食品中亚硝酸盐测定实验
实验二食品中亚硝酸盐含量的测定
实验二食品中亚硝酸盐含量的测定
一、实验目的
1. 了解亚硝酸盐的危害，掌握测定食品中亚硝酸盐含量的方法。
2. 掌握色谱法和分光光度法的原理和操作方法，学会利用这两种方法测定食品中亚硝酸盐的含量。
二、实验原理
1. 亚硝酸盐的危害
亚硝酸盐是一种常见的致癌物质，它在在一定条件下可以转化为亚硝胺，而亚硝胺是一种强致癌物。人体摄入过量的亚硝酸盐会导致亚硝胺的形成，从而增加患癌症的风险。
2. 色谱法测定亚硝酸盐含量
色谱法测定亚硝酸盐含量的原理是利用反相色谱分离亚硝酸盐，并通过紫外检测器检测样品中亚硝酸盐的含量。具体步骤如下：
（1）样品制备：将待测样品加入水中，同时加入明矾和硫酸铜，使亚硝酸盐被还原为亚硝酸钠。
（2）色谱柱处理：用反相色谱柱，在样品进样口处注入样品，经过一定的进样残留时间后，以一定的流速进行柱洗脱。柱洗脱时，先用无机盐水拉平基线，再用有机溶剂进行洗脱。
（3）检测：用紫外检测器检测亚硝酸盐的吸光度，从而得到亚硝酸盐的含量。
分光光度法测定亚硝酸盐含量的原理是利用亚硝酸盐和硫酸铁（Ⅱ）发生化学反应，在一定的酸性条件下生成的重氮化合物与磺基苯二胺反应，生成紫色产物，其最大吸收波长为540 nm。具体步骤如下：
（2）反应：加入磺基苯二胺后，放置反应10-30min，其间温度保持在5℃-25℃之间。
（3）检测：利用分光光度计测定紫色产物在540nm处的吸光度，计算出亚硝酸盐的含量。
三、实验步骤
1. 应注意的问题
（1）亚硝酸钠充分还原后，一定要在酸性环境下进行测定。
（2）在反应中要控制好温度，以保证反应的准确性。
食品中亚硝酸盐的检测方法 -
食品中亚硝酸盐的检测方法 -
食品中亚硝酸盐的检测方法
方法一：亚硝酸盐快速检测管使用说明：
方法原理：按照国标GB/T 5009.33做成的速测管，与标准色卡比较定量。操作方法：
1. 食盐中亚硝酸盐的快速检测及食盐与亚硝酸盐的快速鉴别：用袋内附带小勺取食盐1平勺，加入到检测管中，加入蒸馏水或纯净水至1ml刻度处，盖上盖，将固体部分摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为食盐中亚硝酸盐的含量mg/ kg，（国标规定食盐（精盐）中亚硝酸盐的限量卫生标准应≤2 mg/kg）。当样品出现血红色且有沉淀产生或很快退色变成黄色时，可判定亚硝酸盐含量相当高，或样品本身就是亚硝酸盐。
2. 液体样品检测：直接取澄清液体样品1ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，找出与检测管中溶液颜色相同的色阶，该色阶上的数值即为样品中亚硝酸盐的含量mg/L（以NaNO2计）。（牛乳及豆浆也可直接检测，结果不得超过0.25mg/L ，有颜色的液体样品可加入一些活性炭脱色过滤后测定）。
3. 固体或半固体样品检测：取粉碎均匀的样品1.0g或1.0ml至10ml比色管中，加蒸馏水或去离子水（纯净水）至刻度，充分震摇后放置，取上清液（或过滤或离心得到的上清液）1.0ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为样品中亚硝酸盐的含量mg/ kg，L（以NaNO2计）。如果测试结果超出色板上的最高值，可定量稀释后测定，并在计算结果时乘上稀释倍数（如从10ml比色管中取出1.0mL转入另一支10ml比色管中，加水至刻度，从中取1.0mL加入到检测管中测定，测试结果乘上100（倍稀释）即为样品中亚硝酸盐的含量。
食品中亚硝酸盐含量的测定
第二季度
第三季度
第四季度
分光光度法
利用亚硝酸盐与特定试 剂反应生成有色化合物 ，通过分光光度计测定 其吸光度，从而计算亚 硝酸盐含量。该方法操 作简便、快速，但易受 其他物质干扰。
离子色谱法
利用离子交换原理，将 亚硝酸盐分离并测定其 浓度。该方法准确度高 、选择性好，但设备成
本较高。
电化学法
利用亚硝酸盐在电极上 发生氧化还原反应，通 过测量电流或电势变化 来计算亚硝酸盐含量。 该方法灵敏度高、响应 速度快，但电极易受污
水质监测
亚硝酸盐是水体污染的重要指标之一，对其含量进行测定可评估水 体的污染程度。
大气污染监测
亚硝酸盐可与大气中的某些污染物发生反应，通过测定其含量可间 接反映大气污染状况。
土壤污染评估
土壤中的亚硝酸盐含量可反映土壤的污染状况，为土壤修复和治理提 供依据。
在其他领域的应用及拓展
医药领域
化工领域
亚硝酸盐在医药领域具有一定的应用价值 ，例如可用于制备某些药物或作为药物中 间体。
食品中亚硝酸盐含量 的测定
目录
CONTENTS
• 引言 • 实验材料与方法 • 亚硝酸盐含量的测定步骤 • 结果分析与讨论 • 亚硝酸盐测定的应用与拓展 • 结论与展望
01 引言
目的和背景
目的
准确测定食品中亚硝酸盐含量，以保 障食品安全和消费者健康。
食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法
方法一：亚硝酸盐快速检测管使用说明：
方法原理：按照国标GB/T 5009.33做成的速测管，与标准色卡比较定量。
操作方法：
1. 食盐中亚硝酸盐的快速检测及食盐与亚硝酸盐的快速鉴别：用袋内附带小勺取食盐1
平勺，加入到检测管中，加入蒸馏水或纯净水至1ml刻度处，盖上盖，将固体部分摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为食盐中亚硝酸盐的含量mg/ kg，（国标规定食盐（精盐）中亚硝酸盐的限量卫生标准应≤2mg/kg）。当样品出现血红色且有沉淀产生或很快退色变成黄色时，可判定亚硝酸盐含量相当高，或样品本身就是亚硝酸盐。2. 液体样品检测：直接取澄清液体样品1m l加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，找出与检测管中溶液颜色相同的色阶，该色阶上的数值即为样品中亚硝酸盐的含量mg/L（以NaNO2计）。（牛乳及豆浆也可直接检测，结果不得超过
0.25mg/L ，有颜色的液体样品可加入一些活性炭脱色过滤后测定）。
3. 固体或半固体样品检测：取粉碎均匀的样品1.0g或1.0ml至10ml比色管中，加蒸馏水或去离子水（纯净水）至刻度，充分震摇后放置，取上清液（或过滤或离心得到的上清液）1.0ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为样品中亚硝酸盐的含量mg/kg，L（以NaNO2计）。如果测试结果超出色板上的最高值，可定量稀释后测定，并在计算结果时乘上稀释倍数（如从10ml比色管中取出1.0mL转入另一支10m l 比色管中，加水至刻度，从中取1.0mL加入到检测管中测定，测试结果乘上100（倍稀释）即为样品中亚硝酸盐的含量。
食品中亚硝酸盐含量测定
硝酸盐、亚硝酸盐：肉制品加工
防腐剂：肉毒梭状芽胞杆菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌…… 发色剂：
亚硝酸盐食物中毒
定义：肠源性青紫症 食用了含硝酸盐及亚硝酸盐的蔬菜或误食亚硝酸盐后引起的高铁血红蛋白血症 症状： 潜伏1～3h 头痛、头晕、无力、胸闷、气短、嗜睡、心悸、恶心、呕吐、腹痛、腹泻，口唇、指甲及全身皮肤、粘膜发绀等 严重者心率减慢、心律不齐、昏迷、惊厥等，常因呼吸循环衰竭而死亡 急救处理： 催吐、洗胃和导泻以排出毒物；美蓝、维生素C、葡萄糖联合解毒；对症治疗 预防： 保持蔬菜新鲜，禁食腐烂变质蔬菜，不要短时间进食大量含硝酸盐较多的蔬菜 勿食大量刚腌的菜，腌菜时盐应稍多，至少待腌制15天以上再食用 肉品加工严格按照国家限量使用标准 不喝苦井水，不用苦井水煮饭、煮粥，尤其勿存放过夜 妥善保管好亚硝酸盐，防止误食中毒
食品中亚硝酸盐限量指标GB2762-2005
食品
限量（NaNO2计）（mg/kg）
粮食（大米、面粉、玉米）
3
蔬菜
4
鱼类
3
肉类
3
蛋类
5
酱腌菜
20
乳粉
2
食盐（以NaCl计）
2
食品中亚硝酸盐含量测定
实验目的： 熟悉食品中亚硝酸盐含量的卫生标准 掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法 实验原理：格里斯试剂比色法
食物中亚硝酸盐含量的测定
食物中亚硝酸盐含量的测定
亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，主要指亚硝酸钠，为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。以下是一些测定食物中亚硝酸盐含量的方法：
1. 分光光度法：这是一种常用的分析方法，基于亚硝酸盐在特定波长下的吸光度来定量。将食物样品与化学试剂反应，形成一种有色化合物，然后通过分光光度计测量其吸光度，并与标准曲线进行比较，从而确定亚硝酸盐的含量。
2. 离子色谱法：这是一种分离和分析离子的技术，可用于测定亚硝酸盐。食物样品经过前处理后，通过离子色谱仪进行分离和检测，根据保留时间和峰面积来定量亚硝酸盐的含量。
3. 气相色谱法：该方法适用于分析挥发性化合物，如亚硝酸盐。食物样品经过衍生化处理，将亚硝酸盐转化为易挥发的衍生物，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。
4. 酶联免疫吸附法：这是一种基于抗体-抗原相互作用的分析方法。使用特异性的亚硝酸盐抗体与食物样品中的亚硝酸盐结合，然后通过酶标抗体或显色底物进行检测。
无论选择哪种方法，都需要根据具体的实验条件和要求进行适当的样品前处理，以去除干扰物质并提取出亚硝酸盐。同时，应该使用标准物质进行校准和质量控制，确保测量结果的准确性和可靠性。
这些方法通常需要专业的实验室设备和技术，因此如果你需要测定食物中亚硝酸盐的含量，建议咨询专业实验室或相关机构。
实验室食品中亚硝酸盐的测定盐酸萘乙二胺法亚硝酸盐测定
实验室食品中亚硝酸盐的测定盐酸蔡乙二胺法亚硝酸盐测
1范围
本标准规定了食品中亚硝酸盐的测定方法。适用于食品中亚硝酸盐的测定。亚硝酸盐方法检出限为Img/kg。
2原理
试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸蔡乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。
3试剂
3.1亚铁氟化钾溶液:称取106.Og亚铁氟化钾[KFe(CN)6・3比0],用水溶解,并稀释至IoOon1.1.。
3.2乙酸锌溶液：称取220.Og乙酸锌[Zn(CHsCOO)2、2⅛0],加30m1.冰乙酸溶于水，并稀释至1000m1.o
3.3饱和硼砂溶液：称取5.Og硼酸钠(Na2BQ7∙IOH2O),溶于IOOm1.热水中，冷却后备用。
3.4对氨基苯磺酸溶液(4g∕1.):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于IOOnI1.20%盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。
3.5盐酸蔡乙二胺溶液(2g∕1.)：称取0.2g盐酸蔡乙二胺，溶解于IOOm1.水中，混匀后，置棕色瓶中，避光保存。
3.6亚硝酸钠标准溶液：准确称取0∙IOOOg于硅胶干燥器中
干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入50OnI1.容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于200Ug的亚硝酸钠。
3.7亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.OOm1.,置于20OnI1.容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.Oug亚硝酸钠。
4仪器
4.1小型绞肉机。
4.2分光光度计。
5分析步骤
5.1试样处理
称取5.Og经绞碎混匀的试样，置于50m1.烧杯中，加12.5m1.硼砂饱和液，搅拌均匀，以70。C左右的水约300m1.将试样洗入50Om1.容量瓶中，于沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加入5m1.亚铁氟化钾溶液，摇匀，再加入5m1.乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置0.5h,除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30m1.,滤液备用。
食品中亚硝酸盐的测原理
食品中亚硝酸盐的测原理
亚硝酸盐（Nitrite）是一种常见的食品添加剂，主要用于防腐和抗氧化作用。测定食品中的亚硝酸盐含量可以采用多种方法，其中常见的方法是亚硼酸-镉还原法和亚硫酸盐法。
1. 亚硼酸-镉还原法：
- 原理：亚硝酸盐与亚硼酸在酸性条件下反应生成氮气。氮气进一步与镉盐反应生成镉-亚硝酸盐络合物，其颜色可以通过分光光度法测定。
- 测定步骤：
a. 食品样品经适当操作后与酸性亚硼酸溶液反应，将亚硝酸盐还原为氮气。
b. 向溶液中加入过量的硫脲或肼，并加入酸性亚硝酸铋溶液，使其与氮气反应生成红色络合物。
c. 通过分光光度法测定络合物的吸光度，从而确定亚硝酸盐的含量。
2. 亚硫酸盐法：
- 原理：亚硝酸盐与亚硫酸钠反应生成硝酸盐和硫酸盐，通过反应后剩余的亚硫酸盐的浓度来测定亚硝酸盐的含量。
- 测定步骤：
a. 食品样品经适当操作后与亚硫酸钠溶液反应，将亚硝酸盐与亚硫酸钠反应生成硝酸盐和硫酸盐。
b. 使用碘液滴定剩余的亚硫酸盐，直至生成蓝色终点。
c. 根据滴定过程中消耗的碘液的体积，计算亚硝酸盐的含量。
总结而言，测定食品中亚硝酸盐的原理是通过化学反应将亚硝酸盐转化为其他物质，然后利用化学反应的特性或颜色的变化来测定亚硝酸盐的含量。
香肠中亚硝酸盐含量测定
二、亚硝酸钠含量的检测原理
样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下亚 硝酸盐与氨基苯磺酸重氮后，再与N-1-萘基乙二胺 偶合形成紫红色染料，在538nm处有最大的吸收通 过测定其吸光度与标准比较定量。
三、亚硝酸盐的护色作用
亚硝酸盐所产生的一氧化氮与肉类中的肌红蛋白和 血红蛋白结合，生成一种具有鲜艳红色的亚硝基肌 红蛋白和亚硝基血红蛋白所致。
香肠中亚硝酸含量的检测
一、香肠中的亚硝酸盐的提取
取绞碎的火腿肠5g，置于50ml烧杯中，加12.5ml饱 和硼砂溶液，搅拌均匀。取70℃左右的水约300ml， 将试样全部洗入500ml容量瓶中，于沸水浴中加热 15min，取出后冷却至室温，然后一面转动一面加 入5ml亚铁氰化钾溶液，摇匀。再加入5ml乙酸锌， 加水至刻度，放置30min除去上层脂肪，清夜用滤 纸过滤，弃去初滤液30ml。
系列1
线性 (系列1)
八、数据处理
A 1000 0.6539 1000 X 1.3mg / k g V2 20 m 1000 5 1000 V1 200
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
X—样品中亚硝酸盐的含量 mg/kg m—样品质量 5g A—测定用样液中亚硝酸盐的质量 6ug V —样液总体积 200mL V —测定用样液体积 20mL
1 2
九、实验结论
食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法可以通过以下几种方式进行：
1. 硝酸还原法：该方法是将食品样品经过预处理后，加入硫酸与碘化钾混合后还原生成亚硝酸，再通过测定溶液中的亚硝酸盐含量来确定样品中的亚硝酸盐含量。
2. 色谱法：色谱法是利用高效液相色谱或气相色谱的原理和技术，将食品样品中的亚硝酸盐分离出来，并通过不同检测器来测定其含量。
3. 光谱法：光谱法是通过红外光谱或紫外-可见光谱等光学方法，对食品样品进行扫描或测定，通过峰的强度来确定样品中亚硝酸盐的含量。
4. 电化学法：电化学法是利用电化学技术，将食品样品中的亚硝酸盐转化成电化学信号，再通过电极的测定来确定亚硝酸盐的含量。
需要注意的是，不同的食品样品可能需要不同的预处理方法，以及不同的仪器和设备来进行测定。同时，还需要根据国家或地区的相关标准来进行测定，以确保测定结果的准确性和可靠性。
食品中亚硝酸盐的检测
食品中亚硝酸盐的检测
前言
大家都知道过量的亚硝酸盐会对我们的身体造成一定的损害，甚至会致癌。亚硝酸盐经常存在于过夜的饭菜，腌制的泡菜或者肉及肉制品之中。我国食品添加剂的标准规定在肉制品中亚硝酸盐的使用量不得超过0.15g/kg，残留量不得超过50mg/kg。那么亚硝酸盐到底该如何检测呢，下面我们就一起来看看吧!
亚硝酸盐的检测（分光光度法，）
试剂配制
1.亚铁氰化钾溶液（106g/L）:称取106.0g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。
2.乙酸锌溶液（220g/L）：称取220.0g乙酸锌，先加20mL冰乙酸溶解，用水稀释至1000mL。
3.饱和硼砂溶液（50g/L）：称取5.0g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。
4.盐酸（20%）：量取20ml盐酸，用水稀释至100ml。
5.对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于20%盐酸中，混匀放棕色瓶中避光保存。
6.盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）:称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100ml水中，混匀后放入棕色试剂瓶避光储存。
样品处理
1.称取5g样品(精确至0.001g),置于250ml具塞锥形瓶中，加1
2.5ml 50g/L 饱和硼砂溶液，70℃左右的热水约150ml，混匀后放沸水浴中加热15分钟后取出放入冷水中冷却，冷却至室温。
2.将试液全部移入200ml的容量瓶中，加5ml的106g/l亚铁氰化钾溶液，混合均匀后再加220g/ml的乙酸锌溶液5ml混匀（沉淀样品中蛋白质）。定容后摇晃均匀静置30分钟（沉淀脂肪）。
食品安全亚硝酸盐与硝酸盐的测定
（一）样品的制备
将缩分后的样品四分法分成二份，一份作留样 备用（>100g），另一份切细后用捣碎机捣碎 混匀供分析(>50g)。
当送样量不能满足留样要求时，全部粉碎混匀， 在保证分析样用量后，全部用作留样。
（二）样品的保存
（3）亚硝酸钠总量的测定
吸取 20mL 还原后的样液于 50mL 比色管 中，分别加入 2mL 对氨基苯磺酸溶液，混 匀，静置 3min ～ 5min 后各加入 1mL 盐酸 萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置 15min ，用 2cm 比色杯，以空白管调节零 点，于波长 538nm 处测吸光度。代入标准 曲线计算。
（二）试剂空白制备
于50mL烧杯中，加12.5mL硼砂饱和液， 以70℃ 左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中， 于沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。然 后一面转动，一面加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇 匀，再加入5mL乙酸锌溶液。加水至刻度，摇匀， 放置0.5h，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL ，滤液备用。
（四）镉柱的装填
先用水装满镉柱玻璃管，然后装入 2cm 高的玻璃棉做垫，将玻璃棉压向 柱底时， 应将其中所包含的空气全部 排出。
在轻轻敲击下加入海绵状镉至 8cm ～ 10cm 高，上面再用 1cm 高的玻璃棉 覆盖，上置一贮液漏斗。
泡菜中亚硝酸盐的测定
泡菜中亚硝酸盐的测定
引言
泡菜是一种传统的发酵食品，由蔬菜经过一定时间的发酵制作而成。在泡菜的制作过程中，亚硝酸盐的形成是不可避免的。亚硝酸盐是一种常见的食品添加剂，主要用于防止食品变质和抑制细菌生长。然而，过量的亚硝酸盐摄入可能对人体健康造成危害，因此泡菜中亚硝酸盐的准确测定至关重要。
本文将介绍一种常用的测定泡菜中亚硝酸盐的方法——重铁法。该方法简单、准确且经济实用，已被广泛应用于食品行业。
实验材料和方法
实验材料
•来自不同厂家的泡菜样品
•0.1mol/L盐酸
•0.5%硫酸亚铁溶液
•银氨溶液
•氨水
•玻璃仪器：容量瓶、移液管、试管等
实验方法
1.取适量泡菜样品，并将其剁碎。
2.移取10g泡菜样品，加入容量瓶中。
3.加入50ml盐酸，使用盖子密封容量瓶，摇匀，使泡菜完全溶解。
4.将溶液过滤，以去除固体残渣。
5.取过滤液5ml，加入试管中。
6.加入2-3滴硫酸亚铁溶液，轻轻摇匀。
7.在加入过滤液的另一支试管中，加入适量的银氨溶液。
8.加入氨水至颜色变淡，持续加入氨水，直至颜色完全消失。
9.将上述两个试管放置于白色背景下，比较颜色的深浅。
结果和讨论
根据上述实验方法，我们测定了来自不同厂家的泡菜样品中亚硝酸盐的含量。通过比较试管中颜色的深浅，我们可以初步判断泡菜中亚硝酸盐的含量。
根据实验结果，我们可以得出以下结论： - 样品A的亚硝酸盐含量最低，样品B次之，样品C最高。 - 样品C的亚硝酸盐含量超过了食品安全标准。
然而，仅凭肉眼观察颜色的深浅是不够准确的。为了获得更精确的测量结果，我们可以使用分光光度计来测定泡菜中亚硝酸盐的含量。
食品中亚硝酸盐的测定实验报告
食品中亚硝酸盐的测定实验报告
一、实验目的
实验旨在通过化学方法测定食品中亚硝酸盐的含量，以了解食品的安全性，保障公众健康。亚硝酸盐是一种常见的食品添加剂，适量添加有助于保持食品的色泽和口感，但过量添加或使用不当可能导致人体健康问题。因此，准确测定食品中亚硝酸盐的含量非常重要。
二、实验原理
亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定。试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,外标法测得亚硝酸盐含量。
三、试剂
（一）、试剂配制（以下试剂均为实验室协助配置）
1、亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾,用水溶解,并稀释至1000mL。
2、乙酸锌溶液(220g/L):称取220.0g乙酸锌,先加30mL冰乙酸溶解,用水稀释至1000mL。
3、饱和硼砂溶液(50g/L):称取5.0g硼酸钠,溶于100mL热水中,冷却后备用。
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20%盐酸中,混匀,置棕色
瓶中,避光保存。
5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,混匀,置棕色瓶中,
避光保存。
（二）、标准溶液配置
1、亚硝酸钠标准溶液(200μg/mL,以亚硝酸钠计):准确称取0.1000g于110 ℃~120 ℃干燥恒重的亚硝酸钠,加水溶解,移入500mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。
2、亚硝酸钠标准使用液(5.0μg/mL):临用前,吸取2.50mL亚硝酸钠标准溶液,置于100mL容
食品中亚硝酸盐测定(盐酸萘乙二胺法)实验
实验4 食品中亚硝酸盐测定（盐酸萘乙二胺法）
一、实验原理
制品中加入的亚硝酸盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应，生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白，使肉制品有美观的颜色。同时亚硝酸盐也是一种防腐剂，可抑制微生物的增殖。由于蛋白质代谢产物中仲胺基与亚硝酸反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝胺，因此，亚硝酸盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行。亚硝酸盐的测定方法主要是重氮偶合比色法，此外可与荧光胺偶合，测定其荧光吸收强度，或衍生后用气相色谱法测定。
自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与盐酸2—萘乙二胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。其颜色的深度与样品种亚硝酸含量成正比，故可比色测定。
二、试剂和器材
①饱和硼砂溶液：5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中，冷却备用。
②亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并稀释至1000mL。
③乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌，加30mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000mL。
④果蔬抽提液：溶解50g氯化汞和50g氯化钡于1000mL重蒸水中，用浓盐酸调整到pH值为1。
⑤氢氧化铝乳液：溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中，滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀。用蒸馏水反复
洗涤，真空抽滤，直至洗液分别用氯化钡溶液检验不发生浑浊。取下沉淀物，加适量重蒸水使之呈薄糨糊状，捣拌均匀备用。
⑥0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%的盐酸溶液中，闭关保存。
⑦0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL重蒸水中。
食品中亚硝酸盐测定盐酸萘乙二胺法实验
实验4 食品中亚硝酸盐测定盐酸萘乙二胺法
一、实验原理
制品中加入的亚硝酸盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应;生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白;使肉制品有美观的颜色..同时亚硝酸盐也是一种防腐剂;可抑制微生物的增殖..由于蛋白质代谢产物中仲胺基与亚硝酸反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝胺;因此;亚硝酸盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行..亚硝酸盐的测定方法主要是重氮偶合比色法;此外可与荧光胺偶合;测定其荧光吸收强度;或衍生后用气相色谱法测定..
自样品中抽提分离出亚硝酸盐;亚硝酸盐在酸性条件下;与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐;此重氮盐再与盐酸2—萘乙二胺试剂发生偶合反应;生成紫红色偶氮化合物..其颜色的深度与样品种亚硝酸含量成正比;故可比色测定..
二、试剂和器材
①饱和硼砂溶液：5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中;冷却备用..
②亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水;并稀释至1000mL..
③乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌;加30mL冰醋酸溶于水;并稀释至1000mL..
④果蔬抽提液：溶解50g氯化汞和50g氯化钡于1000mL重蒸水中;用浓盐酸调整到pH值为1..
⑤氢氧化铝乳液：溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中;滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀..用蒸馏水反复洗
涤;真空抽滤;直至洗液分别用氯化钡溶液检验不发生浑浊..取下沉淀物;加适量重蒸水使之呈薄糨糊状;捣拌均匀备用..
⑥0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸;溶于100mL20%的盐酸溶液中;闭关保存..
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实验4 食品中亚硝酸盐测定（盐酸萘乙二胺法）
一、实验原理
制品中加入的亚硝酸盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应，生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白，使肉制品有美观的颜色。同时亚硝酸盐也是一种防腐剂，可抑制微生物的增殖。由于蛋白质代谢产物中仲胺基与亚硝酸反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝胺，因此，亚硝酸盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行。亚硝酸盐的测定方法主要是重氮偶合比色法，此外可与荧光胺偶合，测定其荧光吸收强度，或衍生后用气相色谱法测定。
自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与盐酸2—萘乙二胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。其颜色的深度与样品种亚硝酸含量成正比，故可比色测定。
二、试剂和器材
①饱和硼砂溶液：5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中，冷却备用。
②亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并稀释至1000mL。
③乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌，加30mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000mL。
④果蔬抽提液：溶解50g氯化汞和50g氯化钡于1000mL重蒸水中，用浓盐酸调整到pH值为1。
⑤氢氧化铝乳液：溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中，滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀。用蒸馏水反
复洗涤，真空抽滤，直至洗液分别用氯化钡溶液检验不发生浑浊。取下沉淀物，加适量重蒸水使之呈薄糨糊状，捣拌均匀备用。
⑥%对氨基苯磺酸溶液：称取对氨基苯磺酸，溶于100mL20%的盐酸溶液中，闭关保存。
⑦%盐酸萘乙二胺溶液：称取盐酸萘乙二胺，溶于100mL重蒸水中。
⑧亚硝酸钠标准溶液（5微克每毫升）：精确称取亚硝酸铵，以重蒸水定容到500mL。再吸取此溶液25mL，
以重蒸水定容到1000mL，此工作液每毫升含亚硝酸钠5微克。
分光光度计，组织捣碎机。
三、试验步骤
1、样品处理
果蔬类样品用组织捣碎机打浆。称取适量浆液（视式样中硝酸盐含量而定，如青刀豆取10g，桃子、菠萝取30g），置于500mL容量瓶中。加200mL水，摇匀，再加100mL果蔬抽提液。震荡1h，加L氢氧化钠溶液40mL，用重蒸水定容后立即过滤。然后取60mL滤液于100mL容量瓶中，加氢氧化铝液至刻度。用滤纸过滤，滤液应为无色透明。
2、 亚硝酸钠标准曲线的绘制：
用移液管精确吸取亚硝酸钠标准液, , , , , , , ，于一组50mL 容量瓶中，各加水至25mL ，分别加入%对氨
基苯磺酸溶液，摇匀。静置3到5分钟后，加入%盐酸萘乙二胺溶液，并用重蒸水定容到50mL ，摇匀，静置15min 后，用分光光度计在540nm 波长下测定吸光度，以蒸馏水为空白。以测得的各比色液的吸光度对应的亚硝酸浓度作曲线。比色液中亚硝酸钠浓度为0到微克每毫升时，两者呈直线关系。本法的标准偏差为正负%。
3、 亚硝酸盐的测定
取40mL 待测液于50mL 容量瓶中，加%对氨基苯磺酸溶液，摇匀。静置3到5分钟后，加入%盐酸萘
乙二胺溶液，比色测定，记录吸光度。从标准曲线上差得相应的亚硝酸钠浓度，计算试样中亚硝酸盐（以亚硝酸钠计）的含量。
4、
结果计算
果蔬类中亚硝酸盐含量=50150040100010001⨯⨯⨯⨯m X （mg/kg ） 式中X 为有测得的吸光度值在标准曲线上对应的硝酸钠质量浓度，mL g /μ；m 为样品质量，g 。