兰花组织培养进展研究

兰科 是显 花 植物 中最 大 的科 之一 ，大约 有 ５０ ０ 多个属，２ ０ 多个种 ，分布于世界各地．大多数 ０００
养的方法 ，大大加快 了原球茎增殖 的速度 ，短期内 可获得大量再生植株。此后 ， 组织培养技术在兰花 生产上得到了广泛应用 ，目前大约已有６余属数种 ｏ 兰花拉 ｌ 可以用组织培养的方法进行繁殖 。中国科学 院上海植物生理研究所细胞室、上海园林管理处科 研组 与上海 龙华 苗圃于 １７ 年利用组织培养技术 ９３
大部 分 兰 花具 有 总状 花 序 ，花 梗 上 的花 芽 较 多 ，取 材方便 ，不 伤母株 ．在单 茎性 兰花组培 中应 用较 广 。自Ｒ ｔ ．１４年 利用 蝴蝶兰 花梗腋芽培养 ｏｏ Ｇ ９９ ｒ 出试 管苗 以来 ，关 于利用 蝴蝶 兰花梗 腋芽来获得 营 养 芽 、丛 生 芽方式 增 殖 的研 究较 多 。幼嫩 花梗腋
繁殖建兰 ， 获得成功。兰花的组织培养中有几个关 键时期 ：原球茎的诱导 、原球茎的继代培养 、 壮苗 的培育。根据这几个重要 的时期及在其间组织培养 的外界条件 ， 人们对兰花组织培养进行了广泛的研 究。
１ 兰花组 织培 养程序
外植体（ 、侧 芽 、花梗 、叶片等） 茎尖 ，诱导形 成原球茎 ， 原球茎大量增殖 ， 芽诱导及丛芽大量增 殖 ，育苗培养 ，温室移栽 。
一
用叶 片作为 外植体 可 以减轻 或避 免对母 株 的伤害 ， 而且叶片数量多 ， 取材 又不受季节 的影 响， 是较理想的外植 体 。 中又 以试管苗 的幼 叶 其 作为外植体 培养较好 ，啄蕊兰 、蝴蝶兰 试管苗 幼叶原球茎发生率可达３ ％。 ０ 从成熟植株上取幼 叶为外植体培养成功的报道不多 ， 成熟植株组织 向培养基 中释放高浓度 抑制生长的物质 ， 严重影 响兰花 的存 活。然 而肾药兰成熟 植株最上面３ 片 幼 叶在培养中却显示 出较 强的增殖 能力 ，在ｌ 一 ０ ｌ 内基部分化 出芽 ，但不产生原球茎 ；Ｃ ｅ 等 ２ 周 ｈｎ 从 幼 叶 的 叶 尖 表 皮 细 胞 和 叶 肉细 胞 直 接 培 养 出 体细胞胚 。但在３ ｄ 内无 愈伤组织产生 ，在经 ０之
病毒的植株 日 益增多，导致品种退化。利用植物组 培技术能够有效 的克服病毒积累并大大提 高繁殖 速度 ， 近年来植物组培技术已成为兰花生产的主要 技术 手段 。 白２世纪６年代 以来 ，生物技术的应用促进了 ０ Ｏ 兰花组织培养的研究 ，进而在兰花细胞工程 、 基因 工程等生物技术 的研究方面取得了重要进展 ， 并在
子房 、花芽 、花梗 、侧芽、茎段 、根尖等都是兰花 组织培养中原球茎的重要来源。 ２１茎尖 ．
茎尖是最早用于兰花快速繁殖的外植体 ， 较适 于复轴生长类型的兰花 ，国际上最具商业价值的几 个大属 的兰 花 ， 如大 花蕙 兰 、 卡德 丽亚 兰 、 石斛 兰 、
蝴蝶兰 、文心兰等首先在茎尖培养中取得成功。侧
种类分布于东南亚 、澳大利亚 、中南美洲 、非洲和 马达加斯加。兰花属兰科多年生草本植物 ，常见的 观赏种类有春兰、蕙兰、建兰 、蝴蝶兰、石斛 、 卡 特兰 ， 文心等 ， 作为药用的天麻 、白芨 、红门兰等 和作为香料的香籽兰等，有极高的经济价值。从上
世纪４年代新西兰发展兰花工业开始 ， ０ 世界各 国争 相发展兰花产业 ，国内尤其是华南 、昆明等地兰花 有了很好的产业发展并开始产生 良好的经济效益。 由于兰花植物种子发育不全 ， 自 在 然条件下萌 发率极低，繁殖困难 ，传统栽培靠分株繁殖 ，繁殖 周期长 ，繁殖率低 ，一年只能产生 １ ２ ～ 个新芽Ⅲ ， 育种进程缓慢。此外 ，由于长期无性繁殖 ，造成带
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重 庆 林 业 科 技
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兰花组织培养进展研 究
曾 静
（ 重庆 市林业科 学研 究院 ）
摘 要：本文对兰科植物组织培养的国内外研究进展进行 了概述；对兰花组培 中外植体 的选择 、激素水平、培养基成分及外部条件的影响进行 了重点阐述。 关 键词 －兰花 组 织培 养 外植 体 生物工程
圆锥成活率高 ，中间部位侧芽成活率及生长率较 高 ， ｅ ａ等嘲 Ｓｗ ￣ 曾报道获得 了兜兰的组培苗， 但此后
相关报 道很少 。关 于 国Leabharlann 的组 培 ，近 ｌ 年来 ，先 后 ０
在建兰、春兰、墨兰等几十个品种的芽端培养中获 得成功 ， 吴汉珠等ｐ 素心兰等２个品种进行培养 ， 时 Ｏ 有 ｌ个 品种建立 了快速 无 性繁 殖 系 。据 吴汉珠 等 ３ １ 年的统计 ， 国兰诱导启动后 ， 褐化死亡几乎占３ ． ／ 因 ４ 此 ，解决褐化问题是国兰组织培养的关键所在。 尽管顶芽和侧芽是极好的高质量外植体 ， 但对 些单轴生长类型的兰花，如蝴蝶兰、仙指甲兰等 用茎尖作为外植体有可能丧失母株 ， 损失很大，人 们倾 向于寻找其他可能的外植体。 ２２ 叶片 ．
２ 外植体的选择 与培养
除茎尖 、叶片及种子外 ， 瓣 、 萼片 、花蕾 、
全世界范围内形成了高效益 、 大规模 的兰花产业。 Ｍ ｒ 采用大花蕙兰的茎尖 ，在含有细胞分裂素的 ｏｌ ｅ Ｋ 培养基上进行培养 ， Ｃ 茎尖分生组织膨大形成原球
茎， 并分化出根和叶 ， 首次获得兰花无病毒小植株。 Ｗｉ ｈｒ Ｍ ｒ 的方法进行了改进 ， ｍｅ ， ｏｌ Ｘ ￣ ｅ 采用液体振荡培
作者简介 ：曾静 （ ９ ０ １８ －），女 ，汉族 ，工程 师，硕士研 究生 ，主要从 事园林 花卉 工作 。
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第１ 期 （ 总第 ８ 期） ９
芽应用也相当广泛。一般认 为带ｌ ２ 一 个叶原基的茎
种植物的种子离体萌发研究时发现 ，用０１ ０ Ｌ ．ｍ Ｉ ， 的氢氧化钠 浸泡多花兰 、 朵朵香 、 双飞燕 、 寒兰 、 套叶兰等 １ ３ ｍ ｎ ０～ ０ ｉ，萌发率可提高ｌ 倍以上 。 ０ 风 兰 的成 熟 种 子 用 肥 皂 水 洗 净 后 ， ７ ％ 的酒精 用 ０ 浸 泡 ３ ｓａ 萌 发 。这 些 预 处 理 效 果 的 生 理 机 制 ０Ｓ 于 Ｊ 还 有 待进 一 步 研 究 。 兰 花 种 子 用 于 组 织 培 养极 富前景 ， 部分的种 子可通过无菌萌发 的方式进 大 行 萌 发 ；附生 或 半 附生 兰 和气 生 兰及 杂 交 后代 的 种 子 萌 发 较 易 ，而 地 生 兰 种 子 的萌 发 较难 聃。 ２４花梗 ．