中药制药化学作业模版-丹参注射液及丹参滴注液

丹参注射液及丹参滴注液
丹参注射液及丹参滴注液是我国目前为止临床应用量最大的中药注射，活血化瘀的功效作用显著，常用于治疗心肌缺血及脑梗塞、脑卒中等疾病。

丹参中主要水溶性有效成分有：丹参素、原儿茶醛、丹参酚酸B 、丹参酚酸D 等，而丹参酮类成分为脂溶性成分，在注射剂中含量几乎没有。

丹酚酸B 是由三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成，其结构中的酯键可经碱水解，伴随着呋喃环的开环，转化生成丹参素、原儿茶醛、丹酚酸D 或迷迭香酸。

丹酚酸B 可能的转化途径见下图。

丹酚酸B 碱水解主要产物
丹酚酮脂溶性成分
一、制备工艺
（一）丹参注射液制备工艺
取丹参1500g ，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至750ml ；加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量为75％，第二次使含醇量为85％，每次均冷藏放置后滤过；滤液回收乙醇，并浓缩至约250ml ，加注射用水至400ml ，混匀，冷藏放置，滤过，用10％氢氧化钠溶液调节pH 值至6.8，煮沸半小时，滤过，加注射用水至1000ml ，灌封，灭菌，即得。

具体工艺如下：
COOH O O HO HO O OH
OH O HO OH HOOC O
OH 丹酚酸B 开环，水解丹酚酸D HO HO
C O
H COOH O HO HO O OH
OH OH OH COOH HO
原儿茶醛丹参素O O O
丹参水提液
浓缩液过滤，减压浓缩
醇沉液
醇沉两次（75%与85%），每次均冷藏过滤
回收，加注射用水，
冷藏过滤过滤液
丹参注射液NaOH 调pH ，煮沸，
灌封，灭菌
水提取
（二）丹参滴注液制备工艺
取丹参64g ，加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.16（70℃）的清膏；加乙醇使含醇量达75%，搅匀，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.06～1.08（78℃）的清膏，调节pH 值至9，加热煮沸1小时，调节pH 值至6（碱加热），加乙醇使含醇量达85%，搅匀，冷藏24小时，滤过；回收乙醇，浓缩至相对密度为1.11～1.13（78℃）的清膏，加水稀释，调节pH 值至3（酸沉），冷藏72小时，滤过。

滤液加0.1%的活性炭，加热煮沸15分钟（活性炭吸附），滤过，滤液备用。

取葡萄糖50g ，加入煮沸的注射用水中，使成50%～60%的浓溶液，加盐酸适量，同时加入0.1%的活性炭，混匀，加热煮沸15分钟，趁热滤过脱炭，滤液与上述丹参滤液合并，调节pH 值至5～6，加注射用水至规定量，滤过，精滤，超滤，灌封，灭菌，即得。

具体工艺如下：
丹参清膏清膏醇沉至75%，冷藏过滤，
浓缩至1.06-1.08清膏调pH9，煮沸1小时，调pH6
醇沉至85%，冷藏过滤，回收乙醇清膏过滤液
加水调pH3，冷藏，过滤水提取，浓缩至1.16丹参滴注液
葡萄糖葡萄糖溶液过滤液加HCl 与0.1%活性炭，煮沸，过滤加注射用水使成50%-
60%溶液调pH5-6，过滤，灌封，
灭菌
二、工艺分析
（一）提取
注射液：取丹参1500g，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1.5小时,合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至750ml；
滴注液：取丹参64g，加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.16（70℃）的清膏；
丹参中酚酸类成分是注射液中的主要有效成分，此类成分的水溶性大，活性强。

而丹参酮类成分因存在邻二醌的结构，色泽深，成分不稳定，水溶性差，不利于注射剂的成型与稳定，因此制剂生产采用水提取的方法。

丹参酚酸类成分不稳定，特别是丹参酚酸B在水煎煮的过程中，部分转化成丹参素及原儿茶醛，因此，常常出现丹参素及原儿茶醛成分提取率超过100%的情况。

丹参酚酸类成分含有羧基及多个酚羟基，在水煎液中以盐的形式存在，研究表明，丹参酚酸B等多以镁盐存在，成盐状态加速提取过程中丹参酚酸B等成分的不断转变。

丹参注射液及滴注液提取生产时，一般用注射用水提取，避免水中无机盐离子的带入形成更为复杂的盐类，从而进一步影响成分转变。

水煎煮提取的药液，含有杂质较多，如多糖、蛋白质、多肽、氨基酸、鞣质等；还含有小分子糖类，其中以四糖水苏糖为主，其它还含有单糖、双糖如果糖、葡萄糖等，含很少量三糖。

单糖及寡糖是丹参水提液中固含物的主要成分，其它大分子杂质与水溶性有效成分也占有固含物的一定比例。

药液浓缩过程中，丹参注射液以丹参酚酸B为目标有效成分，应该控制减压条件，在较低温度下进行药液浓缩，以减少丹参酚酸B转变。

丹参滴注液以丹参素、原儿茶醛为目标有效成分，可以在稍高的温度下回收浓缩，加速成分转化。

（二）醇沉工艺
注射液：加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量为75％，第二次使含醇量为85％，每次均冷藏放置后滤过；滤液回收乙醇；
滴注液：加乙醇使含醇量达75%，搅匀，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇，……，加乙醇使含醇量达85%，搅匀，冷藏24小时，滤过；回收乙醇；
二种注射液均采用二级醇沉工艺，第一次为75％，第二次为85％乙醇浓度进行醇沉。

在醇沉工艺中，要注意以下环节：1）浓缩药液的相对密度对醇沉工艺效果有明显影响，因为浓缩程度不同（密度越大时影响越大），成分存在状态不同，相同醇浓度醇沉所得到的成分组成有所差异，且醇溶液中固含物量也相差较大；2）醇沉过程注意醇沉操作过程控制，避免局部醇浓度过高引起快速沉淀凝聚导致药物成分损失；3）醇浓度递增法（75%、85%）二级醇沉效果与一次醇沉相比，会使有效成分转移率增加，杂质含量更低，因为药液浓缩状态不同，沉淀效果不同。

4）一般认为75%至85%的乙醇浓度醇沉去除的是大分子杂质，实际上溶液中以盐形式存在的多肽、氨基酸等绝大部分被醇沉淀去除，而且分子偏大的多酚酸盐也会沉淀损失，如丹参酚酸B（有些在生产过程中调pH值，pH值越高则损失越大）会有部分损失。

单糖、双糖、寡糖等在醇溶液中溶解度较小，分子量越大溶解度越小，因此75%醇沉时四糖以上的糖大部分已沉淀去除，85%醇沉时单糖、双糖也有一定损失，三糖大部分沉淀去除，四糖基本沉淀完全。

5）醇沉后醇液长时间冷藏有利于成分醇沉完全，不仅方便生产过滤，也有利于制剂质量稳定。

（三）碱水解工艺
滴注液：（清膏）调节pH值至9，加热煮沸1小时，调节pH值至6；
滴注液主要有效成分与注射液有所差别，是以丹参素为主，因此为提高丹参素有效成分含量，采用碱水解工艺。

药液调pH值至9加热煮沸1小时后，绝大部分丹参酚酸B转化成丹参素。

（四）水沉工艺
注射液：浓缩至约250ml，加注射用水至400ml，混匀，冷藏放置，滤过，
滴注液：浓缩至相对密度为1.11～1.13（78℃）的清膏，加水稀释，调节pH值至3（酸沉），冷藏72小时，滤过。

滤液加0.1%的活性炭，加热煮沸15分钟（活性炭吸附），滤过，滤液备用。

药液浓缩后，加水稀释，再水沉。

因为浓缩程度不同，成分存在状态不同，一般情况下浓缩程度越高（相对密度越大），成分间缔合物、复合物越多，水沉效果越好。

在生产过程中一定要控制相对密度一致性。

长时间冷藏使药液中水不溶性杂质沉淀更完全；其中滴注液还采用了酸水沉工艺，酸水沉能进一步使其它脂溶性有机酸杂质去除，利于制剂澄清、稳定；加0.1%的活性炭处理，一方面可去除热原，另一方面活性炭脱色及吸附残留脂溶性杂质，使产品质量进一步稳定、提高。

（五）配液灌封工艺
注射液：用10％氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，煮沸半小时，滤过，加注射用水至1000ml，灌封，灭菌，即得。

滴注液：取葡萄糖50g，加入煮沸的注射用水中，使成50%～60%的浓溶液，加盐酸适量，同时加入0.1%的活性炭，混匀，加热煮沸15分钟，趁热滤过脱炭，滤液与上述丹参滤液合并，调节pH值至5～6，加注射用水至规定量，滤过，精滤，超滤，灌封，灭菌，即得。

1、药液均调pH值至近中性，利于有机酸类成分的物理稳定性；
2、大部分注射液及滴注液均采用了超滤工艺，超滤可进一步去除高分子杂质及热原；一般选择3-5万分子量的超滤膜，1万分子量的超滤膜会使丹酚酸B有30%以上的损失，从而超滤会改变注射剂成分组成，影响疗效；
3、实际生产过程中，常常采用充氮等灌封工艺，驱赶注射液中的氧气，减少注射液成分在贮存期内氧化、转化，确保质量稳定，制剂澄明；
4、高温灭菌过程会引起成分变化，最容易出现沉淀或析晶，出现不溶性微粒。

5、部分生产企业还在在关键步骤采用充氮工艺，防止成分氧化、转化。