TEM生物样品制备方法

透射电镜生物样本制备流程及注意事项

透射电镜生物样本制备流程及注意事项透射电镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）是一种使用电子束而不是光束进行成像的显微镜。

它可以提供高分辨率的图像，因此被广泛应用于生物样本的观察和研究。

然而，由于其特殊的工作原理和生物样本的复杂性，透射电镜生物样本的制备过程需要注意一些关键的步骤和细节。

下面将逐步介绍透射电镜生物样本制备流程及注意事项。

一、样品固定1.选择合适的固定剂：固定剂的选择应根据所研究的样本类型和要观察的细胞结构而定。

常用的固定剂包括戊二醛（glutaraldehyde）、乙酰化亚胺（acrolein）、纤维蛋白素（formaldehyde）等。

2.采取合适的固定时间和固定温度：固定时间和温度应根据固定剂的要求和样本的特性进行优化。

通常情况下，固定时间为数小时至数天，温度在4℃至25℃之间。

3.注意透射电镜样品的固定深度：样品应保持较小的厚度以便透射电子束的穿透。

二、样品剖解1.剖解细胞膜：通常采用超声波振荡或冷冻断裂等方法来剖解细胞膜。

超声波振荡可用于含有细胞膜的细胞或组织，而冷冻断裂则适用于脆弱细胞和膜脂体系。

2.剖解细胞核：利用离心裂解法可以将细胞核分离出来。

离心裂解可分为机械法和渗透法两种，机械法利用高速离心的作用将细胞核分离，而渗透法则是通过渗透剂将细胞核溶胀并破碎。

三、样品固化1.脱水：样品在固定后需要进行脱水处理，以便在后续的步骤中更好地渗透和浸透。

常用的脱水剂有乙醇、丙酮和乙醚等，脱水过程往往需要进行多次重复。

2.浸透：在脱水后，样品需要在树脂中进行浸透，使其固化为坚硬的样品。

通常采用环氧树脂或比较稳定的丙烯酸树脂来进行浸透。

这一步骤通常需要较长时间，如数小时甚至数天。

3.树脂填充：浸透后的样品需要在模具中进行树脂填充，并在适当的温度下进行固化。

树脂填充的过程需要注意排除气泡和避免过度填充。

四、样品切片1.选择合适的切割工具和方法：样品通常使用切片机和切片刀进行切割。

透射电镜制样流程

透射电镜制样流程透射电镜（Transmission Electron Microscopy，TEM）制样是指通过一系列的化学和物理方法来制取透射电镜所需的样品。

透射电镜是一种高分辨率的显微镜，可以在纳米尺度下观察材料的原子结构和微观形态。

为了获取高质量的TEM图像，制样过程非常关键。

下面将详细介绍透射电镜制样的流程。

1.样品制备：样品可以是纳米颗粒、薄膜、纤维或生物样品等。

首先，准备适宜的基底材料，如碳膜覆盖的铜网格或碳膜覆盖的铜刀片。

样品通常需要制成非常薄的切片，通常在50到100纳米的厚度范围内。

制备方法包括机械切割、电解石蠟切片、离子切割或电离蚀刻等。

2.固定和固化：对于生物样品，需要先进行固定处理，以保持样品的形态和结构。

常用的固定剂包括戊二醛、酸性醛或重金属盐。

然后，固定的样品需要进一步处理以固化，如用过氧化物、树脂或聚合物进行浸渍，以增加样品的稳定性。

3.切割和悬浮：将固化的样品切割成适当的尺寸和形状。

使用超微切割机、离子切割仪或其他切割工具进行切割。

切割后，样品通常会悬浮在水或有机溶液中，以便进一步处理。

4.脱水和对比染色：脱水是将样品从水中逐渐转移到有机溶剂中的过程。

这种处理可以控制样品的体积，以减少对比染色和观察中的伪影。

脱水通常通过渗透固定液逐渐转移，然后通过有机溶剂（如醋酸乙酯、丙酮或丙二醇）进行交换。

5.嵌入：将样品嵌入到透明的聚合物或树脂中。

嵌入过程中，通常采用逐渐增加浓度的树脂混合物，以确保样品得到完全浸透。

然后，将样品与树脂进行硬化，通常在高温下进行。

6.超薄切片：将固化的样品切割成非常薄的切片。

使用超薄切片机和钻磨刀片进行切割。

切割后的切片应尽快收集并转移到透明的铜网格或铜刀片上。

7.超薄切片处理：超薄切片通常需要进行后继处理以增强对比度和解决其他问题。

这可能包括染色、胶层增强或薄膜剥离等方法。

8.观察：将制备好的样品放入透射电镜中进行观察。

在观察前，样品需要在真空中或过氮气中去除气泡和其他杂质。

透射电镜制样步骤以及注意事项

透射电镜制样步骤以及注意事项透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）是目前最常用的高分辨率电子显微镜，可以用于观察物质的微观结构。

制备TEM样品的过程非常重要，下面将详细介绍TEM制样的步骤以及需要注意的事项。

制备TEM样品的步骤一般包括样品的选择、固定与固化、切片、薄化、网格制备和贴膜等。

第一步是样品的选择，样品应具有研究价值且适合观察。

例如，生物样品可以是细胞、组织或器官的薄片，金属样品可以是扁平的块状、粉末或薄膜等。

第二步是固定与固化。

对于生物样品，常用的固定方法包括浸泡法、灌注法和切片冷冻法；对于无机样品，可以使用固定剂将样品固定在固定剂中。

第三步是切片。

将固定好的样品切割成薄片，一般要求薄片的厚度在100 nm以下，通常使用超薄切片机来进行切割。

第四步是薄化。

将切割好的样品进行薄化处理，使其达到TEM观察所需的薄度。

常见的薄化方法有机械薄化、电化学薄化和离子薄化等。

第五步是网格制备。

将薄化好的样品放置在铜网格上，网格的选取应该根据所研究样品的性质和需要进行选择。

最后一步是贴膜。

将组织切片或带有样品的网格进行贴膜，以保护样品并提高图像的对比度。

在以上步骤中，需要注意的事项有：1.样品在制备过程中要避免受到污染或氧化，尽量在纯净无尘的环境中进行操作。

2.固定剂的选择要合理，不同的样品可能需要使用不同的固定剂，应根据需要进行选择。

3.切片时要注意刀片的尖锐度和切割角度，以免对样品造成损伤或变形。

4.薄化过程中要控制好加工参数，以保证样品的均匀薄化。

5.制作网格时应选择合适的网格尺寸和类型，以适应观察需求。

6.贴膜时要使薄膜均匀平整，并避免出现气泡或杂质。

总之，TEM制样是一项复杂而关键的过程，要保证样品的质量和可观察性，需要仔细选择方法、控制操作参数、注意样品的保护与处理。

合理的样品制备能够获得高质量的TEM图像，并提供准确的实验数据和结论。

第三章TEM样品制备技术ppt课件

电子穿透样品的厚度与电子的能量有关： 100kV---100nm； 200kV---200nm；
高分辨原子像要求的样品厚度应在10nm以下，甚至5nm以下。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用
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一、质厚衬度
衬度：眼睛能观察到的或者其它媒介能记录到的光强度或感光度的差异；质厚衬度就是样品中不同部位由于原子序数不同或者密度不同、样品厚度不同，入射电子被散射后能通过物镜光阑参与成像的电子数量不同，从而在图像上体现出的强度的差别。
经营者提供商品或者服务有欺诈行为的，应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失，增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用
常用电解减薄液
序号
电解液成分与配比
适用材料
1
乙醇（80ml），冰醋酸(80ml)，高氯酸(15ml)，甘油(10ml)
高温合金，耐
热钢，铝及其合金。
的结构和工作原理，而且应该掌握样品制备的基本技术。
电镜样品制备的特点
电镜样品制备属于破坏性分析。花费时间很多，有时甚至超过整个研究工作量的一半以上。制样技术随电镜技术的发展而发展的。制样技术分两大类：生物样品制备、材料科学样品制备。本文只
讲述材料科学中的制样技术，这些试样大多是有一定硬度的固态物质。制备成薄膜，膜厚取决于电子束的穿透能力和分析要求。
支持膜分散粉末法是常用的制样方法。

tem试样制备方法

tem试样制备方法
以下是制备TEM试样的三种主要方法：
1. 切割法：对于大块样品，可以使用切割机或电离子切割机将其切割成薄片。

切割时，需要控制切割角度和速度，以确保切割出的薄片表面光滑。

切割后的薄片需要进行抛光和清洗，以去除表面污染和毛刺。

2. 磨薄法：对于小样品或脆性样品，可以使用磨薄机将其磨成薄片。

磨薄时，需要控制磨头和样品之间的距离和速度，以避免破坏样品。

磨薄后的样品需要进行抛光和清洗。

3. 离子蚀刻法：对于某些材料，如半导体材料和金属材料，可以使用离子蚀刻法制备TEM样品。

离子蚀刻可以将样品表面逐渐去除，直到获得透明的
薄片。

离子蚀刻过程需要控制离子束的能量和流量，以避免样品表面的损伤。

在制备TEM试样之后，需要将其固定在网格上，以便放置到TEM中进行分析。

网格应该是无污染的，通常使用碳膜或氧化亚铜薄膜制成。

将样品放置在网格上时，需要控制样品和网格之间的距离和角度，以确保样品位于
TEM光束路径。

以上方法仅供参考，具体操作需要根据不同的材料和实验需求进行选择和调整。

透射电镜细胞样品制备流程

透射电镜细胞样品制备流程透射电镜细胞样品制备流程概述透射电镜（TEM）是一种常用于观察细胞结构和超微结构的高分辨率显微镜。

样品制备是进行TEM观察的关键步骤，正确的制备流程能够保证样品的质量和结构完整性。

流程步骤1.选择适合的细胞样品–根据研究目的选择不同类型的细胞样品，如培养细胞、动物细胞组织或植物细胞等。

–样品选择要考虑细胞生长状态、形态和结构的要求。

2.采集样品–从培养皿中取出细胞，或从动物或植物组织中切取适当大小的样品。

–注意避免样品受到污染或损坏。

3.固定样品–使用适当的固定剂，如戊二醛、冰醋酸或凝胶固定剂，对样品进行固定处理。

–固定剂的选择要根据样品类型和所需观察结构的特点。

4.去除固定剂–使用缓冲液或盐水洗涤样品，去除多余的固定剂。

–洗涤时间和次数需根据固定剂的种类和浓度进行调整。

5.后续处理–为了进一步增强对样品的对比度和分辨率，可以对样品进行染色处理。

–常用的染色剂包括重质金属盐、乙酸铀和铅染色剂等。

6.样品包埋–涂覆样品表面的浸渍剂，如环氧树脂或丙烯酸树脂。

–用于支撑样品的网格可以放置在浸渍剂中。

7.制备超薄切片–使用超薄切片机将包埋的样品切割成透明的超薄切片。

–切片的厚度通常控制在70-100纳米之间。

8.将切片转移到网格上–使用特殊工具将切片转移到电子显微镜用的网格上。

–要小心操作，避免切片受到损坏或污染。

9.干燥和稳定–将转移到网格上的切片进行脱水和干燥处理，以提高稳定性。

–常见的方法包括用醇溶液进行脱水，然后使用气体吹干。

10.开始透射电镜观察–将处理完的样品装入透射电镜，调整参数和放大倍数。

–进行细胞结构和超微结构的观察和拍摄。

结论透射电镜细胞样品制备是进行TEM观察的关键步骤。

通过选择合适的细胞样品、适当的固定、去固定剂和染色处理，以及正确的样品包埋和超薄切片制备，可以确保样品的质量和结构完整性。

准确无误的制备流程能够为细胞学研究提供可靠的数据支持。

注意事项1.样品的选择要根据研究目的和所需观察结构的特点进行。

透射电镜细胞样品制备流程

透射电镜细胞样品制备流程以透射电镜细胞样品制备流程为标题，我们来介绍一下这个过程。

透射电镜（Transmission Electron Microscope，TEM）是一种高分辨率的显微镜，可以用来观察非常微小的细胞结构和内部细节。

为了获得高质量的透射电镜图像，样品的制备非常重要。

下面我们将详细介绍透射电镜细胞样品制备的流程。

第一步，收集细胞样品。

可以选择不同类型的细胞样品，如动物细胞、植物细胞或微生物细胞。

细胞样品可以从生物实验室中获得，也可以通过培养细胞来获取。

第二步，固定细胞样品。

固定是为了保持细胞在制备和观察过程中的形态和结构。

常用的固定剂有乙醛、戊二醛等。

将细胞样品与固定剂混合，使细胞膜和细胞器固定在原位，停止细胞内部的生化反应。

第三步，脱水样品。

将固定的细胞样品通过一系列浓度递增的乙醇溶液进行脱水处理。

脱水的目的是去除细胞内外的水分，使样品适合后续的浸渍和包埋。

第四步，浸渍和包埋样品。

将脱水后的细胞样品置于透明的有机溶剂中，如丙酮或环氧树脂。

浸渍的目的是使样品与嵌入剂之间充分接触，逐渐将有机溶剂替换为嵌入剂。

然后将样品转移到嵌入剂中，使细胞样品被完全包裹在固体嵌入剂中。

第五步，切片样品。

使用超薄切片机将包埋的细胞样品切成非常薄的切片，一般为50-100纳米。

切片的过程需要非常小心和精确，以确保切片的质量和一致性。

第六步，上膜样品。

将切好的细胞样品转移到透明的膜上，如碳膜或铜膜。

上膜的目的是增强样品的稳定性和导电性，以便在透射电镜中观察。

第七步，染色样品。

可以使用染色剂来增加样品的对比度和可见度。

常用的染色剂有重金属盐（如铋盐）和阴离子染料（如尼格罗红）。

染色的过程需要小心操作，以避免染料的过度使用或样品的损坏。

第八步，干燥样品。

将上膜和染色后的样品放置在通风设备中，使其自然干燥。

干燥后的样品可以储存在干燥剂中，以保持其稳定性和保存时间。

将制备好的样品放入透射电镜中进行观察。

通过透射电镜，我们可以获得高分辨率和高对比度的细胞图像，从而更好地研究细胞的结构和功能。

TEM制样方法范文

TEM制样方法范文TEM(Transmission Electron Microscopy)是一种高分辨率电子显微镜技术，可用于观察和分析材料的微观结构。

TEM利用电子束传输样品并收集透射电子图像，通过显微镜的透射系统产生高分辨率图像。

在TEM制样过程中，样品的制备是非常关键的步骤，因为正确的制备样品对于获得高质量、准确的TEM图像至关重要。

以下是几种常见的TEM制样方法：1.切片法切片法是TEM制样的最常见方法之一、首先，样品通常是固态或半固态的，被嵌入到一种硬化树脂中，使其变得坚固。

然后，使用超微薄切片器将样品切成非常薄的切片，通常在50-100 nm的范围内。

这些切片随后会被转移到一小块碳膜上，并收集在TEM网格上。

最后，将TEM网格放置在TEM样品室中进行显微观察。

2.离子薄化法离子薄化法是一种常用的制备TEM样品的方法，尤其适用于研究金属、合金和陶瓷等材料。

首先，将样品切片制备成片上约厚10-100μm的样品。

然后，将样品放入一个离子薄化装置中，在真空环境中通过离子束装置加速产生高能离子束。

这些高能离子会剥离样品表面的原子，逐渐将其薄化。

通过定期检查样品的厚度，可以控制薄化的过程，直到达到所需的厚度。

最后，将薄样品转移到TEM网格上进行观察。

3.冻结切片法冻结切片法适用于需要观察生物样品或水溶液中的材料的TEM制样。

在这个方法中，样品首先被冷冻，通常是通过液氮或液氮气体冷冻。

然后，使用特殊的微波冻结设备将样品顺利地冻结。

接着，从冷冻样品中制备出非常薄的切片，这样可以保留样品的原始结构和化学性质。

最后，将这些冻结切片转移到TEM网格上进行显微观察。

4.真空沉积法真空沉积法是一种用于制备包含不透明溶液或薄膜样品的TEM样品的方法。

首先，将样品溶液或薄膜放置在TEM网格上。

然后，在真空室中将样品置于高温下，使之脱水并形成固体表面。

最后，在低温下，以较高速度蒸发样品周围的水分子，制备出干燥的样品。

透射电镜样品制备方法

透射电镜样品制备方法透射电镜（Transmission Electron Microscopy，简称TEM）是一种高分辨率的显微镜，能够观察到原子尺度的物质结构。

在进行透射电镜观察前，样品的制备是至关重要的一步。

本文将介绍透射电镜样品制备的方法，希望能够帮助大家更好地进行样品制备工作。

首先，样品的制备要求样品具有一定的薄度。

因此，在进行透射电镜观察前，通常需要将样品切割成极薄的切片。

对于生物样品，可以采用超薄切片机进行切割；对于金属、陶瓷等样品，可以采用离子蚀刻或机械打磨的方法制备薄片。

在进行切割或打磨时，需要保持样品表面的平整和光洁，以确保透射电镜观察时获得清晰的图像。

其次，样品的制备还需要考虑到样品的固定和染色。

对于生物样品，固定和染色是非常重要的步骤。

固定可以保持样品的形态和结构不变，而染色则可以使样品在透射电镜下更易于观察。

常用的固定剂包括乙醛、戊二醛等，而染色剂则根据需要选择不同的染色方法。

另外，样品的制备还需要考虑到样品的支撑。

在进行透射电镜观察时，样品通常需要支撑在一种载体上，以便于放置在透射电镜的样品台上。

常用的载体包括碳膜、网格和硅片等。

在选择载体时，需要考虑到载体的透明性、机械强度和热稳定性等因素。

最后，样品的制备还需要考虑到真空条件。

透射电镜通常在高真空环境下进行观察，因此样品制备时需要保证样品的干燥和密封。

特别是对于生物样品，需要进行脱水和干燥处理，以避免在真空环境下产生气泡或水蒸汽，影响透射电镜观察效果。

总之，透射电镜样品制备是透射电镜观察工作中至关重要的一步。

在进行样品制备时，需要考虑到样品的薄度、固定和染色、支撑和真空条件等因素，以确保最终获得清晰、准确的透射电镜图像。

希望本文介绍的方法能够对大家进行透射电镜样品制备工作有所帮助。

tem透射电镜的样品制备方法

tem透射电镜的样品制备方法TEM（透射电子显微镜）是一种常用的高分辨率显微镜，可以观察到物质的结构和组成。

样品制备对于TEM观测至关重要，良好的样品制备可以提供高质量的显微图像。

以下是TEM透射电镜的样品制备方法的详细讨论。

1.样品选择：选择适合TEM观察的样品，典型的样品包括纳米材料、生物细胞、材料薄膜等。

根据需要选择合适的样品尺寸和形状。

2.样品固定：根据样品的特性和需要，采取合适的方法将样品固定在支撑物上。

常用的方法包括离心沉淀、滴定、蒸发浓缩等。

对于生物样品，可以使用化学固定剂（如戊二醛）进行化学固定。

3.样品切片：对于大尺寸或不透明的样品，需要将其切割成薄片，一般要求切片尺寸在100 nm以下。

常用的切片工具有超声切割仪、离子切割仪等。

切割样品时要注意样品的定位和定向，以确保观察到感兴趣的区域。

4.样品脱水：对于生物样品，需要将其进行脱水处理。

脱水可以使用乙醇和丙酮等有机溶剂，逐渐将样品中的水分替换为有机溶剂。

脱水过程中要避免剧烈振荡，以防止样品的破坏。

5.样品浸渍：将脱水后的样品浸渍在透明介质中，如环氧树脂或聚合物。

浸渍过程中需要避免气泡和异物的进入，以保持样品的质量。

6.样品调平：将浸渍后的样品放在平板上，用研磨纸将其调平。

调平过程中要注意避免样品的损坏。

7.样品切割：将调平后的样品切成适当尺寸的小块，便于后续的操作。

切割时要使用锋利的刀具，以保证切面的平整度。

8.样品研磨：使用研磨纸或研磨腰带对样品进行研磨，以使其表面更加平整。

研磨过程中要注意研磨力度的控制，以免样品的破损。

9.样品薄化：使用电子束或离子束对样品进行薄化处理，将其厚度控制在适当的范围内。

薄化过程中要注意能量和时间的控制，以避免样品的损坏。

10.样品清洁：最后，使用有机溶剂或气流将样品上的杂质去除，使样品表面干净。

以上就是TEM透射电镜的样品制备方法的详细讨论。

不同的样品可能需要不同的制备方法，需要根据实际情况进行调整。

TEM生物样品特殊制备技术课件

硫胺焦磷酸酯酶（TPP）技术获得的选择性染色。大鼠附睾细胞内的高尔基器只有内层着色。（×33000）
肝细胞中毛细胆管呈现ALP反应阳性（箭头）×15000
第四节、免疫电镜技术 Immuno electronmicroscopic technique
1、概念：
免疫电镜技术是免疫学和电镜技术的结合，其特点是将免疫学中抗原抗体反应的特异性与组织化学中形态学的可见性，结合电镜的高分辨能力和放大本领，用胶体金标记抗原，在亚细胞水平上研究组织和细胞的形态与功能，还可进行细胞内抗原的定性定位研究，从而将细胞结构与功能代谢紧密结合起来。
醛类物质对不同细胞器的固定和对酶的活性作用
细胞器胞基质内质网线粒体核周隙 GOL体酶活性戊二醛＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋一般
甲醛＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋优秀
在选择固定剂时，首先考虑保存酶的活性，后考虑结构的保存。由表可见，戊二醛的固定作用优于甲醛，而甲醛保存酶的活性作用大于戊二醛。因此电镜细胞化学技术中常用戊二醛和甲醛的混合液进行样品固定。
从理论上讲，若想保存好样品，需充分固定。但固定越彻底，酶的失活越严重。要想保存酶的活性，最好是先孵育后固定，但先孵育导致细胞微细结构的损伤，反应不均，酶反应物扩散、流失，出现与酶无关部位定居的假象。这些矛盾是EM细胞化学技术中的难点。在EM酶细胞化学技术中酶的失活、丢失是不可避免的，细胞微细结构的破坏也是不可避免的但是应当尽量减少固定剂造成酶的失活与丢失，减少孵育液对细胞微细结构的损伤破坏。
5、免疫金标记技术的应用
（1）免疫金标记技术是金探针作为抗体与组织和细胞内抗原发生抗原抗体特异性反应，使金颗粒附着在反应部位，定位准确，金颗粒电子密度很高，EM下清晰可辨。（2）商品化的金探针购买方便，价格低廉。根据实验要求可选择大小直径不同的胶体金颗粒（如3nm、5nm、10nm ……）（3）在超微结构水平上观察研究细胞表面和细胞器中的特异抗原和抗体等物质。也可对突触小泡内神经递质进行标记。

tem样品制备以及浓度要求

tem样品制备以及浓度要求tem样品制备以及浓度要求是生物、化学等领域实验室常见的操作步骤。

为了获得高质量的tem样品，制备过程和浓度控制至关重要。

本文将详细介绍tem样品制备的流程与方法，以及各种溶液的浓度要求。

一、tem样品制备概述tem样品制备主要包括样品处理、固定、切片、染色、洗涤与脱水、透明化与包埋、切片染色、观察与分析等环节。

在实际操作中，每个环节都需要严格把控，以保证样品的质量和制备效果。

二、制备流程与方法1.样品处理：首先从实验动物或植物中获取所需的组织样品，将其浸泡在生理盐水或PBS缓冲液中，以保持细胞形态。

2.样品固定：将处理好的样品转移到固定液中，常用的固定液有戊二醛、多聚甲醛等，固定液浓度为4%。

固定过程中，应确保样品充分浸泡，以达到良好的固定效果。

3.切片：将固定好的样品进行切片，常用的切片设备有旋转切片机和冷冻切片机。

切片厚度根据实际需求和观察仪器而定，一般为50-70μm。

4.染色：将切片转移到染色液中，染色液可以是Goat Solution、抗兔/鼠IgG等，浓度为1:50-1:100。

染色过程中，需注意温度和时间控制，以保证染色效果。

5.洗涤与脱水：染色后，用PBS缓冲液轻轻洗涤切片，去除多余的染色剂。

然后进行脱水，脱水液可以采用系列酒精（70%、80%、90%、100%），每个浓度停留3-5分钟。

6.透明化与包埋：将脱水后的切片转移到透明液中，常用的透明液有丙酮、乙酸乙酯等，浓度为1:1。

透明化后，将切片转移到包埋液中，包埋液可以选择丙烯酸、环氧树脂等，浓度为1:1。

7.切片染色：将包埋好的切片进行切片染色，染色液可以是Envision、DAB等，浓度为1:50-1:100。

染色过程中，注意控制温度和时间。

8.观察与分析：将染色后的切片放置在显微镜下观察，采集图像并进行分析。

观察指标包括细胞形态、组织结构、染色深度等。

三、浓度要求1.固定液浓度：4%2.染色液浓度：1:50-1:1003.洗涤液浓度：PBS缓冲液4.脱水液浓度：系列酒精（70%、80%、90%、100%）5.透明液浓度：1:16.包埋液浓度：1:1通过以上详细的tem样品制备流程和浓度要求，可以确保获得高质量的tem样品。

TEM样品的制备

复型材料和支持膜材料完全相同. 表面显微组织浮雕的复型膜,只能进行形
貌观察和研究,不能研究试样的成分分布和内部结构.
在材料研究中,复型法常用以下几种：
1 塑料一级复型 2 碳一级复型 3 塑料-碳二级复型 4 萃取复型
1 塑料一级复型
样品上滴浓度为1%的火棉胶醋酸戍酯溶液或醋酸纤维素丙酮溶液,溶液在样品表面展平,多余的用滤纸吸掉, 溶剂蒸发后样品表面留下一层100nm左右的塑料薄膜.
第一步,从大块试样上切取厚度小于0.5mm的薄块,一般用砂轮片、金属丝锯以酸液或磨料液体循环浸润或电火花切割等方法；
第二步,利用机械研磨、化学抛光或电解抛光把薄块减薄成0.1mm的薄片.最后才用上述的电解抛光和离子轰击等技术将薄片制成厚度小于 500nm的薄膜.
薄膜样品的制备比支持膜法和复型法复杂和困难得多.之所以采用如此繁杂的制备过程,目的全在于尽量避免或减少减薄过程引起的组织结构变化,所以应力求不用或少用机械方法.只有确保在最终减薄时能够完全去除这种损伤层的条件下才可使用研究表明,即使是最细致的机械研磨,应变损伤层的深度也达数十微米.
样品制备
要求：
1供TEM分析的样品必须对电子束是透明的,通常样
品观察区域的厚度以控制在50~300nm之间.
2所制得的样品还必须具有代表性以真实反映所分
析材料的某些特征.因此,样品制备时不可影响这些特征,如已产生影响则必须知道影响的方式和程度.
TEM应用的深度和广度一定程度上取决于试样制备技术.
凡用悬浮法在干燥过程中易产生凝聚的粉粒试样,也可用特制的喷雾器将悬浮液喷成极细的雾粒, 粘附在支持膜上.
a
b
a-白垩颗粒；
b-聚苯乙烯塑料球

tem样品制备以及浓度要求

tem样品制备以及浓度要求（最新版）目录一、引言二、tem 样品制备的方法1.薄膜的制备2.样品的切割3.样品的转移三、tem 样品的浓度要求1.薄膜的厚度2.样品的纯度四、结论正文一、引言tem（透射电子显微镜）是一种重要的科学研究工具，它可以帮助科学家们研究物质的微观结构。

在使用 tem 进行研究之前，我们需要制备出符合要求的样品。

那么，如何制备 tem 样品呢？它们又有哪些浓度要求呢？本文将对这些问题进行详细的解答。

二、tem 样品制备的方法1.薄膜的制备制备 tem 样品的第一步是制备薄膜。

通常情况下，我们会选择将样品材料均匀地涂布在载网上，然后通过真空干燥等方式去除样品材料中的溶剂，形成薄膜。

2.样品的切割制备好的薄膜需要进行切割，以得到适合进行 tem 观察的样品。

切割时，我们需要确保样品的厚度均匀，以便获得清晰的 tem 图像。

3.样品的转移切割好的样品需要转移到 tem 样品台上进行观察。

在转移过程中，我们需要确保样品的完整性和稳定性，以免影响观察结果。

三、tem 样品的浓度要求1.薄膜的厚度tem 样品的厚度要求通常在几十到几百纳米之间。

这是因为，tem 观察的是样品的表面结构，如果样品太厚，可能会影响观察结果的准确性。

2.样品的纯度tem 样品的纯度也非常重要。

如果样品中含有杂质，可能会对观察结果造成干扰。

因此，我们在制备样品时，需要尽量保证样品的纯度。

四、结论总的来说，制备 tem 样品需要严格按照步骤进行，并注意样品的浓度要求。

透射电子显微镜的样品制备方法

透射电子显微镜的样品制备方法透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）作为一种高分辨率的显微镜，被广泛应用于材料科学、生物医学等领域的研究中。

然而，为了进行TEM观察，样品制备过程是至关重要的。

本文将介绍几种常见的透射电子显微镜样品制备方法。

首先，最常见的样品制备方法之一是薄片法。

这种方法适用于研究固体材料，如金属、陶瓷和聚合物等，甚至是生物样品。

制备薄片的关键是薄化和抛光样品。

首先，将样品制备成小块或片状。

然后，使用切割机、研磨机或离心切片机将样品切割成适当大小的厚度。

接下来，使用细砂纸或悬浮液对样品进行抛光，直到获得适当的薄度和平滑度。

最后，使用溶剂将样品转移到TEM网状铜网上，以进行电子显微镜观察。

其次，还有一种常见的样品制备方法是焦散法。

与薄片法不同，焦散法主要用于观察液态材料。

例如，溶液中的纳米颗粒和生物分子等。

使用焦散法时，首先将样品放置在一块透明的碳膜上。

然后，用纯水或其他适当的溶液将样品冲洗干净。

在样品干燥之前，使用过滤纸或吸水纸轻轻吸取多余的溶剂。

一旦样品干燥，就可以将其放置在TEM中进行观察。

除了以上两种常见的样品制备方法外，还有一种称为离子切割法的技术。

这种方法主要适用于固体样品，特别是那些被称为厚度大于100nm的样品。

离子切割法的关键是使用离子束切割出更薄的样品层。

首先，将样品与一层保护层（常用的是金属膜）叠加在一起，以增强样品的结构稳定性。

然后，使用离子切割机将保护层以下的样品层剥离下来。

通过不断剥离，获得更薄的样品层。

最后，将样品放在TEM网状铜网上，准备进行电子显微镜观察。

需要注意的是，以上提到的样品制备方法仅代表了常见的几种，针对不同的研究目的和样品性质，还有许多其他的制备方法和技术。

对于研究者来说，选择适合自己研究的样品制备方法至关重要。

综上所述，透射电子显微镜的样品制备方法多种多样，如薄片法、焦散法和离子切割法等。

透射电镜细胞样品制备流程

透射电镜细胞样品制备流程透射电镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）是一种利用电子束穿透样品以获取高分辨率图像的仪器。

它是生物学、材料科学等领域研究中不可或缺的工具。

在细胞学研究中，使用透射电镜观察细胞样品的超高分辨率结构，可以帮助科学家深入了解细胞的组织结构和功能。

想要制备透射电镜的细胞样品，需要经过一系列的步骤和操作。

下面将详细介绍透射电镜细胞样品制备的流程。

1. 样品固定：首先，需要将待观察的细胞样品进行固定。

固定的目的是保持细胞的形态结构和细胞内部组织的稳定性。

常用的固定剂有戊二醛、醋酸乙酯和冰乙酸等。

固定剂的选择应根据细胞类型和实验目的来确定。

2. 组织切片：固定后的细胞样品需要进行切片。

切片可以通过机械切割或冷冻切割等方法进行。

切片时应注意样品的厚度，一般要求细胞切片的厚度在50-100纳米左右。

3. 样品染色：对于未染色的细胞样品，其对电子束的吸收能力较弱，因此需要对样品进行染色增强对比度。

常用的染色剂有重铀酸、铅酸和乙酸铀等。

染色剂的选择应根据样品的性质和实验要求来确定。

4. 薄膜制备：切片好的样品需要转移到透射电镜网格上进行观察。

通常，会使用薄膜来支撑样品，并使其保持平坦。

常用的薄膜材料有碳膜和聚合物膜等。

5. 网格制备：透射电镜网格是一种特殊的载体，用于固定细胞样品并放置在透射电镜中观察。

网格制备通常需要使用特殊的网格支架和胶水，将薄膜和网格固定在一起。

6. 清洗和干燥：制备好的细胞样品需要进行清洗和干燥处理。

清洗的目的是去除样品表面的杂质和残留物，以确保样品的纯净度。

干燥的目的是使样品完全干燥，以便在透射电镜中观察时不产生影响。

7. 观察和记录：制备好的细胞样品可以放入透射电镜中进行观察。

透射电镜通过透射电子束与样品相互作用，获取样品的高分辨率图像。

科学家可以根据观察到的图像来分析细胞的结构和功能，并进行记录和分析。

总结起来，透射电镜细胞样品的制备流程包括样品固定、组织切片、样品染色、薄膜制备、网格制备、清洗和干燥、观察和记录等步骤。

TEM制样方法及详细步骤

TEM制样方法及详细步骤TEM（Transmission Electron Microscope）是一种高分辨率的电子显微镜，主要用于观察物质的微观结构和形态。

其制样方法是获得高质量TEM样品的关键步骤之一、下面将详细介绍TEM制样的常用方法及其步骤。

1.选择合适的样品:首先需要选择合适的样品进行TEM观察。

常见的样品可以是金属、陶瓷、生物材料、纳米材料等。

2.样品固化:对于柔软或液态的样品，需要进行固化处理。

常见的方法包括冷冻固化、溶剂固化和等离子固化等。

冷冻固化适用于水基液体样品，而溶剂固化适用于有机溶液样品。

3.样品切片:将固化的样品切片成薄片，一般厚度为几百纳米至几十微米。

常见的切片工具包括超声切割机、切片机和玻璃刀等。

切片时需要保持样品的湿润状态，以避免切片过程中出现伪影。

4.转移样品到导电基片上:将样品切片转移到导电基片上。

常用的导电基片有铜网格、聚合物膜和碳膜等。

转移样品时要避免产生气泡和杂质，以确保样品的质量。

5.超薄化:将样品的厚度进一步减小到大约100纳米以下的范围，以适应TEM的观察条件。

常见的方法有机械薄化和离子薄化。

机械薄化实际上就是通过磨削和打磨的方式将样品的厚度减小，而离子薄化则是利用离子束对样品进行腐蚀，达到薄化的目的。

6.入射（预处理）:在TEM观察前，为了提高样品的对比度和可见性，通常需要进行预处理。

可能的预处理方法包括吸收染料、金属蒸镀和有机膜覆盖等。

7.放置样品:选择合适的TEM网格，将样品放置在网格孔口上。

网格可以选择自带孔口或膜孔口的类型，根据样品的性质和目的的不同进行选择。

8.观察和记录:将制备好的TEM样品放入TEM仪器中进行观察和记录。

在观察过程中需要调整TEM仪器的参数，如加速电压、聚焦和对比度等，以获得所需的高分辨率图像。

9.分析和解释:通过观察记录的TEM图像，对样品的微观结构和形态进行分析和解释。

可以进行晶体学分析、晶体缺陷分析、显微结构表征等。

tem透射电镜的样品制备方法

tem透射电镜的样品制备方法TEM（透射电子显微镜）是一种高分辨率的显微镜，可以观察到物质的微观结构和原子级的细节。

TEM样品的制备是获取高质量TEM图像的关键步骤之一、下面将介绍一些常用的TEM样品制备方法。

1.机械切片法:通过将所研究物质切片成非常薄的片，以便电子束能够透过样品。

这种方法适用于硬材料或质地坚硬的样品。

首先，使用机械工具（如剪刀）或精密切割仪来制备尺寸较小的薄片。

随后，使用刮刀等工具，将薄片轻轻地转移到透明的TEM样品网格上。

最后，用气吹干净样品，并使用显微镜检查成果。

2.离心沉淀法:使用这种方法，可以制备到具有较大颗粒的样品。

首先，将所研究的材料分散在适当的溶剂中，并用超声波处理来消除聚集物。

然后，使用离心机将样品离心，使颗粒沉淀在薄网格上。

最后，将样品干燥，并用透明胶带密封以保持样品稳定。

3.冻脱水法:这种方法适用于液态或可溶性样品。

首先，将样品溶解在适当的溶剂中，然后将溶液滴到一片透明的TEM样品网格上。

接下来，将样品迅速冷冻，使其形成冻结状态，并使用真空甚至液氮将水从样品中去除。

最后，将样品干燥，并用透明胶带密封以保持样品稳定。

4.薄膜制备法:对于一些材料，可以通过溅射、蒸镀、离子束制备等方法制备薄膜样品。

这种方法适用于需要研究材料的表面结构和形貌的情况。

通过这些技术，可以在TEM样品网格上制备出具有亚纳米尺寸的薄膜。

无论使用哪种方法，请确保样品制备过程中防止氧化或其他污染物的入侵，以保持样品的原始状态。

此外，制备过程中的轻柔操作以及对透明度的注意，也是获得高质量TEM样品的关键。

最后，使用TEM显微镜观察样品前，确保样品在真空或干燥的环境中，以避免图像的模糊或扭曲。

tem制样及测试流程

tem制样及测试流程英文回答：TEM Sample Preparation and Testing Procedure.Transmission electron microscopy (TEM) is a powerful imaging technique that allows scientists to visualize the structure of materials at the atomic level. To obtain high-quality TEM images, it is essential to properly prepare the sample. The following is a general procedure for TEM sample preparation and testing:1. Sample Collection and Preparation:The first step is to collect and prepare the sample to be imaged. The sample can be a thin film, a powder, or a biological specimen.For thin films, a section of the material is typically cut using a diamond knife or a focused ion beam(FIB).For powders, the sample is dispersed in a solvent and then deposited onto a TEM grid.For biological specimens, the sample is typically fixed, dehydrated, and embedded in a resin.2. Sample Mounting:Once the sample is prepared, it is mounted on a TEM grid. The grid is a thin metal support that holds the sample in place during imaging.The sample is typically attached to the grid using a conductive adhesive or a carbon coating.3. TEM Imaging:The prepared sample is then inserted into the TEM. The TEM uses a beam of electrons to illuminate the sample, and the resulting image is projected onto a phosphor screenor a digital camera.The magnification of the TEM image can be varied by adjusting the strength of the electron beam.4. Image Analysis:The TEM images can be analyzed to determine the structure of the material. The images can be used to measure the size, shape, and orientation of atoms and molecules.The images can also be used to identify defects and other features in the material.中文回答：TEM制样及测试流程。

透射电镜样品制备方法

透射电镜样品制备方法透射电镜（Transmission Electron Microscope，TEM）是一种能够观察物质内部微观结构的高分辨率显微镜，广泛应用于材料科学、生物学、纳米技术等领域。

而透射电镜样品的制备质量直接影响到后续的观察结果。

因此，制备高质量的透射电镜样品至关重要。

下面将介绍一些常用的透射电镜样品制备方法。

首先，对于生物样品的制备，常用的方法是冷冻切片技术。

这种方法能够保持生物样品的原始结构，避免了传统化学固定和脱水过程中可能引起的伪形态。

在冷冻切片过程中，样品被快速冷冻，并在低温下切割成极薄的切片，然后通过透射电镜观察。

这种方法适用于观察生物细胞、组织等样品。

其次，对于材料样品的制备，常用的方法是机械切割和离子蚀刻。

机械切割是指利用超薄切片机或离心切片机将材料切割成极薄的切片，然后通过透射电镜观察。

而离子蚀刻则是利用离子束对材料进行加工，形成极薄的样品。

这两种方法适用于观察金属、陶瓷、半导体等材料样品。

另外，对于纳米材料的制备，常用的方法是原位制备技术。

这种方法通过在透射电镜下直接在样品表面进行原位制备，如原位成膜、原位合成等，可以观察到纳米材料的生长过程和结构特征。

这种方法适用于观察纳米颗粒、纳米线、纳米片等样品。

总的来说，透射电镜样品的制备方法多种多样，选择合适的制备方法需要根据具体样品的性质和要求来确定。

在制备过程中，需要注意样品的预处理、切割、薄化等步骤，确保样品的质量和结构完整。

通过精心制备的透射电镜样品，可以获得清晰、准确的观察结果，为后续的科研工作提供可靠的数据支持。

在透射电镜样品制备过程中，还需要注意操作规范、安全防护等问题，确保实验过程安全可靠。

同时，不同样品的制备方法可能存在差异，需要根据具体情况进行调整和改进。

希望本文介绍的透射电镜样品制备方法能够为相关科研工作者提供一些参考和帮助，促进透射电镜技术的应用和发展。