hanks液的配制
PBS & Hank's Buffer等配置方法
附录1 平衡盐溶液配制附录1 平衡盐溶液配制平衡盐溶液是由Ringer根据生理盐水首先创制的，由无机盐和添加成分葡萄糖等组成。
平衡盐溶液是为了使哺乳动物细胞短期处于存活状态，而不是促进其生长。
平衡盐溶液是用来洗涤组织和细胞，稀释作用于细胞的试剂和药物等，维持生理的pH和渗透压。
1．Hank's平衡盐溶液Hank's平衡盐溶液是含磷酸盐的缓冲溶液，在暴露于空气的状态下，能够维持生理的pH。
因此，经常作为酶消化细胞或组织和最终将细胞置于培养基中之前的洗涤细胞过程的首选溶液。
Hank's平衡盐溶液配方Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)组分 分子量 浓度 (g/L) 摩尔浓度 (mM) 无机盐：氯化钾 (KCl) 75 0.4 5.33磷酸二氢钾 (KH2PO4) 136 0.06 0.44碳酸氢钠 (NaHCO3) 84 0.35 4 氯化钠 (NaCl) 58 8 138磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 142 0.048 0.34其它组分(可选)：葡萄糖 (Glucose) 180 1 5.6 酚红 (Phenol Red) 398 0.011 0.03167附录1 平衡盐溶液配制2．磷酸盐缓冲溶液Dulbecco's 磷酸盐缓冲溶液配方 Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline （D-PBS）（不含钙、镁离子）组分分子量浓度 (g/L) 摩尔浓度 (mM)氯化钾 (KCl) 75 0.20 2.67磷酸二氢钾 (KH2PO4) 136 0.20 1.47 氯化钠 (NaCl) 58 8.00 138.00磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10REFERENCE:1．Hanks, J.H. and Wallace, R.E. (1949) Relation of Oxygen and Temperature in the Preservation of Tissues by Refrigeration. Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 71:196 2．Dulbecco, R. and Vogt, M., (1954) Plaque formation and isolation of pure lines with Poliomyelitis viruses. J. Exp. Med., 98:167.168。
hanks液
甲液：Na2HPO4 2H2O 0．06克KH2PO4 0．06克MgSO4 7H2O 0．20克葡萄糖1．00克NaCl 8．00克三蒸水750毫升
乙液：CaCl2 0．14克三蒸水100毫升
①将乙液徐徐加入甲液中。
②将0．35克NaHCO3溶解在37℃100毫升三蒸水中。
③用数滴NaHCO3液溶解0．02克酚红。
④将②、③液移入①液中。
⑤用三蒸水定容至1000毫升，充分混匀，4℃冰箱过夜。
⑥滤过消毒，小瓶分装，冷藏。
注意：酚红对细胞有一定毒性，目前实验中的用量除0．02克外，还有0．01克和0．005克，也有BSS液中不加酚红的。
酚红量不同，BSS颜色也不同
A液NaCI 80．0g，KCI 4log，CaCI 1．4g，MgS04。
7H20 2．Og，加蒸馏水至450mi。
B液Na2HP04·12H20 1．52g，KH 2P04 0．60g，C8Ht 20。
10．Og，加蒸馏水至450mi。
C液1％酚红16mi，酚红1 g置研钵中，加少量l mol／LNaOH研磨至糊状，加水至100ml，过滤后使用。
【配法】
(1)将B液慢慢倒入A液，不断搅拌后再加入C液。
(2)船蒸馏水至1 000ml。
{生殖就医指南网www.９１.是你知心的朋友}(3)113~20分钟高压灭菌后，4℃贮存。
Hanks应用液
母液作lO倍稀释后，高压灭菌，一4℃贮存备用。
Hanks营养液
于应用液中按比例加入0．5％水解乳蛋白，灭菌，4℃贮存。
常用溶液的配制
常用试剂的配制1．无Ca2+、Mg2+Hanks液NaCl 4.5g KCl 0.2gNaHCO30.175gNa2HPO4·12H2O 0.076gKH2PO40.03g葡萄糖 0.5g0.4%酚红 2.5ml将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO3调整 pH 值至7.4，4℃冰箱保存备用。
2．甲基红试剂（1）成份甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml95％乙醇 300ml（2）用途：测定甲基红反应。
3．Hanks液（原液）原液甲： NaCl 160gKCl 8gMgSO4·7H2O 2gMgCl2·6H2O 2g上述试剂加入800ml双蒸水。
溶解。
CaCl22.8g溶于100ml双蒸水上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。
原液乙： Na2NPO4·12H2O 3.04gKH2PO41.2g葡萄糖 20g加入800ml双蒸水，溶解。
0.4%酚红溶液100ml上述二液混合，加双蒸水至1000ml，再加2ml氯仿防腐，4℃保存。
使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液：原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过，8磅20min灭菌，放4℃冰箱保存，使用前用NaHCO3调整PH值。
4．0.4%酚红溶液称取0.4g酚红置研钵中研碎，逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨，直到所有的颗粒几乎完全解，加入0.lmol/LNaOHl0ml，然后倒入容量瓶中，并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。
5．pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液）Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03gNH4Cl（氯化氨) 3.735g加双蒸水至500ml，用浓HCl调pH=7.2，10磅15min灭菌后放4℃保存。
6．0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g加蒸馏水 200ml 加热溶解巴比妥纳 10.3g叠氮纳 0.2g加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
D-Hanks平衡盐溶液(5×,无酚红)
D-Hanks平衡盐溶液(5×,无酚红)产品简介：平衡盐溶液（Balanced Salt Solution,BSS）与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
主要由无机离子组成，有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等，如果有必要还可以加入HEPES以维持渗透压的平衡。
BBS配方常有改动，如Hank,s BBS有不含钙镁或酚红的，也有含钙镁含酚红的等等，Dulbecco,s PBS有不含钙镁或含钙镁的等。
HBSS、EBSS、PBS等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。
常见的平衡盐溶液有Eargle,s液、Hank,s液、磷酸盐缓冲溶液（PBS）等。
D-Hanks平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称CMF-Hanks，Balanced Salt Solution、CMF-HBSS溶液或D- Hanks，BSS，主要由氯化钠、氯化钾、磷酸盐、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，不含Ca2+、Mg2+，pH值为7.2~7.4，Jimei D- Hanks平衡盐溶液（5×,无酚红)，Ca2+、Mg2+，不含酚红，用重蒸超纯水配制，pH值7.4，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶-EDTA细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制以及组织和细胞的漂洗等。
该试剂为5×浓缩液，使用之前应稀释到1×。
产品组成：操作步骤（仅供参考）：1、进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，按D-Hanks平衡盐溶液(5×,无酚红)：无菌水=1：4进行稀释，即取D-Hanks平衡盐溶液(5×,无酚红)1份、无菌水4份、充分混匀，即获得D-Hanks工作液。
2、进行常规实验（不要求无菌）时，按D-Hanks平衡盐溶液(5×,无酚红)：双蒸水或去离子水=1：4进行稀释，即取D-Hanks平衡盐溶液(5×,无酚红)溶液1份、双蒸水或去离子水4份，充分混匀，即获得D-Hanks工作液。
hanks液的配制细胞培养技术
Hanks液的配制：①NaCl 8克、KCl 0.4克、MgSO47H2O 0.1克、MgCl·6H2O 0.1克溶于800毫升重蒸馏水中；②CaCl2(无水)0.14克溶于100毫升重蒸馏水中；③葡萄糖1.0毫克、NaHPO4 0.154克、KH2PO4 0.06克、0.4%酚红液5毫升溶于100毫升重蒸馏水中。
将上述3种溶液混和，8磅30分钟灭活菌，或用玻璃滤器过滤。
保存在5℃备用，用前以5%NaCO3调pH。
细胞培养技术（一）一.细胞培养的基本原理细胞培养是用酶消化法将组织碎块分离成单个细胞，用培养基制成细胞悬液，在体外适宜条件下，使细胞生长繁殖，并保留其一定的结构和功能特性。
细胞培养与组织培养、器官培养主要不同点在于原始培养的对象不同。
细胞培养使用的是单个细胞悬液，组织培养使用的是组织块(0．5～1立方毫米)或薄片(厚0．2毫米)，而器官培养使用的是器官原基或器官的一部分或整个器官。
在组织培养中，细胞自组织块周围移出并生长，细胞在生长过程中总有移动(运动)或其它变动，这样就使被培养的组织难以长期维持其原有的结构和功能。
培养时间越长，发生变化的可能性越大，结果常使单一类型的细胞保存下来，最终成了细胞培养。
在细胞培养中，细胞生命活动和体内细胞一样，仍然是相互依存的，呈现一定的组织特异性，所以组织培养和细胞培养实际上无严格区别。
细胞培养技术是生命科学中常用的研究手段，该方法能排除神经体液因素的影响及肝、肾解毒功能的干扰，观察某些因素或药物对培养细胞的直接作用。
通过实验可获得某一类型细胞的纯培养。
如心肌组织中心肌细胞约占50％，非心肌细胞占50％；而经纯化分离的心肌细胞悬液中，心肌细胞可达95％以上，这样，心肌细胞原代培养实验基本不受其它细胞的干扰。
在细胞培养实验中能直接观察到培养细胞生命活动的动态过程；用定时显微摄影记录可发现一些肉眼观察不到的生命现象；还可利用电镜手段、同位素标记、放免法和免疫组化法等来研究细胞形态结构及细胞内化学物质的分布。
Hanks平衡盐溶液(5×HBSS,无酚红)
Hanks 平衡盐溶液(5×HBSS,无酚红)简介：平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
主要由无机离子组成，有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等，如果有必要还可以加入HEPES 以维持渗透压的平衡。
BBS 配方常有改动，如Hank's BBS 有不含钙镁或酚红的，也有含钙镁含酚红的等等, Dulbecco's PBS 有不含钙镁或含钙镁的等。
HBSS 、EBSS 、PBS 等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。
常见的平衡盐溶液有Eargle's 液、Hank's 液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)等。
Hanks 平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称Hanks' Balanced Salt Solution 、Hanks' BSS 、HBSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸盐、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，含Ca 2+、Mg 2+、酚红。
Leagene Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红)，含Ca 2+、Mg 2+，不含酚红，用重蒸超纯水配制，pH 值7.4，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶-EDTA 细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制以及组织和细胞的漂洗等。
该试剂为浓缩液，使用之前应稀释。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，5×HBSS 溶液:无菌水按一定比例进行稀释，即取5×HBSS 溶液、无菌水，充分混匀，即获得HBSS 工作液。
2、 进行常规实验（不要求无菌）时，5×HBSS 溶液：双蒸水或去离子水按一定的比例进行稀释，即取5×HBSS 溶液、双蒸水或去离子水，充分混匀，即获得HBSS 工作液。
Hanks平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红)
Hanks 平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红)简介：平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
主要由无机离子组成，有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等，如果有必要还可以加入HEPES 以维持渗透压的平衡。
BBS 配方常有改动，Hank ’s BBS 有不含钙镁或酚红的，也有含钙镁含酚红的等, Dulbecco ’s PBS 有不含钙镁或含钙镁的等。
HBSS 、EBSS 、PBS 等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。
常见的平衡盐溶液有Eargle 液、Hanks 液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)等。
Hanks 平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称Hanks' Balanced Salt Solution 、Hanks ’BSS, 或HBSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸盐、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，含Ca 2+、Mg 2+、酚红。
Leagene Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红)，含Ca 2+、Mg 2+、酚红，用重蒸超纯水配制，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶-EDTA 细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制以及组织和细胞的漂洗等，直接使用。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 无需配制，直接使用。
注意事项：1、 在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，应注意无菌操作，避免被微生物污染。
2、 Leagene Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红)由于含钙离子，易产生沉淀，出现该种情况后，一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。
3、 该试剂经过滤除菌。
4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：3个月有效。
Hank's液和D-Hank's液
Hank's液是一种平衡盐溶液，主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。
Hanks液的配制
Hanks液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液（Balanced Salt Solutio,），简称H。主要用于配制配制培养液，稀释剂和细胞清洗液，而不能单独作为细胞，组织培养液。
将（1）液和（2）液混合，补加双蒸水至1000ml，即为原液B。
应用液
原液A
1份
原液B
1份
双蒸水
18份
混合后，分装于200ml小瓶中，10磅高压蒸气灭菌15分钟，临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6
D-Hank’s的配制
D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
D-Hank’s
NaCl
8g
KCl
0.4g
Na2HPO4·12H2O
0.152g
KH2PO4
0.06g
NaHCO3
0.35g
溶于800ml双蒸水
1．依次加入上述试剂至800mL蒸馏水中，溶解后调PH至7.2。
2．定容至1000mL。
3．高压灭菌，10磅10min。
原液A
NaCl
160g
MgSO4·7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2·6H2O
2g
CaCl2
2.8g
溶于1000ml双蒸水
原液B
（1）
Na2H4
1.2g
葡萄糖
20.0g
溶于800ml双蒸水
推荐Hanks 液的配制2篇
推荐Hanks 液的配制2篇篇一：Hanks 液的配制及其应用Hanks平衡盐液，简称Hanks液，广泛应用于生物学实验中，尤其在细胞培养方面的应用十分广泛。
Hanks液是一种用于模拟体液环境，使细胞在体外环境下能够正常生长和分化的人工营养液体。
这种液体中含有各种必需的无机盐和有机营养元素，可以为细胞提供理想的生长环境。
Hanks液的配制虽然需要较高的精度和操作技巧，但只要掌握了配制方法和注意点，也不会感到特别复杂。
Hanks液主要是由钠、钾、镁、磷等无机营养元素，以及氨基酸、糖、维生素等有机营养元素组成。
这些物质的浓度比例非常讲究，既要保证能够满足细胞的营养需求，又要避免浓度过高引发细胞毒性。
在开始配制Hanks液之前，首先要了解清楚Hanks液的组成，对每种组分物质的配制方法和应用性能有所了解。
对于Hanks液的配制来说，最基本的操作步骤是：首先测量各种成分的准确质量，然后将它们溶解在蒸馏水或者去离子水中，予以充分搅拌使成分充分溶解。
在操作过程中，一定要保证进行充分搅拌，才能保证各种成分的充分溶解和混合。
在配制完成后，还需要对Hanks液进行滤杂等处理，以保证其纯净度。
关于Hanks液的配制，需要特别注意的是，由于它是一种生物牵涉液，因此在配制的过程中一定要严格遵守无菌操作规程，避免微生物污染。
另外，安全也是配制工作中必须注意的问题，一些元素和化学物质有可能会对人体产生毒性，因此在操作过程中一定要慎重。
此外，细胞对环境的pH值要求非常严格，因此在配制Hanks液的过程中，需要使用pH计来严格控制pH值，确保其在适宜的范围内。
所以在配制Hanks液时，不仅需要准确称取各种成分，而且还需要精确调节pH值，以满足细胞生长的需要。
篇二：Hanks液的配制操作技巧及注意事项Hanks液的配制需要精确控制各种成分的浓度，因此在配制过程中有很多技巧和注意事项。
首先，Hanks液的配制过程中一定要进行严格的无菌操作，因为任何微生物污染都会吞噬细胞分解的营养，同时，微生物的代谢产物会导致细胞生理环境的改变，干扰细胞的正常生长。
hanks液配方
应用液
原液A
1份
原液B
1份
双蒸水
18份
混合后，分装于200ml小瓶中，10磅高压蒸气灭菌15分钟，临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6
如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！
2.8g
溶于1000ml双蒸水
原液 B
1
Na2HPO4・12H2O
3.04g
KH2PO4
1.2g
葡萄糖
20.0g
溶于800ml双蒸水
2
0.4%酚红溶液：取酚红0.4g，置玻璃研钵中，逐滴加入0.1N NaOH，并研磨，直至完全溶解，约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中，用双蒸水洗下研钵中残留酚红液，并入量瓶中，最后补加双蒸水至100ml。
Hanks液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液（Balanced Salt Solutions, BSS），简称HBSS。主要用于配制配制培养液，稀释剂和细胞清洗液，而不能单独作为细胞，组织培养液。
原 液A
NaCl
1பைடு நூலகம்0g
MgSO4・7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2・6H2O
2g
CaCl2
Hanks平衡盐溶液(1×HBSS,无酚红)
Hanks平衡盐溶液(1×HBSS,无酚红)产品简介：平衡盐溶液(Balanced Salt Solution，BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中，细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
平衡盐溶液(BSS)主要由无机离子组成，有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等，如果有必要还可以加入HEPES，加入少量的HEPES后，可以减少氯化钠的加入量，以维持渗透压的平衡。
平衡盐溶液可以作为完全培养基的基液，亦可以用于稀释浓缩的氨基酸、维生素溶液以配制完全培养基。
BBS配方常有改动，如Hank’s BBS由不含钙镁或酚红的，也有含钙镁含酚红的等等, Dulbecco’s PBS由不含钙镁或含钙镁的等。
HBSS、EBSS、PBS等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。
常见的平衡盐溶液有Eargle液，Hanks’液、低钙镁和无钙、镁平衡盐溶液及磷酸盐缓冲液(PBS)等。
Hanks平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称Hanks' Balanced Salt Solution、Hanks’BSS, 或HBSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，含钙离子和镁离子，pH值一般为7.2～7.4。
Leagene Hanks平衡盐溶液(1×,无酚红)，含钙离子和镁离子，无酚红，用重蒸超纯水配制，pH值7.4，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶和EDTA细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制，组织和细胞的漂洗等，直接使用。
主要成分：主要由KCl、KH2PO4、NaCl、NaHCO3、Na2HPO4、葡萄糖、Mg2+、Ca2+等组成，不含酚红。
操作步骤（仅供参考）：1、无需配制，直接使用。
注意事项：1、在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，应注意无菌操作，避免被微生物污染。
D-Hanks平衡盐溶液(5×无酚红)
北京雷根生物技术有限公司 D-Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红)简介：常见的平衡盐溶液有Eargle 's 液、Hank's 液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)等。
D-Hanks 平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称CMF-Hanks' Balanced Salt Solution 、CMF-HBSS 溶液或D-Hanks' BSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸盐、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，不含Ca 2+、Mg 2+，pH 值一般为7.2～7.4。
D-Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红)，Ca 2+、Mg 2+，不含酚红，用重蒸超纯水配制，pH 值7.4，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶-EDTA 细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制以及组织和细胞的漂洗等。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，按D-Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红)：无菌水=1:4进行稀释，即取D-Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红) 1份、无菌水4份，充分混匀，即获得D-Hanks 工作液。
2、 进行常规实验（不要求无菌）时，按D-Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红)：双蒸水或去离子水=1:4进行稀释，即取D-Hanks 平衡盐溶液(5×,无酚红)溶液1份、双蒸水或去离子水4份，充分混匀，即获得D-Hanks 工作液。
3、 取D-Hanks 工作液进行下游实验。
注意事项：1、 在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，应注意无菌操作，避免被微生物污染。
2、 Leagene D-Hanks 平衡盐溶液(5×,含酚红)由于不含钙离子，不易产生沉淀，出现该种情况后，一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。
3、 该试剂经过滤除菌。
4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
HBSS的配制和使用攻略
HBSS的配制和使用攻略HBSS主要用于培养液的配制或清洗细胞，不能单独使用。
本文介绍HBSS的配制和使用方法。
HBSS，即汉克斯平衡盐。
英文全名Hank's Balanced Salt Solution。
D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl，0.4 g/L KCl，1 g/L 葡萄糖，60 mg/L KH2PO4，47.5 mg/L Na2HPO4，调pH至7.2.一般用于配制细胞培养过程中的培养基或者清洗细胞。
Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14;NaHCO3 0.35;KH2PO4 0.06;Glucose0.34(g/l);Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl，0.4 g/L KCl，1 g/L 葡萄糖，60 mg/L KH2PO4，47.5 mg/L Na2HPO4，调pH至7.2.HBSS一共分为四种，含钙镁，含酚红;含钙镁，不含酚红;不含钙镁，含酚红(D-hanks );不含钙镁，不含酚红(D-Hanks)。
此四种产品可根据客户需要自己选择。
而如果客户无法判断应该选择哪一种，可以选不含钙镁，不含酚红(D-Hanks )。
Hanks’H anks’D- Hanks’D- Hanks’DPBS PBS 10*PBS 实用文档含钙镁含酚红含钙镁，不含酚红不含钙镁含酚红不含钙镁不含酚红不含钙镁不含酚红不含钙镁不含酚红不含钙镁不含酚红g/L g/L g/L g/L g/L g/L g/L NaCl88888880 Na2HPO.12H2O0.1260.1260.1260.126 2.9 2.929 NaH2PO4·2H2O0000000 KCl0.40.40.40.40.20.22 KH2PO40.060.060.060.060.20.24 2.4 MgSO40.0980.09800000 CaCl20.140.1400000D-葡萄糖1111000酚红0.0100.010000添加NaHCO30.350.350.350.35000那么，HBSS能高压灭菌吗?答案是否定的。
HBSS的配制和使用攻略
HBSS的配制和使用攻略HBSS主要用于培养液的配制或清洗细胞，不能单独使用。
本文介绍HBSS的配制和使用方法。
HBSS，即汉克斯平衡盐。
英文全名Hank's Balanced Salt Solution。
D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl，0.4 g/L KCl，1 g/L 葡萄糖，60 mg/L KH2PO4，47.5 mg/L Na2HPO4，调pH至7.2.一般用于配制细胞培养过程中的培养基或者清洗细胞。
Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14;NaHCO3 0.35;KH2PO4 0.06;Glucose0.34(g/l);Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl，0.4 g/L KCl，1 g/L 葡萄糖，60 mg/L KH2PO4，47.5 mg/L Na2HPO4，调pH至7.2.HBSS一共分为四种，含钙镁，含酚红;含钙镁，不含酚红;不含钙镁，含酚红(D-hanks );不含钙镁，不含酚红(D-Hanks)。
此四种产品可根据客户需要自己选择。
而如果客户无法判断应该选择哪一种，可以选不含钙镁，不含酚红(D-Hanks )。
Hanks’H anks’D- Hanks’D- Hanks’DPBS PBS 10*PBS 实用文档含钙镁含酚红含钙镁，不含酚红不含钙镁含酚红不含钙镁不含酚红不含钙镁不含酚红不含钙镁不含酚红不含钙镁不含酚红g/L g/L g/L g/L g/L g/L g/L NaCl88888880 Na2HPO.12H2O0.1260.1260.1260.126 2.9 2.929 NaH2PO4·2H2O0000000 KCl0.40.40.40.40.20.22 KH2PO40.060.060.060.060.20.24 2.4 MgSO40.0980.09800000 CaCl20.140.1400000D-葡萄糖1111000酚红0.0100.010000添加NaHCO30.350.350.350.35000那么，HBSS能高压灭菌吗?答案是否定的。
HBSS的配制和使用攻略
HBSS的配制和使用攻略HBSS主要用于培养液的配制或清洗细胞，不能单独使用。
本文介绍HBSS的配制和使用方法。
HBSS，即汉克斯平衡盐。
英文全名Hank's Balanced Salt Solution。
D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl，0.4 g/L KCl，1 g/L 葡萄糖，60 mg/L KH2PO4，47.5 mg/L Na2HPO4，调pH至7.2.一般用于配制细胞培养过程中的培养基或者清洗细胞。
Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14;NaHCO3 0.35;KH2PO4 0.06;Glucose0.34(g/l);Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl，0.4 g/L KCl，1 g/L 葡萄糖，60 mg/L KH2PO4，47.5 mg/L Na2HPO4，调pH至7.2.HBSS一共分为四种，含钙镁，含酚红;含钙镁，不含酚红;不含钙镁，含酚红(D-hanks );不含钙镁，不含酚红(D-Hanks)。
此四种产品可根据客户需要自己选择。
而如果客户无法判断应该选择哪一种，可以选不含钙镁，不含酚红(D-Hanks )。
Han ks’含钙镁含酚红Hanks’含钙镁，不含酚红D- Hanks’不含钙镁含酚红D- Hanks’不含钙镁不含酚红DPBS不含钙镁不含酚红PBS不含钙镁不含酚红10*PBS不含钙镁不含酚红g/L g/L g/L g/L g/L g/L g/L NaCl 8 8 8 8 8 8 80 Na2HPO.12H2O 0.126 0.126 0.126 0.126 2.9 2.9 29 NaH2PO4·2H2O 0 0 0 0 0 0 0 KCl 0.4 0.4 0.4 0.4 0.2 0.2 2 KH2PO40.06 0.06 0.06 0.06 0.2 0.24 2.4 MgSO40.098 0.098 0 0 0 0 0 CaCl20.14 0.14 0 0 0 0 0D-葡萄糖 1 1 1 1 0 0 0酚红0.01 0 0.01 0 0 0 0 添加NaHCO30.35 0.35 0.35 0.35 0 0 0那么，HBSS能高压灭菌吗?答案是否定的。
台盼蓝染色法
PriCells:台盼蓝染色法
材料：
1.显微镜、玻片、盖玻片、滴管；
2.试剂：0.4%台盼蓝染液；
3.台盼蓝（Trypan blue）：0.4g；
4.生理盐水：100ml；
操作步骤：
1.用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2.用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3.再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4.将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5.每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6.染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7.死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。
活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8.计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9.统计未染色细胞。
可按公式计算出细胞活率。
细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100
注意事项：
1.染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使监测结
果偏低；
2.另可结合细胞计数方法，同时进行细胞计数和活力检测；
PriCells提供：
1.各种原代细胞特制基础培养基；
2.各种原代细胞培养特制添加剂；
3.原代细胞分离试剂盒；
4.原代细胞鉴定试剂盒；
5.原代细胞转染试剂盒；
6.原代细胞总蛋白质抽提物；
7.原代细胞总RNA；
8.原代细胞总DNA；。
Hanks平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红)
Hanks 平衡盐溶液(1×HBSS,含酚红)简介：平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
主要由无机离子组成，有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等，如果有必要还可以加入HEPES 以维持渗透压的平衡。
BBS 配方常有改动，Hank ’s BBS 有不含钙镁或酚红的，也有含钙镁含酚红的等, Dulbecco ’s PBS 有不含钙镁或含钙镁的等。
HBSS 、EBSS 、PBS 等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。
常见的平衡盐溶液有Eargle 液、Hanks 液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)等。
Hanks 平衡盐溶液是最常用的磷酸盐缓冲溶液之一，又称Hanks' Balanced Salt Solution 、Hanks ’BSS, 或HBSS, 主要由氯化钠、氯化钾、磷酸盐、碳酸氢钠、葡萄糖等组成，含Ca 2+、Mg 2+、酚红。
Leagene Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红)，含Ca 2+、Mg 2+、酚红，用重蒸超纯水配制，经严格过滤除菌处理，内毒素含量低，可用于胰蛋白酶-EDTA 细胞消化液等各种无或低钙镁细胞培养用液的配制以及组织和细胞的漂洗等，直接使用。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 无需配制，直接使用。
注意事项：1、 在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，应注意无菌操作，避免被微生物污染。
2、 Leagene Hanks 平衡盐溶液(1×,含酚红)由于含钙离子，易产生沉淀，出现该种情况后，一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。
3、 该试剂经过滤除菌。
4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：3个月有效。
Hanks`平衡盐溶液(无碳酸氢钠)干粉使用说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://
Hanks`平衡盐溶液（无碳酸氢钠）干粉
Hanks` 平衡盐溶液（无碳酸氢钠）干粉
干粉中含有：1.3mM 氯化钙；5.4mM 氯化钾；0.4mM磷酸二氢钾；0.8mM 硫酸镁；137mM 氯化钠；0.34mM 磷酸氢二钠；5.6mM 葡萄糖，0.03mM 酚红。
配制流程
1. 将干粉的外包装袋撕开；
2. 将袋中的干粉慢慢到入1.8L 15~20℃蒸馏水，搅拌使其溶解；
3. 将20mL左右的蒸馏水加入干粉袋内，冲洗剩余的干粉，将冲洗的蒸馏水加入至第2步的溶液中，反复冲洗直至袋中无肉眼可见的颗粒；
4. 加入0.7g碳酸氢钠；
5. 调节pH值至
6.7~
7.8；
6. 定容至2L；
如果需要无菌溶液，可通过0.22μm滤膜过滤除菌；或高压灭菌。
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请带手套。
储存温度
干粉可室温保存；配制为液体后可保存于2~8℃。
包装清单
货号品名包装HCY188Hanks` 平衡盐溶液（无碳酸氢钠）干粉2L HCY189 Hanks` 平衡盐溶液（无碳酸氢钠）干粉5L
1。
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Hanks 液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液（Balanced Salt Solutio, ），简称H。主要用于配制配制培养液，稀释剂和细胞清洗液，而不能单独作为细胞，组织培养液。
原液A
NaCl
160g
MgSO4·7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2·6H2O
2g
CaCl2
溶于1000ml双蒸水
原液 B
（1）
Na2HPO4·12H2O
KH2PO4
葡萄糖
溶于800ml双蒸水
（2）
%酚红溶液：取酚红，置玻璃研钵中，逐滴加入 NaOH，并研磨，直至完全溶解，约加 NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中，用双蒸水洗下研钵中残留酚红液，并入量瓶中，最后补加双蒸水至100ml。
CaCL2
KH2PO4
NaHCO3
葡萄糖
酚红
加水至1L，用NaHCO3调PH至~
将（1）液和（2）液混合，补加双蒸水至1000ml，
双蒸水
18份
混合后，分装于200ml小瓶中，10磅高压蒸气灭菌15分钟，临用前用无菌的% NaHCO3调pH至~
Hank's液配方(g/L)------- 来自司徙镇强主编〈细胞培养〉（P41页）
NaCL
KCL