细胞生物学实验汇总
细胞生物学实验
细胞生物学实验细胞实验复习一、细胞内蛋白质及核酸成分的测定1.细胞组织化学法在保持细胞结构的基础上，利用某些化学试剂与细胞内的一些物质发生化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀。
再通过显微镜对细胞内的化学成分进行定位定性的检测方法。
2.三氯醋酸的作用：抽提DNA、RNA，使蛋白质与DNA、RNA 分开3.固定：将细胞杀死，使其仍然保持原来的结构和形态4.甲基绿-哌罗宁染色原理核酸是强性酸，甲基绿-哌罗宁是碱性染料，具有亲和力。
这两种碱性染料有选择地特异染色。
甲基绿把DNA染成绿色，哌罗宁把RNA染成红色。
二、观察细胞的生理活动1.淀粉肉汤：刺激腹腔聚集大量巨噬细胞，台酚蓝起标记巨噬细胞的作用2.渗透现象原理原生质层具有选择透过性，原生质层内外的溶液存在着浓度差，水分子就可以从溶液浓度低的一侧通过原生质层扩散到溶液浓度高的一侧。
溶液渗透压的高低与溶液中溶质分子的物质的量的多少有关，溶液中溶质分子物质的量越多，渗透压越高，反之则越低。
3.质壁分离原理质壁分离是植物细胞失水造成的细胞壁与细胞质的分离。
细胞壁主要由纤维素分子组成，是水和溶质都可以通过的透性膜，而细胞质膜是半透性膜，有选择性和流动性。
由于质膜对水的可透性，水会从低溶质浓度一侧（高水浓度）向高溶质浓度一侧（低水浓度）运动，即渗透作用。
当植物细胞内的溶液浓度低于外界浓度时，细胞会失水，细胞壁形状不变，而细胞质膜皱缩，使得原生质体与细胞壁分离。
4.血涂片方法①取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，血滴即沿推片散开。
然后便推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动，载片上保留下一薄层血膜。
②使血膜迅速干燥,以免血细胞皱缩.③用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液溢出，然后将血膜平放在染色架上。
加瑞氏染液2-3滴，使覆盖整个血膜，固定0.5-1min。
滴加等量或稍多蒸馏水，与染料混匀染色5-10min。
细胞生物学实验
二、实验原理
植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”，是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术，其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成，因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降解细胞壁成分，除去细胞壁而使原生质体释放出来。
原生质体分离纯化或融合后，在适当的培养基上应用合适的培养方法，能够再生细胞壁，并启动细胞持续分裂，直至形成细胞团，长成愈伤组织或胚状体，再分化发育成苗。其中，选择合适的培养基及培养方法是原生质体培养中最基础也是最关键的环节。
选取新鲜的嫩菠菜叶，洗净擦干后去除叶梗脉，称30g于150ml 0.35mol/L NaCl溶液中，装入组织捣碎机。
将匀浆用6层纱布过滤于500ml烧杯中。
利用组织捣碎机低速(5000r/min)匀桨3-5min。
将上清液在3000r/min下离心5min。弃去上清液，沉淀即是叶绿体(混有部分细胞核)。
二、实验原理
凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果。
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凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价，并与细胞膜上受体的分布有关。
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三、实验仪器
显微镜、粗天平、载玻片、滴 管、 离心管、离心机等.
用镊子撕去叶的下表皮，然后将叶放有酶液的培养皿或带盖三角瓶，每10ml酶液放2g叶片；
洋葱、小麦种子或黄豆幼根根尖
人口腔上皮细胞
五、实验内容与实施过程
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察 清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上 ↓ 滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液 ↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞 ↓ 刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中 ↓ 染色10-l5min(注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液) ↓ 盖上盖玻片,显微镜下观察
细胞生物实验报告
一、实验目的1. 了解细胞生物学实验的基本原理和操作方法；2. 掌握显微镜的使用技巧；3. 通过观察细胞形态、结构，加深对细胞生物学知识的理解。
二、实验原理细胞是生物体的基本结构和功能单位，是生命活动的基础。
细胞生物学实验是研究细胞结构、功能、发育和遗传等方面的科学方法。
本实验通过观察细胞形态、结构，了解细胞的基本组成和功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱表皮细胞、口腔上皮细胞、动物细胞培养液、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、碘液等；2. 仪器：显微镜、离心机、培养箱、超净工作台等。
四、实验步骤1. 制备临时装片（1）取洋葱表皮细胞：将洋葱鳞片叶撕下一小块，放入装有清水的培养皿中；（2）制备动物细胞：取少量动物细胞培养液，用滴管滴在载玻片上；（3）制作临时装片：用镊子夹住盖玻片，轻轻放在载玻片上的细胞液上，避免产生气泡。
2. 显微镜观察（1）低倍镜观察：将临时装片放在显微镜载物台上，调整镜头，观察洋葱表皮细胞和动物细胞的整体形态；（2）高倍镜观察：将镜头切换到高倍镜，观察细胞内部结构，如细胞核、细胞质、细胞器等。
3. 细胞染色（1）碘液染色：将碘液滴在盖玻片边缘，用吸水纸从另一侧吸引，使染液均匀覆盖细胞；（2）观察染色效果：观察细胞染色后的颜色变化，了解细胞结构。
4. 数据记录与分析（1）记录细胞形态、结构；（2）分析细胞结构特点，了解细胞功能。
五、实验结果与分析1. 洋葱表皮细胞洋葱表皮细胞呈长条形，细胞壁较厚，细胞核明显，细胞质中存在液泡、细胞器等结构。
2. 动物细胞动物细胞呈圆形，细胞膜较薄，细胞核较大，细胞质中存在线粒体、内质网、高尔基体等细胞器。
六、实验结论1. 细胞是生物体的基本结构和功能单位，具有复杂的结构；2. 细胞内部存在多种细胞器，承担不同的生物学功能；3. 通过显微镜观察细胞形态、结构，可以加深对细胞生物学知识的理解。
七、实验注意事项1. 实验过程中注意无菌操作，防止污染；2. 使用显微镜时，注意调节镜头和光源，保证观察效果；3. 细胞染色时，注意染液浓度和染色时间，避免染色过深或过浅；4. 数据记录与分析时，注意观察细节，确保实验结果的准确性。
医学细胞生物学实验
细胞凋亡诱导与检测
细胞凋亡检测
细胞凋亡诱导
自噬诱导
通过饥饿、药物刺激等手段诱导细胞自噬，以研究自噬的生物学意义和作用机制。
自噬检测
采用荧光染色、电镜观察、蛋白质印迹等方法检测自噬体的形成、数量和相关蛋白的表达。
自噬诱导与检测
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实验原理
实验设计
根据实验目的和原理，设计具体的实验方案和操作流程。
实验操作
按照实验方案进行实验操作，包括细胞培养、显微观察、分子生物学检测等步骤。
数据收集与分析
收集实验数据，进行统计分析，得出实验结果。
结果汇报与讨论
将实验结果以书面形式汇报，并进行讨论和总结。
实验步骤
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细胞培养
CHAPTER
利用免疫荧光染色、荧光共振能量转移等技术，可以检测和定位细胞内特定信号分子的分布和动态变化，进而揭示其在信号转导中的作用机制。
详细描述
总结词
信号转导抑制剂的应用
总结词：信号转导抑制剂是一类能够干扰细胞信号转导过程的化合物，具有潜在的治疗作用。
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细胞凋亡与自噬研究
CHAPTER
通过使用化学物质、射线、病毒等手段诱导细胞凋亡，以研究其发生机制和生物学意义。
电子显微镜
利用电子束代替可见光，观察细胞超微结构。
显微镜观察
通过显微镜或细胞计数板，统计细胞数量。
细胞计数
利用染色剂或荧光染料，检测细胞活性，如MTT法、染色排除法等。
细胞活力检测
细胞计数与活力检测
利用染色剂对细胞进行染色，以便观察细胞形态和结构。
染色技术
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师：xxx所在学校：xxx中学目的要求：1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具：新鲜叶片（如菠菜、槐树、蚕豆的叶片），显微镜，双面刀片（两片、并在一起、一侧用胶布粘牢）、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。
方法步骤方法与步骤要点注意事项（一）练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。
2右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割。
3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。
要多切几次（每切一次，刀片要蘸一下水）。
4用毛笔蘸出较薄的一片，制成临时切片。
叶片下面要垫上小块木板，以防损坏桌面。
刀片要捏紧，切割速度要快，注意安全。
为了便于观察，载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片，选择切得较薄的一片用来观察。
（二）观察叶片的结构1．用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。
2．观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。
仔细观察上、下表皮细胞的`区别（三）观察叶片的下表皮1．用镊子撕下一小块叶片的下表皮，制成临时装片。
2．用显微镜进行观察，下表皮细胞的形态是什么样子的，下表皮上有没有气孔？撕取下表皮时，一定要薄，否则影响观察效果。
注意观察气孔的结构。
（四）画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞，这一对保卫细胞要详细画，周围的细胞只需勾出轮廓。
画图时，要真实、实事求是。
讨论与交流1．保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义？2．从结构上看，叶片有哪些方面是适于接受阳光的？细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。
2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。
二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。
细胞生物学实验教学总结5篇
细胞生物学实验教学总结5篇教学总结是通过学习实践总结出的快速掌握知识的方法。
因其与学习掌握知识的效率有关,越来越受到人们的重视。
那么,学习的方法您都了解清楚了吗下面是由小编给大家带来的细胞生物学实验教学总结5篇，让我们一起来看看!细胞生物学实验教学总结11.基因重组只发生在减数分裂过程和基因工程中。
(三倍体、病毒、细菌等不能基因重组)2.细胞生物的遗传物质就是DNA，有DNA就有RNA，有5种碱基，8种核苷酸。
3.双缩脲试剂不能检测蛋白酶活性，因为蛋白酶本身也是蛋白质。
4.高血糖症≠糖尿病。
高血糖症尿液中不含葡萄糖，只能验血，不能用本尼迪特试剂检验。
因血液是红色。
5.洋葱表皮细胞不能进行有丝分裂，必须是连续分裂的细胞才有细胞周期。
6.细胞克隆就是细胞培养，利用细胞增殖的原理。
7.细胞板≠赤道板。
细胞板是植物细胞分裂后期由高尔基体形成，赤道板不是细胞结构。
8.激素调节是体液调节的主要部分。
CO2刺激呼吸中枢使呼吸加快属于体液调节。
9.注射血清治疗患者不属于二次免疫(抗原+记忆细胞才是)，血清中的抗体是多种抗体的混合物。
10.刺激肌肉会收缩，不属于反射，反射必须经过完整的反射弧，判断兴奋传导方向有突触或神经节。
11.递质分兴奋性递质和抑制性递质，抑制性递质能引起下一个神经元电位变化，但电性不变，所以不会引起效应器反应。
12.DNA是主要的遗传物质中“主要”如何理解每种生物只有一种遗传物质，细胞生物就是DNA，RNA也不是次要的遗传物质，而是针对“整个”生物界而言的。
只有少数RNA病毒的遗传物质是RNA。
13.隐性基因在哪些情况下性状能表达①单倍体，②纯合子(如bb或XbY)，③位于Y染色体上。
14.染色体组≠染色体组型≠基因组三者概念的区别。
染色体组是一组非同源染色体，如人类为2个染色体组，为二倍体生物。
基因组为22+X+Y，而染色体组型为44+--或XY。
15.病毒不具细胞结构，无独立新陈代谢，只能过寄生生活，用普通培养基无法培养，只能用活细胞培养，如活鸡胚。
生物各个实验知识点总结
生物各个实验知识点总结实验一：细胞鉴定实验1.实验目的：通过细胞鉴定实验，了解不同种类的细胞结构和功能。
2.实验步骤：收集样本，制备玉米和豌豆根尖细胞悬液，利用显微镜观察细胞结构和染色体分裂情况。
3.实验原理：细胞是生物体的基本单位，通过细胞结构和染色体的观察，可以了解细胞的特征和功能。
4.实验结果：观察到玉米和豌豆根尖细胞中的细胞核、质体和染色体结构，以及细胞分裂过程中的染色体行为。
5.实验结论：通过细胞鉴定实验，可以了解不同种类的细胞结构和功能，为研究生物细胞和细胞分子提供了重要参考。
实验二：生物种群数量动态实验1.实验目的：通过生物种群数量动态实验，了解生物种群数量的变化规律及其影响因素。
2.实验步骤：选择实验区域，记录种群数量，进行采样和统计，分析种群数量变化的原因。
3.实验原理：种群数量的动态变化受到环境因素和种群内因素的影响，通过实验可以发现生物种群数量的变化规律。
4.实验结果：观察到种群数量在不同环境条件下的变化，分析了种群数量变化的原因。
5.实验结论：生物种群数量受到环境因素和种群内因素的共同影响，了解种群数量的变化规律对于生物种群管理和保护具有重要意义。
实验三：生物种类分类实验1.实验目的：通过生物种类分类实验，了解生物的分类原则和方法。
2.实验步骤：采集样本，观察生物的形态特征，确定生物的种类，进行分类鉴定。
3.实验原理：生物的分类原则主要包括形态特征、生殖方式、生态习性等，通过这些特征可以确定生物的分类归属。
4.实验结果：通过对不同生物形态特征的观察和分类鉴定，了解了生物的分类原则和方法。
5.实验结论：生物的分类归属可以通过形态特征、生殖方式、生态习性等多种特征进行确定，这对于生物研究和保护有重要意义。
实验四：生物代谢实验1.实验目的：通过生物代谢实验，了解生物的能量代谢和物质代谢过程。
2.实验步骤：选择实验材料，进行生物代谢实验，观察生物在代谢过程中产生的物质和能量变化。
细胞生物学实验报告(3篇)
细胞生物学实验报告（3篇）细胞生物学实验报告（精选3篇）细胞生物学实验报告篇1一、实验目的：1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理：1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。
它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
三、实验步骤：细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。
5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）6、清水冲洗，番红复染2min。
7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100_）细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。
吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
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细胞生物学实验汇总————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：实验一、二：细胞凝集反应和细胞膜通透性的观察【基本原理】细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。
凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。
凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。
细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。
可选择性地让某些物质进出细胞，各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，以至于在高渗环境中，动物细胞会失水而收缩；在低渗环境中，动物细胞会吸水膨胀直至破裂。
本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中，由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同，使得不同溶质透入细胞的速度相差很大，有些溶质甚至不能透入细胞。
当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高，水分子随即进入细胞，使细胞膨胀，当膨胀到一定程度时，红细胞膜会发生破裂，血红素溢出，此时，原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为红细胞溶血。
由于各种溶质进入细胞的速度不同，所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同，相反可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。
【方法步骤】1．制备土豆凝集素液和红细胞悬浮液，制备无血清的鸡红细胞悬液，使凝集素液和红细胞悬液混合，静置后，在光镜（低倍）下观察凝集素使红细胞凝集的现象。
（以PBS 缓冲液加2％血细胞作对照实验）[土豆凝集素的制备：称取土豆去皮块茎2g , 加10 mL PBS 缓冲液，浸泡2h（浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素） , 载玻片上滴一滴土豆凝集素,再滴一滴2％红细胞液,充分混匀静置20 min , 低倍显微镜下观察血球凝集现象。
] 2．观察10%的鸡红细胞悬液，可见该悬液为一种不透明的红色液体3．观察溶血现象取一支试管，再加入4ml 蒸馏水，加入0.4ml 鸡红细胞悬液，混匀后注意观察溶液颜色的变化，可见溶液由不透明的红色变成透明的红色液体（可将试管贴靠在书上，隔着试管看书中的字，如发现溶血则文字可被看清）。
4．观察鸡红细胞对不同物质的通透性（1）取一支试管，和0.17M 的Nacl 溶液4ml，加入0.4ml 鸡红细胞悬液，轻轻摇匀，用上述方法观察是否出现溶血现象，如出现溶血，记下发生溶血所需要的时间（从加入4ml 溶液算起）（2）按上述方法分别加入下列9种溶液是否导致红细胞溶血并记录实验结果。
①0.17M 氯化铵②0.17M 硝酸钠③0.17M 硫酸钠④0.17M 醋酸胺⑤0.17M 草酸铵⑥0.17M 葡萄糖⑦0.17M 甘油⑧0.17M 乙醇⑨0.17M 丙酮【实验结果】1、土豆凝集素能使鸡红细胞凝集，PBS 对照液中红细胞分散均匀。
对照组未凝血，实验组凝血。
2、氯化钠、硝酸钠、硫酸钠溶液不溶。
醋酸铵>草酸铵>氯化铵>乙醇>甘油>丙酮>葡萄糖。
膜通透性大小主要取决于分子大小和分子极性。
小分子比大分子容易通过，非极性比极性易通过，带电荷离子高度不透。
实验三：聚乙二醇（PEG）介导的细胞融合【基本原理】两个以上的细胞合并成为一个双核或多核细胞称为融合细胞。
在通常情况下，两个细胞接触并不发生融合现象，因为各自存在完整的细胞膜，在特殊融合诱导物的作用下，两个细胞膜发生一定的变化，就可促进两个或多个细胞聚集，相接触的细胞膜之间融合，继之细胞质融合，形成一个大的融合细胞。
人工细胞融合开始于五十年代，六十年代到七十年代作为一门新兴的技术发展很快，应用范围极广。
细胞与组织不同，不排斥异类、异种细胞。
不仅能产生同种细胞融合、种间细胞融合，而且也能诱导动植物细胞间产生融合。
因此，融合细胞的研究为生物学无论在基础理论上或生产实践上开辟了一条新的道路。
这一技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。
细胞融合(Cell fusion)，即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。
人工诱导的细胞融合不仅能产生同种细胞融合，也能产生种间细胞的融合，因此细胞融合技术目前被广泛应用于细胞生物学和医学研究的各个领域，如研究核质关系、绘制染色体基因图谱、制备单克隆抗体、育种等。
细胞融合的诱导物种类很多．常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus) ，聚乙二醇（Polyethyleneglycol，PEG）和电脉冲。
目前应用最广泛的是聚乙二醇，因为它易得、简便，且融合效果稳定。
聚乙二醇(PEG)结构为：HOH2C(CH2OCH2)n CH2OH，相对分子质量在200-6000 均可用作细胞融合剂。
普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用，从而使细胞发生融合。
【方法步骤】1．采血及鸡红细胞悬液的制备（同教材57 页）。
2．（共2 组）取鸡红细胞悬液1mL，移人10mL 离心管，加入4mL 0.85％生理盐水混匀。
1000r／min 离心5 min。
3．弃上清液(用吸管吸去)，加0.85％生理盐水5mL，用指弹法（或吸管轻吹）将细胞团块弹散，混匀后1000r／min 离心5min；重复上述条件，再离心洗涤1 次。
4．收集最后1 次离心沉淀的血细胞，加入适量（5－8mL）的GKN 液，轻吹散，混匀。
5．（每4 人）取悬液1mL 到1 个试管中，加入0.5 mL 预热的50％PEG 混匀，置于30℃水浴中温浴3－5min；取未融合和融合的血细胞悬液各1 滴分别滴于载玻片上的两侧，盖上盖玻片。
6．利用光学显微镜(高倍) 以未融合细胞为对照观察2 个靠近细胞形成融合的过程。
【结果观察】在高倍镜下可以看到有两个或两个以上的鸡红细胞膜融合在一起，形成一个同核体细胞。
要注意辨别融合细胞与重叠的鸡红细胞。
【实验结果】在高倍镜下可以看到有两个或两个以上的鸡红细胞膜融合在一起，形成一个同核体细胞。
要注意辨别融合细胞与重叠的鸡红细胞。
实验四：线粒体和液泡系的超活染色与观察【基本原理】线粒体是细胞内一种重要细胞器，细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。
活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。
詹纳斯绿B（Janus green B）是线垃体的专一性活细胞染色剂，毒性很小，属于碱性染料，解离后带正电，由电性吸引堆积在线粒体膜上。
线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，从而使线粒体显色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。
细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。
中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液泡系染成红色。
【方法步骤】1．线粒体的超活染色与观察1）口腔上皮细胞线粒体的超活染色：1/5000 詹纳斯绿B1-2 滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于37℃恒温染色10-15min，显微镜下观察。
2）洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察：1/5000 詹纳斯绿B 溶液1-2 滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片于37℃恒温水浴染色10-15min，显微镜下观察。
2．小麦（或绿豆）幼根根尖液泡系的中性红染色观察小麦（或绿豆）幼苗根尖（1-2cm）纵切面切片，1/3000 中性红溶液1 滴染色5-10min，载玻片于37℃恒温水浴，盖上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察。
【实验结果】口腔上皮细胞的线粒体分布洋葱内表皮细胞线粒体分布植物根尖液泡的中性红染色实验五：植物细胞微丝束的光学显微镜观察【基本原理】细胞骨架在通常情况下不稳定：如低温、高压、饿酸处理等。
当用适当浓度的TritonX-100 处理细胞时，能溶解质膜结构中及细胞内许多蛋白质，而细胞骨架系统的蛋白质却不被破坏显得更清晰，M-缓冲液洗涤细胞，可以提高细胞骨架的稳定性，戊二醛固定能较好地保存细胞骨架成分，经考马斯亮蓝R250 染色后，可使细胞骨架蛋白着色，而胞质背景着色弱，有利细胞骨架纤维显示。
微丝、微管和中间纤维都是直径很小的结构，最大的单根微管才25nm 左右，只能在电镜下才能观察到。
目前研究细胞骨架的主要方法是应用高压电镜或免疫荧光显微镜技术。
本实验用普通光镜观察到细胞骨架，是因为骨架纤维成束分布、结构经染色后，有夸大作用。
由于细胞经TritonX-100 抽提后剩下的主要是细胞骨架成分，使得显现更清晰。
细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构，按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。
它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。
光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1% Triton X-100 处理细胞，可使细胞膜溶解，而细胞骨架系统的蛋白质被保存，再用考马斯亮兰R250 染色，使得胞质中细胞骨架得以清晰显现。
【实验用品】1．材料：新鲜洋葱鳞茎2．试剂1）M 缓冲液（pH 7.2）各成分终浓度为：50mmol/L 咪唑(MW:68.08)；50mmol/L KCl(MW:74.55)；0.5mmol/L MgCl2·6H2O(MW:203.30)；1mmol/L EGTA(MW:380.36)；0.1mmol/L EDTA-Na2(MW:372.24)；1mmol/L DTT(MW:154.3)2）6mmol/L PBS 磷酸缓冲液（pH 6.5）：KH2PO4 : Na2HPO4.2H2O = 7:33）0.7% NaCl 生理盐水4）1% Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚) 溶于M-缓冲液5）3% 戊二醛100mL: 25% 戊二醛取12mL，PBS 88mL6）0.2% 考马斯亮蓝R250 染液200mL：考马斯亮蓝R250 0.2g；甲醇46.5mL；冰乙酸7mL；蒸馏水46.5mL3．仪器：光学显微镜，镊子，剪刀，试管，表面皿，滴管，载玻片，盖玻片【方法步骤】【实验结果】洋葱鳞茎外层与内层的表皮细胞比较（放大倍数10×20）附：各种主要试剂的作用1．Triton X-100 (聚乙二醇辛基苯基醚)作用：非离子去垢剂；适当浓度的Triton X-100，可使细胞膜溶解，而细胞质中的细胞骨架系统可被保存。
2．M－缓冲液和磷酸缓冲液作用：维持细胞的渗透压。
3．EDTA（乙二胺四乙酸）和EGTA（乙二醇双醚四乙酸）作用：前者可螯合大部分金属离子；后者专一性螯合Ca2＋，主要是高浓度的Ca2＋可是微管解聚，因此加入EGTA 来降低Ca2＋的浓度。