细胞房注意事项和管理

细胞房注意事项和管理

一、常规操作

1. 穿着专用实验服。自己的白大衣或厚外套，可脱在门外的衣帽架上。

2. 穿着专用拖鞋。先在入室间换下自己的鞋子，穿着绿色拖鞋进入缓冲间；再在缓冲间换红色拖鞋。尽量避免在缓冲间走动、停留。

3. 细胞房最多可4个人同时使用。尽量避免在内长时间逗留、交谈。

4. 离开细胞房前，要保证不使用的仪器及时关闭并拔下插头（离心机、水浴锅、日光灯），超净台开启紫外灯照射2h后关闭。

二、值日生工作职责

1. 每周值日生时间从周一开始，至周日结束。

2. 值日周开始时需做的事情：配制消毒用的75%勺酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%C业乙醇供酒精灯使用。

* 75%的酒精可用750ml95%勺酒精加去离子水至950ml配制而成。

3. 值日周内每天需做的事情：开大紫外灯消毒细胞房15-30min后才能投入一天的使用，晚上开启紫外灯灭菌，第二天及时关闭；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；及时安排人员清洗回收培养器皿；检查培养液母液、血清、

酒精等公用试剂的储备情况；至少每天倾倒细胞房垃圾、换垃圾袋；检查培养箱内水量是否足够。

4. 值日周结束前需完成的事情：星期五全方位打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、柜子、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水，洗细胞房专用的实验服和拖鞋，紫外消毒细胞房。更换培养箱内无菌水、

检查硫酸铜溶液是否需要更换（一个月更换一次）！

5. 每2周清洁一次培养箱：先将培养箱中的物品取出暂存于超净台内，对于比较敏感的细胞可以暂存于其他细胞房的培养箱；将培养箱内的不锈钢板取

出，包括4块横板和左右2块立着的架子，用酒精棉球清洁钢板和培养箱内壁；打开培养箱清洁内壁时动作要迅速，避免长时间敞开门使得大量不洁净空气进入，缩短过滤器的寿命；用紫外灯照射培养箱内部15mi n,手提紫外灯放入培养箱前要用酒精棉擦拭干净。

2014.6.9

培养箱使用注意事项

1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。

*培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。

2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。

3. 2-3人共用一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长

时间敞开培养箱。普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。

*频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。

超净台操作规则

1. 超净台使用前用紫外灯照射15分钟灭菌，使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台前均应用酒精喷拭表面消毒。

2. 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。

*消毒用75%勺酒精，酒精灯用95%勺酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。酒精和酒精棉球由值日生负责补给，发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。

3. 超净台中应摆放废液杯和废品杯各一只，用于实验时暂时存放废弃物，实验结束后废液杯内垃圾要随即清理带走，废液杯冲洗、于入室间晾干备用。

4. 可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等，放入装有清水的塑料桶中浸泡，桶内需有足量的清水以没过浸泡物品。

*可回收器皿初步涮洗后再放入清水内，保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满，避免营养物质在培养瓶或血清管中过多残留而滋生微生物。

回收器皿洗涤程序：洗洁精洗净，清水冲十次以上去除洗涤剂残留；烘干；泡酸缸48h,尽量沥干后取出，清水冲洗10次，纯水冲洗3次，超纯水3次；烘干/晾干；

报纸/牛皮纸/锡箔纸包装，高压湿热灭菌121C, 20min；放入细胞房备用。

显微镜使用注意事项

1. 显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。

2. 离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。

培养液、试剂等相关操作规则

1. 从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。

2. 血清按一定量分装，分装好的血清长时间保存于-20 C,使用前取出需要的量4°C预解冻。按需解冻，避免反复冻融。

*从-20 C取用血清者需在表格上做好登记，方便在不够时及时领取，以免耽误实验进程。

3. 原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用，若有剩余，则暂存于4C并尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清，以免交叉污染。

血清使用/领取登记

实验相关购买记录