细胞生物学实验答案

细胞生物学实验考试复习题

1.总结细胞膜通透性的一般规律。

答：（1）由于细胞膜是磷脂双分子层，所以一般脂溶性小分子物质易透过细胞膜。

（2）不带电荷的极性小分子可以透过细胞膜而不带电荷的极性大分子则不能透过细胞膜。

（3）水可利用自由扩散通过细胞膜。

（4）强电解质的离子对细胞膜为高度不通透

2.什么是凝集素？分析土豆凝集素使鸡血红细胞凝集的原因？

答：（1）凝集素：是一类含糖并能与糖专一结合的蛋白质。

（2）鸡血凝集的原因：细胞膜外被是由质膜表面的寡糖链形成，凝集素是一类含糖并能与糖专一性结合，它能与细胞表面的糖分子连接形成“桥”，从而使细胞凝集。

3.什么是活体染色？活体染色植物大液泡和线粒体分别用什么染料？为什么？

答：（1）活体染色：是指应用无毒或毒性较小的染色剂真实的显示细胞内的某些，而很少影响细胞生命活动的一种染色方法。

（2）液泡染料：中性红溶液；线粒体染料：詹纳斯绿B溶液

（3） 1. 液泡用中性红原因：中性红对液泡染色具专一性，只将活细胞液泡染成红色，胞质和胞核不染色。

2 .线粒体用詹纳斯绿B原因：由于线粒体内的细胞色素的氧化酶作用，是染料始终保持氧化状态而

呈蓝绿色，而细胞质中染料被还原成无色。

4.叶绿体的分离提取过程中，先后选择1000 rpm 和3000 rpm 分别离心的目的

是什么？

答：目的：（1）用1000rpm将滤液中的细胞碎片沉淀下来。

（2）用3000rpm是将叶绿体从上清液中沉淀下来。

5.叶绿素分离提取时，应注意哪些问题？

答：（1）叶片要新鲜。（2）使用0.35M的Nacl的研磨。（3）用6层纱布过滤。（4）研磨时不能太长。

6.观察植物细胞骨架的实验中，pH 6.8 的PBS和pH

7.2 的M缓冲液的作用分

别有哪些？

答：（1）PBS的作用: 维持细胞内环境稳定和洗涤戊二醛。

（2）M缓冲液的作用：洗去残留Triton-100液和稳定细胞骨架。

7.观察动物细胞骨架的实验中，1% Triton-100、戊二醛和考马斯亮蓝的作用分

别是什么？

答：（1）1% Triton-100的作用：抽提细胞膜和细胞内的蛋白质，脂质。

（2）戊二醛的作用：固定细胞骨架。

（3）考马斯亮蓝的作用：使细胞骨架着色。

8.Feulgen反应的基本原理是什么？

答：DNA经稀酸水解后，破坏嘌呤和脱氧核糖的糖苷键，并在脱氧核糖一端形成游离醛基，这些醛基与schiff试剂结合形成紫红色化合物，所以有DNA的部位，就呈现除紫红色阳性反应。

9.DNA的Feulgen反应实验中，剪取洋葱根尖后为何要用Carnoy液固定？答：Carnoy液的作用:杀死细胞，固定DNA

10.DNA的Feulgen反应实验中，Carnoy液处理洋葱根尖后，依次用95%乙醇、

70%乙醇和蒸馏水处理10 min，其中乙醇和水的作用分别是什么？这三个步骤最终的目的是什么？

答：（1）95%乙醇作用：洗去固定液；（2）70%乙醇的作用：减少固定液的残留；（3）蒸馏水处理10 min的作用：使细胞膨胀，使细胞内部结构清晰可见。

11.DNA的Feulgen反应实验中，用1 M的HCl 和Schiff试剂处理洋葱根尖的

作用分别是什么？

答：（1）1 M的HCl的作用：使洋葱根尖有缓冲时间和适应环境并让ＤＮＡ水解。

（2）Schiff试剂的作用：与DNA水解后的醛基反应形成含醌类的紫红色化合物。

12.怎样设计DNA Feulgen反应的对照组？

答：（1）对照组：实验材料先不经过稀酸水解或预先用ＴＣＡ９０度处理,则不能出现显色反应，从而证明Feulgen反应专一性。

13.诱导细胞融合的方法有哪些？PEG诱导细胞融合原理是什么？

答：（1）细胞融合的方法有：1. 电融合； 2. 化学诱导（PEG）；3 病毒诱导；

（2）PEG诱导的原理：可使细胞凝聚，使细胞间接触处质膜分子发生疏散或重组而发生膜融合，继而发生细胞质细胞核的融合。

14.PEG融合时间对细胞融合效果有何影响？

答：影响有;（1）PEG融合时间过短，细胞可能凝集不起来。

（2）PEG融合时间过长，PEG对细胞有毒害作用。

15.PEG法融合细胞实验的成败受哪些因素的影响？

答：因素有：（1）PEG浓度（2）温度（3）PEG分子量（4）PH (5)细胞浓度（6）融合时间

16.细胞中的糖类和脂类物质分别可以用哪些染料显示和定位？

答：（1）糖类物质可用：schiff试剂；（2）脂类物质可用：苏丹染料；

17.PAS显示糖类的实验原理是什么？

答：（1）原理：利用强氧化剂，使多糖产生游离的醛基，醛基与schiff试剂反应生成紫红色化合物。

因此有多糖部分就会呈现出除紫红色阳性反应。

18.Schiff 试剂在PAS反应和Feulgen反应中的作用有何异同？

答：（1）相同点：两者都是利用和醛基反应生成紫红色化合物。

（2）不同点: PAS反应为糖类的显示方法；Feulgen反应为DNA的显示方法；

19.证明多糖是淀粉的对照实验的原理是什么？

答：植物的糖有纤维素和淀粉，而纤维素是β-糖苷键，淀粉是α-糖苷键，利用α-淀粉酶处理，只水解淀粉，不水解纤维素。所以用染料处理后，对照组中只有细胞壁显色，而实验组细胞内和细胞壁都显色。

20.苏丹染料显示脂类的原理是什么？

答：原理：苏丹染料具脂溶性，在脂肪中的溶解度大于在乙醇的溶解度，当含有脂肪的标本和苏丹染料接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于含脂类的结构而显色。

注：总成绩= 平时成绩（70%）+ 理论考试成绩（30%）