比色法测硝酸盐

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植物硝酸盐含量的测定(紫外光度法)
一、实验试剂
1. 100mg/L硝态氮标准溶液:精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221g溶于蒸馏水中,定容至1000ml。

2. 5%水杨酸─硫酸溶液:称取5g水杨酸溶于100ml比重为1.84的浓硫酸中,搅拌溶解后,贮于棕色瓶中,置冰箱保存一周有效。

3. 8%氢氧化钠溶液:80g氢氧化钠溶于1L蒸馏水中即可。

二、操作步骤
1.样品中可溶性蛋白的提取
取一定量的植物材料剪碎混匀后,精确称取2-3克分别放入三支刻度试管中,加入10ml 无离子水,用玻璃塞封口,置入沸水浴中提取30分钟,到时间后取出,用自来水冷却,将是取液过滤到25ml容量瓶中,并反复冲洗残渣,最的定容至刻度。

2.标准曲线的绘制
分别吸取0.00、10.00、20.00、30.00、40.00、50.00ml标液于50ml试管中定容,配制成浓度分别为0、20、40、60、80、100mg/ml的葡萄糖溶液。

3.可溶性蛋白的测定
吸取0.2ml溶液,加入0.8ml水杨酸,混匀(黄色),置室温下20分钟,再慢慢加入9. 5 ml 8%NaOH溶液,待冷却至室温后,在410nm测定吸光度。

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