流式知识基础介绍
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流式基础介绍
什么是流式细胞仪?
流式细胞仪是一个重要的细胞生物学研究工具,它通过不同的液流原理(流体动力学聚焦和微毛细管聚焦)实现细胞样本在液态检测环境中的单细胞排列,经特异性抗体和相应荧光染料标记过的单个细胞样本高速依次通过激光检测点,其所标记的荧光染料分子被激光激发释放出相对应的特异光学信号。
流式细胞仪通过捕捉这些具有细胞种类和信号强度差异的光学信号,可以对数十万乃至数百万细胞样本的细胞种类进行定性定量分析。
流式细胞仪的主要科学意义,在于可以高速地获得具有统计学意义的群体数据,并具有良好的检测灵敏度。
在主要数据模式有两种:直方图---又称单参数图;散点图---又称双参数图;流式细胞仪是细胞生物学家,免疫学家,血液学家等生命科学研究领域研究者不可或缺的研究工具
直方图-单参数图散点图-双参数图
流式细胞仪的主要类别?
目前市场上,主要有三种不同类型的流式细胞仪:分析型流式细胞仪;分选型流式细胞仪;量化成像分析流式细胞仪
分析型流式细胞仪:主要是通过荧光信号强度这一单一数据参数,对不同的细胞群体进行定性定量分析,既无法看到细胞样本的形态,更无法对特定的细胞群体进行分离,单用户想要从混合细胞样本中分选获得某种特性的细胞时,传统分析型流式细胞仪则无法实现细胞的分选功能。
Guava 5 5HT 6 6HT 6-2L 6HT-2L以及8 8HT等均属于分析型流式细胞仪。
分选型流式细胞仪:
主要用途除了细胞群体的分析功能外,还可以从混合细胞样本中将特定群体的细胞进行有效的分离和获取,这一过程被称之为细胞分选。
BD FACSJazz, BD FACSAriaIII, BD Influx, BEC MofloXDP 以及 BECAstrios均属于细胞分选仪的范畴。
量化成像分析流式细胞仪:
量化成像分析---是指基于一系列形态学图像参数,量化地对细胞群体进行分析。
在传统流式细胞仪的分析功能基础上结合了高性能荧光显微镜的图像数据,可以实现流式数据的形态学验证。
并且除单一的荧光信号强度参数以外,量化成像分析流式细胞仪还可以提供超过100种不同的基于图像数据的形态学参数;简单的讲,以前做细胞分析,每个荧光通道只能检测1种参数---荧光信号强度;在量化成像分析流式细胞仪上出荧光信号强度外,每个荧光通道还以可以实现超过100种形态学参数的检测。
从而可以更高效的对细胞群体进行定性定量分析。
量化成像分析流式细胞仪是,流式发展历程中的一枚新的徽章,他将流式数据的统计学意义,同荧光显微镜成像数据的高层次内涵有机结合,代表了这项技术向数据结果更加精确,数据模式更加丰富,应用领域更加广泛方向发展的发展趋势。
目前市场上的量化成像分析流式细胞仪只有默克密理博的Amnis 一家,并没有其他竞争性技术平台。
流式细胞仪的主要客户群体:
临床用户:
HIV, 血液,免疫,肿瘤及癌症, 药理
科研用户:
目前主要集中在细胞生物学,免疫学,包含以下研究领域:
•免疫分型、细胞信号传导、细胞周期、细胞毒理研究
•细胞凋亡、基因表达RNAi、细胞计数、环境微生物研究
主要客户群体来自:
•医院(血液科,检验科,肿瘤,干细胞治疗)
•大学研究所(细胞生物学,免疫学,医学院,生命科学院)
•生物技术公司
•CRO公司
•血库
•CDC 、CIQ。