卡式不完全抗体筛查操作规程
血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测
5）37°C孵育15分钟；
6 ）离心5分钟（9rpm2分钟，15rpm3分钟）；
7）肉眼观察结果。
结果判定：
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
5、试剂卡应放在18-25C储存，如若长期放在4C冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
**医院文件编号:
**
输全抗体检测卡一母体IgG抗体效价检测=r八 =n =—
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反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（MicrocolumnGel Heamagglutination As，aMGHA ）。
试剂材料：
1、DTT （或2-Me）应用液2、妻子血清3、效价检测卡4、丈夫0.5-0.8%工细胞悬液
阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反映；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色
不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色
混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
注意事项
1、血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。
BIOVUE不规则抗体筛选操作规程
BioVue不规则抗体筛查操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：不规则抗体筛查2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
具有已知抗原的人红细胞将与血浆中相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue －poly Cassettes3．包装规格：400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4．试剂成分：抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第1～6柱：抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性抗－lgG(兔)抗－C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3) 抗－C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7) FD＆C1＃蓝色染料FD＆C5＃黄色染料5．试剂的储存与效期：储存方法：2～25℃环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行，应将标本置于2－8℃保存。
六、试剂准备：抗人球蛋白(IgG,C3b/C3d)检测卡为即用型产品。
每一微柱中含有仅适用于一个测试的试剂。
卡式不规则抗体操作方法
卡式不规则抗体操作方法卡式不规则抗体操作方法主要包括以下几个步骤：抗原包被、孵育体、洗涤、探针标记、显色以及结果解读。
首先，抗原包被是指将待检测抗原包被在固相材料上，可以使用ELISA板、纳米颗粒等材料作为固相基质。
在包被过程中，需要在固相材料上涂覆包被液，将待检测抗原与固相材料充分结合。
接下来是孵育体环节。
将包被好的固相材料与待检测样本共孵育，使抗原与抗体结合。
待检测样本可以是体液样本，如血清或细胞上清等。
抗原与抗体结合的结果可以通过孵育体环节来检测。
然后是洗涤步骤。
洗涤是为了去除没有结合的抗原和抗体，以减少非特异性的背景信号。
洗涤过程中，可以使用缓冲液进行一系列的冲洗，确保只有特异性的抗原与抗体结合在固相材料上。
探针标记是指使用标记物来特异性检测抗原与抗体的结合情况。
可以使用酶联免疫吸附法（ELISA）中的酶标记物，如HRP等，也可以使用放射性同位素、荧光物质等作为标记物。
标记物在将样本与固相结合后，可以通过对标记物进行染色、放射性检测或荧光检测等方式，来获得抗原与抗体结合的信息。
接下来是显色步骤。
显色可以通过使用显色底物，比如ABTS、TMB等底物，来进行信号放大和可视化。
底物与酶标记物的反应会产生着色或荧光效应，从而将结合信息转化为可见的信号。
最后是结果解读。
通过读取显色或荧光信号的强度，可以获得待检测抗原的定量信息。
结果解读可以通过比较待检测样本的信号强度与阴性对照、阳性对照的信号强度来判断抗原是否存在。
通常，将待检测样本的信号强度与阴性对照的信号强度进行比较，如果待检测样本的信号强度高于阴性对照，则表示抗原存在。
总结起来，卡式不规则抗体的操作方法主要包括抗原包被、孵育体、洗涤、探针标记、显色以及结果解读。
通过这些步骤，可以对特定抗原的存在与否进行定性和定量分析。
在实际操作中，需要注意标本的处理、试剂的准备和操作条件的控制，以确保实验结果的准确性和可靠性。
不规则抗体筛检卡使用
不规则抗体筛检卡标准操作方法
（一）原理：微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。
在一定离心力下，该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的
红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。
（二）操作步骤：
1、红细胞悬液的制备：将筛检红细胞或谱细胞配成0.8%浓度的悬液。
2、将准备好的不规则抗体筛检卡做好标记；
3、将配好的筛检细胞或谱细胞悬液加入标好的微管中，各一滴（或50μl）；
4、分别立即加入被检者血清1滴（或50μl）；
5、加样后的试剂卡，置37℃孵育器中孵育15分钟；
6、使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500 rpm3分钟），取出肉眼
观察结果。
（三）结果判定：根据所提供的筛检红细胞或谱细胞的反应格局来判定结果例：按Ⅰ(-)、Ⅱ(4+)、Ⅲ(-)的实验结果及提供如下的筛检红细胞反应格局来分析
阴性结果用排除法,阳性结果用可能包含法。
以前五种抗原为例：
Ⅰ(-)：可排除D、C、e；
Ⅱ(4+)：判断可能含有D、C、E、c、e；
Ⅲ(-)：可排除D、C、c、e；
综上，可认为：此样品血清中可能含有-E。
不规则抗体筛选操作规程
不规则抗体筛选操作规程一．试剂和仪器1.抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）多特异检测试剂卡或抗人球蛋白（IgG）单特异检测试剂卡。
2.上海血液生物医药有限公司3%抗筛试剂红细胞悬液3.离心机和孵育器二．标本收集与处理1．血清或血浆都可以使用。
2．如果在直接抗人球蛋白实验中加入了血浆标本，因为钙离子的失活，补体依赖的抗体可能无法检测出来，所以建议使用血清标本。
三．操作步骤1．取出试剂卡，平衡至室温；使用前离心确保无气泡和断层。
2．观察卡的反应液面高度，确保试剂液面高于凝胶平面3mm左右，否则请勿使用；撕开试剂卡上的锡纸，撕开后的微柱请于1小时内进行下面操作。
3. 分别向反应柱内加入50 ul患者血清或血浆。
注意，加样时，吸头请勿触及微柱管壁。
4．再分别向反应柱内加入10ul 3%红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(抗筛红细胞)。
5．观察柱中的反应物各组分是否混匀，必要时轻弹几下微柱充分，使反应物混匀。
6．在孵育仓中37℃孵育15分钟。
7．用离心机离心5分钟，离心必须在加样后30分钟内进行。
8. 从微柱正反两面判读并记录结果。
四．结果判读阳性结果（＋）：红细胞凝集为阳性结果。
阴性结果（－）：无溶血及红细胞未凝集为阴性结果。
溶血会导致玻璃珠上方呈粉红色或红色。
如果发现溶血现象，则应先将血清或血浆置于56℃水浴30min以灭活补体，然后再重复试验，观察红细胞凝集现象。
4 + 反应：红细胞在柱中玻璃珠上面凝集，并形成一个环形带。
3 + 反应：发生凝集的大部分红细胞停留在玻璃珠的上半部分。
2 + 反应：发生凝集的红细胞分布于整个玻璃珠床，柱的底部有少量细胞。
1 + 反应：大部分凝集的红细胞停留在玻璃珠床的下半部分，柱的底部有少量红细胞。
阴性反应：所有红细胞均穿过玻璃珠床，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。
五.注意事项1. 试剂卡应保存在2～25℃，请勿冷冻保存；请勿将试剂卡放入自动除霜的冰柜中，也不要放在离热源很近或阳光直射的地方。
抗体筛查标准操作规程
直接或间接抗球蛋白试验（Coombs test）介绍：多克隆抗人球蛋白（AHG）常工作中常用来检测和鉴定同种异体抗体、交叉配血试验和直接抗球蛋白试验（DA T）。
试剂：6孔微柱凝胶卡，凝胶介质中含有多克隆AHG试剂（兔抗-IgG和单克隆抗-C3d，C139-9细胞系），保存于<0.1% NaN3中，置于18℃-25℃下。
器材：微量加样器，吸量管，吸嘴，微柱凝胶卡架，操作台，37℃孵育箱，微柱凝胶卡专用离心机，标本要求：为了获得最佳的试验结果，应该尽量使用新鲜的标本或者使用符合实验室接收标准的标本。
标本应该使用柠檬酸盐，EDTA或CPD-A抗凝。
当使用血清代替血浆作为标本时，必须通过1500g或10min的离心除去血浆，以免纤维蛋白影响试验结果。
标准的准备：a) DAT或对照红细胞悬液使用2号稀释液配置0.8%红细胞悬液：在使用前使稀释液恢复室温，吸取1.0ml 2号稀释液到一干净的试管中，加入10µl包被好的红细胞，混匀，这些红细胞悬液可以立即被使用。
b) 使用血浆或血清检测间接抗球蛋白试验（IAT）过程。
标本在分离后没有被使用的时候最好保存于2-8℃，最多保存48h，超过这个时间最好保存在-20℃冰箱。
测试过程：不要使用已经干涸的，有气泡的，密封膜损坏了的或者凝胶处于微孔上部或铝箔上边的微柱凝胶卡。
Ⅰ. 直接抗球蛋白试验（DAT）1．检查微柱凝胶卡，标记好患者或献血员的名字或代码。
2．根据需要移除铝箔，并保持向上。
3．加入50µl红细胞悬液到适当的微孔中。
4．将微柱凝胶卡置于专用离心机上离心10min。
5．检查和记录结果。
Ⅱ．抗体筛查（IAT）请使用准备好的测试细胞试剂（ID-DiaCell），在使用前需要恢复室温。
1. 检查微柱凝胶卡，标记好患者或献血员的名字或代码。
2. 根据需要移除铝箔，并保持向上。
3. 加每种测试细胞试剂50µl到适当的微孔中（标记相应的测试细胞类型）。
微柱凝胶卡式法不规则抗体筛查及Rh血型鉴定在临床输血中的应用
有 良好的疗效 。 本研究在用药后 出现了本组不 良反应发生率为
３ ． ６ ， 表 现 为激 越 、震 颤 、 口干 、 出汗 、 失眠 、头 昏 、肝 ３５％
功能异 常、体重增加、厌食 等不 良药物 反应， 在治疗全过程 中
并 没有 进 行 特 殊 处 理 而 自行 缓 解 。 阿立 哌 唑 是 一种 安 全 有 效 的 抗精 神病 药 物 ， 以提 高 患 者 的 依 从性 ，从而 提 高 治 疗 效 果 ， 可 值 得 临床 推广 使用 。
致性培训。
监测药物不 良反应用 ＴＳ Ｅ Ｓ量表。用药后 １ 、４ 、２ 、６周各评定 １ 治疗 ６周。在治疗期间监测生命体征、心 电图和血常规。 次，
４ 统 计 学方 法
所有数据应用 Ｓ Ｓ Ｉ． Ｐ Ｓ Ｏ ０软件处理， 采用 ｔ 检验 。
表 １ 治疗前后 ＰＮ Ｓ评分 比较 （ｘ ±ｓ ＡＳ ）
为确保临床输血安全有 效防止免疫 性溶血性输血 反应的 发生 ， 我院输血科 自 ２０ ０ ５年 １ １月开始 ， 应用微柱凝胶卡式法 对所有 术前备血及临床输血治疗 的患者检测 Ｒ ｈ血型及不规则
抗体筛查。 并对筛检出的 ５例不规则抗体 由潍坊市红十字中心
血 站 输 血研 究 室进 行 鉴 定 并 准 备合 适 的血 液 ，对 检 出 的 ｌ ６例
阿立 哌唑属喹 啉类衍 生物，是新一代 的抗精 神病药 多 巴
胺 （Ａ 和 ５ 色胺 （－Ｈ ） 统 稳 定 剂 （Ｓ Ｓ ， 外文 献 认 为 Ｄ） 羟 ５２ Ｔ 系 ＤＳ） 国
其对 治疗精神 分裂症患者疗 效显著 ， 能明显 改善患者 阳性症
状 、阴 性 症状 和 认 知 功 能 。用 于 精 神 病 的 临 床 治疗 可 以较 好
不规则抗体筛查卡式法
不规则抗体筛查卡式法不规则抗体筛查卡式法，听起来有点复杂对吧？别担心，我们今天就来聊聊这个话题，让它变得简单又有趣！大家都知道抗体是什么。
就像是身体里的小卫士，保护我们免受各种病菌的侵害。
不过，有些人呢，身体里会出现一些“不听话”的抗体，或者说是不规则抗体。
这些家伙就像是那种在球场上不守规矩的球员，时不时给你带来点麻烦。
没错，这就是我们要筛查的对象了。
什么是筛查卡式法呢？嘿，这个听起来可就像个科学实验室的高科技产品了。
其实吧，它就是一种简便、快速的检测方法。
想象一下，你在家里做实验，不需要太多的仪器，也不需要太复杂的步骤，简单易懂。
你只需要一张小卡片，加上一点样本，等待一段时间，就可以看到结果，轻轻松松。
就像在煮泡面，等个几分钟就可以吃上一碗热腾腾的美食，谁不爱呢？再说到这些不规则抗体，为什么要筛查它们呢？想想，身体里有个“小坏蛋”在作乱，肯定得赶紧找出来啊。
那些不规则抗体可能会导致各种疾病，像过敏反应、免疫系统紊乱，甚至更严重的病情。
筛查就像是医生的“侦探工作”，帮助找到潜在的健康隐患。
相信我，早发现早治疗，才是王道！这就好比在海里钓鱼，提前知道哪儿有鱼，绝对能大获全胜。
说到检测的过程，其实也没那么复杂。
你只需要用小针扎一下，取一点血液，像是在做一个小实验。
然后，把这点血液放到那张神奇的卡片上，等待个十几分钟，期间你可以喝杯茶，看看电视，完全不影响你的生活。
等到时间到了，看看卡片上的结果。
如果出现了一条线，那恭喜你，没问题！如果有两条线，哎呀，可能就得去医院进一步检查了。
这卡式法还有个大优点，操作方便，结果直观。
就像是考试成绩一样，分数高低一目了然，谁也不用再去揣测。
很多人都害怕去医院抽血，想象中都是一阵紧张，结果搞得自己心慌慌的。
可这卡式法，简直就是解放双手，既省时又省力，真是给人一种“轻松搞定”的感觉。
这个方法也不是万能的。
有些复杂的情况，可能还得通过其他的检测手段来进一步确认。
不过，作为初步筛查，卡式法无疑是个好选择。
不规则抗体筛查试验操作规程
XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。
不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体检测标准操作流程(SOP)
目的:输血前进行检验查,可对有妊娠史,多次输血史,大量输血的病人进行不完全抗体的初选.
操作:
1、取3—5名“O”型正常人抗凝血(新鲜血常规抗凝血)进行等量混合。
2、用无菌生理盐水洗涤3—5次。
3、配制成2%红细胞悬液(上述离心沉淀红细胞1ml加生理盐水49mL混匀)待用。
4、取病人(受血者)血清或血浆100mL和2%红细胞悬液100mL等到量混合，然后离心，侄去上清液，混匀，倒在玻片上，显微镜观察是否凝集。
5、如有凝集，说明该受血者体内存在不规则抗体，毅然交叉配血不能进行。
6、如无凝集才能配血。
微柱凝胶卡式法不规则抗体筛查与输血安全
c
E
表 1 11 名特异性抗体阳性患者临床资料与检测结果
性别 年龄（ 岁） 输血史 妊娠史
临床诊断
抗体特异性
用血情况
1 男 80
有
-
前列腺癌、肾功不全尿毒症期
抗-E 输洗涤 RBC 48 U，输悬浮 RBC 16 U，血浆 1 000 ml
2 男 55
有
-
肝硬化、上消化道出血
抗-E
输悬浮 RBC 21 U
关键词： 微柱凝胶卡式法； 不规则抗体； 抗体筛查； 输血安全 中图分类号： R457. 1 + 1 文献标识码： B 文章编号： 1004-549X（ 2011） 10-0884-02
为确保临床输血安全有效，防止免疫性溶血性输血反应 的发生，本院应用微柱凝胶卡式法，对有无输血史，妊娠史而 需要输血的患者，均常规进行输血前不规则抗体筛查。并将 筛查阳性标本分别送北京市临床输血质控中心开放实验室 和北京市红十字血液中心进行鉴定，及时准备相配合的血液 输注，收到 了 很 好 的 临 床 效 果。现 将 本 院 2009 年 1 月 ～ 2010 年 11 月间的 1 470 人次抗体筛查结果以及抗筛阳性患 者临床输血情况报道如下。
1 材料与方法
1. 1 检测对象 本院 2009 年 1 月 ～ 2010 年 11 月门诊和住 院有输血史、妊娠史而需输血的患者，共 1 470 人次。男性 777 例，年龄 2 ～ 97 岁； 女性 693 例，年龄 12 ～ 98 岁。 1. 2 试 剂 与 仪 器 ABO-Rh 血 型 检 测 卡 （ Grifols，批 号： 9019. 01） ，Serigrup Diana A1 / B（ 批号： 10007. 01） ，抗球蛋白 检测 卡 （ Grifols，批 号： 9123. 01 ） ，Serscan Diana3p 抗 筛 细 胞 （ 批号： 10001. 01） ，鉴定细胞（ 美国 Immucor 公司） ，抗球蛋白 血清（ 上海血液生物医药有限责任公司） ，Diana 离心机（ 型 号： DG-232） 、Diana 孵育器（ 型号： DG-230） 。 1. 3 微柱凝胶卡式法抗体筛查 用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号抗体筛查细 胞与患者血清在微柱凝胶卡上反应，按操作说明，取 50 μl 0. 8% 的筛选细胞悬液和 25 μl 被检者血清加入对应的反应 孔内，37℃ 孵育 15 min，离心 9 min（ 转速为 120 g） ，观察结 果。红细胞沉于 底 部 为 阴 性，悬 于 凝 胶 上 或 凝 胶 中 为 阳 性。 采用间接抗球蛋白试验对阳性血清进行确证。对阳性标本 进一步用谱细胞与患者血清在微柱凝胶卡上做抗体鉴定。
卡式不规则抗体操作方法
卡式不规则抗体操作方法卡式不规则抗体操作方法是一种常用的实验技术，常用于检测抗体的存在和浓度。
以下是一般的卡式不规则抗体操作方法：1. 准备抗原：将需要检测的抗原溶解在缓冲液中，通常为PBS（磷酸盐缓冲液）或Tris缓冲液，并调整pH值。
2. 准备固相载体：选择合适的载体，如ELISA板或磁珠，然后在载体上吸附抗原。
可以使用直接吸附法或间接法。
- 直接吸附法：将抗原直接吸附到固相载体上，并将载体孵育在适当的温度下，使抗原牢固结合。
- 间接法：将抗原与小分子链结合，如蛋白A/G或biotin，然后将这些标记分子吸附到载体上。
3. 阻断非特异性结合：将非特异性结合位点进行阻断，以减少背景噪音信号。
常用的方法包括在载体上孵育蛋白质或牛血清蛋白。
4. 添加样品或标准品：将待测样品或标准品加入载体中，使其与载体上的抗原发生反应。
5. 添加一定浓度的检测抗体：将与待检抗原特异性结合的检测抗体加入载体，并进行孵育，使其与待检抗原发生反应。
6. 洗涤：将载体进行充分的洗涤，以去除未结合的物质，以减少背景噪音信号。
7. 添加二级抗体：二级抗体与检测抗体特异性结合，常为辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体。
可以选择适当的荧光素或颜色底物来检测反应。
8. 添加底物：添加相应的底物，如TMB（3,3',5,5'-四甲基苯基联氨），以发生酶反应。
反应时间通常为10-20分钟。
9. 停止反应：通过添加停止剂，如硫酸或酸浸泡，停止酶反应。
10. 读取结果：使用底物反应生成的颜色或荧光信号进行光度计测量或荧光测量。
根据标准曲线或对照样品，确定待测样品中抗原的浓度。
以上是一般的卡式不规则抗体操作方法，实际操作可能会根据具体的实验目的和试剂的不同而有所不同。
在操作过程中应严格遵守实验室操作规范，并进行实验设备和试剂的消毒和无菌处理。
不规则抗体筛选试验标准操作规程(sop)
不规则抗体筛选试验标准操作规程一、目的为规范微柱凝胶抗球蛋白检测卡在红细胞不规则抗体筛选试验中的应用，保证实验结果的准确性和有效性。
二、适用范围输血科进行的微柱凝胶卡式不规则抗体试验。
三、原理红细胞血型抗原—抗体反应体系在微柱凝胶卡微孔上端反应室反应后，如红细胞血型抗原与相应特异性抗体发生凝集反应后，离心后被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或者颗粒间隙之中，不能通过凝胶筛网，而未发生抗原—特异性抗体凝集的红细胞则可以通过凝胶筛网沉降至微柱凝胶底部。
四、步骤和方法1、取微柱凝胶抗球蛋白检测卡放入专用离心机，3000r/min离心1min后撕开锡纸膜，正立放置待用。
2、在标记为I、II、III的各反应腔中分别加入对应的I、II、III号筛选红细胞稀释液（1滴细胞+3滴lis液）50微升，再在标记为I，II，III的各反应腔中分别加入对应的受检者血清（血浆）20微升，加入后轻轻震荡3次使其充分混合。
3、将检测卡在微柱凝胶专用孵育器中37℃孵育15min后，用专用离心机以1800r/min·2min，2500r/min·1min离心后取出判断结果。
5、结果判读：I、II、III型红细胞任何一种出现阳性反应，表明该血清（血浆）不规则抗体筛选阳性。
五、质量控制微柱凝胶试剂卡，试剂筛选红细胞在有效期内使用。
六、注意事项1、检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室5—10min平衡至室温。
2、撕开微柱凝胶卡锡纸膜时，注意避免各微柱间特异性抗体试剂的交叉污染。
3、细菌污染，纤维蛋白析出及抗凝不佳的血，可产生假阳性结果，建议使用血清。
4、严格遵循离心力，离心时间要求，离心速度过快，离心时间过长均易产生假阴性结果。
5、由于试剂生产厂家，批号不同等因素，红细胞浓度，吸取样品的量及离心条件等环节要求有所差异，以试剂说明书为准。
不完全抗体筛检操作规程
血型不完全抗体检测操作规程
[样本要求]：血样用枸橼酸钠或EDTA等抗凝，用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。
图二.
[样本准备]：筛检标准红细胞配制为1%浓度。
试剂卡室温平衡。
图一.
[配套试剂]：筛检标准红细胞
如图一，血型不完全抗体检
测卡如图二，抗原格局如图
三
[实验步骤]:
(1) 试剂卡室温平衡后1
离心一次，并做好编号。
(2)将配制好的0.5%－1%浓度筛检红细胞分别加入I、II、III管,每管50UL;
(3)将待检者血清分别加入I、II、III管,每管50UL;
(3)加样好的试剂卡，置专用孵育器中，370C中孵育15分钟；
(5)使用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟、1500r/min，3分钟），判定结果。
[结果判定]：
一、阳性（+ ）：红细胞浮在凝胶表面或部分散入于胶中（即大于等于1+报阳性，）。
表示有不规则抗体,将结果与试剂红细胞的抗原格局图比对,分析抗体类型,
也可以进一步检测以鉴定抗体.
阴性（－）：红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。
表示被检血清中未发现不规则抗体.
溶血（Hemo）：红细胞溶解，作为阳性结果对待。
筛检红细胞反应格局。
抗体筛检试验操作规程
抗体筛检试验操作规程
1.【目的】检查血清中是否有不完全抗体。
2.【试剂】
2.1凝聚胺试剂：
2.2筛检红细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号：
3.【操作步骤】
3.1取试管三支，各加被检血清（或血浆）2滴，分别加入筛检红细胞（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）各一滴。
3.2各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。
3.3用BASO血库专用离心机1000g离心力，离心10秒，（若用普通离心机，离心条件为：3400rpm，离心10秒）然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
3.4轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5最后加入Resuspending2滴，轻轻转动试管混合并观察结果。
如凝集散开，表示由Polybrene引起的非特异性凝集，抗体筛检结果为阴性。
如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体筛选试验标准操作规程(sop)
不规则抗体筛选试验标准操作规程一、目的为规范微柱凝胶抗球蛋白检测卡在红细胞不规则抗体筛选试验中的应用，保证实验结果的准确性和有效性。
二、适用范围输血科进行的微柱凝胶卡式不规则抗体试验。
三、原理红细胞血型抗原—抗体反应体系在微柱凝胶卡微孔上端反应室反应后，如红细胞血型抗原与相应特异性抗体发生凝集反应后，离心后被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或者颗粒间隙之中，不能通过凝胶筛网，而未发生抗原—特异性抗体凝集的红细胞则可以通过凝胶筛网沉降至微柱凝胶底部。
四、步骤和方法1、取微柱凝胶抗球蛋白检测卡放入专用离心机，3000r/min离心1min后撕开锡纸膜，正立放置待用。
2、在标记为I、II、III的各反应腔中分别加入对应的I、II、III号筛选红细胞稀释液（1滴细胞+3滴lis液）50微升，再在标记为I，II，III的各反应腔中分别加入对应的受检者血清（血浆）20微升，加入后轻轻震荡3次使其充分混合。
3、将检测卡在微柱凝胶专用孵育器中37℃孵育15min后，用专用离心机以1800r/min·2min，2500r/min·1min离心后取出判断结果。
5、结果判读：I、II、III型红细胞任何一种出现阳性反应，表明该血清（血浆）不规则抗体筛选阳性。
五、质量控制微柱凝胶试剂卡，试剂筛选红细胞在有效期内使用。
六、注意事项1、检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室5—10min平衡至室温。
2、撕开微柱凝胶卡锡纸膜时，注意避免各微柱间特异性抗体试剂的交叉污染。
3、细菌污染，纤维蛋白析出及抗凝不佳的血，可产生假阳性结果，建议使用血清。
4、严格遵循离心力，离心时间要求，离心速度过快，离心时间过长均易产生假阴性结果。
5、由于试剂生产厂家，批号不同等因素，红细胞浓度，吸取样品的量及离心条件等环节要求有所差异，以试剂说明书为准。
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卡式不完全抗体筛查操
作规程
Last revised by LE LE in 2021
卡式不完全抗体筛查操作规程文件编号XN-XK-SXK-006
第二版共 2 页
生效日期年月日
编写者：
审批者：
复审人：
复审日期：
医务科保管者：（签名）
检验科主任：（签名）
输血科：（签名）
1.原理：
抗人球蛋白试验又称Coombs试验。
抗人球蛋白血清与已经致敏的红细胞悬液混合，红细胞表面的抗体球蛋白（即使其致敏的不完全抗体）与抗人球蛋白血清中的抗体发生特异性反应，使红细胞发生凝集。
在聚丙烯塑料透明卡片上的微柱型管中填充葡萄糖凝胶和抗人球蛋白，制成不完全抗体检测卡，在微柱凝胶中进行抗人球蛋白试验。
2.标本采集与要求：
采集被检对象静脉血，10分钟后离心，2000r/min,10分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀）。
3.试剂：
长春博迅生物技术有限责任公司提供不完全抗体检测卡。
4.仪器：
4.1.F YQ型免疫微柱孵育器
4.2.T D-3A型血型血清学用离心机
5.操作步骤
5.1.将试剂卡做好标记。
5.2.将1滴（50μl）筛检红细胞加入微管中。
5.3.分别立即加入被检者血清一滴（50μl）。
5.4.加样后的试剂卡，置孵育器中37℃孵育15分钟。
5.5.使用专用离心机离心5分钟，即2分钟900rpm，3分钟1500rpm取出
肉眼观察结果。
6.结果观察：
阴性：微管中的红细胞均沉淀在管底。
阳性：微管中的红细胞凝集块在凝胶上。
7.注意事项：
7.1.血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶管中
析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。
7.2.如在微柱管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体反应，也不
排除其他原因所致溶血，故对标本一定认真分析。
8.参考文献：全国临床检验操作规程（第二版）。