《抗体工程制药》PPT课件 (2)

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多克隆抗体和单克隆抗体
Antigen 31 2 4 Immunization
12 3
Adapted from Milstein (1980) Scientific American, Oct. p.58
1 3
2 4
m m
m m
Spleen cells
B cell
1
+ Myeloma
4
有抗药标记的骨髓瘤细胞（如小鼠的NS-1或SP2/0）在
聚乙二醇（PEG）作用下融合，然后利用抗药性标记
和经稀释法选出单个产生抗体的杂交瘤细胞，再用血
清学方法证实其与抗原结合的特异性和亲和力。这样
的杂交瘤细胞能长期传代同时分泌针对单一抗原上单
一抗原表位的抗体，称为McAb（第二代抗体）。
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与局部的免疫反应;
免疫球蛋白
• IgD在血清中含量很低;
• IgE在血清含量最少。医学PPITgG IgM IgA IgD I1g0 E
抗原刺激的第一至三周，IgM生成；抗原再 刺激后， IgＧ将取代IgM
动物血清中产生抗体的时间示意图
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抗体研究的发展阶段：
①以1890年Behring发现白喉抗毒素为代表,用 抗原免疫动物来获得多克隆抗体。
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• 多克隆抗体:
31 24
一种抗原具有多个抗原决定簇,每个
抗原决定簇都能刺激一个B细胞产生一种
抗体。这样所获得的免疫血清是多种抗
体的混和物。
• 单克隆抗体(Monoclonal antibody McAb):
由一个抗原决定簇刺激的、单一的B
细胞和骨髓瘤细胞融合增殖后所产生的、
高度均一的抗体。
②以1975年Milstein & Kohler创建杂交瘤技
术制备单克隆抗体(McAb)为代表。 ③以1994年Winter,创建了噬菌体抗体库
(repertoire of antibodies displayed on phages)技术,以基因工程方法制备抗体为代 表。在此基础上发展成抗体工程。
如微生物、异种血清
半抗原：又称不完全抗原。是指其本身只有反应原性，
但没有免疫原性的简单小分子的抗原物质。如 某些药物（青霉素，等）、多糖、类脂。
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目前，在中草药中发现广泛存在半抗原，如 小檗碱、茶碱、丹参酮等，具有生化活性 基因的化学成分都有可能成为半抗原，这 些半抗原可与体内蛋白质结合成完全抗原 ，造成一些过敏反应。
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免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)分子量范
围从150,000到950,000道尔顿。分五类：
• IgG在血清中含量最高，达75~80%,是抗感染
的主要抗体;
• IgM是五类免疫球蛋白中分子量最大的，为
五聚体,是对一个抗原作出反应时产生的
第一个抗体；
• IgA在黏膜表面、乳腺、泪腺形成，主要参
Each hybridoma line can produce pure single antibody, called mon oclonal antibody.
二. 单克隆抗体的制备
McAb（Monoclonal antibody，单克隆抗体）：
将在体外不能长期传代的抗体产生细胞（如
Balb/C小鼠的免疫脾细胞）与在体外能迅速增殖并带
23 4
Cell fusion
x
31 24
12 34
Antiseum
A mixture of all Ab
Monoclonal antibodies
Pure single Ab
If a single B cell was picked up and cultured, then it will prod uce only one kind of antibody.
如：病原微生物、免疫血清、药物、疫苗
对机体来说，抗原相当于一个国家已知
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的或潜在的、外部的或内部的“敌人”
。
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免疫原性：指能刺激机体产生抗体和/或致 敏淋巴细胞的性能。
反应原性：能与相应的抗体和/或淋巴细胞 发生特异性结合，发生反应的性能。
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完全抗原：既具有免疫原性，又具有反应原性的抗原。
二.单克隆抗体的制备
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单
克
隆
抗
体
制
备
过
程
图
解
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单 克 隆 抗 体 制 备 过 程 图 解
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一.抗原与动物免疫
1.抗原选择 — 完整细胞(肿瘤细胞)；可溶 性蛋白质或多肽;
2.免疫动物 — 小鼠(Balb/C,鼠龄6-8周)或 大鼠 (Lou);
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抗原的特异性既表现在免疫原性上，也表现 在反应原性上。
大
菌沙
肠
门
杆
氏
菌
杆
结合
抗大肠杆菌的抗体
结合
抗沙门氏杆菌的抗体
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抗体：能与相应抗原特异性结合的具有
免疫功能的球蛋白。
免疫球蛋白的结构
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抗体的产生过程：
机体免疫系统受抗原
物质刺激后，B淋巴 细胞被激活，增殖和
分化为浆细胞，由浆 细胞合成和分泌的球 蛋白。
第七章 抗体工程制药
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一.概述
抗体(工程)制药—生物技术制药领 域的重要组成部分
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抗 原(antigen,Ag)
---是指那些能够刺激和/或诱导机体免疫 系统发生免疫应答、产生抗体和/或致敏 （效应）淋巴细胞，同时又能与免疫应 答产物在体内外特异性结合，发生免疫 反应的物质。
BIfAECuBfaottecncBhrveceilBmlenislmtclioecfunallnsanpiezlrndaaoontdwitotuiissntchue,errtms医vhuiomeyvnee学millsoywomotePuhnlaslePe,einmtTkhstiipehnxletdefuuecorsenufelaoctdunofrctnaeiebtl.lalolaimdnnysit,gibBwhothcdbeiiceelhlsscbppuirrnltooudddrsuuetccoeinidgd atnsbdssyppBereocccdiifefuiicclclsaeanfnartotinibgmtoiebdsnoip.edlsye.en.14
3.常用的骨髓瘤细胞系— SP2/0，P3.653细 胞，都是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HGPRT)的缺乏株。
4.免疫方法: 体外免疫法；体内免疫法