液体菌种的几种接种方法

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细菌的接种方法

细菌的接种方法
细菌的接种方法有：曲线划线法、分区划线法、棋盘格划线法、倾注平板法、斜面接种法、穿刺培养法、液体培养基接种法、菌落分纯法。

本实验室常用的有斜面接种法、液体培养基接种法、菌落分纯法。

一、斜面接种法
此法主要用于鉴定或保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力（如图1）
（1）用左手握住菌种管和斜面培养基底部，右手持接种环（针）。

（2）用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌。

（3）用接种环（针）伸入菌种管内挑取移种之菌落。

（4）伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线，或直接自下而上地蜿蜒划线。

（5）接种完，火焰灭菌管口，塞上棉塞，置于37℃培养。

二、液体培养基接种法（在比浊实验时可用到）
（1）用灭菌接种环挑取菌落或标本。

（2）在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌混匀在液体培养基中。

（如图2）
图1 斜面接种图2 液体培养基接种法
三、菌落分纯法
主要用于分离琼脂平板上的混合菌（如图3）。

（1）用接种针（环）垂直挑取所需分纯细菌的单个菌落，点在另一个固体琼脂平板上的一区，用接种环划线、涂布。

（2）第一区接种后烧红接种环，再划第二区，依次接种至第四区。

图3菌落分纯接种法。

杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术

杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术杏鲍菇是一种优质食用菇，其菇体细嫩鲜美、营养丰富，且有硫化葱蒜味道，深受消费者喜爱。

随着人们对健康、营养、绿色食品的追求，杏鲍菇的种植逐渐得到了广泛关注和推广。

液体菌种技术是一种高效、方便、重复性好且能够促进放大培养的菌株生长速度的技术。

本文旨在介绍杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培的关键技术。

一、液体菌种生产技术1、原料准备：在无菌条件下，将适量的玉米粉（或米粉、面粉）加入蒸馏水中搅拌均匀后，加入0.3%的琼脂。

煮沸使琼脂充分溶解，然后加入适量的蔗糖和牛肉膏粉，再次充分搅拌均匀。

2、液体培养基接种：将培养菌株在无菌条件下接种至液体培养基中，转移到恒温摇床进行培养，培养时间一般为5-7天。

3、菌体分离：使用高速离心将菌体和培养基分离，用0.45 μm的滤膜过滤，获得纯化后的液体菌种。

二、绿色高产栽培技术1、基质选择：在基质上进行栽培是杏鲍菇液体菌种生产的一个重要步骤。

杏鲍菇最适合生长的基质包括秸秆、木屑、锯末、玉米芯等，也可以使用优质蘑菇渣、菜籽饼等废弃物质或菌袋底废料作为基质。

2、驯化和预处理：在进行杏鲍菇栽培前，需要对基质进行驯化和预处理。

驯化是通过加热、蒸汽灭菌等方式消毒基质，预处理则是在驯化基质的基础上对基质进行水分调节、调整基质pH值等操作。

3、接种：在基质中均匀撒上杏鲍菇液体菌种，然后进行松压、覆盖保湿等操作，使其能够迅速生长。

4、环境控制：在杏鲍菇的生长过程中，需要控制环境温度、湿度、光照等参数，以提高其生长速度和产量。

一般来说，最适合杏鲍菇生长的环境温度在20-25°C之间，湿度控制在80-90%之间，光照不宜过强。

5、收获和加工：杏鲍菇一般生长周期在20-30天左右，当杏鲍菇黑色孢子盖完全展开时，即可进行收获。

杏鲍菇采摘后应及时清理残留的残渣和污垢，最好在当天进行加工和包装，以保证杏鲍菇的品质和口感。

总之，杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培是一种高效、科学化的种植模式，其关键技术包括液体菌种生产、驯化与预处理、基质选择和环境控制等。

微生物接种方法

微生物接种方法微生物接种是生物实验中的一项基本技术，也是各种微生物检测和研究中不可缺少的步骤。

本文将介绍一些常见的微生物接种方法，包括平板划线法、斜面接种法、液体培养基接种法和穿刺接种法等。

平板划线法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种纯化，得到单一的菌落。

该方法通过在固体培养基上划线，使菌种在培养基上繁殖并形成菌落。

具体步骤如下：(1)将固体培养基灭菌后倒入培养皿中，待凝固后加入适量菌液。

(2)用接种环取适量菌液，在培养皿表面划线。

(3)将培养皿放入适宜的温度下培养，观察菌落的生长情况。

(4)根据需要重复划线操作，直至得到单一的菌落。

斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种接种到斜面培养基上，以便于观察和保存。

该方法通过将菌液加入到灭菌后的斜面培养基中，使菌种在斜面上繁殖并形成菌落。

具体步骤如下：(1)将斜面培养基灭菌后放置在实验台上，用无菌操作法加入适量菌液。

(2)将接种环放入菌液中沾取少量菌种，然后在斜面培养基上划线接种。

(3)将培养皿放入适宜的温度下培养，观察菌落的生长情况。

(4)根据需要重复划线操作，直至得到单一的菌落。

液体培养基接种法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种接种到液体培养基中，以便于微生物的生长和繁殖。

该方法通过将菌液加入到灭菌后的液体培养基中，使菌种在液体培养基中繁殖并形成微生物。

具体步骤如下：(1)将液体培养基灭菌后倒入试管中，加入适量菌液。

(2)用摇床或其他设备将试管中的培养基混合均匀。

(3)将试管放入适宜的温度下培养，观察微生物的生长情况。

微生物接种技术是生物工程中一项重要的技术，广泛应用于生物制品制造、环境生物治理、医学诊断等领域。

本文将介绍微生物接种技术的基本原理、应用场景以及发展前景。

微生物接种技术是指将目的微生物通过一定的方式引入到培养基或发酵系统中，使其在特定的环境下生长繁殖，以达到特定的生物制品或环境治理的目的。

该技术的主要环节包括菌种选择、接种量确定、接种方法选择和培养条件控制等。

总结归纳液体培养基的接种

总结归纳液体培养基的接种液体培养基是一种常用的微生物培养工具，它提供了营养物质和适宜的环境条件，使微生物能够生长和繁殖。

接种液体培养基是进行微生物培养和研究的基础，具有重要的意义。

本文将总结归纳液体培养基的接种方法、操作技巧以及常见问题。

一、液体培养基的接种方法液体培养基的接种方法有多种，常见的有无菌移液管接种法、注射器接种法以及无菌环接种法等。

接下来将介绍这些方法的具体操作步骤。

1. 无菌移液管接种法先准备好培养基和移液管，确保其无菌。

首先需要用火将移液管的口焰消毒，然后用无菌吸管将待接种物悬浮在液体培养基中，将吸管置于移液管中，再将移液管的口焰消毒后，将其封闭。

2. 注射器接种法首先需要准备好注射器和培养基，确保其无菌。

将待接种物悬浮在培养基中，然后将接种物吸入注射器中，再将注射器头部插入培养基中，慢慢释放接种物。

3. 无菌环接种法准备一个无菌的环铊棒，用火将环铊棒焰消毒。

将待接种物悬浮在培养基中，然后将环铊棒沾取一些接种物，将其轻轻划过液体培养基的表面，使接种物均匀分布。

二、液体培养基的操作技巧在接种液体培养基时，需要注意一些操作技巧，以保证接种的准确性和无菌性。

1. 使用无菌技术在接种液体培养基之前，必须保证自己的操作、仪器和培养基都是无菌的，这样才能避免外界微生物的污染。

2. 注意接种量接种液体培养基时，需要根据需求合理控制接种量，以避免过度接种或接种过少。

3. 避免气泡产生在接种液体培养基时，需要小心操作，避免产生气泡。

气泡的存在会影响微生物的生长和观察。

4. 密封容器在接种后，需要将液体培养基的容器密封好，以防止外界微生物的污染。

三、常见问题及解决方法在液体培养基的接种过程中，可能会遇到一些问题，下面列举了几个常见问题及解决方法。

1. 培养基发生变色如果发现培养基变色，可能是由于培养基本身的问题或者接种物的污染。

解决方法是更换新的培养基或重新接种。

2. 生长速度缓慢如果微生物的生长速度很慢，可能是由于培养条件不适宜，例如温度过低或营养物质不足。

液体菌种的5种接种方法

液体菌种的5种接种方法液体菌种具有方便快捷菌龄短而一致，纯度高，活力强等优点，越来越受科研工作者和广大食用菌生产者的重视，但如何正确使用液体菌种尚未见系统报道。

液体菌种培养好后接种方法直接影响液体菌种优势的发挥，甚至关系到生产的成败。

笔者在规模应用液体中使用过多种接种方法，各有特点，下面介绍给大家以供参考。

1 料表面接种法这是目前采用较普遍的方法，接种时多为瓶装或袋装培养料，上端有一定的空间，如生产金针菇、茶薪菇、黑木耳、杏鲍菇菌包，以及生产香菇鸡腿菇、平菇等菌种，接种时尽量将料表面喷淋上菌种，液种萌发生长快，封面早杂菌污染的机会很小，除破袋外菌袋污染的机会极低，甚至以万袋计算可达到零污染。

这种方法的菌球处于氧气充足的条件下生长很好。

2 表面加枪头插入式接种法因表面接种法接种时菌球易被培养料的过滤作用阻滞在料的上半部分，菌丝生长需要从上往下生长，不能在料内上下同时生长。

如果将接种枪枪头做成管状插入料内接种，菌球在料内同时生长，可以缩短发菌时间一半以上。

这种方法一要注意料内氧气的供应（不适应扎口袋），二要注意接种环境的无菌要求，避免菌种不萌发或枪头带入杂菌造成污染。

如生产中香菇菌棒从两端中心插入接种时即使不封口，菌棒中段的菌种也不易萌发。

这种方法曾在低温季节大量接种香菇、鸡腿菇、金针菇、平菇等菌种，成品率在98%~100%，缩短时间一半以上。

3 袋表面扎孔接种法长菌棒从两端接种不能缩短养菌时间，从袋的表面一面或两面用枪头扎入３~５cm深并同时接种，扎孔间隔根据需要确定，如香菇每棒扎３~５个孔，这种方法调节接种量和孔间距离可以达到缩短养菌时间和减少杂菌污染的目的，缺点是用种量大，每个孔的接种量不少于１０mL，接种后不封口的应达到每孔２０mL以上。

4 袋壁内喷射接种法长菌棒还可以采取从两端一侧用枪头分别扎入到袋薄膜内，从料与塑料薄膜之间喷射菌种（要求液体压力达到9.8×100KPa以上），喷射后用手按压分散菌种，使菌棒一侧布满菌种，待菌丝生长１~３c m后可以扎孔增氧．这种方法可以覆盖较大的料表面，发菌快袋面微孔污染小，缺点是用种量大，每喷射一次用种都在１００mL左右。

草菇液体菌种栽培技术

草菇液体菌种栽培技术一、引言草菇是一种常见的食用菌，其口感鲜美，营养丰富，深受人们喜爱。

液体菌种栽培技术是一种新型的草菇栽培方法，具有生产效率高、周期短、成本低等优点。

本文将详细介绍草菇液体菌种栽培技术。

二、液体菌种制备1. 菌种选择选择高效率的草菇品系作为液体菌种的母本。

常用的品系有松茸型、平顶型和鸡腿型等。

2. 菌丝接种将选好的母本放入无菌环境中进行接种。

可以采取划线法或直接注射法进行接种。

3. 菌丝培养将接种好的母本放入含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的基础培养液中进行培养。

常用的基础培养液有PD（Potato Dextrose）和PDA（Potato Dextrose Agar）等。

4. 液体发酵将培养好的草菇菌丝转移到含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的液体培养基中进行发酵。

常用的液体培养基有PDB（Potato Dextrose Broth）和Czapek-Dox Broth等。

三、液体菌种栽培技术1. 菌种接种将培养好的草菇液体菌种接种到含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的草菇栽培基质中。

常用的草菇栽培基质有稻草、秸秆、木屑等。

2. 保湿在接种后，要及时进行保湿处理，使基质保持适宜的湿度。

可以采用喷水或覆盖湿毛巾等方法进行保湿。

3. 通风换气草菇需要充足的氧气才能生长繁殖，因此要及时进行通风换气。

可以采用开窗通风或安装通风设备等方法。

4. 控制温度草菇生长适宜温度为18℃-25℃，因此要控制好环境温度。

可以采用加热或降温设备等方法进行控制。

5. 控制光照草菇不需要光照，因此要避免阳光直射或强光照射。

可以选择适宜的栽培场所进行栽培。

四、液体菌种栽培技术的优点和应用1. 优点液体菌种栽培技术具有生产效率高、周期短、成本低等优点。

2. 应用液体菌种栽培技术广泛应用于草菇生产中，可以大幅度提高草菇的产量和质量。

五、总结草菇液体菌种栽培技术是一种新型的草菇栽培方法，具有生产效率高、周期短、成本低等优点。

杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术

杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培关键技术杏鲍菇是一种美味营养的食用菌，在市场上备受欢迎。

液体菌种生产和绿色高产栽培是杏鲍菇种植业的重要环节，对提高产量、质量和效益具有重要意义。

本文将介绍杏鲍菇液体菌种生产及绿色高产栽培的关键技术。

1. 液体培养基的制备：液体培养基是液体菌种生产的基础，通常选用麦芽汁、玉米糖浆等为基础，加入氮源、磷酸盐、微量元素等成分，pH值控制在6.0-6.5之间。

2. 菌种接种：将杏鲍菇的子实体细胞分离出来，接种到含有营养物质的液体培养基中，在30℃下静置培养。

3. 摇床培养：将培养基置于摇床上，以120rpm的速度摇动，加大菌丝生长速度。

通常在20天左右，液体中就会出现白色菌丝。

4. 分离纯化：将杂质去除，分离出纯净的杏鲍菇液体菌种。

5. 储存：以冰箱冷冻或冰点冷冻的方式将菌种储存起来，保证菌株的保存和多次使用。

1. 基质选择：选择新鲜的秸秆、稻草等农作物秸余作为基质，将其蒸煮灭菌，作为杏鲍菇栽培的基质。

2. 棚室建设：搭建温度、湿度、通风等条件合适的棚室，有利于杏鲍菇的快速生长和高效产量。

3. 原生菌种接种：选择优质的液体菌种，采用原生菌种接种法，均匀混合培养原料。

4. 控制温湿度：采用低温（15℃-20℃）高湿（85%-90%）的环境条件，使杏鲍菇菌丝生长。

5. 底面覆盖物：在基质表面覆盖透明塑料膜，保持适宜的湿度，增强透气性。

6. 喷雾浇水：喷雾浇水可保持适宜的湿度，也有利于芽菇的生长。

7. 日光照射：杏鲍菇需要一定的日光照射，有利于其发育和成长。

8. 控制菌体生长速度：控制杏鲍菇的生长速度，保证杏鲍菇的形态和口感。

总之，杏鲍菇液体菌种生产和绿色高产栽培是杏鲍菇种植业的重要环节，可以提高产量和效益，具有广阔的市场前景。

实验3 液体菌种制作

制作的特点
1、成本低； 2、菌丝体生长快速； 3、生产周期短； 4、工厂化生产、无季节性。
五、液体菌种制作的用途
1、生产液体菌种； 2、制备药物或提取生化制品； 3、制作食品或畜禽饲料。
六、液体菌种制作的主要设备
1、摇床往复式摇床：振荡方式为来回震荡旋转式摇床：振荡方式为旋转 2、发酵罐
实验三液体菌种的制作
一、实验目的
1、液体培养基的制备方法 2、液体菌种接种方法
二、实验材料与设备
1、菌种侧耳 2、马铃薯 200克；葡萄糖 20克；自来水 1000毫升；自然PH 。 3、广口三角瓶、振荡培养箱
三、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是采用液体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获得大量的菌丝体或代谢产物。
七、液体菌种接种方法：
1、用75%的酒精棉球对手指和广口三角瓶外壁消毒。 2、点燃酒精灯。 3、打开三角瓶封口膜，用移液管取5~10mL的液体菌种迅速移接到三角瓶中，迅速封口。 4、贴标签写明菌种编号，接种日期，姓名，随后置于振荡培养箱中于25℃避光振荡培养，7~10d可以长满瓶。 5、结果记录

食用菌液体发酵罐制种技术

食用菌液体发酵罐制种技术食用菌制种主要有液体和固体两种制种方式。

液体制种是目前国际上通用的、先进的方法。

液体菌种具有生产周期短、用工成本低、菌丝活力强、接种后萌发吃料快、菌种在培养基中的流动性和分散性好、菌龄一致、出菇整齐、可缩短栽培时间等优点。

在对液体制种与固体制种经济效益分析比较中指出，液体菌种发育时间可以减少24d，接栽培袋菌丝满菌时间缩短约10d，污染率可以降低1.5%，成本利润率可提高42%。

液体菌种作为食用菌基料工厂化生产发展过程中的重要环节，具有重要意义。

而现在食用菌产业受资金和技术的限制，其规模化、工厂化生产仍然以固体菌种为主，液体菌种的应用只有少数较大规模工厂化生产的企业及少数栽培品种工厂化栽培中获得应用，液体菌种的优势完全没有发挥出来。

液体菌种在制作过程中对设备、技术的要求较高，液体菌种发酵罐的操作技术流程复杂，增加了使用者的生产难度。

我们将对食用菌液体菌种发酵罐的生产工艺、操作流程进行技术总结，为食用菌项目的液体菌种提供参考。

1、研发液体菌种发酵罐的构造液体菌种在发酵培养过程中需要充足的氧气，属好氧性发酵。

满足于好氧性发酵的生化反应器主要有两大类即机械搅拌通风发酵罐和气流搅拌发酵罐。

前者利用通风装置和搅拌装置将氧溶入发酵液中，因机械搅拌剪切力而对菌丝产生破坏作用，因此不适于栽培型菌种的应用。

而后者则利用外部供气装置将气体通入发酵罐内形成环流将氧溶入发酵液中，其特点是基质溶液分布均匀、具有较高的溶解氧速率和溶解氧效率、结构简单、易于加工和操作。

而气流搅拌发酵罐的构造主要由电控系统、气体输送系统、发酵培养系统三部分组成。

1.1电控系统。

由控制箱体、微型电脑、集成传感器、报警器、数码显示屏、控制开关等组成，可调控灭菌温度、时间、压力及培养温度等。

1.2气体输送系统。

由无油隔膜泵、气水分离器、空气过滤器、滤芯、止回阀、压力表、硅胶管等组成，可为发酵罐提供纯净、无菌的气源。

1.3发酵培养系统。

液体菌种的制作难点

液体菌种的制作难点.txt看一个人的的心术，要看他的眼神；看一个人的身价，要看他的对手；看一个人的底牌，要看他的朋友。

明天是世上增值最快的一块土地，因它充满了希望。

大连富森科技有限公司液体菌种培训教材(节选五)2010年4月10日（五）液体菌种的制作难点1.试管的选择：生产液体菌种时，试管的选择非常重要，有好多的人就是在试管的选择上出问题，总是做不出专用母种。

在生产上，我们要求试管一是自己新生产的，再一个就是存放时间短的。

长期存放的、上面长霉菌的，一定不能用。

2.三角瓶专用母种的制作：三角瓶专用母种其实很好做，就是有些人不求甚解，以为接上种就可以，其实这样是永远都不会生产出三角瓶的。

这里面的操作细节一定要掌握。

3.发酵罐的制作细节：发酵罐其实很好操作，只是做为一个最后的环节，它要求的是细节。

操作规程上说的那些是对的，只是要想做得好，最好是学习一下。

由老师亲自做一次，注意哪个地方应该特别小心，也就是细节要特别小心，可保成功率。

4.接种技术：接种技术对于固体来说应该没什么的，可以在液体菌种上，是有说法的。

特别是一些特别品种，在接种时应该特别注意。

5.栽培料的含水量和接种量的控制：这一项没做好，是好多人做液体菌种失败的一个重要原因。

需要一些计算公式和方法。

液体菌种制作与士兵用枪射击是一个道理，其实一般的人也会射击，可是要想一枪毙命，正中眉心，就不是一般人能做到的了，要经过系统的学习和训练。

理论上说的是一回事，实际上做的又是一回事。

正常情况下，经过系统培训的人，在做液体菌种时，成功率应该在95%以上。

能熟练掌握试管的制作、搅拌器和摇瓶机的液体菌种制作技术，能自己一个人操作液体菌种发酵罐、懂得不同品种的接种技术。

经常做的人，应该在98%以上，甚至更高。

这里面除了技术外，还有设备的问题。

（未完待续）大连富森科技有限公司液体菌种培训教材(节选四)2010年4月10日三、液体菌种的制作过程及方法（一）试管种的生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。

一文搞定细菌的接种方法（值得收藏）

⼀⽂搞定细菌的接种⽅法（值得收藏）常⽤的细菌接种⽅法有平板划线分离法、斜⾯接种法、穿刺接种法、液体和半固体接种法、涂布接种法等。

⼀、平板划线分离法平板划线分离法:是指把混杂在⼀起的微⽣物或同⼀微⽣物群体中的不同细胞⽤接种环在平板培养基表⾯，通过分区划线稀释⽽得到较多独⽴分布的单个细胞，经培养后⽣长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微⽣物的纯种。

有时这种单菌落并⾮都由单个细胞繁殖⽽来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。

其原理是将微⽣物样品在固体培养基表⾯多次作“由点到线”稀释⽽达到分离⽬的的。

为⽅便划线，⼀般培养基不宜太薄，每⽫约倾倒20ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表⾯光滑。

划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种（如图1， A、B）。

图1分区划线法是将平板分四区，故⼜称四分区划线法。

划线时每次将平板转动60~70°划线，每换⼀次⾓度，应将接种环上的菌烧死后，再通过上次划线处划线；另⼀种连续划线法是从平板边缘⼀点开始，连续作波浪式划线直到平板的另⼀端为⽌，当中不需灼烧接种环上的菌。

1）连续划线法将琼脂平⽫半开盖倒置于培养箱内⾄⽆冷凝⽔，接种环于酒精灯外焰烧⾄红透，接种棒也要充分灼烧，最后再集中烧接种环⾄红。

轻轻摇匀待接种试管，左⼿⼿⼼托待接种试管底侧部，右⼿执接种环，右⼿⼩指拔下试管塞，于酒精灯附近将接种环伸进试管，稍候，再插⼊待接接种液中，蘸⼀下，取满⼀环，抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。

或将接种环通过稍打开⽫盖的缝隙伸⼊平板，在平板边缘空⽩处接触⼀下使接种环冷却，然后以⽆菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。

于靠近酒精灯处打开平⽫盖约30°，右⼿将环伸进平⽫，将菌种点种在平板边缘⼀处，轻轻涂布于琼脂培养基边缘（如图2），抽出接种环，盖上平⽫盖，然后将接种环上多余的培养液在⽕焰中灼烧，打开平⽫盖约30°伸⼊接种环，待接种环冷却后，再与接种液处轻轻接触，开始在平板表⾯轻巧滑动划线，接种环不要嵌⼊培养基内划破培养基，线条要平⾏密集，充分利⽤平板表⾯积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上⽫盖。

黄伞液体菌种拌菌栽培工艺

黄伞液体菌种拌菌栽培工艺哎，说起黄伞菌，这可是个好东西。

我呢，是个对菌类情有独钟的人，尤其是黄伞，那味道，那口感，简直了！不过，今天咱们不聊吃，聊聊怎么种。

对，你没听错，就是种黄伞，而且还是液体菌种拌菌栽培工艺，听起来是不是挺高大上的？别急，我这就给你细细道来。

首先，咱们得准备液体菌种。

这玩意儿，就像是黄伞的种子，没有它，咱们的黄伞菌是长不出来的。

制作液体菌种，得先找个干净的实验室，或者至少是个干净的房间，然后准备一些培养基，这玩意儿就像是黄伞菌的“土壤”。

培养基的配方嘛，得根据黄伞菌的喜好来，一般是些葡萄糖、蛋白胨、酵母膏之类的，混合在一起，然后高温灭菌，保证无菌。

接下来，就是接种了。

这个步骤得特别小心，因为一旦有杂菌污染，那可就前功尽弃了。

咱们得从健康的黄伞菌中提取菌丝，然后接种到培养基里。

这个过程得在无菌条件下进行，所以得穿上无菌服，戴上手套，还得用酒精灯火焰消毒。

接种完，就得让菌丝在培养基里慢慢生长了。

这个过程得控制好温度和光照，黄伞菌喜欢温暖湿润的环境，所以温度得保持在20-25度，湿度得保持在80%以上。

光照嘛，黄伞菌不需要太多，所以放在半阴的地方就行。

等菌丝长好了，咱们就可以开始拌菌了。

这个步骤，就是把菌丝和培养料混合在一起。

培养料，就是黄伞菌生长的“土壤”，一般是些木屑、麦麸、玉米芯之类的。

拌菌的时候，得保证菌丝均匀分布在培养料里，这样才能保证黄伞菌均匀生长。

拌好菌后，就可以装袋了。

这个袋子，得是透气不透水的，这样才能保证黄伞菌的生长环境。

装好袋后，还得再灭菌一次，确保无菌。

最后，就是接种和培养了。

把装好袋的培养料放到培养室里，控制好温度和湿度，让黄伞菌慢慢生长。

这个过程，得持续个把月，直到黄伞菌长成。

哎，说起来简单，做起来可不容易。

这黄伞液体菌种拌菌栽培工艺，得有技术，得有耐心，还得有细心。

不过，看着黄伞菌一天天长大，那种成就感，那种喜悦，真是无法言表。

好了，今天的黄伞液体菌种拌菌栽培工艺就聊到这了。

平菇液体菌种基础知识

平菇液体菌种基础知识平菇液体菌种基础知识一、平菇液体菌种标准及生产技术规程1.液体摇瓶菌种标准及生产技术规程。

（1）菌种斜面菌种作为待接菌种（2）摇瓶菌种标准：①外观形态：菌液澄清、棕黄色液体、菌丝呈放射状，“菌球”味感有水果香味、稍酸、菌球量占30%以上。

②镜检形态：美蓝单染色后观察，菌丝着色深、均匀、粗壮、分枝呈树枝状。

侧丝线形、顶端稍弯曲、生长点多见，可见大量椭圆形分生孢子，无杂菌污染，无明显空泡，有锁状联合。

（3）液体摇瓶生产技术规程：①工艺流程：母种一级摇瓶种子二级摇瓶发酵。

②培养基配方：蛋白胨1.5%、酵母膏0.1%、麦芽糖1%、葡萄糖2%、杨树木屑5%、硫酸镁0.075%、磷酸二氢钾0.15%、维生素B10. 01%、pH值6.5（消前）。

③制法：按配方规定量准确称取各药品，加一定量水加热溶解，定容至规定量，杨树木屑加水浸煮，温火下30～40min，用八层纱布过滤取滤汁，充分拌匀后分装于三角瓶中（500ml三角瓶装量至200ml）塞上棉塞（棉塞包扎纱布）上覆牛皮纸，置高压蒸汽灭菌锅灭菌（1kg/㎝2）30min，取出检验无杂菌污染备用。

④接种：在无菌条件下，按斜面与摇瓶之比为1：5（斜面比摇瓶）的比例接种。

一般一只斜面母种可接500 ml三角瓶2～3瓶。

取一支带长把的铁环，环上缠绕纱布后，吸足95%酒精，点燃后套在大三角瓶瓶口上，形成一道“火圈”，阻止杂菌侵入，将斜面母种挖块后，经“火圈”中心接入瓶内，每瓶不少于3块（0.6×0.5㎝/块）。

⑤培养：要求培养温度22℃±2℃，旋转式摇床的转速为170～200转/min，光线以黑暗为佳。

⑥培养终止时间为7d。

2.液体种子罐培养菌种及生产技术规程（1）菌种：使用平菇经摇瓶培养的液体菌种，选用新培养的摇瓶菌种，菌龄不超过7d，菌球不能中空，不能有太多空泡。

（2）种子罐培养菌种标准：①外观形态：基本同摇瓶种子，只是菌球量要占50%以上，pH值为6.5，若菌丝已经中空，表明菌球中部菌丝已老化，部分菌丝自溶。

第五节-食用菌菌种的扩繁与培养

第五节食用菌菌种的扩繁与培养引言：从外地购进或分离获得的母种数量有限，不能满足生产的需要时，要对初次获得的母种进行扩大繁殖，以增加母种数量。

一、菌种扩大把接种物移至培养基上，在菌种生产工艺上称接种。

在栽培工艺即生产中称播种。

条件：无菌操作（接种箱或超净工作台、酒精灯火焰周围10cm）1、母种扩接方法（超净工作台内接种，由试管到试管）将试管菌种接到新的试管斜面上扩大繁殖，称为继代培养，转管。

程序：P43（1）消毒手和菌种试管外壁。

（2）点燃酒精灯。

（3）用左手的大拇指和其他四指并握要转接的菌种和斜面培养基，在酒精灯附近拔掉棉塞。

（4）在酒精灯灼烧接种锄和试管口。

（5）冷却接种锄，取少量菌种（绿豆大小），至斜面培养基上。

（6）塞上棉塞，贴好标签。

整个过程要快速、准确、熟练。

1支→30支二、菌种的培养1、母种培养（1）适温培养在恒温箱（室）培养种块有萌发，并向培养基上蔓延后，将培养温度降低2～3℃，促使菌丝健壮生长。

（2）注意通风通风不足，菌丝生长缓慢，棉塞上易滋生霉菌。

（3）定期检查前几天，要逐管检查，以防掩盖杂菌。

发现污染，及时淘汰。

（4）详实记录记录菌株来源、转接时间、培养基种类、发菌的温湿度、菌丝生长情况，以及污染现象、数目。

液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。

若少量生产，可以用摇瓶培养法。

深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。

而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。

本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。

平菇：土豆100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸30克，蛋白胨1.5克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片， pH值自然；1.液体菌种培养基配方(1)葡萄糖 3% 豆粉 2%玉米粉 1% 硫酸镁 0.05%磷酸二氢钾 0.1% 酵母粉 0.5%其余为水 pH 值自然本配方适用于多种食用菌的液体培养。

液体培养技术的操作步骤和关键技巧

液体培养技术的操作步骤和关键技巧液体培养技术是现代微生物学研究的重要方法之一，它可以用于细胞生长、代谢产物分析、酶活性研究等领域。

液体培养技术的操作步骤和关键技巧对于实验结果的可靠性和科学性至关重要。

本文将对液体培养技术的操作步骤和关键技巧进行论述，以帮助读者更好地掌握这一技术。

一、准备工作在进行液体培养实验前，必须进行准备工作。

首先，要准备好所需的培养基和试剂。

培养基的配制需要按照实验的需要进行，使用无菌技术操作，防止细菌的污染。

其次，要准备好培养容器，如培养皿、培养瓶等。

这些容器也需要在使用前进行无菌处理。

最后，要准备好待培养的菌种或细胞。

菌种的选择要根据实验的目的和要求来确定。

二、操作步骤1. 准备液体培养基首先，将所需的培养基配制好，按照配方将试剂加入到无菌水中，并进行搅拌混匀。

然后，将配制好的培养基进行高温高压灭菌，以杀灭其中的细菌和真菌等微生物。

2. 培养容器的无菌处理将培养容器（如培养瓶）放入高温高压灭菌器中进行高温高压处理，以确保容器内的细菌和真菌等微生物被杀灭。

处理完毕后，使用无菌操作将培养容器取出。

3. 菌种接种将待培养的菌种从冷冻保存物中取出，用无菌移液器将菌种接种到培养容器中的培养基中。

注意，在接种菌种的过程中要保持无菌操作，避免细菌的污染。

4. 培养条件设定根据待培养菌种的特性，设置适当的培养条件。

包括培养温度、培养时间、培养基的pH值、培养基的营养成分等。

这些条件需要根据具体的实验要求进行设定，以提供合适的生长环境给菌种。

5. 培养过程的观察在培养过程中，需要对菌种的生长情况进行定期观察。

可以通过目测或使用显微镜对菌种进行观察，并记录其生长速度、形态特征等。

此外，也可以对培养基中的各种代谢产物进行分析，以研究菌种的代谢活性。

6. 培养液的采集与分析在培养结束后，需要采集培养液进行进一步的分析。

可以使用无菌提取方法将培养液中的代谢产物提取出来，然后进行色谱、质谱等分析方法进行定性和定量分析。

液体菌种的制作及使用方法

液体菌种的制作及使用方法随着食用菌生产的发展,食用菌制种方法在传统固体制作的基础上在不断的改进和提高,其中液体菌种的制作便是其中之一。

液体发酵技术是现代生物技术之一，起源于美国。

它是指在生化反应器中，模仿自然界将食药用菌在生育过程中所必需的糖类、有机和无机含有氮素的化合物、无机盐等一些微量元素以及其它营养物质溶解在水中作为培养基，灭菌后接入菌种，通入无菌空气并加以搅拌，提供食用菌菌体呼吸代谢所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，进行菌丝大量培养繁殖的过程。

工业化大规模的发酵培养即为发酵生产，亦称深层培养或沉没培养。

液体菌种的制作及使用方法液体菌种由于具有生产规模化、控制自动化、生长无菌化、发菌高速化的生产应用优势,为食用菌产业化的发展提供了良好的种源条件,是食用菌产业化发展的必然方向,已被业内人士所看好。

液体菌种是用液体培养基培养而成的菌种。

近年来，国内外正积极研究液体菌种的培养与利用。

与固体菌种相比，它具有菌种生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、接于固体菌料发酵快、适宜于工厂化生产等优点，因而受到了广大栽培者的欢迎。

目前我国已能进行深层发酵的食用菌有：香菇、平菇、凤尾菇、美味侧耳、鲍鱼菇、金针菇、黑木耳、猴头、草菇、蜜环菌、茯苓、滑菇和冬虫夏草等。

一、液体菌种的培养方法常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。

若少量生产，可以用摇瓶培养法。

深层培养需要一整套工业发酵设备，如锅炉、空气压缩机、空气净化系统、发酵罐等，故投资大，只适用于工厂化的大规模生产。

而摇瓶培养投资少，设备技术简单，适合一般菌种厂生产使用。

本节主要介绍摇瓶培养的技术方法。

1、食用菌液体发酵的培养基根据培养基中组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。

天然培养基的组成均为天然有机物。

合成培养基则是采用—些已知化学成分的营养物质作培养基。

在生产上，还根据工艺将培养基分为孢子培养基、种子培养基及发酵培养基。

但无论如何划分，每一种培养基的组成中都离不开碳、氮、无机盐、微量元素、维生素和生长素等。

液体培养基的接种方法

液体培养基的接种方法液体培养基是一种在生物学、医学、食品工业等领域广泛使用的培养微生物的基础工具。

接种液体培养基是进行微生物培养的第一步，因此正确的接种方法是非常重要的。

本文将介绍几种常见的液体培养基的接种方法。

1. 灭菌：在进行液体培养基接种之前，必须对培养基进行灭菌处理。

常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌和滤器灭菌等。

灭菌的目的是消除培养基中的细菌和病毒，避免污染和错误的结果。

2. 确定接种量：接种液体培养基时，需要确定接种量，以确保培养的微生物数量足够且不会过多。

一般来说，接种量应在0.1-1%之间。

对于某些微生物，如快速生长的细菌，接种量应相对较少。

3. 无菌操作：接种前必须进行无菌操作。

这包括清洗并消毒工作台、使用消毒酒精处理手部和操作工具等。

避免在接种过程中引入外来微生物。

4. 种子菌接种：种子菌接种是将已经培养好的微生物接种到新的液体培养基中。

这种方法适用于某些微生物，如真菌和酵母菌等。

将种子菌接种到新的液体培养基中，可以快速开始微生物培养。

5. 直接接种：直接接种是将微生物接种到新的液体培养基中，并在此基础上进行微生物培养。

直接接种适用于那些不能进行种子菌接种的微生物，如细菌和病毒等。

6. 摇床培养：在进行液体培养基接种后，将培养瓶放在摇床上进行培养，可以使培养基中的微生物均匀分布，并提供适当的通气和营养条件。

7. 定期观察：在液体培养基中进行微生物培养时，需要定期观察微生物生长情况。

这可以帮助及时发现微生物污染、生长缓慢或异常等情况，并采取相应的措施。

总之，正确的液体培养基接种方法是进行微生物学研究和实验的基础，必须严格遵循操作规程，以确保实验结果的准确性和可靠性。

菌种的接种及菌悬液制备操作程序之欧阳治创编

菌种的接种及菌悬液制备操作程序二、菌种的接种：1、菌种的复苏：1.1 把冻干菌种管、灭菌1ml毛细滴管、双碟、镊子、营养肉汤培养基、营养琼脂斜面数支，移入接种室或超净工作台。

1.2 将冻干菌种管外壁用碘酒擦洗消毒、稍干，用75%乙醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待干。

点燃酒精灯，将菌种管的封口一端在火焰上，烧灼红热，用灭菌毛细滴管吸取营养肉汤培养基，滴在灼热的菌种管封口一端，使冷而炸裂。

1.3 取灭菌镊子，在火焰旁，将炸裂的管口打开，放入灭菌双碟内，另取一支灭菌毛细滴管，在火焰旁吸取营养肉汤少许，加至菌种管底部，将冻干菌块搅动促使溶解，随即吸出管内菌液，分别接种至营养琼脂斜面置35～37℃培养22～24小时。

1.4 取出培养物，仔细观察菌苔形态、有无杂菌、涂片、革兰氏染色镜检，呈典型菌落后，转种3代即可应用。

如发现菌形不典型，可进行平板分离单菌落。

2、菌种的接种：2.1 准备需用的培养基，培养基应新鲜制备，如斜面已无冷凝水者，不宜再使用。

标签上注明菌名及接种日期。

自冰箱取出的菌种斜面，应在室温放置约30分钟，待温度平衡后再移入接种室或超净工作台。

2.2 点燃酒精或其他灯，在左手握住菌种斜面，将管口靠近火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30分钟，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。

右手用无名指、小指及掌部夹住棉塞，左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手再轻轻拨开棉塞，将接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮取少量菌苔，随即取出接种棒，并将菌种管品移至火焰旁。

堵上棉塞，左手将菌种管放下，取营养琼脂斜面1支，照上述操作打开棉塞，将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部，由底向上，将接种环轻贴斜面的表面曲折移动，使细菌划在斜面的表面上。

2.3 取出接种棒，在火焰旁将培养基管棉塞堵上，然后将接种过细菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。

2.4 将已接种毕的细菌管置35～37℃培养22～24小时，霉菌管一般置24～25℃霉菌培养箱内培养7日。