江苏省医院消毒灭菌效果监测
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检。 医用缝线：用无菌剪刀剪取中间层缝线，或将线圈直接置入肉汤管中送检。 缝合针、针头、手术刀片等小件，各取 ５枚，分别投入肉汤管中送检。 一般器械（持物钳、手术剪、镊子等）：无菌条件下，用浸有含中和剂的肉汤棉拭
子涂擦持物钳、镊子内外侧尖端，将棉拭子放入肉汤试管内送检。 引流条：无菌操作剪取 １ｃｍ～３ｃｍ，放入肉汤试管中送检。 ６２ 消毒物品 ６２１ 消毒后物品主要指体温表、氧气湿化瓶及连接管、雾化口含管、呼吸机连
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中和剂的无菌磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）或生理盐水采样液的棉拭子 １支，在规格板内横竖 往返均匀各涂抹 ５次，并随之转动棉拭子，连续采样 ４个规格板面积，被采表面 ＜ １００ｃｍ２，取全部表面；被采表面≥１００ｃｍ２，取 １００ｃｍ２。剪去手接触部分，将棉拭子放入 装有 １０ｍｌ无菌检验用洗脱液的试管中送检。
接管及螺纹管、吸引器导管、面罩、头罩、开口器、舌钳等。 ６２２ 采样方法：（采样液可用含相应中和剂的无菌生理盐水） 体温表：用无菌生理盐水棉拭子涂擦体温表前端 １／３口含部（３支 ／组），棉拭子
放入试管内立即送检。 氧气湿化瓶：用无菌生理盐水棉拭子涂擦湿化瓶内部四壁及底部，棉拭子放试
管内立即送检。也可用无菌吸管吸取湿化液 １ｍｌ，送培养。 各种导管、连接管，用无菌生理盐水棉拭子，伸入管内壁 ５ｃｍ～８ｃｍ处涂擦，棉
１１３ 检测方法 将采样管在混匀器上振荡 ２０秒或用力敲打 ８０次，用无菌吸 管吸取 １０ｍｌ待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种 ２个平皿，平皿内加入已熔化 的 ４５℃ ～４８℃营养琼脂 １５ｍｌ～１８ｍｌ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 ３６±１℃温箱培养 ４８ｈ，计数菌落数。
细菌菌落总数计算方法 细菌总数（ｃｆｕ／ｃｍ２）＝平皿上采菌样落面数积（×ｃ稀ｍ２释）倍数 １１４ 结果判定 （１）卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应≤１０ｃｆｕ／ｃｍ２。 （２）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤５ｃｆｕ／ｃｍ２。 １２ 皮肤消毒效果监测 １２１ 采样时间 达到消毒效果后及时采样。 １２２ 采样方法 用 ５ｃｍ×５ｃｍ的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含 相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 １支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 ５次，并随 之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 １０ｍｌ含相应中和剂的无菌洗脱液的 试管内，及时送检。不规则的皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。 １２３ 检测方法 同 １１３ １２４ 结果判定 皮肤消毒效果的判定标准遵循手消毒效果标准。 １３ 注意事项 采样皮肤表面不足 ５ｃｍ×５ｃｍ可用相应面积的规格板采样。 注开展卫生手消毒效果监测的同时，应关注洗手依从性的监测。建议每季度对 手术室、ＩＣＵ、新生儿室开展此类监测。 二、物品和环境表面消毒效果监测 ２１ 采样时间 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。 ２２ 采样方法 将 ５ｃｍ×５ｃｍ的灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有含相应
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毒的物品（浸泡或熏蒸后物品），用含有相应中和剂的营养肉汤采样管。 ６１３ 采样方法 敷料类：纱布、棉球、无菌包内物品，于无菌条件下剪取面积约 １ｃｍ×３ｃｍ的样
品，全部置于培养试管中，然后放 ３６±１℃恒温箱培养 ４８小时，观察结果。 导管类：无菌条件下，用无菌剪刀取被检导管 １ｃｍ～３ｃｍ，置肉汤培养试管内送
医院消毒灭菌效果监测规范
目 录
１．手和皮肤黏膜消毒效果的监测 （１） ２．物体及环境表面消毒效果的监测 （１） ３．空气消毒效果的监测 （２） ４．使用中消毒液染菌量的监测 （４） ５．内镜消毒灭菌效果的监测 （５） ６．灭菌与消毒物品的监测 （５） ７．灭菌效果监测方法 （７） ８．紫外线灯消毒效果的监测 （１１） ９．血液透析液的监测 （１２） １０．餐具消毒效果的监测 （１３） １１．卫生洁具消毒效果监测 （１４） １２．各类环境空气、物体表面及医护人员手细菌菌落总数卫生标 （１５） １３．消毒试验用试剂和培养基配方 （１６） １４．常用消毒剂的中和剂 （２０）
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洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）
等级
空气洁净度级别
手术区
周边区
布 点 要 求
细菌最大平均浓度 （个 ／Φ９０皿·０５ｈ）
手术区
周边区
Ⅰ
１００级
１００１００００级
０７５
１５
Ⅲ
１００００级 １０００００级
２
４
辅Ⅲ
１０００００级
５
３２２ 未采用洁净技术净化空气的房间采用平板暴露法：室内面积≤３０ｍ２，设 内、中、外对角线三点，内、外应距墙壁 １ｍ处；室内面积 ＞３０ｍ２，设四角及中央五点，四 角的布点位置应距墙壁 １ｍ处。
求。 ３４２ Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿 ３４３ Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿 ３５ 注意事项：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止 １０ｍｉｎ进行采样。 注医疗环境应强调通风及气流组织，无需常规进行空气消毒效果监测。 四、消毒液的监测 ４１ 常用消毒液有效成分含量测定 库存消毒剂的有效成分含量应依照产品企
门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。采样物体表面有消毒剂残 留时，采样液应含相应中和剂。
２３ 检测方法 将采样管在混匀器上振荡 ２０秒或用力振打 ８０次，用无菌吸管 吸取 １０ｍｌ待检样品接种于灭菌平皿，平皿内加入已熔化的 ４５℃ ～４８℃营养琼脂 １５ｍｌ～１８ｍｌ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 ３６±１℃温箱培养 ４８ｈ，计数菌落数。
２４ 结果计算 ２４１ 规则物体表面 物体表面细菌总数（ｃｆｕ／ｃｍ２）＝平板上采菌样落面数积（×ｃ稀ｍ２释）倍数 ２４２ 小型物体表面的结果计算，用 ｃｆｕ／件表示。 ２５ 结果判定 ２５１ Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤５ｃｆｕ／ｃｍ２。 ２５２ Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤１０ｃｆｕ／ｃｍ２ 注平日无需常规进行物体表面消毒效果监测，怀疑与医院感染暴发有关时，进 行目标微生物的检测。 三、空气消毒效果监测 ３１ 采样时间 采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活 动前采样；未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活 动前采样；或怀疑与医院感染暴发有关时采样。 ３２ 监测方法 ３２１ 采用洁净技术净化空气的房间可选择平板暴露法和空气采样器法，参照 ＧＢ５０３３３要求进行监测。空气采样器可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的 空气采样器。监测时将采样器置于室内中央 ０８ｍ－１５ｍ高度，按采样器使用说明书 操作，每次采样时间不应超过 ３０ｍｉｎ。房间面积大于 １０ｍ２ 者，每增加 １０ｍ２ 增设一个 采样点。
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暴发有关时，进行目标微生物的检测。 ３３ 结果计算： ３３１ 平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：ｃｆｕ／皿·暴露时间 ３３２ 空气采样器法计算公式 空气中菌落总数（ｃｆｕ／ｍ２）＝ 采样器各平皿菌落数之和（ｃｆｕ） ×１０００ 采样速率（Ｌ／ｍｉｎ）采样时间（ｍｉｎ） ３４ 结果判定 ３４１ 洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要
业标准进行检测；使用中消毒液的有效浓度测定可用以下方法，也可使用经国家卫生 行政部门批准的消毒剂浓度试纸（卡）进行监测。
４２ 使用中消毒液染菌量测定 ４２１ 监测方法 ４２１１ 涂抹法 用无菌吸管吸取消毒液 １０ｍｌ，加入 ９０ｍｌ含有相应中和剂的 采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液 ０２ｍｌ，滴于干燥普通营养琼脂平板，每份样 品同时做 ２个平行样，一个平板置 ２０℃培养 ７ｄ，观察真菌生长情况，另一个平板置 ３６ ±１℃恒温箱温箱培养 ７２ｈ，记数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生 物的检测。 消毒液染菌量（ｃｆｕ／ｍｌ）＝每个平板上的菌落数 ×５０ ４２１２ 倾注法 用无菌吸管吸取消毒液 １０ｍｌ，加入到 ９０ｍｌ含相应中和剂的 无菌生理盐水采样管中混匀，分别取 ０５ｍｌ放入 ２只灭菌平皿内，加入已熔化的 ４５℃ －４８℃的普通营养琼脂 １５ｍｌ－１８ｍｌ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一个平板置 ２０℃恒 温箱培养 ７ｄ，观察真菌生长情况；另一个平板置 ３６±１℃培养 ７２小时，计数菌落数。 怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。 消毒液染菌量（ｃｆｕ／ｍｌ）＝每个平板上的菌落数 ×２０ — ４—
一、手和皮肤粘膜消毒效果监测 １１ 手消毒效果监测 １１１ 采样时间 接触病人、进行诊疗活动前采样。 １１２ 采样方法 被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭
子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦各两次，一只手涂擦面积约 ３０ｃｍ２，涂擦过程 中同时转动采样棉拭子；剪去操作者手接触部分，将棉拭子投入 １０ｍｌ含相应中和剂的 无菌洗脱液试管内，及时送检。
４２２ 结果判断 灭菌用消毒液的菌落总数应为 ０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ ４２３ 注意事项 ４２３１ 采样后 １ｈ内检测。 ４２３２ 使用中消毒剂应每季度进行监测，灭菌剂应每月进行监测。 ４２３３ 对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂，使用前应按照使用中消 毒液染菌量的方法进行细菌检测，未检出细菌为合格。 五、内镜消毒灭菌效果监测 ５１ 采样时间 在消毒灭菌后、使用前进行采样。 ５２ 采样部位 为内镜的内腔面。 ５３ 采样方法 用无菌注射器抽取 １０ｍｌ含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活 检口注入，用 １５ｍｌ无菌试管从活检孔出口收集，及时送检，２ｈ内检测。 ５４ 菌落计数 将送检液用旋 涡 器 充 分 振 荡，分 别 取 ０５ｍｌ，加 入 ２只 直 径 ９０ｍｍ无菌平皿，每个平皿分别加入已熔化的 ４５℃ ～４８℃营养琼脂 １５ｍｌ～１８ｍｌ，边倾 注边摇匀，待琼脂凝固后，于 ３６±１℃恒温箱培养 ４８小时后计数。 菌落数 ／镜 ＝２个平皿菌落平均值 ×２０ ５５ 致病菌检测 将送检液用旋涡器充分振荡，取 ０２ｍｌ分别接种 ９０ｍｍ血平 皿、中国兰平皿和 ＳＳ平皿，均匀涂布，３６±１℃恒温箱培养 ４８小时，观察有无致病菌生 长。 ５６ 结果判断 消毒后内镜合格标准为：细菌总数 ＜２０ｃｆｕ／镜，不能检出致病菌。 灭菌后内镜：无菌生长 注消毒后内镜应每季度进行生物学监测并做好监测记录；灭菌后的内镜及附件 应每月进行生物学监测并做好监测记录。 六、灭菌与消毒物品监测 ６１ 灭菌物品 ６１１ 采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 ６１２ 采样液 压力蒸汽灭菌后物品，用普通营养肉汤采样管；化学方法灭菌消
拭子放入试管内送检。 螺纹管：用无菌注射器吸取无菌生理盐水 １０ｍｌ～２０ｍｌ加入螺纹管内，振荡螺纹
管后收集盐水及时送检。 面罩、头罩：用浸有无菌生理盐水棉拭子涂擦内壁，棉拭子放入盐水试管内送
检。 ６３ 卫生学标准： ６３１ 进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。 ６３２ 接触粘膜的医疗用品，细菌菌落总数≤２０ｃｆｕ／ｇ或 １００ｃｍ２，致病性微生物
室内面积≤３０ｍ２布点图
室内面积 ＞３０ｍ２布点图 将普通营养琼脂平皿（φ９０ｍｍ）放置各采样点，采样高度为距地面 ０８ｍ－１５ｍ； 采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（Ⅱ类环境暴露 １５ｍｉｎ，Ⅲ、Ⅳ类环 境暴露 ５ｍｉｎ）后盖上平皿及时送检。 ３２３ 将送检平皿置 ３６±１℃恒温箱培养 ４８ｈ，计数菌落数。若怀疑与医院感染
子涂擦持物钳、镊子内外侧尖端，将棉拭子放入肉汤试管内送检。 引流条：无菌操作剪取 １ｃｍ～３ｃｍ，放入肉汤试管中送检。 ６２ 消毒物品 ６２１ 消毒后物品主要指体温表、氧气湿化瓶及连接管、雾化口含管、呼吸机连
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中和剂的无菌磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）或生理盐水采样液的棉拭子 １支，在规格板内横竖 往返均匀各涂抹 ５次，并随之转动棉拭子，连续采样 ４个规格板面积，被采表面 ＜ １００ｃｍ２，取全部表面；被采表面≥１００ｃｍ２，取 １００ｃｍ２。剪去手接触部分，将棉拭子放入 装有 １０ｍｌ无菌检验用洗脱液的试管中送检。
接管及螺纹管、吸引器导管、面罩、头罩、开口器、舌钳等。 ６２２ 采样方法：（采样液可用含相应中和剂的无菌生理盐水） 体温表：用无菌生理盐水棉拭子涂擦体温表前端 １／３口含部（３支 ／组），棉拭子
放入试管内立即送检。 氧气湿化瓶：用无菌生理盐水棉拭子涂擦湿化瓶内部四壁及底部，棉拭子放试
管内立即送检。也可用无菌吸管吸取湿化液 １ｍｌ，送培养。 各种导管、连接管，用无菌生理盐水棉拭子，伸入管内壁 ５ｃｍ～８ｃｍ处涂擦，棉
１１３ 检测方法 将采样管在混匀器上振荡 ２０秒或用力敲打 ８０次，用无菌吸 管吸取 １０ｍｌ待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种 ２个平皿，平皿内加入已熔化 的 ４５℃ ～４８℃营养琼脂 １５ｍｌ～１８ｍｌ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 ３６±１℃温箱培养 ４８ｈ，计数菌落数。
细菌菌落总数计算方法 细菌总数（ｃｆｕ／ｃｍ２）＝平皿上采菌样落面数积（×ｃ稀ｍ２释）倍数 １１４ 结果判定 （１）卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应≤１０ｃｆｕ／ｃｍ２。 （２）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤５ｃｆｕ／ｃｍ２。 １２ 皮肤消毒效果监测 １２１ 采样时间 达到消毒效果后及时采样。 １２２ 采样方法 用 ５ｃｍ×５ｃｍ的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含 相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 １支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 ５次，并随 之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 １０ｍｌ含相应中和剂的无菌洗脱液的 试管内，及时送检。不规则的皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。 １２３ 检测方法 同 １１３ １２４ 结果判定 皮肤消毒效果的判定标准遵循手消毒效果标准。 １３ 注意事项 采样皮肤表面不足 ５ｃｍ×５ｃｍ可用相应面积的规格板采样。 注开展卫生手消毒效果监测的同时，应关注洗手依从性的监测。建议每季度对 手术室、ＩＣＵ、新生儿室开展此类监测。 二、物品和环境表面消毒效果监测 ２１ 采样时间 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。 ２２ 采样方法 将 ５ｃｍ×５ｃｍ的灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有含相应
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毒的物品（浸泡或熏蒸后物品），用含有相应中和剂的营养肉汤采样管。 ６１３ 采样方法 敷料类：纱布、棉球、无菌包内物品，于无菌条件下剪取面积约 １ｃｍ×３ｃｍ的样
品，全部置于培养试管中，然后放 ３６±１℃恒温箱培养 ４８小时，观察结果。 导管类：无菌条件下，用无菌剪刀取被检导管 １ｃｍ～３ｃｍ，置肉汤培养试管内送
医院消毒灭菌效果监测规范
目 录
１．手和皮肤黏膜消毒效果的监测 （１） ２．物体及环境表面消毒效果的监测 （１） ３．空气消毒效果的监测 （２） ４．使用中消毒液染菌量的监测 （４） ５．内镜消毒灭菌效果的监测 （５） ６．灭菌与消毒物品的监测 （５） ７．灭菌效果监测方法 （７） ８．紫外线灯消毒效果的监测 （１１） ９．血液透析液的监测 （１２） １０．餐具消毒效果的监测 （１３） １１．卫生洁具消毒效果监测 （１４） １２．各类环境空气、物体表面及医护人员手细菌菌落总数卫生标 （１５） １３．消毒试验用试剂和培养基配方 （１６） １４．常用消毒剂的中和剂 （２０）
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洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）
等级
空气洁净度级别
手术区
周边区
布 点 要 求
细菌最大平均浓度 （个 ／Φ９０皿·０５ｈ）
手术区
周边区
Ⅰ
１００级
１００１００００级
０７５
１５
Ⅲ
１００００级 １０００００级
２
４
辅Ⅲ
１０００００级
５
３２２ 未采用洁净技术净化空气的房间采用平板暴露法：室内面积≤３０ｍ２，设 内、中、外对角线三点，内、外应距墙壁 １ｍ处；室内面积 ＞３０ｍ２，设四角及中央五点，四 角的布点位置应距墙壁 １ｍ处。
求。 ３４２ Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿 ３４３ Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿 ３５ 注意事项：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止 １０ｍｉｎ进行采样。 注医疗环境应强调通风及气流组织，无需常规进行空气消毒效果监测。 四、消毒液的监测 ４１ 常用消毒液有效成分含量测定 库存消毒剂的有效成分含量应依照产品企
门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。采样物体表面有消毒剂残 留时，采样液应含相应中和剂。
２３ 检测方法 将采样管在混匀器上振荡 ２０秒或用力振打 ８０次，用无菌吸管 吸取 １０ｍｌ待检样品接种于灭菌平皿，平皿内加入已熔化的 ４５℃ ～４８℃营养琼脂 １５ｍｌ～１８ｍｌ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 ３６±１℃温箱培养 ４８ｈ，计数菌落数。
２４ 结果计算 ２４１ 规则物体表面 物体表面细菌总数（ｃｆｕ／ｃｍ２）＝平板上采菌样落面数积（×ｃ稀ｍ２释）倍数 ２４２ 小型物体表面的结果计算，用 ｃｆｕ／件表示。 ２５ 结果判定 ２５１ Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤５ｃｆｕ／ｃｍ２。 ２５２ Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤１０ｃｆｕ／ｃｍ２ 注平日无需常规进行物体表面消毒效果监测，怀疑与医院感染暴发有关时，进 行目标微生物的检测。 三、空气消毒效果监测 ３１ 采样时间 采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活 动前采样；未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活 动前采样；或怀疑与医院感染暴发有关时采样。 ３２ 监测方法 ３２１ 采用洁净技术净化空气的房间可选择平板暴露法和空气采样器法，参照 ＧＢ５０３３３要求进行监测。空气采样器可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的 空气采样器。监测时将采样器置于室内中央 ０８ｍ－１５ｍ高度，按采样器使用说明书 操作，每次采样时间不应超过 ３０ｍｉｎ。房间面积大于 １０ｍ２ 者，每增加 １０ｍ２ 增设一个 采样点。
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暴发有关时，进行目标微生物的检测。 ３３ 结果计算： ３３１ 平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：ｃｆｕ／皿·暴露时间 ３３２ 空气采样器法计算公式 空气中菌落总数（ｃｆｕ／ｍ２）＝ 采样器各平皿菌落数之和（ｃｆｕ） ×１０００ 采样速率（Ｌ／ｍｉｎ）采样时间（ｍｉｎ） ３４ 结果判定 ３４１ 洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要
业标准进行检测；使用中消毒液的有效浓度测定可用以下方法，也可使用经国家卫生 行政部门批准的消毒剂浓度试纸（卡）进行监测。
４２ 使用中消毒液染菌量测定 ４２１ 监测方法 ４２１１ 涂抹法 用无菌吸管吸取消毒液 １０ｍｌ，加入 ９０ｍｌ含有相应中和剂的 采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液 ０２ｍｌ，滴于干燥普通营养琼脂平板，每份样 品同时做 ２个平行样，一个平板置 ２０℃培养 ７ｄ，观察真菌生长情况，另一个平板置 ３６ ±１℃恒温箱温箱培养 ７２ｈ，记数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生 物的检测。 消毒液染菌量（ｃｆｕ／ｍｌ）＝每个平板上的菌落数 ×５０ ４２１２ 倾注法 用无菌吸管吸取消毒液 １０ｍｌ，加入到 ９０ｍｌ含相应中和剂的 无菌生理盐水采样管中混匀，分别取 ０５ｍｌ放入 ２只灭菌平皿内，加入已熔化的 ４５℃ －４８℃的普通营养琼脂 １５ｍｌ－１８ｍｌ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一个平板置 ２０℃恒 温箱培养 ７ｄ，观察真菌生长情况；另一个平板置 ３６±１℃培养 ７２小时，计数菌落数。 怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。 消毒液染菌量（ｃｆｕ／ｍｌ）＝每个平板上的菌落数 ×２０ — ４—
一、手和皮肤粘膜消毒效果监测 １１ 手消毒效果监测 １１１ 采样时间 接触病人、进行诊疗活动前采样。 １１２ 采样方法 被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭
子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦各两次，一只手涂擦面积约 ３０ｃｍ２，涂擦过程 中同时转动采样棉拭子；剪去操作者手接触部分，将棉拭子投入 １０ｍｌ含相应中和剂的 无菌洗脱液试管内，及时送检。
４２２ 结果判断 灭菌用消毒液的菌落总数应为 ０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ ４２３ 注意事项 ４２３１ 采样后 １ｈ内检测。 ４２３２ 使用中消毒剂应每季度进行监测，灭菌剂应每月进行监测。 ４２３３ 对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂，使用前应按照使用中消 毒液染菌量的方法进行细菌检测，未检出细菌为合格。 五、内镜消毒灭菌效果监测 ５１ 采样时间 在消毒灭菌后、使用前进行采样。 ５２ 采样部位 为内镜的内腔面。 ５３ 采样方法 用无菌注射器抽取 １０ｍｌ含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活 检口注入，用 １５ｍｌ无菌试管从活检孔出口收集，及时送检，２ｈ内检测。 ５４ 菌落计数 将送检液用旋 涡 器 充 分 振 荡，分 别 取 ０５ｍｌ，加 入 ２只 直 径 ９０ｍｍ无菌平皿，每个平皿分别加入已熔化的 ４５℃ ～４８℃营养琼脂 １５ｍｌ～１８ｍｌ，边倾 注边摇匀，待琼脂凝固后，于 ３６±１℃恒温箱培养 ４８小时后计数。 菌落数 ／镜 ＝２个平皿菌落平均值 ×２０ ５５ 致病菌检测 将送检液用旋涡器充分振荡，取 ０２ｍｌ分别接种 ９０ｍｍ血平 皿、中国兰平皿和 ＳＳ平皿，均匀涂布，３６±１℃恒温箱培养 ４８小时，观察有无致病菌生 长。 ５６ 结果判断 消毒后内镜合格标准为：细菌总数 ＜２０ｃｆｕ／镜，不能检出致病菌。 灭菌后内镜：无菌生长 注消毒后内镜应每季度进行生物学监测并做好监测记录；灭菌后的内镜及附件 应每月进行生物学监测并做好监测记录。 六、灭菌与消毒物品监测 ６１ 灭菌物品 ６１１ 采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 ６１２ 采样液 压力蒸汽灭菌后物品，用普通营养肉汤采样管；化学方法灭菌消
拭子放入试管内送检。 螺纹管：用无菌注射器吸取无菌生理盐水 １０ｍｌ～２０ｍｌ加入螺纹管内，振荡螺纹
管后收集盐水及时送检。 面罩、头罩：用浸有无菌生理盐水棉拭子涂擦内壁，棉拭子放入盐水试管内送
检。 ６３ 卫生学标准： ６３１ 进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。 ６３２ 接触粘膜的医疗用品，细菌菌落总数≤２０ｃｆｕ／ｇ或 １００ｃｍ２，致病性微生物
室内面积≤３０ｍ２布点图
室内面积 ＞３０ｍ２布点图 将普通营养琼脂平皿（φ９０ｍｍ）放置各采样点，采样高度为距地面 ０８ｍ－１５ｍ； 采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（Ⅱ类环境暴露 １５ｍｉｎ，Ⅲ、Ⅳ类环 境暴露 ５ｍｉｎ）后盖上平皿及时送检。 ３２３ 将送检平皿置 ３６±１℃恒温箱培养 ４８ｈ，计数菌落数。若怀疑与医院感染