紫杉醇的提取制备
从细胞中提取紫杉醇的方法
从细胞中提取紫杉醇的方法
从细胞中提取紫杉醇的方法主要包括以下几个步骤：
1. 细胞培养：首先，需要将含有紫杉醇的细胞接种到培养基中进行培养。
常用的培养基有MB培养基和1/2MB培养基，其中可以添加生长因子等物质来促进细胞的生长和代谢。
2. 细胞破碎：当细胞生长到一定阶段后，可以通过物理或化学方法将细胞破碎，释放出细胞内的紫杉醇。
常用的物理方法有超声波破碎和冷冻破碎等，化学方法则包括使用表面活性剂或酸碱溶液等。
3. 分离纯化：破碎后的细胞中，除了紫杉醇外还含有其他杂质，因此需要通过分离纯化技术将紫杉醇分离出来。
常用的分离纯化方法有离心、过滤、萃取、色谱分离等。
4. 浓缩干燥：经过分离纯化后的紫杉醇溶液可能还含有一些水分和杂质，需要进行浓缩和干燥处理。
常用的浓缩方法有真空蒸发和冷冻干燥等，干燥后的紫杉醇粉末可以用于进一步的分析和制备。
需要注意的是，以上方法仅供参考，实际操作中可能需要根据具体情况进行调整和改进。
同时，由于紫杉醇的提取涉及到多个技术领域，如细胞生物学、化学、药学等，因此需要综合考虑各方面的因素，确保提取过程的顺利进行。
紫杉醇的配制方法
紫杉醇的配制方法
紫杉醇（Paclitaxel）是一种广泛应用于癌症治疗的化学药物，主要用于治疗乳腺癌、卵巢癌等多种癌症。
紫杉醇的配制需要在合适的环境下、按照相关规范和标准进行，通常是由专业的药物制剂厂家完成。
以下是一般紫杉醇注射剂的简化制备方法，但请注意，这只是供了解，任何药物的制备都需要在受过专业训练的人员的监督下进行。
紫杉醇注射剂的简化制备方法：
材料：
紫杉醇（Paclitaxel）粉末
赋形剂（例如：无水乙醇、聚醚或其他合适的赋形剂）
溶剂（例如：聚氧乙烯甘油脂肪酸酯）
调节pH的溶液（例如：氢氧化钠或盐酸）
步骤：
将一定量的紫杉醇粉末称取到一个容器中。
添加适量的赋形剂，确保形成均匀的混合物。
赋形剂的选择和比例需要根据具体制剂的配方而定。
加入溶剂，使紫杉醇和赋形剂充分溶解。
这一步通常需要搅拌和混合。
调节pH值，以确保最终制剂的稳定性和适用性。
调节pH的过程需要小心进行，以避免影响药物的活性。
进行最终的过滤和灭菌步骤，以确保制剂的纯净度和无菌性。
将制备好的溶液灌装到注射剂瓶中，并密封保存。
请注意，上述步骤是一般性的制备方法，并不能完全取代专业药物制剂厂家的操作。
紫杉醇作为一种抗癌药物，其制备和使用都需要严格遵循法规和标准，以确保患者的安全和治疗效果。
任何涉及药物制备的操作都应由受过专业培训的人员进行，遵循相关法规和制药标准。
紫杉醇
抗癌药物——紫杉醇一、前沿1963年美国化学家瓦尼（M.C. Wani）和沃尔（Monre E. Wall）首次从一种生长在美国西部大森林中称谓太平洋杉（Pacific Yew）树皮和木材中分离到了紫杉醇的粗提物。
在筛选实验中，Wani和 Wall发现紫杉醇粗提物对离体培养的鼠肿瘤细胞有很高活性，并开始分离这种活性成份。
由于该活性成份在植物中含量极低，直到1971年，他们才同杜克（Duke）大学的化学教授姆克法尔（Andre T. McPhail）合作，通过x-射线分析确定了该活性成份的化学结构——一种四环二萜化合物，并把它命名为紫杉醇（taxol）。
紫杉醇具有显著的抗癌活性和独特的作用机理，现主要用于治疗晚期乳腺癌和卵巢癌等癌症。
紫杉醇分子结构复杂，具有特殊的三环[6+8+6]碳架和桥头双键以及众多的含氧取代基。
其全合成引起国内外许多有机化学家的兴趣。
先后共有30多个研究组参与研究，实属罕见。
经20多年的努力，于1994年才由美国的R．A．Holton与K．C．Nicolaou两个研究组同时完成紫杉醇的全合成。
随后，S．T．Danishefsky(1996年)、P．A．Wender(1997年)、T．Mukaiyama(1998年)和I．Kuwajima(1998年)4个研究组也完成这一工作。
6条合成路线虽然各异，但都具有优异的合成战略，把天然有机合成化学提高到一个新水平。
紫杉醇是目前已发现的最优秀的天然抗癌药物,在临床上已经广泛用于乳腺癌、卵巢癌和部分头颈癌和肺癌的治疗.紫杉醇作为一个具有抗癌活性的二萜生物碱类化合物,其新颖复杂的化学结构、广泛而显著的生物活性、全新独特的作用机制、奇缺的自然资源使其受到了植物学家、化学家、药理学家、分子生物学家的极大青睐,使其成为20世纪下半叶举世瞩目的抗癌明星和研究重点,包括寻找新的生物资源、化学全合成、半合成、衍生物制备、生物转化、生物合成、生物工程、构-效关系研究、作用机制研究、药理学和药效学等研究.2011年是发现紫杉醇结构40周年,对紫杉醇发现的曲折历史过程进行回顾和总结,以纪念这一伟大发现并纪念为紫杉醇的研究与第二代紫杉醇的开发作出贡献的科学家。
紫杉醇抗癌药物
紫杉醇抗癌药物紫杉醇抗癌药物——紫杉醇是从红豆杉里提炼出的药物！紫杉醇抗癌药物大名鼎鼎的，用于治疗卵巢癌，乳腺癌，和非小细胞肺癌。
紫杉醇是比较复杂的天然产物之一，紫杉醇最初是从红豆杉的树皮中提取，但是其含量非常低，约10-50公斤的树皮中才能提炼出1克紫杉醇。
紫杉醇抗癌药物可以解释一些乳腺癌肿瘤对特异的化疗产生反应而另一些则无反应的原因。
研究结果突出强调了癌症发展必需的一种营养物质——谷氨酰胺的水平是乳腺癌对于选择性抗癌疗法产生反应的决定因子，并鉴别出了可用来判断乳腺癌治疗潜在预后及患者分层的一种与谷氨酰胺摄取相关的标记物。
紫杉醇抗癌药物是最常用来对抗实体瘤的药物之一，紫杉醇抗癌药物是治疗卵巢癌和晚期乳腺癌的一线药物。
已知这一药物可与微管结合，”冻结”住它们，在细胞分裂之时阻止它们分离染色体。
这会导致分裂细胞，尤其是快速增殖的癌细胞死亡。
紫杉醇抗癌药物证实了RNF5在控制谷氨酰胺摄取以及在对抗肿瘤发展中发挥重要作用。
紫杉醇抗癌药物测试肿瘤RNF5和谷氨酰胺载体蛋白例如SLC1A5的水平或可用来鉴别出哪些患者最适合以紫杉烷类为基础的治疗。
紫杉醇抗癌药物也是由10-脱乙酰基浆果赤霉素III半合成制备。
其水溶性优于紫杉醇，具有光谱抗肿瘤性，主要用于治疗乳腺癌，卵巢癌，前列腺癌，和非小细胞肺癌等。
年销售额超过25亿美元。
尽管一段时间以来研究人员已经知道许多的肿瘤细胞类型依赖于谷氨酰胺实现生长和生存，但却不清楚谷氨酰胺摄取的调控机制。
来自加州大学伯克利分校的科学家们发现了处方药紫杉醇抗癌药物在细胞内的极微妙效应，紫杉醇抗癌药物正是这一效应使得它成为了世界上最广泛应用的抗癌药物之一。
世界各地许多科学家们的研究工作已经表明了，紫杉醇抗癌药物细胞骨架极其不同于坚硬的动物骨架。
微管是一种管状蛋白多聚体结构，其不断地生长和收缩，通过这样来推拉细胞各处的物质，包括染色体。
科学家们将这称之为动态不稳定性。
微管还为将细胞器和其他包装物输送到细胞各处提供了一条高速公路。
紫杉醇的合成研究进展
化工能源化 工 设 计 通 讯Chemical EnergyChemical Engineering Design Communications·163·第47卷第1期2021年1月紫杉醇由于其良好的抗肿瘤作用，得到广大的关注，广泛应用于治疗乳腺癌、头颈癌、卵巢癌、肺癌等。
紫杉醇注射液、紫杉醇酯质体、紫杉醇（白蛋白结合型）等产品不断更迭换代、提高疗效，将紫杉醇更好地应用于临床实践。
紫杉醇结构化学名为5β，20-环氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羟基紫杉烷-11-烯-9-酮-4，10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯-13[（2’R ，3’S ）-N-苯甲酰-3-苯基异丝氨酸酯]，结构如图1所示。
图1 紫杉醇结构式1 紫杉醇的全合成紫杉醇母核骨架为6-8-6碳环结构，其全合成自20世纪开始，全世界众多化学家致力于其合成路线的研究。
其全合成路线主要分为三个过程：紫杉醇母核骨架的合成；对骨架进行官能团反应，对其进行修饰；最后加上侧链苯基异丝氨酸完成全合成。
其全合成过程复杂、烦琐，耗时长，且效率低下。
Wender 合成是目前公开最短的紫杉醇全合成路线。
以化合物2为起点，经过系列反应得到化合物7，完成AB 环的合成。
经过C-3位反应和氧化反应得到10，经醇醛缩合得到12，完成C 环的建立。
然后经过C-5的溴取代，C-4、C-20臭氧化完成对含氧D 环的建立，得到13，再进一步得到巴卡亭Ⅲ（14），最后完成C-10乙酰化及侧链的加成得到紫杉醇。
其合成路线，如图2所示。
23OOOOHOH OTMSO OO O CHO45678OOO OOOOOOO OTBSTIPSOOTBSTIPSOCHOOH TIPSOTIPSOOBOMOHHO OBzOAcOTESO OO OOO 910TIPSOHO OH OHOH BrOTroeAcO AcOO OHO 1211OBzOBzHHOBOMTIPSOTIPSOHO HOHO 1314OCOPhOAcOBzH HHH O OOTES 1OO ONPhAcO AcOOHBzOTroe图2 Wender 合成路线2 紫杉醇的半合成紫杉醇的全合成烦琐且收率低，不适合大生产，于是应寻求更佳的合成方法。
紫杉醇的提取
1、紫杉醇的提取——溶剂萃取法溶剂萃取法常用于紫杉醇的粗提阶段。
紫杉醇的粗提阶段又可分为初级萃取和次级萃取。
在这两级萃取过程中，溶剂的选择对于精提产物的质量和过程经济性具有重要影响。
初级萃取和次级萃取一般采用的溶剂系统不同。
各个时期的研究者对这两个过程的溶剂系统的研究结果已有详细的总结。
最近、日本学者对紫杉醇提取的溶剂种类进行了详细的研究，结果表明：在乙酸乙酯、乙醚、乙腈、丙酮、甲醇、已烷、异丙醇、乙酸乙酯-甲醇、乙酸乙酯-二氯甲烷、乙酸乙酯-丙酮、乙酸乙酯-乙醚等溶剂中，以乙酸乙酯-丙酮（1：1）混和溶剂提取的效果最好，所得浸膏仅为植物干重的7.70%，紫杉醇的含量高达浸膏的0.084%，而用甲醇提取所得浸膏为植物干重的20.98%，紫杉醇的含量为浸膏的0.027%，尚需要多次抽提才能得到紫杉醇含量较高的浸膏。
现在看来利用乙酸乙酯-丙酮（1：1）一次便可以使紫杉醇提取量高于以往常用溶剂所能得到的量，这就为后序的分离纯化工作带来很大的方便，由于乙酸乙酯-丙酮（1：1）的价格与甲醇的价格相当，且可回收再利用，因此，这一提取方法的经济性较为合理。
在初级萃取过程中引入超声技术，可大大缩短初级萃取过程的时间。
例如Xu采用甲醇-二氯甲烷（95.5）作初级溶剂，所需萃取时间约为35-60min。
在溶剂系统不变的情况下，将原料与溶剂的混和物进行超声振荡，萃取达到平衡的时间缩短到仅5min，与此对比，Hoke 等人采用纯甲醇作为初级溶剂，无超声振荡，所需时间长达16-48h。
超声技术的引入，除可大大缩短萃取平衡时间外，还可以使初级萃取在低温下进行，从而避免了紫杉醇在高温下转化为其它物质而造成收率降低。
2、紫杉醇的提取——色谱法早期的色谱纯化紫杉醇工艺是采用多根硅胶层析柱串联的一种操作，因为硅胶对紫杉醇的不可逆吸附造成的损失很大，使得紫杉醇的收率很低，仅为0.004%左右。
近年来，随着色谱技术的进步，不断有新的色谱技术被引入到紫杉醇的分离提取过程中来。
提取紫杉醇初分离工艺的研究
紫杉醇（paclitaxel，商品名Taxol）是当今一种重要的抗癌新药。
早在1971年，Wani等就从红豆杉树皮中发现并分离出了这种物质。
由于它特异的临床抗癌疗效，1992年被美国FAD批准为治疗晚期乳腺癌的特效药而上市。
然而，在实际药物生产中，紫杉醇的大规模制备仍存在许多问题。
首先，紫杉醇来源匮乏，其主要存在于红豆杉树皮和针叶中，其次，紫杉醇在植物中含量极低，大约为0.010%~0.013%，而紫杉醇与其它紫杉烷化合物在化学结构和极性等方面又极为相似，要将它们完全分离困难很大。
关于紫杉醇提取分离方法，已有过不少的研究。
其中以液-液萃取应用最为广泛，在文献报道的每一种工艺中，几乎都采用过它。
Willey等和Mattina等在测定样品中紫杉醇浓度时，选择了固相萃取作为HPLC分析的预处理。
以分子间吸附为机理的硅胶柱层析，是制备紫杉醇最常用的方法之一。
1984年，Senilh等曾采用氧化铝柱层析处理红豆杉浸膏，但所报道的分离效果不是太理想。
1995年，Matysik等曾用制备薄层层析来少量获取紫杉醇。
本研究的目的，在于寻找一条切实可行的工艺路线，最大程度地提高紫杉醇的回收率，以充分利用有限的红豆杉资源；采用一些高效、经济的提取分离方法，减少过程步骤，快速、简捷地提取出紫杉醇。
1 材料方法1.1 材料红豆杉树皮提取浸膏，云南张峰植物加工厂；紫杉醇对照品，纯度大于95%，Sigma；固相萃取柱（C18填料，10ml），大连化学物理研究所；GF254硅胶和粗孔硅胶（100~140目），青岛海洋化工厂；层析氧化铝（200~300目），上海新诚精细化学品有限公司。
DU-7紫外/可见分光光度计及FL-750HPLC仪，Beckman公司；XZ-6A旋转蒸发器，北京科龙仪器公司；常压层析系统，Pharmacia公司。
1.2 方法1.2.1 液-液萃取称取红豆杉树皮浸膏于锥形瓶中，加CH2Cl2（浸膏CH2Cl2的重量比为1：50），充分溶解，再加入与CH2Cl2等量的水，充分混合后静置分层，分液回收有机相，弃水相。
紫杉醇制药原理范文
紫杉醇制药原理范文
紫杉属植物的树皮富含紫杉醇，传统的提取方法是采用乙醇、甲醇等有机溶剂，通过浸泡、蒸馏、浓缩等步骤将紫杉醇从树皮中提取出来。
这种方法简单直接，但效率较低，产量有限，且存在伤害植物资源的问题。
改进的提取方法使用超声波辅助提取，其基本原理是通过超声波的震荡作用，提高溶剂与植物细胞壁之间的质传递效应，加速紫杉醇的释放。
在超声波处理下，植物细胞壁破裂，有利于紫杉醇与溶剂相互作用，提高提取效果。
除了传统的提取方法，现代生物技术也被用于紫杉醇的生产。
通过细胞培养、组织培养等方法，可以实现对紫杉醇的生物合成。
具体方法是将紫杉树中富含紫杉醇的细胞分离、培养，利用生物反应器中提供的适宜环境和营养物质，使细胞自身合成紫杉醇。
这种方法无需大量砍伐紫杉属植物，减少了对植物资源的损害，并且可以进行规模化生产。
经过提取得到的紫杉醇并不是最终药物，还需要进行结构修饰和半合成等步骤，以得到可供临床使用的药物形式。
这是因为紫杉醇本身对水溶性较差，不能有效地进入细胞内，导致药效降低。
结构修饰的方法包括改变紫杉醇的化学结构，引入水溶基团，增强药物的水溶性。
同时，还可以通过半合成的方法合成与紫杉醇类似结构的分子，提高药物的效果，降低毒副作用。
总的来说，紫杉醇的制药原理包括提取、生物合成、结构修饰和半合成等步骤。
这些步骤共同完成了从自然资源到药物的转化，为临床治疗提供了重要的药物。
随着生物技术的不断发展，紫杉醇的制备工艺也不断完善，为更好地开发和利用紫杉醇的抗肿瘤活性提供了可能性。
紫杉醇生产工艺
6.1 概述 6.2 紫杉醇半合成工艺过程与质量控制
1
6.1 概 述
（一）紫杉醇简介 （二）紫杉醇的生产工艺路线
2
紫杉醇
简介
O
O O OH
苯 基 异 丝 氨 酸
10
*
7*
B *C
O NH O
A
*
* 13 1 * *
H
4 *
*
5
O
* 2' *
O
OH O O
HO
OO
11个手性中心 紫杉醇 Taxol 三环二萜核
20（Leabharlann ）基础四元环的制备[2+2]型环加成反应：乙酰氧基乙酰氯在三乙 胺作用下脱HCl生成烯酮，烯酮与亚胺反应得 单一顺式异构体。
21
（3）基础四元环的制备
产物的立体构型取决于亚胺上取代基的类型。 取代基为芳基、芳杂环、共轭烯烃时，环加成 产物为顺式。
22
（4）氧化四元环的制备
cis-3-乙酰氧基-4-苯基-2-吖叮啶酮
乙氧乙氧基
28
（6）硅化四元环的制备
保护剂乙烯基乙醚与羟基的亲电加成机理
H
OC2H5 + H+
CC
H
H
H + OC2H5 HCC
HH
Ph NH
+
H HO
O
H C C OC2H5
HH
Ph NH
-H
HO
O
H C C OC2H5
HH
➢ 需保持反应体系的单一性，防止其他具有较强
3
紫杉醇
简介
HO O OH
O
O NH O
抗癌药物紫杉醇的制备、抗癌机理和应用前景
抗癌药物紫杉醇的制备、抗癌机理和应用前景摘要紫杉醇具有显著的抗癌活性和独特的作用机理，现主要用于治疗晚期乳腺癌和卵巢癌等。
紫杉醇分子结构复杂，具有特殊的三环[6+8+6]碳架和桥头双键以及众多的含氧取代基，其全合成引起国内外许多有机化学家的兴趣。
本文简述紫杉醇的制备、抗癌机理和不良反应。
关键词紫杉醇制备抗癌机理不良反应紫杉醇（Taxol）是从短叶红豆杉树皮中分离得到的一种四环二萜化合物。
1992年12月29日美国FDA正式批准紫杉醇作为治疗晚期卵巢癌的新抗癌药物。
由于该药疗效确切、副作用小，在美国上市后销售情况一直很好，并保持着20％以上的年销售增长率。
2000年该药的销售额已超过10亿美元。
紫杉醇被当今世界上公认为广谱、活性最强的抗癌药物，尤其是对子宫癌、卵巢癌、乳腺癌具有特殊的疗效，它的问世被誉为20世纪90年代国际上抗癌药三大成就之一[1]。
美国FDA已原则上同意其他国家及厂家生产紫杉醇制剂并可以作为通用名药上市，这就打破了美国施贵宝公司对该药的垄断生产。
这一决定意味着紫杉醇制剂价格将大幅下降，从而有利于广大肿瘤患者服用。
然而由于这种天然化合物资源极其有限，严重的限制了其研究和应用的进度。
同时尖锐的供需矛盾也在医学、化学和植物组织培养领域的科学家中引起了一场非同寻常的广泛研究，以增加这种化合物的来源和寻找高效、低毒、来源丰富的紫杉醇类似物。
经过40多年努力，已经取得了可喜的进展。
1紫杉醇的制备1.1天然红豆杉植物提取[2，3]紫杉醇的直接来源是从天然植物红豆杉树皮、树叶中提取。
但并不是所有品种的红豆杉树均含有紫杉醇，而且不同种类的红豆杉紫杉醇含量的多少差别非常明显。
红豆杉属植物共11种，我国有4种及1种变种，它们分别是云南红豆杉、西藏红豆杉（又名喜马拉雅红豆杉）、中国红豆杉、东北红豆杉、南方红豆杉（又名美丽红豆杉）。
紫杉醇在不同植物来源以及植物体不同部位的含量与提取分离有着直接关系。
Vidensek对东北红豆杉幼苗以及成树的不同部位中的紫杉醇含量作了分析，结果表明，成树紫杉醇的含量高低依次为：树皮>树叶>树根>树干>种子>心材。
紫杉醇全合成
紫杉醇全合成紫杉醇是一种用于治疗肿瘤的药物，其原料来自于太平洋紫杉树。
但是由于太平洋紫杉树生长缓慢，净化成本高，所以大规模生产紫杉醇是一项巨大的难题。
为此，科学家们开始探索紫杉醇的全合成方法，即通过化学合成方式生产紫杉醇。
紫杉醇的全合成分为5个步骤：第一步：合成环氧局部结构在这个步骤中，将苯乙烯和氢氧化钠加入二氯甲烷中，制备出一个含有羟基的物质。
接着，通过邻二甲基苯基酚的合成，将羟基改为酚环，得到紫杉醇所必需的环氧局部结构。
第二步：引入侧链在这个步骤中，需要利用脂肪酸的结构来构建紫杉醇的侧链。
将乙烯基叔丁基基乙烯酸叔丁酯与一系列的化学品反应，可以制备出紫杉醇侧链的前体，即乙撑二酸酐。
第三步：连接环氧和侧链在这个步骤中，需要将侧链与环氧局部结构连接起来。
将环氧与乙撑二酸酐进行反应，得到含有侧链和环氧的物质。
第四步：制备紫杉醇的骨架在这个步骤中，需要将紫杉醇骨架的各个部分连接起来。
将含有侧链和环氧的物质与一系列的化学品反应，最终得到紫杉醇骨架，这个骨架就是紫杉醇的主要结构。
第五步：去保护基在这个步骤中，需要将合成过程中保护羟基的化学品去掉，使得紫杉醇的羟基暴露出来。
通过一系列化学反应，去掉羟基保护基，得到最终成品——紫杉醇。
总的来说，紫杉醇的全合成方法需要借助高级有机合成技术，包括羟基的保护和去保护、各种侧链的引入等。
虽然整个合成过程比较复杂，并且需要很多的前体物质，但相比于从太平洋紫杉树中提取的成本，这种化学合成方法仍然具有很大的优势，可以为大规模生产紫杉醇提供技术支持。
紫杉醇的分离与纯化
摘要目的：探索红豆杉中紫杉醇的提取纯化工艺。
方法：将新鲜的红豆杉树皮干燥后用甲醇浸泡，陶瓷膜进行固液分离，纳滤膜浓缩，再用大孔树脂HZ818层析，洗脱液浓缩结晶，再活性炭脱色后甲醇重结晶，再硅胶正向层析，洗脱液浓缩后正已烷结晶，再真空干燥得成品。
结论：按本方法从红豆杉中提取的紫杉醇纯度为97.5%，收率为十万分之八。
关键词红豆杉，紫杉醇，提取纯化，树脂，硅胶目录一、紫杉醇目前的一些分离纯化方法。
................................................. 错误!未定义书签。
（一）液相萃取。
.................................................................................... 错误!未定义书签。
（二）固相萃取法。
............................................................................... 错误!未定义书签。
（三）树脂层析法。
............................................................................... 错误!未定义书签。
（四）活性炭脱色。
............................................................................... 错误!未定义书签。
（五）硅胶正向层析。
.......................................................................... 错误!未定义书签。
（六）结晶纯化。
.................................................................................... 错误!未定义书签。
紫杉醇的合成路线
紫杉醇的合成路线
紫杉醇的合成路线主要有以下几种：
1.通过生物合成法制备紫杉醇。
具体过程包括形成紫杉烷骨架、氧化、乙酰化和苯甲
酰化等步骤。
2.通过化学合成法制备紫杉醇。
具体过程包括先合成戊二酸二甲酯，再合成丙酮乙酸
酯，最后通过还原反应将硫酮官能团还原成醇官能团，得到紫杉醇。
3.通过根木素法合成紫杉醇。
具体过程包括将根木素环化、氧化、酯化等反应得到紫
杉醇中间体，再经过氧化、酯化等反应制备出紫杉醇。
4.通过甲酰胺法合成紫杉醇。
具体过程包括将甲酰胺与异戊烯醇反应得到中间体，再
将其转化为紫杉醇。
以上是紫杉醇的几种合成路线，目前应用较多的是通过生物合成法制备紫杉醇。
紫杉醇的制备
科技 疆向导
◇ 职业教育◇
紫杉醇的制备
齐 艳 荣 （ 天津药科中等 专业学校 中国 天津
３ ００ ） ０ ４ ０
【 要】 摘 紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物， 目 也是 前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。 位素 同
示踪表明， 紫杉醇只结合到聚合的微管上， 不与未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在 细胞内积累大量的微管， 这些微管的积累干扰 了 细胞的各种功能， 特别是使细胞分裂停止于有丝分裂期 ， 阻断了细胞的正常分裂。 通过 Ⅱ一 Ⅲ临床研 究 ， 紫杉醇主要适 用于卵巢癌 和乳腺 癌 ， 对 肺癌 、 大肠癌、 黑色素瘤、 头颈部 癌、 巴瘤、 瘤也都有一 定疗效 。 淋 脑 【 关键 词】 紫杉醇； 大肠癌； 癌； 管 抗 微 分 裂时不能形成纺锤体 和纺锤丝 ． 制了细胞分 裂和增殖 ． 而发挥 抑 从 抗肿瘤作用。 体外研究 表明 ， 醇浓度依赖性地 、 紫杉 可逆性地结合到微 管上 ， 尤其是结合到 Ｎ端微管蛋白的 Ｂ 亚单位上 ． 一 这一作用降低 了聚 合所需要微管蛋 白的浓度 ． 使动态平衡 向着微管 装配的方向移动 ． 增 加聚合的速率和产量。 另外 紫杉醇抑制有丝 分裂所必需 的微管 网的正 常动态再生 ． 防止正常 的有 丝分裂纺锤体 的形成 ． 会 导致 染色体断裂 并抑制细胞复制和移行 紫杉醇改变了细胞 的有 丝分裂过程 ． 使有丝 分裂持续时问从 Ｏ５ ． ｈ增加 到 １ｈ 并抑制细胞质分裂 ５． 体内实验中 ，紫杉醇对动物移植性肿瘤 Ｂ ６ ｗｓ １１ ｉ ｅ 、肺癌 、３ ８ Ｐ ８ 和 Ｃ８ ３ 等都有较强的生长抑制作用 对 Ｋ Ｂ细胞和 １ １ 细胞集落形成 １ ０ ２ 的抑制强度超过长春新碱和秋水 仙碱 在 １ ４名患急性髓性或淋 巴细 胞 白血病的病人 中， 紫杉醇治疗剂量 ≤１５ ２ ０ （ ｍ） ｍ 前后 ， 自然死亡 的带 有 Ｄ Ａ链断裂特征 的单核 细胞的 比例 ．从 治疗 前的 ０ ％～ ６ Ｎ ． １％增加 ４ 豆 杉 及 南 方 红 豆 杉 ， ４ ％ ４ 对于不同植物来源的组织培养细胞 中的紫杉醇含量 ． 经过大 量研 到治疗后的 ３ ％－５ Ｍａ ｔｅ ｎｈｙ等认 为紫杉醇 的抗癌 作用 除稳 定微 管而 阻止细胞 分裂 究表明 ． 愈伤组织 中的紫杉醇含量以云南红豆杉为最高 。其 次为欧洲 尚有 明显 的细胞周期非依 赖性 作用 ． 他们 发现紫杉醇 与细菌性脂 红豆杉 ． 次为红豆杉 ： 再 而悬 浮培养细胞 中的紫杉醇 含量 从高到低 一 外 ， 次为云南红豆杉 、 洲红豆杉 、 豆杉。 欧 红 多糖（Ｐ ） Ｌ Ｓ一样 ， 可激活 鼠巨噬细胞杀灭肿 瘤的作用 。１ 外 ． ６ 此 ｌ 他们还发 ｙ 一 ＬＳ 红豆杉植 物样 品经过预处 理 ． 再用有 机溶剂提取 、 然后用液液 萃 现在正常 鼠的巨噬细胞中 ． 干扰素 、Ｐ 、或紫杉 醇单用仅可诱导出 然而紫 取法 、 固相萃取法 、 Ｏ 超临界流体萃灭法等方法进行萃取。 Ｃ２ 再经过 柱 低度或中度浓度的一氧化氮合成 酶基 因表达及一 氧化氮分泌 ． Ｐ 干扰素合用则一氧化 氮合成 酶基 因表达及一氧化氮 层析法 、 薄层色谱法 、 沉淀法 、 胶束电动毛细管色谱法 、 膜分离法 、 树脂 杉醇或 Ｌ Ｓ与 一 并 吸附 分离法 、 高速逆 流色谱法 、 化学 反应法 、 药理作用 靶点法 分离 纯 分泌量均明显增加。一氧化氮分泌量 与肿瘤细胞 杀灭量呈正相关 ． 且紫杉醇在有一氧化氮合成酶竞争性抑制剂 Ｎ 一 ６ 甲基一 一 Ｌ 精氨酸存在 化。 下， 经紫杉醇抑制的巨噬细胞不 能杀灭肿瘤靶细胞 。 ａ ｔ ｖ Ｍ ｎ ｅ 等的研究 ｈ １ ． ２紫杉醇的全合成 尚有激 活巨噬细胞介导的抗肿 有机合 成紫杉 醇分子 结构复杂 ， 具有 特殊 的三 环ｆ＋ ＋ １ ６ ８ ６碳架 和 表明紫杉醇除有抗有丝分裂的作 用外 ． 桥头双键以及众多的含氧取代基。 其全合成引起国内外许 多有机化 学 瘤作用。 紫杉醇是一种新型抗微管药物。 微管 网的重组对细胞生命周期和 家的兴趣。 先后共有 ３ Ｏ多个研究组参与研究 ， 实属罕见。 ２ 经 Ｏ多年的 努力 ．于 １ ９ ９ ４年才 由美 国的 ＲＡＨｏ ０ ＿． ｈ ｎ与 ＫＣＮｃｌｏ 个研究 组 细胞分裂都具有重 要作用 ， ．．ｉ ａｕ两 ｏ 紫杉醇可促进微管 聚合 ． 而后通 过防止去 聚合过程而使微管稳定化 ． 此种稳定化作用可抑制微 管网正常动力学 同时完成紫杉醇的全合成 重组 ， 人们利用 这一独 特机制对 癌症及某些其他疾病进行治疗 ｌ － ３紫杉醇的半合成 半合成法 指的是经过 某些化学反应 将红豆杉属植 物 中所含 的紫 ３ 临床 应 用 ． 杉醇类似物转化为紫杉醇 ３１紫杉醇 治疗卵巢癌 ． 为 了保护紫杉树珍贵的资源 ， 避免大量采集紫杉树树皮造成资 源 国内孙燕 等用紫杉醇 １０ １５ｌ ５ ～ ７ （ ｍ 静滴 ３ ５ ， ３ ４ 重复 Ｉ ｌ ～ｈ每 — 周 破坏 ， 应将 目 瞄向了利用可再生资源进行 紫杉醇的生产 。１９ 年 ． 治疗 ｌ 标 ９４ ５例卵巢癌 ， 有效率为 ４ ％。Ｍａｔｎ 等用紫杉 醇联合 卡铂 治疗 ０ ｒ ｉ ｏ 美国 Ｈ ｌ （ 教授 以 １ 一 ｅｅｔ — ａｃｔ ｎ ｏｔ ｏ） ｎ ０ ｄ ａ ｙ ｂ ｃａ ０ Ⅲ为原料半合成 了紫杉醇 ３ ｅｌ ｉ ３例 卵巢癌 ． 紫杉 醇 １５ ２ ５ｍｇｍ） ２～ ２（ Ｃ ￣ 静滴 ３ ｈ后 加卡铂 ２０ ４ ０ｍｇ ５～０ （ ／ 紫杉醇半合成 前体 １ 一 ｅｃｔｌｂ ｃａｉ Ⅲ是从 欧洲红豆杉针叶 中分 ｍ 静滴 ０５ 有效率为 ７ ％。Ａｎ ｒａ 用紫杉 醇联 合顺 铂治疗卵巢 癌 ０ ｄａｅｙ— ａｃｔ ｎ ｏ ， ． ｈ， １ ｄｅｓ 离出来的 ． 可达到 ０１ ． ％。 由于针 叶再生很 容易 ． 紫杉醇半合成可有 较 ４ ４例 ， 紫杉醇 １５ｍ ／ｚ ３ （ｇｍ） 静滴 ３ ． ｈ 顺铂 ７ （ ｇｍ）每 ３ 重复治疗 共 ６ ５ｍ ／￣． 周 丰富的原料 所以 ， 经美国 Ｂ ＭＳ公司计划在获得 美国 Ｆ Ａ批 准后 ． Ｄ 于 周期 ． 效率为 ７ ％ 有 ５ １９ 年底便停止从树皮 中萃取 紫杉醇生产 他们成 功地 利用紫杉树 ４ ９ ３ ． ２紫杉醇 治疗乳腺癌 的细枝 、 叶等可再 生材料 ， 提取初 级原料 ， 人工半合成 生产紫杉醇 。 再 Ｇ ｌ ｏ Ｋ等用紫杉醇单药治疗 ４ ４名乳腺癌患者 ． ３ ｅｍ ｎ ５ 每 周一 次用 从此 ． 紫杉树不再被破坏性采集 ［ ４ １ 紫杉醇 １５ｍ ／ ｚ ７（ｇ ） ｍ 静滴 ２ ｈ 有效率 为 ２ ％。 ４， ９ 国内孙燕ｆ 等用紫杉醇单 ８ 】 ６ 紫杉醇 １０ １５ １ ｍ 静 滴 ３ ， ３ ４ ５ ～ ７ （ Ｉ １ ｈ 每 － 此外 ． 还有多种方法制备紫杉醇嘲 织培养 和细胞培养进展很快 ， 药治疗晚期乳腺癌病人 １ 例 ， 但无法达 到商业要求 ．所 以 目前只是扩 大药源的潜在方 法 ：基 因工 周为一次 ，～ ２ ３周期 为一疗程 ． 有效率为 ６ ．％ 用紫杉醇 １５ｍｇｍ） ２５ ３（ ／￣ 程——虽然利用基因工程提高细胞中紫杉醇生 物合成的具体途径 ． 但 静滴 ． 阿霉素 ４ （ｇ ￣ 滴联 合 治疗乳 腺 癌病 人 １ ０ｍ ／ ） ｍ静 ４例 ． 效 率 为 有 是 由于紫杉醇合成可能需要多个基因（ 或一组基 因 ） 与 ， 以还有待 ５ ． 杨俊兰 参 所 ７１ ％。 用紫杉醇联合 阿霉素 、一 ｕ治疗常规化疗 失败 的乳腺 ５Ｆ 于进一 步研 究 ： 通过杂交方法 培育生长快 紫杉醇含量 高的红豆杉新 癌病人 ， 总有效 率为 ３ ． ％（／８ ３３ ６１１ ３ ３３紫杉醇治疗食道癌 － 品种 ． 以其 为原料提取分离紫杉醇 Ｋｌ ｎ ｅ ｅ 等对 ４ 名晚期食道癌患者进行评价 ．其 中原发 部位 和转 ｓ ２ ２紫杉醇 的药理作用机制 ． ２ ２ ． ９ 腺癌和磷状上皮 细胞癌 患者根据组织亚 微 管是真核细 胞的一种组 成成份 ． 它是 由两 条类似 多肽（ Ⅱ和 Ｂ 移部位缓解者有 １ 名ｆ ％１ ） ［ ９ １ ０ ９ ０， ／ ５ ３ ２ 中位 应 ／） 亚单位构成 的微管蛋 白二 聚体形成 的 正常情况下 ， 微管 和微管 蛋白 型而定 的应答率相 似 ，前 者为 ３ ％（ ３ ）后者为 ２态平衡 ， 导 答持续时间为 ９ 诱 ３４紫杉醇治疗非小细胞性肺癌（ Ｓ Ｌ ） ． Ｎ Ｃ Ｃ （ 下转第 １ ９页 ） ５ 和促进 微管蛋 白聚合 防止解聚 ， 稳定 微管 ， 这些作用 导致细胞在 有丝
紫杉醇生物体内合成过程
紫杉醇生物体内合成过程
紫杉醇是一种天然产物，最初是从紫杉树（Taxus brevifolia）中提取的。
紫杉醇的生物体内合成过程涉及植物细胞中的多个生物
化学途径和酶的作用。
以下是紫杉醇在植物体内合成的一般过程：
1. 起始物质，紫杉醇的生物合成起始物质是丙酮和葡萄糖。
这
些起始物质通过植物体内的代谢途径被转化为更复杂的中间体。
2. 萘乙酰辅酶A的合成，在生物体内，丙酮和葡萄糖首先被转
化为萘乙酰辅酶A，这是紫杉醇合成途径的第一步。
3. 萘前体的合成，萘乙酰辅酶A接下来被转化为一系列的中间体，最终形成萘类化合物。
4. 萘类化合物的重排和环化，这些萘类化合物经过一系列酶催
化的反应，发生重排和环化反应，形成紫杉醇的前体物质。
5. 紫杉醇的合成，紫杉醇的前体物质最终被转化为紫杉醇，这
是通过多个酶催化的复杂反应完成的。
需要指出的是，紫杉醇的生物合成过程是一个复杂的生物化学过程，涉及多个酶的作用和多个中间产物的转化。
这个过程在植物细胞内进行，受到细胞内环境和调控因素的影响。
此外，紫杉醇的生物合成过程也是植物生物技术研究的热点之一，对其生物合成途径的研究有助于开发紫杉醇的生物合成技术，以满足医药和工业上对紫杉醇的需求。
紫杉醇制备工艺原理及流程
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白蛋白结合型紫杉醇纳米粒的制备方法与流程
白蛋白结合型紫杉醇纳米粒的制备方法与流程白蛋白结合型紫杉醇纳米粒是一种新型的药物载体，具有优异的药物输送性能。
在制备过程中，首先需要获取纳米粒的主要原料——白蛋白和紫杉醇，并通过一系列的步骤进行反应和处理，最终得到稳定的纳米粒产品。
制备白蛋白结合型紫杉醇纳米粒的方法主要包括以下几个步骤：步骤一：准备原料需要准备白蛋白和紫杉醇作为制备纳米粒的原料。
白蛋白是一种常见的蛋白质，可以从动物血浆中提取得到，紫杉醇则是一种常用的抗癌药物。
步骤二：制备白蛋白溶液将提取得到的白蛋白溶解在适量的缓冲液中，通过搅拌和超声处理使其充分溶解，并去除其中的杂质和气泡。
步骤三：制备紫杉醇溶液将紫杉醇溶解在有机溶剂中，如二甲基亚砜或乙醇，形成紫杉醇溶液。
需要注意的是，紫杉醇是一种毒性较大的药物，操作时应采取相应的防护措施。
步骤四：制备白蛋白结合型紫杉醇纳米粒将白蛋白溶液缓慢地加入紫杉醇溶液中，同时进行搅拌和超声处理，使两种溶液充分混合。
在此过程中，白蛋白会与紫杉醇发生结合，形成白蛋白结合型紫杉醇纳米粒。
步骤五：调整pH值和温度根据需要，可以通过调整溶液的pH值和温度来控制纳米粒的大小和稳定性。
一般来说，较高的pH值和温度会促使纳米粒的形成和稳定。
步骤六：纳米粒的稳定处理得到初步的白蛋白结合型紫杉醇纳米粒后，需要进行稳定处理。
可以通过添加适量的稳定剂或进行超声处理等方法来提高纳米粒的稳定性，防止其在储存或输送过程中发生团聚或分解。
步骤七：纳米粒的表征和质量控制对制备得到的白蛋白结合型紫杉醇纳米粒进行表征和质量控制。
常用的表征方法包括粒径分析、Zeta电位测量、扫描电子显微镜观察等，通过这些方法可以确定纳米粒的粒径分布、表面电荷和形貌等性质。
白蛋白结合型紫杉醇纳米粒的制备方法包括准备原料、制备白蛋白溶液、制备紫杉醇溶液、制备白蛋白结合型紫杉醇纳米粒、调整pH值和温度、纳米粒的稳定处理以及纳米粒的表征和质量控制等步骤。
这种方法制备的白蛋白结合型紫杉醇纳米粒具有较好的稳定性和药物输送性能，有着广泛的应用前景。
紫杉醇的提取制备
具体介绍
紫杉醇（paclitaxel，商品名Taxol）是从红豆杉属（Taxus spp）植 物中分离得到的一种具有独特抗癌作用的二萜类化合物。
分子式为C47H51NO14，分子量为853.89，外观为白色针状结晶，
熔点为213~216 ℃ ，比旋度为[α ]D20-49（MeOH），结构式如图。
乙酸乙 叶末 酯 /丙酮 质量/g /mL 浸膏 质量/g 浸膏 得率/%
ห้องสมุดไป่ตู้时间/h
普通浸提
索氏提取
60
60
200
200
48
8
7.60
12.44
12.5
20.7
在提取方式上索氏提取明显优于普通浸提，所用时间较少， 而且普通浸提过滤时由于粉末过于细微，很难过滤. 而索氏提取则 可直接得到提取液且无需过滤。
TLC 薄层板检测
将结晶产物 4℃低温离心后弃上清，沉淀溶解在甲醇中进行薄 层板点样检测。展开剂：氯仿/甲醇（体积比为12∶1）；显色剂：茴 香醛/硫酸/乙醇（体积比为1∶3∶50）放置干燥箱内100℃烘干，10
min 或直接在紫外检测器下观察。紫杉醇的Rf值为0.6 左右. 薄层色
谱法检测的优点在于所用设备简单，分离、定量检测迅速，在一般实 验条件下就可以完成，但是该方法不能够测定紫杉醇的含量及纯度。
紫杉醇硅胶柱层析纯化
由于己烷沉淀法得到的样品中仍含有较多杂质，本试验采用了分 段梯度操作. 洗脱中以正己烷/丙酮作为流动相。 取1 g浸膏溶于5 mL 丙酮，加样于含15 g硅胶的层析柱，用正己 烷/丙酮（体积比为8∶2）洗脱，每5 mL 收集流份，不断减少流动相
中正己烷的含量，最终以正己烷/丙酮（体积比为5∶5）结束. 对所有
紫杉醇提炼步骤
紫杉醇规模生产工艺及方案（1500吨/年规模）一、项目规模生产工艺方案1、紫杉醇概述紫杉醇具有复杂的化学结构，母核部分是一个复杂的四环体系，有许多的功能基团和立体化学特征，化学名称为：5β，20-环氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羟基紫杉烷-11-烯-9-酮-4，10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯-13-[（2’R，3’S）-N-苯甲酰-3-苯基异丝氨酸酯，分子由3个主环构成二萜核，上连1个苯异丝氨酸侧链，分子中有11个手性中心和多个取代基团，分子式为C47H51NO14，相对分子质量853.92，元素百分比（%）C：66.41，H:6.02，N:1.64，O:26.23。
紫杉醇结构式为：紫杉醇为白色结晶性粉末，无臭，无味，在甲醇、乙醇或氯仿中溶解，在乙醚中微溶，在水中几乎不溶。
甲醇制3mg/ml 的溶液，比旋度为-48℃~56℃。
甲醇制15μg/ml的溶液，在227nm处有最大紫外吸收，10mg紫杉醇加甲醇溶液10ml溶解后应澄清无色。
紫杉醇注射剂是新型抗微管药物，通过促进微管蛋白聚合抑制解聚，保持微管蛋白稳定，抑制细胞有丝分裂。
体外实验证明紫杉醇具有显著的放射增敏作用，可能是使细胞中止于对放疗每咸的G2和M期，适用于卵巢癌和乳腺癌及NSCLC的一线的二线治疗。
用于头颈癌、食管癌、精原细胞瘤，复发非何金氏淋巴瘤等治疗，静脉给予紫杉醇注射剂，药物血浆浓度呈双曲线，蛋白结合率89%~98%，主要在肝脏代谢，随胆汗进入肠道，经粪便排出体外（﹥90%），经肾清除只占总清除的1%~8%。
红豆杉浸膏1.1操作过程：（1）浸提：将原料投入提取罐内，干红豆杉每罐填装约1.2吨的原料，加入约4吨的甲醇浸提，温度为45±5℃，每遍循环浸提大于4小时，浸提完成后，将浸提液排入浸提液储罐中，进行蒸汽吹渣，温度控制在85±5℃,压力小于等0.2Mpa，回收残余的甲醇溶液，吹渣结束后，将废渣移到废料堆场集中处理。
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溶解性：可溶于甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷，三氯甲烷等有机溶剂 ，难溶于水（在水中溶解度仅为0.006mg/ml），不溶于石油醚。与糖 结合成苷后的水溶性大大提高，但在脂溶性溶剂中溶解性降低。 酸碱性：紫杉醇分子结构中虽然含有氮取代基，但氮原子处于酰胺状 态，且邻近连有苯基、羟基、酯基等吸电子基，不显碱性，故紫杉醇 为中性化合物。 化学性质：紫杉醇在PH4-8范围内比较稳定，碱性条件很快分解，对 酸相对稳定；紫杉醇在甲醇钠溶液中发生剧烈反应，可与MnO2试剂发 生反应，且不易还原。
紫杉醇的提取制备
中药化学与分析 宗阳 20141576
1 2 3 4 5
具体介绍 提取制备的方法 实验结果 分析与讨论
具体介绍
紫杉醇（paclitaxel，商品名Taxol）是从红豆杉属（Taxus spp）植 物中分离得到的一种具有独特抗癌作用的二萜类化合物。
分子式为C47H51NO14，分子量为853.89，外观为白色针状结晶，
高效液相色谱检测
将紫杉醇标准品和实验中制备的样品分别进行HPLC 检测，紫杉 醇标准品的HPLC 检测得到的回归方程为：Y=0.0298 + 0.356 X ， r=0.998。说明紫杉醇在10~20μ g/mL浓度范围内线性关系良好。紫杉 醇标准品和实验中制备的样品HPLC 谱图如图4所示。 紫杉醇标准品HPLC 图谱
TLC 薄层板检测
将结晶产物 4℃低温离心后弃上清，沉淀溶解在甲醇中进行薄 层板点样检测。展开剂：氯仿/甲醇（体积比为12∶1）；显色剂：茴 香醛/硫酸/乙醇（体积比为1∶3∶50）放置干燥箱内100℃烘干，10
min 或直接在紫外检测器下观察。紫杉醇的Rf值为0.6 左右. 薄层色
谱法检测的优点在于所用设备简单，分离、定量检测迅速，在一般实 验条件下就可以完成，但是该方法不能够测定紫杉醇的含量及纯度。
紫杉醇的HPLC 检测
色谱条件：流动相为甲醇：水=65∶35，进样量10 μ L，流量为 1.0 mL／min，检测波长为227 nm 检测。标准曲线绘制：用甲醇配制
浓度为 0.1 mg／mL 的紫杉醇标准品溶液，分别以10、12、14、16、
18、20 μ L 的进样量进行HPLC分析并绘制标准曲线。
提取制备方法
提取纯化工艺
60g红豆杉枝叶、树皮、 树枝杉枝叶、树皮、树枝
干燥与粉碎，乙酸乙酯-丙 酮（1:1）索式提取8h
紫杉醇浸膏, 取5g小试
经50 mL 石油醚固液萃取， 90 mL 乙酸乙酯溶解， 90 mL 1mol/L 的NaOH洗 涤，蒸馏水分两次淋洗
有机相用无水硫酸钠脱 水后浓缩，己烷沉淀后上样层析 （硅胶用量25 g）， 经结晶反应获得纯化的紫杉醇样品
决资源保护与医学需要之间的矛盾提供新思路。
用 10 倍体积（mL/g）乙酸乙酯溶解适量浸膏；加入等体积 1mol/L 的NaOH 溶液，搅拌10~20 min；静置分相后，有机相用1/2 倍NaOH。溶液体积的蒸馏水洗涤 2 次。由于第二次洗涤常伴有乳化 现象，所以在第二次洗涤中改用浓度为0.5 mol/L 的盐水洗涤，洗涤 后有机相用无水硫酸钠进行脱水，旋转蒸发浓缩至25%~30%的有机相 体积。
树枝叶样品HPLC 图谱
由图可知，本实验获得的紫杉醇样品，通过回归方程计算，样品 中紫杉醇含量为6.3 μ g，纯度为93%。
迄今为止，红豆杉属植物仍然是紫杉醇的主要资源，紫杉
醇的价格曾经一度每公斤高达上千万美元。 目前国际市
场上，每公斤紫杉醇仍达几十万美元。 本实验利用紫杉
树的细枝、叶等可再生材料，提取紫杉醇，该方法将为解
紫杉醇是一种分子量很大，结构很复杂的化学物质。 目前，紫杉醇 的来源主要有以下几种：(1)天然红豆杉植物提取;（2）人工栽培;(3 ）半合成；（4）全合成；（5）生物合成；（6）真菌发酵；（7）植 物组织细胞培养。但更多的还是从天然和栽培红豆杉的树皮或枝叶中 直接提取得到。 其提取物中含有大量的植物腊、色素和树胶等杂质 ，特别是其中共存许多分子结构和理化性质与紫杉醇极其相近的紫杉 烷系列化合物，给分离工作带来很大的困难。 研究表明，紫杉醇有明显的抗肿瘤作用。对人体肿瘤MX-1乳腺癌、 CX-1结肠癌、LX-1肺癌异种移植均有明显的抑制作用。临床上主要用 于卵巢癌、也用于肺癌、恶性淋巴瘤、乳腺癌等。
紫杉醇浸膏的己烷沉淀
紫杉醇有在正己烷中沉淀这一特性，所以向上述得到的紫杉醇 乙酸乙酯溶液中加入不同体积的正己烷溶剂，将紫杉醇沉淀下来，沉 淀效果如图所示。
当加入正己烷的量较小时，紫杉醇沉淀的量也小，在加入正己烷与 乙酸乙酯溶液体积比在6∶1 以上时，沉淀量几乎不再变化，但HPLC 测 定发现，体积比在10∶1 以下时，紫杉醇不能完全沉淀。 因此，正己烷 与乙酸乙酯溶液的体积比以10∶1 为好，加入量再大，不但对去除杂质 没有多少帮助，还会造成正己烷使用量过大，溶剂浪费。
实验结果
由60g红豆杉枝叶粉末最后获得紫杉醇69.64 μ g，纯度 93%。由于在本实验中选取试剂均以无毒、廉价为原则， 所以在环境、经济性上有一定的优势，可以为工业放大提 供参考。
分析与讨论
溶剂对紫杉醇提取率的影响
不同种类的溶剂对红豆杉紫 杉醇醇类化合物的萃取效果不同
溶剂 氯仿 叶末质 量/g 30 30 30 30 浸质量 /g 3.75 5.40 5.21 6.18 4.63 浸膏得 率/% 12.5 18.0 17.4 20.6 15.4
紫杉醇浸膏的固液萃取纯化
本实验采用了石油醚（60~90℃）对浸膏进行固液萃取，结果如 图所示。
随石油醚用量的增加，萃取的杂质百分率也在增加，但当石 油醚的用量达到原始浸膏的5倍（mL/g）时，被萃出的杂质百分 数则不再有明显变化。 因此，采用为原始浸膏5倍体积的石油醚 进行固液萃取效果最佳。
紫杉醇浸膏的液-液萃取纯化
乙酸乙 叶末 酯 /丙酮 质量/g /mL 浸膏 质量/g 浸膏 得率/%
时间/h
普通浸提
索氏提取
60
60
200
200
48
8
7.60
12.44
12.5
20.7
在提取方式上索氏提取明显优于普通浸提，所用时间较少， 而且普通浸提过滤时由于粉末过于细微，很难过滤. 而索氏提取则 可直接得到提取液且无需过滤。
。 本实验采用了几种溶剂进行提 甲醇
取，所得结果见右表。ຫໍສະໝຸດ 乙醇 酯/丙酮确定采用乙酸乙酯/丙酮为提 乙酸乙 取溶剂。
甲醇/乙 30 醇 氯仿/丙 30 酮
4.22
14.0
提取方法对紫杉醇提取的影响
实验采用普通浸提法与索式提取法进行比较，两种提取方法使用相 同量的乙酸乙酯/丙酮提取相同质量的红豆杉叶粉末。结果见表。
收集液进行毛细管薄层点样后，发现在体积比为7∶3 这个浓度之前 杂质很多。
紫杉醇的结晶
紫杉醇结晶体系以甲醇和水（3∶1）体系较佳. 将层析后含紫杉
醇的组分减压浓缩后，按8 mL/g 的比例溶解在甲醇中，水浴加热到
50℃，同时在搅拌的情况下缓缓滴入1/3 甲醇体积的双蒸水，4℃冷 却放置48 h 以上即可得呈白色发黄的紫杉醇针状晶体。
紫杉醇硅胶柱层析纯化
由于己烷沉淀法得到的样品中仍含有较多杂质，本试验采用了分 段梯度操作. 洗脱中以正己烷/丙酮作为流动相。 取1 g浸膏溶于5 mL 丙酮，加样于含15 g硅胶的层析柱，用正己 烷/丙酮（体积比为8∶2）洗脱，每5 mL 收集流份，不断减少流动相
中正己烷的含量，最终以正己烷/丙酮（体积比为5∶5）结束. 对所有