食品中亚硝酸盐的测定
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分装,1瓶/大组
3、饱和硼砂溶液:称取5.0g硼酸钠(Na2B0Байду номын сангаас·10H20),溶于100 mL热水中,冷却后备用。
分装,1瓶/大组
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4 g对氨基苯磺酸,溶于100 mL 20%的盐酸中,置棕色瓶中混匀,避光保存。
分装,1瓶/大组
5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2克盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,避光保存。有致癌作用
???????????????m×——× 1000
V1
式中:
X—试样中亚硝酸盐的含量,mg/kg;
V1—试样处理液总体积,mL;
V2—测定用样液体积,mL;
m—试样质量,g;
A—试样测定液中亚硝酸盐的质量,μg;
部分食品中亚硝酸盐的限量标准(以NaNO2计)
品名限量标准mg/kg
食盐(精盐)、牛乳粉≤2
(3)过滤:加水定容,放置,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤,弃去
初滤液30mL,滤液备用。
2标准曲线的绘制和样品的测定
取10个25ml具塞比色管,标号,按下列步骤操作:
管号
0
1
2
3
4
5
6
7
8
样
标准溶液
(ml)
相当亚硝酸钠(μg)
对氨基苯磺酸(ml)
各管均加1ml(混匀,静置3-5min)
盐酸萘乙二胺(ml)
九、讨论
上层脂肪用滴管吸除。
结果保留2位有效数字。
各管均加
加水至刻度(25 ml ),混匀,静置15min,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度A,绘制标准曲线。同时做试剂空白。
六、数据记录
管号
0
1
2
3
4
5
6
7
8
样液
试剂空白
A538
七、数据处理
按下式计算:
A
????????????????X=? ———————×1000
??????????????????????????v2
3、硼砂饱和液的作用:①吸收亚硝酸盐的NO2,使亚硝酸盐的总量不会因加热而减少;②蛋白质沉淀剂。
4、亚铁氰化钾溶液和乙酸锌(可用硫酸锌代替)作用:蛋白质沉淀剂。原因:亚铁氰化钾溶液和乙酸锌反应,生成亚铁氰化锌沉淀,从而与蛋白共沉淀。
5、清液用滤纸过滤后,要弃去初滤液30ml。原因:滤纸中含有少量铵盐,弃去初滤液是为了除去滤纸中铵盐的干扰。
香肠(腊肠)香肚、酱腌菜、广式腊肉≤20
鲜肉类、鲜鱼类、粮食≤3
肉制品、火腿肠、灌肠类≤30
蔬菜≤4
其他肉类罐头、其他腌制罐头≤50
婴儿配方乳粉、鲜蛋类≤5
西式蒸煮、烟熏火腿及罐头、西式火腿罐头≤70
八、注意事项
1、盐酸萘乙二胺有致癌作用
2、显色后稳定性与室温有关,一般显色温度为15~30℃时,在20~30min内比色为好。
分装,1瓶/大组
6、亚硝酸钠标准溶液(0.2g/L):精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入500ml容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200μg亚硝酸钠。
分装,1瓶/大组
7、亚硝酸钠标准使用液(μg/mL):临用前,吸取0.2gL亚硝酸钠标准溶液,置于200mL容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每mL相当于5μg亚硝酸钠。
分装,1瓶/大组
8.蒸馏水
1瓶/组
五、实验步骤
1、样品的处理:
(1)取样:准确称取5.0g经绞碎、混匀的样品,置于50mL烧杯中。
(2)沉淀蛋白质:①加硼砂饱和溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温。②一面转动一面加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质
三、仪器
1.722分光光度计
若干,提前20min打开预热
2.组织绞碎机,菜刀,砧板
1-2套
3.50mL烧杯
500mL烧杯
3L大烧杯
2个/组
1个/组
2个
4.电炉
2个
5.托盘天平
1个/组
6.200mL容量瓶
500mL容量瓶
1个
1个/组
7.恒温水浴锅
1-2个
8.25mL具塞比色管
11个/组
9.滴管,漏斗,滤纸,吸小球,
1个/组
10.玻璃棒,温度计,标记笔,标签纸
若干
四、试剂(所用试剂,除另有规定外,均为分析纯试剂。)
1.亚铁氰化钾溶液:称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe6(CN)·3H2O],用水溶解后,稀释至1000mL。
分装,1瓶/大组
2.乙酸锌溶液:称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3C00)2·2H20],加3 mL冰乙酸溶于水,并稀释至100mL。
食品中亚硝酸盐的测定(分光光度法)
一、实验目的
1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。
2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项
二、实验原理
样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料,最大吸收波长538nm下测吸光度值A,与标准系列比较定量。
3、饱和硼砂溶液:称取5.0g硼酸钠(Na2B0Байду номын сангаас·10H20),溶于100 mL热水中,冷却后备用。
分装,1瓶/大组
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4 g对氨基苯磺酸,溶于100 mL 20%的盐酸中,置棕色瓶中混匀,避光保存。
分装,1瓶/大组
5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2克盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,避光保存。有致癌作用
???????????????m×——× 1000
V1
式中:
X—试样中亚硝酸盐的含量,mg/kg;
V1—试样处理液总体积,mL;
V2—测定用样液体积,mL;
m—试样质量,g;
A—试样测定液中亚硝酸盐的质量,μg;
部分食品中亚硝酸盐的限量标准(以NaNO2计)
品名限量标准mg/kg
食盐(精盐)、牛乳粉≤2
(3)过滤:加水定容,放置,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤,弃去
初滤液30mL,滤液备用。
2标准曲线的绘制和样品的测定
取10个25ml具塞比色管,标号,按下列步骤操作:
管号
0
1
2
3
4
5
6
7
8
样
标准溶液
(ml)
相当亚硝酸钠(μg)
对氨基苯磺酸(ml)
各管均加1ml(混匀,静置3-5min)
盐酸萘乙二胺(ml)
九、讨论
上层脂肪用滴管吸除。
结果保留2位有效数字。
各管均加
加水至刻度(25 ml ),混匀,静置15min,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度A,绘制标准曲线。同时做试剂空白。
六、数据记录
管号
0
1
2
3
4
5
6
7
8
样液
试剂空白
A538
七、数据处理
按下式计算:
A
????????????????X=? ———————×1000
??????????????????????????v2
3、硼砂饱和液的作用:①吸收亚硝酸盐的NO2,使亚硝酸盐的总量不会因加热而减少;②蛋白质沉淀剂。
4、亚铁氰化钾溶液和乙酸锌(可用硫酸锌代替)作用:蛋白质沉淀剂。原因:亚铁氰化钾溶液和乙酸锌反应,生成亚铁氰化锌沉淀,从而与蛋白共沉淀。
5、清液用滤纸过滤后,要弃去初滤液30ml。原因:滤纸中含有少量铵盐,弃去初滤液是为了除去滤纸中铵盐的干扰。
香肠(腊肠)香肚、酱腌菜、广式腊肉≤20
鲜肉类、鲜鱼类、粮食≤3
肉制品、火腿肠、灌肠类≤30
蔬菜≤4
其他肉类罐头、其他腌制罐头≤50
婴儿配方乳粉、鲜蛋类≤5
西式蒸煮、烟熏火腿及罐头、西式火腿罐头≤70
八、注意事项
1、盐酸萘乙二胺有致癌作用
2、显色后稳定性与室温有关,一般显色温度为15~30℃时,在20~30min内比色为好。
分装,1瓶/大组
6、亚硝酸钠标准溶液(0.2g/L):精密称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入500ml容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200μg亚硝酸钠。
分装,1瓶/大组
7、亚硝酸钠标准使用液(μg/mL):临用前,吸取0.2gL亚硝酸钠标准溶液,置于200mL容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每mL相当于5μg亚硝酸钠。
分装,1瓶/大组
8.蒸馏水
1瓶/组
五、实验步骤
1、样品的处理:
(1)取样:准确称取5.0g经绞碎、混匀的样品,置于50mL烧杯中。
(2)沉淀蛋白质:①加硼砂饱和溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温。②一面转动一面加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质
三、仪器
1.722分光光度计
若干,提前20min打开预热
2.组织绞碎机,菜刀,砧板
1-2套
3.50mL烧杯
500mL烧杯
3L大烧杯
2个/组
1个/组
2个
4.电炉
2个
5.托盘天平
1个/组
6.200mL容量瓶
500mL容量瓶
1个
1个/组
7.恒温水浴锅
1-2个
8.25mL具塞比色管
11个/组
9.滴管,漏斗,滤纸,吸小球,
1个/组
10.玻璃棒,温度计,标记笔,标签纸
若干
四、试剂(所用试剂,除另有规定外,均为分析纯试剂。)
1.亚铁氰化钾溶液:称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe6(CN)·3H2O],用水溶解后,稀释至1000mL。
分装,1瓶/大组
2.乙酸锌溶液:称取22.0g乙酸锌[Zn(CH3C00)2·2H20],加3 mL冰乙酸溶于水,并稀释至100mL。
食品中亚硝酸盐的测定(分光光度法)
一、实验目的
1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。
2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项
二、实验原理
样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料,最大吸收波长538nm下测吸光度值A,与标准系列比较定量。