临床微生物检验标本的正确采集及注意事项.

标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误, 不当标本可导致假阴性。假阳性结果的出现。因此正确采集临床微生物标本, 直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物, 延缓细菌耐药, 减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步, 也是最重要的一步。为此应正确采集各种细菌学标本。

一、血液标本的采集

1、皮肤消毒程序:a.75%酒精清洁局部皮肤 30s 以上。 b. 待皮肤干后, 再用1%-2.%碘酊作用 30s 或 10%碘伏作用 90s 以上,从穿刺点中心部位向外画圈消毒,范围不应小于 3cm (直径 , 且不能用手指触摸消毒后的皮肤。 c. 皮肤碘酒干后 (约

1min , 穿刺采集血液, 采血量成人 10-20ml ,婴幼儿 1-2ml 。儿童 3-5ml 。 d. 培养瓶消毒程序:70%酒精擦拭血培养橡皮塞,作用 60s ;用无菌棉签清除橡皮塞表面残余酒精。用注射器无菌采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。立即送检,切勿冷藏。一般情况下可把血培养瓶放 20-22℃。不放冰箱。

2、注意事项:a. 怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38.5℃采血可提高阳性率, 但也要防止因等待而延误时机。 b. 对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本, 也不能从静脉导管及动脉插管中取血。 c. 培养基与血液之比以 10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人, 培养基与采血量之比可为 20:1或大于这个比例。 d. 近年研究表明, 将血液注入血培养基前, 更换针头反而易导致污染。 e. 每例至少采血两次,间隔 0.5-1h , 以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。 f. 疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h3-4次和增加采血量(可增加 10ml 。 g 采血后立即送检,如不能立即送检可置室温,而不能放置冰箱。 h 如临床表现很似败血症,而血培养多次阴性者,提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。

二、呼吸道痰标本

1、采集方法:a. 清晨起床后用凉开水漱口多次,以除去口腔内大量杂菌,用力咳出肺深部的脓痰, 置于清洁干燥容器中送检。 b. 痰量极少者可用 45℃ 3%-5%的氯化钠溶液约 5ml 雾化吸入 min, 进行导痰。对于咯痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。 c. 咳嗽无力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。 d. 气管切开者可以深入透气孔中取痰。 e. 可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。 f. 用无菌导管经鼻腔插入气管镜内,缓慢注入无菌蒸馏水 5ml ,取出导管。留取患者在 3h 内咳出的痰液,放入无菌容器中送检。

2、注意事项:a. 痰标本的采集以晨痰为准,此时患者痰量较多且含菌量也多。 b. 标本采集后立即送检,若不能及时送检者,可暂存 4℃冰箱。若晚 1-2h 接种,会失去苛氧菌,并使得革兰阴性菌过分生长。 c. 可接受的标本:痰;支气管灌洗液,支气管刷,支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本:唾液; 24h 留的痰(结核杆菌培养除外 ;拭子。 d. 痰标本的质量评价:(用显微镜筛选在低倍镜下,检查鳞状上皮细胞,至少 10个视野,集中在有白细胞处,合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于 2:1。

三、鼻咽喉拭子标本

A. 用湿的拭子(生理盐水 ;需插两个鼻孔;深入 3.3cm 左右,转动 4-5次;以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。

B. 咽拭子、口腔拭子(1采集方法(到细菌室取专用拭子 a. 患者清水漱口后, 由检查者将其舌外拉, 用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次; b. 化脓性扁

桃体炎、口腔念珠菌病时, 直接用棉拭子在病灶部位擦拭; c 插入运送培养基中立即送检, 防止干燥。 (2注意事项 a. 棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液 ;b. 采集标本前数小时不可用

消毒药物漱口或接触病灶局部。

六、胃肠道

1、粪便 a. 采集方法选取脓血、黏液粪便 2-3g ,液体粪便取絮状物 1-2ml 。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。 b. 注意事项①标本要采集新鲜的,陈旧标本影响阳性检出率; ②切忌粪尿混合; ③若要分离阿米巴, 标本要立即送检并注意保温; ④运送培养基可提高阳性率;⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便; ⑦标本在病理早期或治疗前采集;

⑧一般认为用抗菌药三天后, 标本培养病原菌阴性。

2、肛拭子在无法获得粪便的情况下,可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门 4-5cm (幼儿 2-3cm 处,轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出,置运送培养基中送检。

七、泌尿道

根据卫生部《医学感染诊断标准》 (试行通知,泌尿系统临床诊断为:患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状,或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热,并具有下列情况之一:(1尿检白细胞男性≥ 5个 /高倍视野,女性≥ 10个 /高倍视野,插导尿管患者应结合尿培养; (2临床已诊断为泌尿道感染,或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。

1、中段尿 (1 采集方法①女性采样前用肥皂水或 0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴, 留取中段尿 10ml 于灭菌容器内。②男性用肥皂水清洗尿道口, 或 0.1%的碘伏溶液消毒尿道口,灭菌纱布擦干,留取中段尿 10ml 于灭菌容器内。 (2注意事项①导尿虽然可以减少污染, 但是多次重复导尿可以造成逆行性感染, 因此近年来大多采用中段尿。②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本, 减少污染。③采集标本以晨起第一次尿液为佳。④采集标本后,若不能在 1h 内送检,暂放 4℃冰箱,但不能超过 8h 。若尿液标本在室温下放置超过 2h ,即使接种培养结果细菌数≥ 104 cfu/ml获 103cfu/ml,也不能作为诊断依据,应重新留取标本送检。⑤疑为尿道炎时可将最初 3-4ml 尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌, 如反复检查为同一细菌,也应考虑为病原菌。⑥儿童在多数情况下,仅冲洗外阴是不够的, 故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多,可以高度怀疑为尿路感染,无菌则可否定。⑦若