, 观察二层溶液界面处颜色变化, 并比较芦丁和槲皮素的区别。
(3)FeCL3反应: 取芦丁和槲皮素乙醇液0.5ml, 置2支试管中分别加1%三氯化铁乙醇液几滴, 观察颜色变化。
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（Sophora japonica L ．）的未开放花蕾。
味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
槐米常炒炭应用。
槐米的主要化学成分为芦丁，其含量可达12～16％，其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
芦丁具有Vitp 样作用，可降低毛细血管脆性和调节通透性。
临床上用作毛细血管脆性引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。
[目的要求]1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2．掌握槲皮素的制备原理及操作。
3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4．通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
[实验原理]芦丁（rutin ）：C 27H 30O 16·3H 2O ，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。
难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素（quercetin ）：C 15H 10O 7·2H 2O ，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。
能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。
利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。
通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。
[实验内容]一、芦丁的提取分离及精制方法⑴槐米粗粉（50g）置1000ml烧杯中，加入500ml饱和石灰水，加热，并维持pH8～9煮沸20分钟，趁热用脱脂棉滤过滤液药渣用300ml饱和石灰水煮沸10分钟，维持pH8～9趁热滤过滤液药渣（×）合并70℃下用浓HCl调pH至4 ～5沉淀低温（80℃）干燥，称重。
槲皮素,芦丁的提取
槐米中主要成分是芦丁。
从槐米中提取芦丁可用乙醉提取法、水提取法、碱溶酸沉提取法。
碱溶酸沉提取法是依据芦丁结构中有游离的酚羟基, 显弱酸性, 遇碱成盐溶解，加酸又游离析出的原理设计的, 此法成本低、收率高, 所得产品质童好, 是实际生产中常用的方法芦丁碱溶酸沉（alkali-solution and acid-isolation）碱溶酸沉法，中药化学中常用于黄酮类、蒽醌类、酚性,内酯结构的木脂素、香豆素类提取分离等实验。
原理：利用混合物中各组分酸碱性差异而进行分离。
具体操作将总提物溶于亲脂性有机溶，用碱水提取，调节PH值后用有机溶剂萃取，还可用PH梯度法进一步分离各碱度或酸度不同的成分。
注意：提取过程中料液比、浸提碱液pH值、浸提时间等条件都对提取率及纯度有影响。
注意酸性或碱性的强度，与被加热分离成分接触的时间，加热温度和加热时间等，避免在剧烈条件下某些化合物结构发生变化或结构不能回复到原本存在于中药的状态。
1．溶剂萃取法去杂原理：利用黄酮类与其它杂质极性不同，选不同溶剂进行萃取。
石油醚：除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性物质逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。
2．碱水提酸沉淀法原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。
注意事项：①酸碱度不宜过大②邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护③石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质3．炭粉吸附法适用于苷类的精制工作。
植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。
依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。
大部分苷类可用7%酚/水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。
（一）常用溶剂的特点：石油醚，环己烷，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇极性：小————大亲脂性：大————小亲水性：小————大1．比水重的有机溶剂：氯仿2．与水分层的有机溶剂：环己烷 ~ 正丁醇3．能与水分层的极性最大的有机溶剂：正丁醇4．与水可以以任意比例混溶的有机溶剂：丙酮~ 甲醇5．极性最大的有机溶剂：甲醇6．极性最小的有机溶剂：环己烷7．介电常数最小的有机溶剂：石油醚8．常用来从水中萃取苷类、水溶性生物碱类成分的有机溶剂：正丁醇9．溶解范围最广的有机溶剂：乙醇。
实验二 槐米中芦丁的提取和芦丁水解制备槲皮素
实验二 槐米中芦丁的提取和芦丁水解制备槲皮素一、概述植物来源：槐米系豆科植物槐树（sophora japonica L.）的花蕾（槐米），芦丁含量高达12%~20%。
荞麦中含量也较高。
含芦丁成分的植物高达70种以上。
功效：芦丁经药理实验证明具有调节毛细血管渗透作用，具有维生素P 样作用。
在临床上用作毛细血管止血药，常作为高血压病的辅助用药。
芦丁为槐米中主要有效成分。
主要化学成分的结构及理化性质：芦丁（Rutin ）也称芸香苷，是槲皮素3位上的羟基与芸香糖脱水缩合形成的苷(芸香糖为葡萄糖与鼠李糖组成的双糖)。
分子式：C 27H 30O 16·3H 2O ，淡黄色针状结晶，含三分子结晶水，熔点174～178℃,无水物为188~190℃。
易溶于碱液，显橙黄色，酸化后又析出。
在冷水中的溶解度为1：10000，热水中为1：200，在冷乙醇中为1：650，在热乙醇中为1：60，在吡啶中为1：12。
微溶于乙酸乙酯和丙酮，难溶于苯、三氯甲烷、石油醚等极性小有机溶剂，可溶于硫酸和盐酸，加水稀释又可析出。
UV EtOHm ax λ：259，299，359nm 。
芦丁用20%H 2SO 4水溶液水解可得槲皮素（芦丁的苷元），呈黄色结晶，313～314℃，C 15H 10O 7·2H 2O ，在热乙醇中溶解度为1：23，冷乙醇中1：290，难溶于水和苯等极性小的有机溶剂，可溶于极性较大的有机溶剂如甲醇、乙酸乙酯、丙酮等。
UV EtOH m ax λ：255，269sh,301sh,370nm 。
其他成分理化性质：皂苷（saponin ）粗品为白色粉末，m.p.210～220℃。
易溶于吡啶。
能溶于200倍的甲醇，酸水解后获得两种苷元（白桦酯醇、槐花二醇）及糖（糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄糖醛酸内酯）。
白桦酯醇（betulin ）无色针晶，m.p215～217℃,能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、三氯甲烷、苯等；难溶于石油醚。
芦丁槲皮素鉴定实验报告
一、实验目的1. 了解芦丁和槲皮素的理化性质。
2. 掌握芦丁和槲皮素的提取、分离与鉴定方法。
3. 熟悉光谱分析在有机化合物结构鉴定中的应用。
二、实验原理芦丁和槲皮素均为黄酮类化合物，具有多种生物活性。
芦丁是槐米中的一种主要活性成分，槲皮素则广泛存在于多种植物中。
本实验通过碱酸法提取芦丁和槲皮素，并利用光谱分析（紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振波谱）对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、芦丁标准品、槲皮素标准品、无水乙醇、浓盐酸、镁粉、10%萘酚溶液、浓硫酸、聚酰胺薄层板、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温加热器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
四、实验步骤1. 芦丁和槲皮素的提取（1）将槐米粉末用无水乙醇回流提取，过滤，收集滤液。
（2）将滤液浓缩至一定体积，用热水溶解，冷却后用盐酸调节pH值至2～3。
（3）静置沉淀，取上清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干。
（4）用少量无水乙醇溶解残渣，定容至一定体积，得到芦丁和槲皮素的提取液。
2. 芦丁和槲皮素的鉴定（1）紫外-可见光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用紫外-可见分光光度计测定其在200～400nm范围内的吸收光谱，与标准品进行比较。
（2）红外光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用红外光谱仪测定其红外光谱，与标准品进行比较。
（3）核磁共振波谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用核磁共振波谱仪测定其核磁共振波谱，与标准品进行比较。
3. 芦丁和槲皮素的分离（1）薄层色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，点样于聚酰胺薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（5:4:1）为展开剂进行薄层色谱分析，与标准品进行比较。
（2）高效液相色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，经适当处理后，用高效液相色谱仪测定其含量，与标准品进行比较。
五、实验结果与分析1. 紫外-可见光谱分析芦丁和槲皮素的紫外-可见光谱与标准品的吸收光谱基本一致，表明提取液中含有芦丁和槲皮素。
纸层析法鉴定芦丁和槲皮素的实验方程式
纸层析法鉴定芦丁和槲皮素的实验方程式纸层析法是一种简单、快速、经济、易于操作的色谱分离技术，广泛应用于化学分析和药物化学等领域。
在实际应用中，纸层析法常用于对化合物的分离和纯化，并通过染色、显色等方法进行定性和定量分析。
在鉴定芦丁和槲皮素中，可以使用纸层析法进行分离和鉴定。
实验步骤如下：1.实验物料准备：准备好检测芦丁和槲皮素的纸层析板、标准品芦丁和槲皮素、溶剂毛细管、显色剂等。
2.准备样品溶液：取一定量的待测样品，将其溶解在适量的溶剂中，使浓度适当，以便在纸层析板上均匀涂抹。
3.准备标准溶液：准备芦丁和槲皮素的标准溶液，浓度分别为C1和C24.样品处理：将纸层析板上端标出起点线，再标出标准品C1和C2的位置，然后用毛细管在起点上均匀涂抹样品溶液和标准溶液。
5.平行纸层析：将涂抹好样品和标准品的纸层析板，放入干燥的脱水培养器中，在温度适宜的条件下进行平行纸层析分离，待样品跑至标准品C1和C2处时，取出纸层析板进行干燥。
6.显色：将纸层析板放入含有显色剂的容器中，在室温下进行显色反应，待出现斑点时取出。
7.结果分析：观察纸层析板上的斑点形成情况和色谱图，对比标准品的色谱图，根据斑点位置和色谱图形态，可以初步判断出纸层析板上的斑点是否与标准品C1和C2相同或相似。
8.定量分析：根据纸层析板上斑点的形成情况和色谱图，可以根据标准品的浓度、质量和相对迁移率等参数，计算出样品中芦丁和槲皮素的含量。
需要注意的是，纸层析法是一种相对简单的色谱分离方法，但是对于复杂样品的分离和鉴定较为有限。
在实际应用中，需要对样品进行预处理、选用合适的纸层析板和显色剂，并进行合理的操作控制和数据分析。
同时，纸层析法也可以与其他色谱分离方法如薄层色谱、柱层析等相结合，提高分析的准确性和可靠性。
芦丁的提取与鉴定
实验现象 芦丁分层上层呈浅 黄色，下层出现紫 红色环。槲皮素分 层上层为浅黄色， 下层为无色
芦丁，槲皮素溶液 都变成紫红色
芦丁，槲皮素溶液 都出现荧光
解析 Molish 反应是鉴定 糖的反应。芦丁含 有葡萄糖和鼠李 糖，所以出现紫环 反应，槲皮素没有 糖结构，所以没反 应。 盐酸镁粉反应是检 查是否有黄酮类化 合物的最常用方 法。芦丁，槲皮素 都含有黄酮结构， 所以出现紫红色。 芦丁，槲皮素都含 有黄酮结构。
所以可以认为 a 为葡萄糖，b 为鼠李糖。糖试液中含有葡萄糖和鼠李糖。芦丁样品中含有 芦丁，槲皮素样品中含有槲皮素。 （4）薄层色谱
Rf（A）=0.46 Rf（B）=0.40 Rf（C）=0.10 Rf（D）=0.07 因为 Rf（A）≈ Rf（B） Rf（C）≈ Rf（D）
所以可以认为 B 为芦丁，D 为槲皮素。 五．实验结果与讨论
二. 实验原理
芦丁为双糖苷，具有较大极性，对热水和冷水具有较大的溶解差异，故用水对其进行提取 精制。
芦丁可被稀水解，生成槲皮素及葡萄糖，鼠李糖，并通过薄层层析，纸层析鉴定。芦丁 及槲皮素还可以通过化学反应及紫外及红外光谱鉴定。
OH OH
OH OH
HO
O
HO
O
+
H
+
O
OH
OH O Glc O
OH O
芦丁粗品
重结晶
芦丁纯品
原理：黄酮苷难溶于酸水，易溶于碱水。
2 芦丁及槲皮素的纸层析和聚酰胺薄膜层析的结果如何？为什么不同？
在纸层析中 Rf 槲皮素>Rf 芦丁，在聚酰胺薄膜层析中 Rf 槲皮素<Rf 芦丁
芦丁的提取
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
芦丁的提取与定性反应
槲皮素
OH OH
OAc OAc
AcO
HO O
O
O
O
OAc
OH OHቤተ መጻሕፍቲ ባይዱO OH OH OH OH OH O CH2O
O CH2O O OAc OAc
OAc
O
O
OAc OAc
OAc
芦丁
芦丁十乙酰化物
实验原理
提取原理---芦丁分子中有酚羟基，呈弱酸性。在碱水 中成盐而增大其溶解度。然后，在酸中不溶而沉淀析 出，从而进行提取。 精制原理---利用芦丁易溶于热水或热甲醇，而较难溶 于冷水或冷甲醇，由此进行重结晶而精制。 芦丁— 槲皮素—
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O H2O Zr O Cl O 4'
稳定性： 稳定性： 3-OH络合物〉5-OH络合物 OH络合物〉 OH络合物 络合物
芦丁的提取与定性反应
实验注意事项
芦丁粉碎不可过细， 芦丁粉碎不可过细，以免过滤时速度过慢 加入石灰乳即可达到碱溶解提取芦丁的目的， 加入石灰乳即可达到碱溶解提取芦丁的目的，还可以除 去槐花米中含有的大量多糖类粘液质， 去槐花米中含有的大量多糖类粘液质，但pH值不能过 值不能过 高，否则钙能与芦丁形成螯合物而沉淀析出 pH值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解，降低收率（最 值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解，降低收率（ 值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解 值为5） 佳pH值为 ） 值为
芦丁的提取与定性反应
糖 的 纸 色 谱 鉴 定
标准品：葡萄糖乙醇液、鼠李糖乙醇液 标准品：葡萄糖乙醇液、 展开剂：正丁醇：醋酸： 展开剂：正丁醇：醋酸：水（4：1：5，上层） 上层） 显色剂：喷邻苯二甲酸苯胺显示剂，105℃烘 显色剂：喷邻苯二甲酸苯胺显示剂，105℃烘 箱加热10min, 10min,显棕色斑点 箱加热10min,显棕色斑点
槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定
槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定实验名称：槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定实验目的：1）掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理及操作，学会芦丁的精制与水解方法。
2）能运用化学法、色谱法鉴定芦丁。
实验器材：槐花粗粉石灰乳硼砂烧杯纱布蒸馏水抽滤装置盐酸硫酸三角烧杯镁粉α-萘酚硅胶ＧBa(OH)2 FeCl3K3[Fe(CN)6]苯胺-联苯二甲酸芦丁标准品槲皮素标准品葡萄糖标准品鼠李糖标准品参考文献：（一）主要成分的结构及性质槐花系豆科植物Sophora japonica L.的干燥花蕾。
其主要有效成分为芦丁，芦丁在槐花花蕾中含量高，《药典》规定槐花中芦丁含量不得少于20.0％。
其结构为槲皮素-3-O-芸香糖苷。
（二）基本原理芦丁分子中有较多的酚羟基，有弱酸性，可与碱成盐而溶于水中，加酸酸化后可沉淀析出，因而用碱溶酸沉法提取芦丁。
芦丁的精制是利用它在冷热水中的溶解差异进行的。
（三）操作步骤１．芦丁的提取称取槐花粗粉，置500ml烧杯中，加入0.4％硼砂沸水溶液200ml，在搅拌下加入石灰乳，调至pH8～9,加热微沸20分钟（注意保持pH8～9），并随时补充蒸发的水分，趁热用四层纱布滤过。
同样操作再提取一次，合并两次滤液。
滤液在60~70oC用浓HCl调至pH ３~４，静置过夜使沉淀完全，抽滤，沉淀用蒸馏水洗２~３次，抽干，置空气中晾干，得芦丁粗品。
2．芦丁的精制称量粗品芦丁，按1:200的比例悬浮于蒸馏水中，煮沸10分钟使芦丁全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析晶。
抽滤，结晶置空气中晾干或60～70oC干燥，得精制芦丁，称重，计算收率。
3．芦丁的水解取芦丁，研细后置于250ml三角烧杯中，加入2%H2SO4溶液100ml，直火加热微沸约40分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤，滤液保留作糖检查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干称重，得粗制槲皮素，然后用乙醇（95%乙醇约15ml）重结晶得精制槲皮素。
实验三芦丁的提取
实验目的
以芦丁为实例学习黄酮类成分的提取分离方法
实验内容
一、槐花米中已知主要成分的理化性质
槐花米中芦丁的含量可高达20%，另含少量皂苷、皂 苷水解后，可得到桦皮醇及槐二醇
1．芦丁（Rutin）
本品为淡黄色细小针状结晶，溶于热水（1:200）， 难溶于冷水（1:8000）：溶于热甲醇（1:7），冷甲醇 （1:100）：热乙醇（1:30），冷乙醇（1:300），难溶于 乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚，及石油醚等溶 剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后又析出
芦丁的水解取芦丁取芦丁1g1g加加22hh22so10分钟为澄清溶液逐渐析出黄色分钟为澄清溶液逐渐析出黄色so4480ml80ml小火加热微沸回流小火加热微沸回流3030分分钟至一小时开始加热钟至一小时开始加热10小针状结晶即槲皮素抽滤取结晶保留滤液小针状结晶即槲皮素抽滤取结晶保留滤液20以检查其中所含单糖加以检查其中所含单糖加50热回流使槲皮素粗晶溶解趁热抽滤放置析晶抽滤得热回流使槲皮素粗晶溶解趁热抽滤放置析晶抽滤得精制品在减压下精制品在减压下110110干燥可得槲皮素无水物测熔点干燥可得槲皮素无水物测熔点进行纸层析鉴定进行纸层析鉴定20毫升毫升90ml量加量加50乙醇按乙醇按11克用克用90ml思考题与记录思考题一：取槐花米40g，置于100ml烧杯中，用冷水快速清洗去泥 沙等杂质沥干水，加0.4%硼砂水溶液400ml，pH 6 ～ 7 左右，在搅拌 下以石灰乳调至pH 8，加热微沸30分钟，趁热抽滤，重复操作一次， 合并滤液，用浓盐酸调pH至 5, 搅匀，静置24小时 方法二：取槐花米20g，置于500ml圆底烧瓶中，加乙醇150ml， 加热回流1小时，稍冷后抽滤，滤渣再加乙醇100ml回流1小时，合并乙 醇提取液，放冷，析出絮状沉淀，过滤，滤液浓缩至约50ml。放置过 夜，滤取析出结晶。母液继续浓缩一半，放置又析出结晶，合并结晶 用乙醚30~50ml分次洗去脂溶性成分（油脂、叶绿素等）再用丙酮10ml 洗涤一次，得粗芦丁
芦丁水解为槲皮素的原理
芦丁水解为槲皮素的原理芦丁是一种天然药物成分，主要存在于苦槟榔中，也可以从其他植物如草莓等中提取。
芦丁具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗衰老等多种活性。
芦丁在体内可以通过水解反应转化为槲皮素，槲皮素是芦丁的主要代谢产物。
下面将详细探讨芦丁水解为槲皮素的原理。
首先，芦丁水解的过程主要是通过酶催化反应完成的。
在人体内，芦丁主要通过酶类如β-葡萄糖苷酶进行水解转化。
β-葡萄糖苷酶是一种重要的酶类，在体内广泛分布于肝脏、肠道和肾脏等组织中。
当芦丁进入体内后，β-葡萄糖苷酶能够识别并与芦丁结合，从而催化芦丁分子中的β-葡萄糖苷键断裂，将芦丁分解为槲皮素和葡萄糖两个部分。
其次，芦丁水解为槲皮素的过程还受到一系列因素的调控。
例如pH值、温度和酶的浓度等因素都可以影响芦丁的水解反应。
研究发现，在酸性环境中，芦丁的水解速度较快，而在碱性环境中，则水解速度较慢。
此外，较高的温度和酶的浓度也可提高芦丁的水解速率。
因此，人体内的酸碱平衡、温度和酶的表达等因素可能对芦丁水解为槲皮素的过程起到一定的调控作用。
进一步研究发现，芦丁的水解还受到微生物代谢的影响。
人体肠道内寄生着大量的微生物，这些微生物能够产生多种酶类，其中包括能催化芦丁水解的β-葡萄糖苷酶。
通过与这些微生物的代谢作用，芦丁可以在体内更容易地转化为槲皮素。
因此，肠道微生物的种类和数量等因素也可能对芦丁水解为槲皮素起到一定的影响。
此外，人体内还存在其他一些代谢途径可以将芦丁转化为槲皮素。
例如，芦丁可以被肠道细菌降解为等效的化合物如草酸、黄烷醇等。
这些化合物在体内能够被进一步代谢为槲皮素。
因此，芦丁水解为槲皮素的过程可能是一个复杂的代谢网络，涉及到多个酶和代谢途径的相互作用。
综上所述，芦丁水解为槲皮素是一个复杂的代谢过程，涉及到酶类、环境因素和微生物的调控。
酶类如β-葡萄糖苷酶是芦丁水解的主要催化剂，而人体内的酸碱平衡、温度和酶的浓度等因素则可能对该反应起到一定的调控作用。
均匀设计法优选老鹳草中芦丁和槲皮素提取工艺
均匀设计法优选老鹳草中芦丁和槲皮素提取工艺【关键词】均匀摘要：目的优选出老鹳草中芦丁和槲皮素提取最佳工艺。
方法采用均匀设计安排实验，以芦丁、槲皮素含量作为指标，考察了乙醇浓度、回流时间、回流温度及溶剂用量对芦丁和槲皮素提取率的影响，优选出合理的提取工艺。
结果芦丁：用乙醇浓度为75%，乙醇用量为药材的24倍量，提取温度80℃，提取时间为60 min为最佳。
槲皮素：用乙醇浓度为90%，乙醇用量为药材的24倍量，提取温度80℃，提取时间为60 min为最佳。
结论经验证性实验证明所优化条件可靠，适合老鹳草中芦丁和槲皮素的提取工艺参考。
关键词：老鹳草；芦丁；槲皮素；均匀设计Optimization of the Extraction Technology of Rutin and Quercetin from Geranium wilfordii maxim by Uniform DesignAbstract:Objective To explore an optimum extraction technology of rutin and quercetin from Geranium wilfordii maxim. MethodsUsing rutin and quercetin as the indexes，the effects of alcohol concentration，solvent amount， extraction time and extraction temperature onextraction technology were evaluated by uniform design method . ResultsThe superior technology of rutin was as follows: 75% alcohol，24fold solvent amount，60 minutes and the reflux temperature is 80℃；The superior technology of quercetin was as follows: 90% alcohol，24fold solvent amount， 60 minutes and the reflux temperature is80℃.ConclusionTh e optimum extraction process is proved stable and accurate by verificated test，and it is suitable for extraction of rutin and quercetin from Geranium wilfordii maxim. It can be used for the theoretical basis.Key words:Geranium wilfordii maxim；Rutin；Quercetin；Uniform design老鹳草是牛儿苗科植物牛儿苗及多种老鹳草的全草，是我国和其他一些国家常用的药材，是多年生草本，性辛、苦、平，归肝、肾、脾经，为少常用中药，具有祛风湿、通经络、筋骨酸痛、泄泻痢疾［1］等作用。
3 芦丁的提取与鉴定
实验三芦丁的提取与鉴定一、实验目的芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，尤以槐花米（为植物sophora japonica 的末开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。
本实验采用碱提取一酸沉淀方法从槐花米提取芦丁，以芦丁为实例学习黄酮类成分的提取分离方法及鉴定方法。
二、实验原理芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖连结而成的苷，依据芦丁结构中含有酚羟基，能与碱反应，生成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸，则芦丁游离析出。
三、材料及设备槐花米，硼砂，石灰乳，浓盐酸，纱布，布氏漏斗，搪瓷盘，烧杯，pH试纸，玻璃棒，电炉，无水乙醇，正丁醇，醋酸，氨水，紫外分光光度计，层析滤纸，薄层板，层析展缸四、实验过程1、芦丁的提取、及水解取槐花米40g，置于1000ml烧杯中，用冷水快速清洗去泥沙等杂质沥干水，加0.4%硼砂水溶液400ml，pH6~7左右，在搅拌下以石灰乳调至pH 8，加热微沸30分钟，用纱布过滤，重复操作一次，合并滤液，用浓盐酸调pH至5, 放置过夜，抽滤，水洗3～4次，放置空气中自然干燥得粗芦丁。
2、粗品芦丁精制取粗芦丁2g，加乙醇50~60ml加热溶解，趁热抽滤，将滤液浓缩至约20~30ml，放置析出黄色结晶。
3、芦丁的水解取芦丁1g，加2%H2SO4 80ml，小火加热微沸, 回流30分钟，待溶液中析出黄色小针状结晶，即槲皮素，抽滤取结晶，干燥得槲皮素。
4、薄层鉴定取少许芦丁，用乙醇溶解，同时与标准品对照，点板。
配置展开剂（正丁醇-醋酸-水=4:1:1），展开，可见光下观察，再在紫外光下观察。
五、结果计算提取收率六、思考题调pH值时，若pH低，对收率有何影响？1。
槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定 (3)
综合化学实验论文槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定学院化学化工学院姓名专业化学年级2011级指导老师2014年4月20日槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定（山西大学化学化工学院，山西太原 030006）摘要：采用碱溶液沉淀法，从槐米中提取芦丁，用稀酸催化水解，得到水解产物槲皮素，并用紫外分光光度法进行定性、定量测定。
关键词：槐米；芦丁；槲皮素；碱溶液沉淀法；紫外光谱槐米中含有多种黄酮类物质，如芦丁、槲皮素等。
其中槲皮素具有广泛的生理和药理活性，它具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等作用，槲皮素对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。
芦丁（Rutin）亦称芸香苷（Rutionside），广泛存在于多种植物中。
槐米中含量最高达12~16%。
芦丁为维生素P类药物，有助于保持毛细血管的正常弹性和调节毛细管壁的渗透作用，临床上用于治疗高血压的辅助药物和毛细管性止血药。
此外，对放射性伤害所引起的出血症也有一定的治疗作用。
芦丁为淡黄色针状结晶，含3分子结晶水，其熔点为174-178℃，不含水的芦丁熔点188℃。
芦丁在沸水的溶解度相当大（1:200），而在冷水中的溶解度很小（1:10000），溶于热甲醇（1:7），冷甲醇（1:100），热乙醇（1:30），冷乙醇（1:300），难溶于乙酸乙酯，不溶于苯、氯仿、乙醇及石油醚等溶剂，芦丁分子结构中含有酚羟基，呈弱碱性，易溶于碱液中呈黄色，酸化后又析出，所以可用水煮沸的方法提取。
Rutin Quercetin 芦丁中的苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解，水解产物主要有苷元槲皮素（quercetin）、鼠李糖和葡萄糖。
槲皮素，即芸香苷元，为黄色针晶体，含2分子结晶水的槲皮素熔点313-314℃，不含结晶水的槲皮素熔点316℃，溶于热乙醇（1:23）、冷乙醇（1:300）、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚和水中。
利用紫外分光光度法先分别扫描出芦丁、槲皮素标准品的紫外谱图，再分别扫描出样品芦丁、槲皮素的紫外谱图，进行对照后，根据吸收峰峰形、最大吸收峰位置是否一致，即可定性；根据朗伯—比尔定律，配置槲皮素标品的系列溶液做成标准曲线，即可定量测出槲皮素的含量。
槐米中芦丁和槲皮素的提取分离
槐米中芦丁和槲皮素 的提取分离
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槐花 槐米
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L．的干燥 花及花蕾
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性能：苦，性微寒。 功效：凉血止血、清肝泻火 应用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 主要含有芦丁、槲皮素，还含少量皂苷类及多 糖、粘液质等。近代研究表明槐米含芦丁可高 达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
OH OH
OH OH 3' HO O 7 5 3 OH OH O 4'
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
槲皮素
芦丁
碱溶酸沉法
黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶 于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取， 再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀 析出。此法简便易行，芦丁、橙皮苷、黄芩苷 提取都应用此法。
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OH OH
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
性状：浅黄色粉末或极细微淡黄色针 状结晶。 溶解度：在冷水中1:10000，沸水中 1:200；冷乙醇中1:200，沸乙醇中 1:60。沸甲醇中1:7。 酸碱性：芦丁分子中具有较多酚羟基， 显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又 可析出。
芦丁
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OH OH
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
芦丁
槐花米粗粉（20g） 置500ml烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入石 灰乳（1~1.5g），调至PH8~9，加热至微沸， 保持30min，趁热抽滤。 残渣 滤液 在60~70℃下用浓盐酸调至 PH4~5，精置1hr,抽滤。 滤液 沉淀（粗制芦丁） 重结晶 将沉淀悬浮于蒸馏水中，加热 煮沸15min，趁热过滤 残渣 滤液 充分静置后过滤，60~70℃下干燥 芦丁（精制品）
中药化学 实验 槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
取样品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl3乙醇溶 液2~3滴，观察颜色。 ③中性醋酸铅反应
取样品的乙醇溶液1ml加5%的中性 取样品的乙醇溶液1ml加α-萘酚试液1~ 2滴
槲皮素的制备
精品芦丁(0.2g)
放入150ml圆底烧瓶中，加入2%稀硫酸50ml, 空气冷 凝直火加热（电炉上放石棉网）40分钟，放冷抽滤。
沉淀
滤液
水洗至中性抽滤、干燥。 取10ml，加氢氧化钡约1g,调PH7.5,过滤。
沉淀
滤液 水浴浓缩至1~2ml
浓缩液（备检查糖用）
4、芦丁、槲皮素的鉴定
（1）试管定性反应： ①HCI-Mg粉反应
实验
槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
[实验目的]
1.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、 苷元的结构研究的一般方法；
2.熟悉根据溶解性差异来提取分离芦丁的 方法；
3.了解芦丁紫外光谱的测定方法。
实验原理
➢提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异； ➢纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异 ➢制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进
后振摇，然后沿管壁加适量浓H2SO4，观察两界 面处的颜色。
（2）AlCl3纸斑反应 取样品的乙醇溶液，在滤纸上各滴一个点，
干燥后置紫外灯下观察荧光。然后在原斑点上 喷AlCl3，干燥后重新置紫外光灯下观察荧光。
5、糖的检识（径向纸层析） 展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5）上层 显色剂：邻苯二甲酸-苯胺试剂（95℃烘干） 样 品：水解浓缩液 对照品：葡萄糖、鼠李糖的水溶液 展开方式：径向 结 果：对照样品斑点及对照品斑点位置并计
微波辅助槐花中芦丁和槲皮素提取
微波辅助槐花中芦丁和槲皮素提取LI Min-jing，YOU Jing-yan，YAO Shuang，DING Lan, LIU Zhong-ying and ZHANG Han-qi**吉林大学化学学院，中国长春130023被普遍接受的 2003年12月研究出三种微波辅助提取（MAE）的方法.。
第一种是家庭微波炉动态提取（HMODE）。
第二种是特殊的微波炉浴锅提取（SMOBE）。
第三种是微波共振动态提取（MRCDE）。
通过这三步微波辅助提取的方法获得的结果与通过传统的索氏提取法的结果相比较。
结果表明波辅助提取不仅需要的时间短，而且简化了程序，以及提取出更高的产量。
同时对通过这三步微波辅助提取获得的结果也相互作了比较。
关键字：微波辅助提取(MAE，类黄酮，芦丁，槲皮素t文章编号： 1005-9040(2004-06-703-04引言槐花是苦瓢虫蜇的花蕾。
豆科的树. ，培养在中国的大多数地区。
槐花能减少脉管的渗透性以及恢复正常脉管的弹力。
芦丁是槐花的一种起作用的成分，能抑制传导性心脏病，降低心率和血压.。
槲皮素是槐花另一种起作用的成分，它能够扩大冠状的动脉. ，减少心肌的耗氧量以及降低血-脂质［1］。
目前,这种中草药中起作用的成分经常地通过应用在室温下浸泡和索氏提取的技术被提取，这些都是费时的。
然而超临界流体的提取有着特殊的溶解能力，可设备是昂贵的和应用范围是狭窄的。
超声波提取可以减少提取时间，但是黄酮的产量低［2］还有大的噪音。
用微波能照射有高偶极子样品的瞬间没有造成样品的分解，这样进一步提高了样品的提取效率。
对于复杂的样品在与更多传统的提取方法相比较起来通过微波炉暖气装置提供瞬间的高温转移可以得到一个更短的提取时间［3-5］。
中草药通常在水中加热差不多一个小时。
但是微波辅助提取方法完成提取只需要不到6分钟。
有许多不同的微波辅助提取过程比如高压提取［6］,常压提取［7］和动态的提取［8,9］已经形成。
芦丁的提取与分离技术
色谱鉴定
槲皮素和芦丁的聚酰胺色谱鉴定
点样：取聚酰胺薄膜；距下端2厘米处用铅笔划线， 为起始线，隔1.5厘米处点样品。将点好样品的聚 酰胺薄膜放在层析缸中展开。
样品：a精制芦丁 b芦丁标准品 c精制槲皮素 展开剂：氯仿—甲醇(10：5) 显色：a可见光下观察色斑，再于紫外灯下观察荧
酰化物
碱溶酸沉法
黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但 却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可 用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸 性，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便 易行，芦丁、橙皮苷、黄芩苷提取都应 用此法。
槐花米粗粉（20g）
置500ml烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入石 饱 灰乳（和1~石1.5灰g）水，，调至PH8~9，加热至微沸， 保持30min，趁热抽滤。
pH8-9 直火/电炉加热
双层滤纸或棉 花趁热抽滤
滤液 残渣
在60-70度下，用 浓盐酸调pH3-4
静置 1h
60-70℃下干 燥 芦丁粗品
抽滤
黄
酮
苷
抽滤
的
水
滤液
解
沉淀（粗品芦丁，60℃烘干） 均分2份
重结晶
按1：60量加入蒸馏水，沉 淀悬浮于蒸馏水中，加热煮 沸15分钟后，趁热抽滤
苷水解 按1：70量加入 2%硫酸，加热 40min，放冷静 置，抽滤
２．提取液中加入0.4％硼砂水的目的是 什么？
３.加石灰乳调ＰＨ８~9的目的是什么？ 如果碱性太强会怎样？
课后思考题
4.酸化时加盐酸为什么要控制在PH3~4? 如果PH＜２会怎样？
5.为什么用热水或乙醇重结晶？
（3）其它成分
其粗制品为白色粉末， 经酸水解后得二种苷 AcO
芦丁的提取与鉴定以及芦丁和槲皮素的柱色谱分离道
实验五芦丁的提取与鉴定以及芦丁和槲皮素的柱色谱分离芦丁Rutin又称芸香苷Rutoside是广泛存在于植物界的黄酮类化合物。
其中以槐花米、荞麦叶、桉树叶中含量较高均可作为提取芦丁的原料。
本实验以槐米为提取原料。
槐米为豆科植物槐树Sophora japonica L.的末开放花蕾其中芦丁含量高达23.5槐花开放后降至13.0。
槐米的主要化学成分为芦丁此外还含有槲皮素、白桦脂醇、槐二醇、三萜皂苷以及槐花米甲、乙、丙素等。
芦丁具有多方面的生理活性如抗炎、维生素P样作用、抗病毒、抑制醛糖还原酶作用等。
临床上用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、急性出血性肾炎等。
其衍生物三羟乙芸香苷troxerutin即维脑路通用以治疗脑血管病、视网膜水肿及出血。
一、目的和要求1、通过碱溶酸沉、水重结晶等方法要求得到纯品芦丁。
2、通过芦丁的水解制备其苷元槲皮素。
3、学习和掌握聚酰胺柱色谱法的原理和操作技术。
4、通过槲皮素的乙酰化反应要求得到纯品五乙酰化物。
二、主要成分结构和性质OOOROHOHOHOHRGlu-O-RhaRutinRHQuercetin 1、芦丁Rutin: 分子式C27H30O16.3H2O分子量664.51。
是黄酮苷类化合物为浅黄色粉末或极细的针状结晶水熔点176-178℃.无水芦丁熔点不恒定185-192℃成棕色215℃发泡分解. 溶解度:难溶于冷水1:8000略溶于沸水1:200冷乙醇1:300热乙醇1:30沸甲醇1:7易溶于吡啶和稀碱溶液中.微溶于丙酮、乙酸乙酯不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
芦丁分子中具有多个酚羟基显弱酸性易溶于碱液中酸化后又析出因此可用碱溶酸沉法来提取芦丁。
芦丁分子中含有邻二酚羟基在空气中易被光分解而变为暗褐色在碱性条件下更易被氧化分解硼酸盐能与邻二酚羟基结合从而达到保护的目的因此在用碱液加热提取芦丁时往往加入少量硼砂保护芦丁以减少其氧化分解。
2、槲皮素Quercetin: 分子式C15H10O7.2H2O分子量338.28。
槐米中芦丁及槲皮素的提取实验策划
槐米中芦丁及槲皮素的提取、分离、鉴定及含量测定实验策划[实验背景]槐米为豆科植物槐树(Sophora japonicaL)的花蕾，具有清热、凉血、止血的功效。
现代药学研究表明，槐米中主要含有芦丁，槲皮素和粘液质等，其中芦丁是有效成分。
芦丁(Rutin)，又名芸香甙 (Rutio side)，属黄酮类化合物[1]，其化学名称为∶5，7，3，4'-四羟基一3一芸香糖黄酮，性状为黄色结晶粉末或无晶形粉末，有苦味，略溶于水，能溶于热水及乙醇。
芦丁具有维生素P样作用，能降低毛细血管通透性和脆性，促进细胞增生和防止血细胞凝聚，临床上用于治疗毛细管脆性引起的出血症，有助于恢复毛细血管弹性，如治疗脑血管出血、高血压、视网膜出血、急性出血性肾炎等;芦丁还具有抗心肌缺氧、缺血、抗心律失常、降低血清胆固醇、抑制血小板集聚、抗溃疡、抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗衰老、抗辐射、抗病毒和增强免疫力等功能，是预防和治疗糖尿病、心绞痛、慢性心功能不全、高血脂和预防动脉硬化[2]、心机梗死、脑血栓等疾病的天然绿色药物。
因此，目前芦丁已被广泛用于医药、保健食品和化妆品中，具有很高的开发价值。
我国芦丁生产主要以槐米(槐花的花蕾)为原料进行提取。
[目的要求]1．通过芦丁的提取与精制掌握黄酮类化合物的不同提取方法及操作。
2．掌握槲皮素的制备原理及操作。
3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4．通过芦丁的结构检识，熟悉它的主要性质、检识方法和含量测定。
[实验内容]1、芦丁的提取方法：碱提取酸沉淀法1.1、原料与试剂槐米（100g），石灰水（硼砂缓冲液饱和），亚硫酸钠，盐酸，op-10，水。
1.2、仪器电子天平，量筒（1000mL），pH试纸，抽滤装置，真空干燥器，大烧杯等。
1.3、实验步骤a.称取槐米100g，加水800mL煮沸，用硼砂缓冲液饱和的石灰水调pH至8～9，加入1%亚硫酸钠作为抗氧剂，在90°C提取30min，过滤。
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槐米中主要成分是芦丁。
从槐米中提取芦丁可用乙醉提取法、水提取法、碱溶酸沉提取法。
碱溶酸沉提取法是依据芦丁结构中有游离的酚羟基, 显弱酸性, 遇碱成盐溶解，加酸又游离析出的原理设计的, 此法成本低、收率高, 所得产品质童好, 是实际生产中常用的方法
芦丁
碱溶酸沉（alkali-solution and acid-isolation）碱溶酸沉法，中药化学中常用于黄酮类、蒽醌类、酚性,内酯结构的木脂素、香豆素类提取分离等实验。
原理：利用混合物中各组分酸碱性差异而进行分离。
具体操作将总提物溶于亲脂性有机溶，用碱水提取，调节PH值后用有机溶剂萃取，还可用PH梯度法进一步分离各碱度或酸度不同的成分。
注意：提取过程中料液比、浸提碱液pH值、浸提时间等条件都对提取率及纯度有影响。
注意酸性或碱性的强度，与被加热分离成分接触的时间，加热温度和加热时间等，避免在剧烈条件下某些化合物结构发生变化或结构不能回复到原本存在于中药的状态。
1．溶剂萃取法去杂
原理：利用黄酮类与其它杂质极性不同，选不同溶剂进行萃取。
石油醚：除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素
水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性物质
逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚
在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。
2．碱水提酸沉淀法
原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出
适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。
注意事项：
①酸碱度不宜过大
②邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护
③石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质
3．炭粉吸附法
适用于苷类的精制工作。
植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。
依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。
大部分苷类可用7%酚/水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。
（一）常用溶剂的特点：
石油醚，环己烷，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇
极性：小————大
亲脂性：大————小
亲水性：小————大
1．比水重的有机溶剂：氯仿
2．与水分层的有机溶剂：环己烷 ~ 正丁醇
3．能与水分层的极性最大的有机溶剂：正丁醇
4．与水可以以任意比例混溶的有机溶剂：丙酮~ 甲醇
5．极性最大的有机溶剂：甲醇
6．极性最小的有机溶剂：环己烷
7．介电常数最小的有机溶剂：石油醚
8．常用来从水中萃取苷类、水溶性生物碱类成分的有机溶剂：正丁醇
9．溶解范围最广的有机溶剂：乙醇。