SDS-PAGE全部试剂配方

SDS-PAGE试剂配方
30%凝胶贮液（150ml， 4℃保存）
29.2% Acr：43.8g 0.8% Bis：1.2g
将Acr完全溶解于120ml水中，再加入Bis使其完全溶解，加ddH2O定容至150ml，用滤纸过滤溶液，棕色玻璃瓶中4℃保存。

分离胶Buffer （1.5M Tris-HCl 250ml）
Tris：45.4725g SDS：1g
将Tris溶于200ml水中，在磁力搅拌器上不断搅动溶液使其完全溶解，用HCl调节pH 至8.8，此过程中加入HCl时浓度需逐渐降低，越接近目标pH越要小心防止pH调节过头。

加ddH2O定容至250ml，加入SDS（此时容易产生气泡，可用超声或抽气破碎气泡），抽滤或滤纸过滤，4℃保存。

浓缩胶Buffer （0.5M Tris-HCl 100ml）
Tris：6.07g SDS：0.4g
将Tris溶于80ml水中，后续步骤同分离胶Buffer，调节pH值至6.8（可配置200ml调pH后100ml用于添加SDS作浓缩胶Buffer，剩余100ml为Tris-HCl贮液）
SDS裂解液（10ml）：
0.5M Tris-HCl pH：6.8 2ml
2%甘油2ml
4%SDS 0.4g
65mM DTT 100mg（使用时临时加入）
ddH2O 6ml
样品溶解液：（100ml）
终浓度为50 mmol/L Tris﹒HClpH=6.8（总体积的20%=20ml），2% SDS=2g，0.1% 溴酚蓝=0.1g，10% 甘油=10ml，补ddH2O到100ml
10％过硫酸铵：5g(0.5g)过硫酸铵，溶于50mL(5mL)去离子水中；现配现用或分装至0.5mL 离心％过硫酸铵：管中冷冻备用
TEMED(N-N-N`-N`－四甲基乙二胺)原液，室温保存（有毒，致癌物质）。