五日生化需氧量(BOD5)的测定

配制方法及浓度
称取480gMnSO4·4H2O溶于水中,过滤 后稀释至1L。该溶液在酸性条件下， 加入碘化钾后遇到淀粉，不得变色。
盐酸 将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀 溶液 释至1000 mL，浓度为0.5mol/L。
碘化钾 称取10g固体碘化钾，用水溶解后稀释 溶液 至100mL，配制成10%碘化钾溶液。
稀释倍数的确定
①地面水：由测得的高锰酸盐指数与一定的 系数的乘积，即求得稀释倍数。
高锰酸盐指数
<5 5-10 10-20 >20
系数
一 0.2, 0.3 0.4, 0.6 0.5, 0.7, 1.0
②工业废水： 由CODCr值分别乘以系数0.075, 0.15, 0.25即获 得三个稀释倍数。
②直接稀释法：（本实验采用 ）
将移液管插 入液面下加 1.5~2.0ml 浓硫酸
待棕色絮状 沉淀降到瓶 的一半时， 再颠倒几次
盖好瓶塞，勿 使瓶内有气泡， 颠倒混合15次， 静置
稀释倍数的确定 水样稀释方法
水样预处理
1.水样的pH值若超出6.5-7.5范围时，可用盐酸 或氢氧化钠溶液调节pH近于7，但用量不要超 过水样体积的0.5%。若水样酸度或碱度很高， 可改用高浓度的碱或酸液进行中和。
2.水样中含有铜，铅，锌，镉，铬，砷，氰等 有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液的 稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以减少毒物 的浓度。
试剂
名称 碱性碘化 钾溶液
0.5%淀粉 溶液
配制方法及浓度
称取500g氢氧化钠溶解于300400mL水中，另称取150g碘化钾溶 于200mL水中，待氢氧化钠溶液冷 却后，将两种溶液合并后混合，用 水稀释至1L。若有沉淀则放置过夜 取上清液，贮于塑料瓶中，存放时 避光。
称取0.5g可溶性淀粉，用少量的水调 成糊状，再加刚煮沸的水至100mL （亦可煮沸1-3分钟）。冷却后，加
直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。
• 在已知两个容积相同（其差<1mL）的溶解氧 瓶内，用虹吸法加入部分稀释水（或接种稀 释水）；
• 再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样 量；
• 然后用稀释水（或接种稀释水）使之刚好充 满后加塞。
• 注意不要将气泡留在瓶内。
直接稀释法实验步骤
根据 CODcr 值确 定稀 释倍 数
五日生化需氧量(BOD5)测定
大连理工大学环境与生命学院
实验目的和要求
1.了解BOD5间接表示水体中有机物 含量的意义和稀释法测定BOD5的 基本原理。
2.掌握一般稀释水、接种稀释水的 制备和稀释倍数的选择。
3.掌握BOD5测定方法与操作规程。
实验原理
基本概念 • 用水中有机物在一定条件下所消耗氧的
• 一瓶随即测定溶解氧。另一瓶的瓶口进行 水封后，放入培养箱中，在20±1℃培养5d。
需经稀释水样的测定
• 对某些地面水及大多数工业废水，因含较 多的有机物，需要稀释后再培养测定，以 降低其浓度和保证有充足的溶解氧。
• 稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和 缓冲物资(磷酸盐、钙、镁和铁盐等)，以 保证微生物生长的需要。
调整 被测 水样 的pH
直接 稀释 法采 集稀 释水 2瓶
1瓶测溶解氧 1瓶放入培养箱
溶解氧(DO)的测定(碘量法)
• 用溶解氧瓶虹吸法采集2瓶空白水样；
• 用溶解氧瓶虹吸法采集2瓶被测水样， 分别测定当天的溶解氧和培养5天后的 溶解氧。
溶解氧的固定
虹吸法采集 水样转移到 溶解氧瓶
将移液管插 入液面下加 入1ml硫酸 锰溶液
0.02500mol/L。
试剂
名称
配制方法及浓度
氢氧化 将20g氢氧化钠溶于水,稀释至 钠溶液 1000 mL,浓度为0.5mol/L。
硫酸镁 将22.5g七水合硫酸镁(MgSO4.7H2O)溶 溶液 于水中，稀释至1000mL。
将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4)，21.75g磷 磷酸盐 酸氢二钾(K2HPO4)，33.4g七水合磷酸 缓冲液 氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵
3.含有少量游离氯的水样，一般放置1-2h,游 离氯即可消失。对于游离氯在短时间不能消 散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，以除去之。 其加入量由下述方法决定。
不稀释水样的测定
• 溶解氧含量较高，有机物含量较少的地面水， 不经稀释，而直接以虹吸法，将约20℃的混 匀水样转移入两个溶解氧瓶内，转移过程中 应注意不使产生气泡。
(NH4Cl)溶于水中，稀释至1000mL。此 溶液的pH应为7.2。
试剂
名称 氯化钙溶液 氯化铁溶液
(1+5)硫酸溶液
配制方法及浓度 将27.5g无水氯化钙溶于水， 稀释至1000mL。
将0.25g六水合氯化铁 （Fe3Cl ·6H2O）溶于水，稀 释至1000mL。
实验步骤
1. 水样预处理 2. 不稀释水样的测定 3．需经稀释水样的测定 4. 溶解氧(DO)的测定 5. BOD5测定结果计算 6. 硫代硫酸钠溶液标定 7．一般稀释水制备 8． 接种稀释液制备
选择水样 预处理
确定稀释比 制备一般稀释水或接种稀释水
稀释水样 BOD5测定
实验仪器及试剂
仪器
名称 恒温培养箱 溶解氧瓶
三角瓶 酸式滴定管 移液管或移液器、虹吸管 试剂瓶、量筒、细口瓶及气泵
规格及用途 20℃±1℃ 250mL楔形磨口 250mL楔形磨口
25mL 各种规格 各种规格
试剂
名称
硫酸锰 溶液ຫໍສະໝຸດ 剂名称配制方法及浓度
硫代硫酸 称取32g硫代硫酸钠溶于1L煮沸放冷 钠溶液 的蒸馏水中，加入0.5g氢氧化钠，贮
于棕色瓶中。此溶液临用前稀释10倍， 并用0.02500mol/L重铬酸钾标准溶液 标定。
6mol硫酸
称取在105℃烘干两小时并冷却至室 重铬酸钾 温的重铬酸钾1.2258g溶于水中，移入 标准溶液 1000mL容量瓶稀释至标线。浓度为
量，来间接表示水体中有机物的含量。
• BOD5是反映水体被有机物污染程度 的一个综合指标
• 分别测定水样培养前的溶解氧含量
和在201C培养五天后的溶解氧含 量，二者之差即为五日生化所消耗 的氧量。
实验内容
1．测定工业废水的BOD5并选择被测 水样之一做实验预处理设计。
2．选择正确的方法确定稀释比。 3．BOD5测定。 4．硫代硫酸钠溶液的标定。 5．一般稀释水和接种稀释水的制备。