血液分析仪原理及血常规报告审核
血液分析仪
血液系统疾病
血液分析仪能够检测出血 液中的异常细胞，有助于 诊断白血病、淋巴瘤等血 液系统疾病。
监测病情
肿瘤治疗
01
在肿瘤治疗过程中，血液分析仪可以监测肿瘤标记物和免疫指
标的变化，评估治疗效果。
感染控制
02
通过定期检测白细胞计数和分类，了解感染是否得到控制或恶
化。
贫血治疗
03
监测红细胞计数和血红蛋白浓度等指标，评估贫血治疗的效果
血液分析仪的重要性
快速诊断
广泛应用
血液分析仪能够快速准确地检测血液 样本，为医生提供诊断依据，有助于 及时确诊和治疗疾病。
血液分析仪广泛应用于临床实验室、 急诊室、重症监护病房等场所，为各 种疾病的诊断和治疗提供支持。
自动化
血液分析仪的自动化操作可以减少人 为误差，提高检测结果的准确性和可 靠性。
。
健康体检
常规检查
血液分析仪在常规体检中检测血常规指标，帮助发现 潜在的健康问题。
高风险人群筛查
对于有家族遗传史或高危生活习惯的人群，血液分析 仪有助于筛查潜在疾病。
预防保健
定期进行血液检查，有助于预防和控制慢性疾病的发 生和发展。
04
血液分析仪的优缺点
优点
快速检测
血液分析仪能够快速检测血液样本，缩短了检测时间，提高了工作效 率。
应用拓展
床旁检测
开发便携式血液分析仪，方便在床旁进行实时检测，满足急救和 重症监护等场景的需求。
家庭自测
研发适用于家庭使用的血液分析仪，让患者在家中即可进行常规检 测，方便自我管理和监测。
远程医疗
借助互联网和通讯技术，实现远程操控血液分析仪，为偏远地区提 供便捷的医疗服务。
血细胞分析仪检测方法与原理
血细胞分析仪检测方法与原理1、电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法这是Coutler公司1987年推出的新技术，血球悬浮在电解液中，用一定的电流通过传感器的内外两个电极，由于血细胞电阻抗很大，当血细胞通过两个电极时，电极间阻抗瞬间增大，形成幅度与血细胞体积成正比的电脉冲，根据脉冲的大小可测出细胞的体积。
在测量红细胞时，利用一个脉冲甄别器，将幅度较小的血小板脉冲去掉，保留红细胞和白细胞脉冲，因血液中白胞的数量不及红细胞的1/500，故其总数据近似认为是对红细胞计数。
在测量白细胞时，利用溶血素，使红细胞溶解，再对剩下的白细胞计数。
在对血小板计数时，调低脉冲甄别器的阈值，计出总数，减去红细胞的计数（其中已包括白细胞的计数），即为血小板计数。
由于不同类型但体积相同的细胞产生的脉冲幅度相同，故仅靠体积是不能完全区分.利用高频电导法和激光散射分析白细胞内部结构可以弥补这一缺陷。
虽然细胞壁不能使低频电流通过，但能通过高频电流，细胞核的大小和密度不同，它们对高频电流的阻抗也不同，因此可用来区分白细胞。
激光散射技术主要用来检查细胞膜表面特征和内部结构。
激光散射对细胞颗粒的结构和密度的区分能力强，粗颗粒产生的光散射比细颗粒强，借此可将粒细胞区分开来，美国COULTER公司的STKS、MAXM系列血细胞分析仪五分类就是利用电阻法、高频电导及激光散射联合检测法。
2、光散射和细胞化学染色联合检测法利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。
嗜酸性粒细胞有很强的过氧化氢酶活性，中性粒细胞浆内含有较为丰富的过氧化氢酶，单核细胞次之，原始细胞则极少，而淋巴细胞和嗜碱性细胞则缺管此酶。
使用微量血液经与含有清洗剂和甲醛的高渗液体进行适当稀释并孵育几十秒钟，此时细胞被清洗剂所破坏，白细胞浆内酶固定，此后继续再进行第二次反应，加入过氧化氢和四氢一萘酚加热，此时待测细胞中过氧化氢酶分解过氧化氢产生氧，后者使四氯一萘酚显色并沉淀定位于含酶的颗粒中，此类细胞经激光束，由于光散射及细胞大小不同而被分类。
血常规操作规程
血常规检验一、【检验方法】：CD—1700 血细胞分析仪二、【原理及意义】：（一）Hb1、原理：红细胞被溶血素溶解，释放出血红蛋白，血红蛋白被SLS的亲水性的烷基部分所改变，由亚铁血红蛋白形态转变为高铁血红蛋白形态，形成SLS-Hb的正铁血红蛋白化合物，在555nm处有吸收峰，通过仪器内部的比色系统比色，可以测定Hb的浓度。
该方法利用了氧化血红蛋白法和氰化血红蛋白法的优点。
一方面，SLS-Hb法具有和氧化血红蛋白法一样的检测快速、无毒性成分的优点；另一方面也具有氰化血红蛋白法检测结果精确、重复性好的特点。
（二）RBC、MCV、MCH、MCHC、HCT、RDW-CV、RDW-SD1、原理：血液被稀释液稀释后，细胞一个一个通过狭缝，狭缝内外是有直流电的电解质环境，当细胞通过时会引起瞬时的电位变化，形成电脉冲，电脉冲的个数反应细胞的个数，大小反应细胞的大小。
细胞体积在一定范围内划为红细胞；在某个范围划为血小板。
同时通过仪器内部的数据分析系统换算出MCV、MCH、MCHC、Hct和统计学处理得出RDW-CV、RDW-SD 分析数据。
（三）WBC计数、及其分类1、原理（电阻检测法）：仪器吸取样本，用一定量的试剂和稀释液稀释后，让白细胞一个个依次通过计数池的微孔，利用细胞通过微孔时瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数。
脉冲信号经放大、甄别后，微机处理数据得到其体积分布直方图。
淋巴细胞群为：35-90fl中间细胞群为：90-160fl粒细胞群为：160-300fl三、【试剂品牌】：1、稀释液：Sandem 氯化钠6.38g/L硼酸1.0g/L四硼酸钠0.2g/LEDTA-2K 0.2g/L2、Hb溶血素：SULFOLYSER(SLS-200A)月桂洗硫酸钠 1.7g/L3、清洗液：SANDEM CELLCLEANSTACCLEANER-SYS次氯酸盐 5%4、抗凝剂： KEDTA·2HO（1.5-2.2mg每毫升血液）四、【仪器】：CD—1700 血细胞分析仪五、【操作步骤】：㈠开机：1.插上电源，打开CD—1700 血细胞分析仪电源开关2.仪器进入自动检测系统，自动检测各系统参数，同时测定本底参数。
血液分析仪的检测方法及测定原理
血液分析仪的检测方法及测定原理基金项目：黑龙江中医药大学2021年大学生创新创业训练计划项目（X202110228031）摘要：本文主要介绍通过血液分析仪检测血细胞基本参数的方法以及相应的测定原理。
关键字:血液分析仪;电阻抗法;白细胞;红细胞;血红蛋白;血小板血常规是临床上最基础的化验检查之一，作为血常规检查的重要设施，血细胞分析仪是现今应用于临床医学检验领域的重要仪器之一。
探究其相对基础的检测方法和原理具有一定重要的临床实际意义。
1各个血细胞参数的血细胞分析仪检测方法及原理如今，随着科技的快速发展，血细胞的分析检测技术也随之不断更新和完善。
根据目前国际参考方法，红细胞和白细胞计数通常用电阻抗的方法测量，其检测结果被视为样本的真实值。
血小板的鉴定是利用流式细胞仪，即在全血中使用单克隆抗体来获得红细胞总数与血小板总数的比率，然后乘以实际红细胞数，间接计算出实际的血小板数。
另一方面，血小板是由氰化高铁蛋白来进行衡量的【[1]】。
1.1红细胞和白细胞—电抗阻法测定这种方法是由美国物理学家W.H.Coulter在其前辈的基础上于1958年发明的。
该方法基于检测悬浮液中的颗粒通过小孔时引起的电势差变化的原理，被称为库尔特原理【[2]】。
其基本原理为：在对全血样本进行数万次稀释后【1】，一个中间有用于细胞计数小管子的等渗电解质溶液被一分为二，从内部填充稀释剂和电极，从外部填充细胞悬浮液和电极。
由于溶剂的导电性和孔隙间的低电阻【[3]】，血细胞的非导电性在它们通过孔隙时引起电位差的瞬时变化，并产生一个脉冲信号。
脉冲的数量与细胞的数量成正比，而脉冲的高度与细胞的体积成正比【[4]】，所以在计数的同时，根据数据我们还可以得到一个细胞分布直方图。
1.1.1电抗阻红细胞检测1.1.1.1红细胞计数和红细胞比容测定:原理与上述相同，可根据一系列的效应变化计算出脉冲值和脉冲高度，从而得出红细胞的数量和体积。
然后通过叠加脉冲的高度来计算，得到红细胞比容。
血液细胞分析仪-实验简述
GENS散点图五个细胞亚群
.
中性粒细胞
单核细胞 嗜酸性细胞
淋巴细胞 嗜碱性细胞
联合检测型分类原理(VCS)
容量、电导、光散射（VCS）白细胞分类法 VCS(volume， conductivity ，scatter)技术可使 血细胞在未经任何处理，与体内形态完全相同 的自然状态下得出检测结果。 （Beckman Coulter公司的仪器采用此法。）
（一）、血细胞分析仪基本工作原理与影响因素
负压
小孔电流 内电极
库尔特原理三要素：小孔、 负压、电极 检测：细胞大小和数量
外电极 血细胞 悬液 小孔近观
样品杯
小孔
小孔管
库尔特原理
“当一个不良导体颗粒，例如血细胞，通过两个电 极之间时，导致电路的电阻抗发生变化。” ----华莱士.库尔特,1947
—
1.注意环境温度 不能过热或过冷，低于15℃或高于30℃
在另一个通道内进行，测定原理也是库尔特原理。 注意：仪器的最小测出值、小孔的洁净状况、红细胞的聚集、小红细胞、红
细胞碎片、电磁波的干扰、血小板的聚集、大血小板严重重影响红细胞和血小板 测定。必须格外注意。
3、红细胞、血小板计数原理与影响因素:
表示细胞群体分布情况的图形，它是计算机收集 细胞通过微孔管时产生的脉冲而得到的。横坐标表示 细胞体积大小，以飞升（fl）为单位，纵坐标表示一 定体积细胞的相对数量。
直方图的作用是：
1、反映细胞群体体积分布情况。
2、为临床提供直观的诊断信息或图形依据。
3、用以监测仪器状态及分析结果的可靠性。
4、反映结果误差的潜在原因。
影响直方图变化的其它因素
• 仪器的阈值、孔电压、脉冲增益。 • 试剂的质量（稀释液的导电性、渗透压、离子强 度；溶血剂的种类用量、溶血时间等）都会干扰 使直方图发生改变。
血常规SOP文件
全自动血细胞分析SOP一，检验目的及原理1，目的：用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪，在临床和实验室定量分析血液细胞，对人体的血液中三种有形成分（红细胞，白细胞，血小板）的19项参数和3个直方图进行对患者和健康人群来讲，观察有无各种原因引起的贫血，出血和失血，目前机体有无细菌及病毒感染，可筛查出各种血液病，如白血病，血小板减少性紫癜等。
2，原理：电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释，用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下，分别通过各自的计数微孔，流入管道，通过两个光电传感器，在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边，在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境，根据血细胞非传导性的性质，当有细胞通过计数微孔时，将引起阻抗的变化，阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小，它有多种形态，由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同，WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下，显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞（嗜酸＋嗜碱＋单核）和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂结合形成复合物，用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强，用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较，得到血红蛋白浓度（空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态）。
二，标本1，标本种类：末梢血为200-300微升，静脉血2毫升。
2，采集标本容器及添加剂：容器：末梢血为一次性朔料试管，静脉血为真空采血管。
添加剂：不同实验使用不同的抗凝剂，不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3，采集方法：毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间：患者随到随时采集。
4，标本运送：标本采集后，应及时送检。
5，标本接受：标本的编号与化验单上的编号要一致，清楚，正确及完整。
血常规分析仪原理及解析
血液检查***附院检验科 ****第四篇第四篇 实验诊断实验诊断血常规检查•即全血细胞分析，可以对感染、炎症、手术后、血液系统疾病、肝脾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。
•标本采集与要求–抗凝剂：EDTA-K2–静脉采血方法：4小时内测定–毛细血管采血方法：半小时内测定–手指血与静脉血有差异，条件允许尽可能静脉采血–尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数于站位时增加）、一定时间和近似生理条件下采血血细胞分析仪检测指标与临床应用2.电阻抗法血细胞分析仪血细胞与等渗电解质溶液相比为相对的不良导体，其电阻值大于稀释液的电阻值。
当血细胞通过检测器小孔管微孔的孔径感受区时，检测器内外电极之间的恒流源电路上电阻值瞬间增大，造成两极之间电压的变化，产生一个电压脉冲信号。
每次检测中产生的脉冲信号数，即相当于检测出的细胞数。
血细胞分析仪在进行细胞分析时，将每个细胞的脉冲根据其体积大小分配并存储在相应的体积通道中，每个通道收集的数据被统计出相对数，表示在Y轴上，体积数据以飞升(fl)为单位，表示在X轴上。
可将白细胞体积从30～450fl 分为256个通道，每个通道1.64fl，依据体积大小分别将其放在不同的通道中，得到白细胞体积分布直方图。
初步确认：第一群是小细胞区，主要是淋巴细胞，体积在35～90fl之间；第二群是中间细胞群，主要是单核细胞，体积在90～160fl，；第三群为大细胞区，主要是中性粒细胞，它分叶多，颗粒多，体积可大至160fl以上。
中间细胞血小板和红细胞共用一个小孔管。
正常人红细胞体积和血小板体积有明显的界限。
因此血小板计数准确容易。
当血细胞悬液中含有异常血细胞（如小红细胞）时，划分界限不清。
为使血小板计数有较高的准确性，计算机对血小板和红细胞分布图进行判断，将血小板计•各项红细胞指数的检测原理:根据仪器检测的RBC、HCT和Hb的数据，经仪器内存程序换算出红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白的含量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)。
临床检验全自动血细胞分析仪操作人员素质要求、性能评估、运行环境、试剂质量要求、分析质量控制及分析审核
临床检验全自动血细胞分析仪操作人员素质要求、性能评估、运行环境、校对、试剂质量要求、分析质量控制、评价要求及报告分析审核目前全自动血球分析仪在各检验科的血常规测定中已非常普及，它大大地提高了血细胞分析的效率。
但由于仪器的种类繁多，性能差异较大，而且各种仪器的工作原理也不完全相同，完成一个项目测定要受到仪器、试剂、校准品、操作程序以及操作人员等因素影响。
因此，避免不同仪器之间测定结果的差异，提高测定结果的准确性，全面做好血液分析仪的质量控制是一项非常重要的工作。
操作人员素质要求人是第一要素，是实验仪器的操作者，必须经过专门的技术培训。
了解仪器各部件结构，熟悉仪器的性能、工作原理、参数设置、日常的维护以及试剂应用。
具有能解释和处理仪器各种报警信息，对仪器一般故障排除的能力。
血液分析仪性能进行评估新仪器在安装调试之后用于临床测定之前，首先要对新仪器各项性能指标进行初步评估。
即按照国际血液学标准化委员会（ICSH）和美国临床实验室标准化研究所(CLSI)的有关规定，对仪器的各项性能指标进行评估，包括仪器的线性范围、精密度、准确度、抗干扰性、白细胞分类以及携带污染率等。
有条件的应与其他性能稳定、运行良好、结果具有可溯源性的仪器进行比对。
这样就能对新仪器的各项性能指标的实际情况有一个较全面的了解。
良好运行环境全自动血球分析仪的正常运行必须依靠一个良好的运行环境。
其中包括一个有稳定电流、电压和接地保护的电源系统，放置仪器的实验台要稳固、防阳光直射，实验室防震、防尘，防潮、通风条件好，室内温度应在15℃～25℃，相对湿度应＜80%，仪器安放在远离电磁干扰源、热源的位置，使其有一个相对独立的运行环境。
任何环境因素的变化都可能影响到仪器的稳定性，从而影响测定结果的精密度和准确度，因此，要经常观察并做好相应的记录，及时纠正。
全自动血球分析仪正确校准全自动血球分析仪的校准直接影响到检测结果的正确性。
可以采取相应的校准方式：1、应选用仪器商提供的配套血细胞校准品进行校准，这是最理想和最实用的方法，但这种原装校准品价格比较昂贵且有效期短，不易普及；2、用新鲜的全血标本进行校准，即用新鲜血液标本在其他已确定用配套校准品校准好且性能稳定的全自动血球分析仪上进行测定，测定多次取均值，将测定的结果视为该标本的标准值，来校准需要校准的仪器，这样也会得到比较满意的结果，也可以用这种方式来校准同一实验室内不同全自动血球分析仪，确保本实验室不同全自动血球分析仪测定结果的一致性。
血细胞分析仪检测原理18
检测原理比较： 与手工显微镜 检查相比血细 胞分析仪具有 更高的准确性 和效率
检测原理优缺点： 血细胞分析仪检 测具有快速、简 便、重复性好等 优点但也可能存 在假阳性或假阴
性的情况
检测原理应用： 血细胞分析仪 检测原理广泛 应用于临床检 验、诊断和治 疗中
检测系统由传感器、信号处理电路和计算机组成 传感器负责检测血细胞的各种参数如大小、数量和形态等 信号处理电路将传感器输出的信号转换为可被计算机识别的数字信号 计算机对数字信号进行处理最终输出检测结果
作用：对血细胞分 析仪检测到的数据 进行处理、分析和 存储
组成：中央处理器、 存储器、输入输出 设备等
性能要求：高速度、 大容量、高可靠性
与其他系统的关系：与 图像处理系统、控制系 统等相互协作确保检测 结果的准确性和可靠性
组成：显示器、显示电路和显示软件 功能：将血细胞分析仪检测到的数据以图形或数字形式显示出来 特点：高分辨率、高清晰度、易于观察和解读 重要性：为医生提供准确的血细胞检测结果辅助诊断和治疗
法等。
按检测指标分类：血细胞分析 仪可分为三分群和五分群两类。
按检测原理分类：血细胞分析 仪可分为光学法和电学法两大 类。
按检测速度分类：血细胞分析 仪可分为高速、中速和低速三
类。
按自动化程度分类：血细胞分 析仪可分为半自动和全自动两
类。
临床诊断：用于检测各种血液 疾病、感染和贫血等
监测治疗：评估治疗效果调整 治疗方案
健康体检：用于筛查潜在疾病 预防性检查
科学研究：为科研提供数据支 持推动医学发展
血细胞分析仪检测原理基于流式细胞术和激光技术通过测量细胞物理和化学性质来分析血细胞。 血细胞分析仪通过将待测样本与试剂混合在特定的检测系统中进行检测。 检测过程中血细胞通过激光束时会产生散射光和荧光这些信号被光电倍增管接收并转换为电信号。 电信号经过处理后可以生成血细胞数量、体积、血红蛋白浓度等参数从而对血细胞进行分类和计数。
血细胞分析仪测定原理和参数解析课件
细胞、淋巴细胞、异型淋巴细胞和巨
大未成熟细胞（LIC）散点图结果。双
矩阵LIC散点图可将幼稚细胞分为3个
亚群：①未成熟粒细胞（IMG）：包
括异常中性粒细胞、晚幼粒细胞、中 双矩阵巨大未成熟细胞（LIC）
幼粒细胞、早幼粒细胞、原始粒细胞。
散点图
②未成熟单核细胞（IMM）：包括幼 （IMG未成熟粒细胞、IMM未成熟
MCV、MCH、MCHC值，得到红细胞散点图；同时可
测定单个红细胞体积及红细胞内血红蛋白含量，得到
相应直方图及RDW、HDW等参数。
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
三、血小板系列参数检测原理
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文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
三、激光散色法流式细胞术检测原理
➢
如细胞（或其他颗粒）用
荧光染料染色,则染色后的细胞
（或其他颗粒）被激光照射时，
可产生不同波长的荧光散射，
可用检测器接受散射荧光。将
来自各种散射光的信息进行综
合分析，即可准确区分正常类
型的细胞（其他颗粒）。激光
不断创新，检测的参数显著增多。
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
➢ 传统手工法显微镜血细胞计数或分类
方法，不仅速度慢，而且因操作过程的随 机误差、实验器材的系统误差和检测方法 的固有误差，检测的精密度不高。
➢ “精度高、速度快、易操作、功能强”
是血细胞分析仪的强劲优势，还可和血涂 片制备和染色仪进行组合，由后者完成血 细胞分析仪检测后的形态学复检。
血细胞分析仪—血细胞分析仪检测原理(临床检验课件)
免疫学及临床检验教研室
电阻抗法是三分群血液分析仪的核心技术，可准 确测出细胞（或类似颗粒）的大小和数量。
电阻抗法还与其他 检测原理组合应用于 五分类血液分析仪中。
图3-1 电阻抗法细胞计数原理
免疫学及临床检验教研室
白细胞计数时除加入一定量稀释液外还要加入 溶血剂，红细胞迅速溶解同时使白细胞膜通透性改 变，白细胞胞质中部分物质经细胞膜渗出，使细胞 膜紧裹在细胞核或存在的颗粒物质周围，所以经溶 血剂处理后含有颗粒的粒细胞比无颗粒的单核细胞 和淋巴细胞要大些。
③IMI通道：由于幼稚细胞膜上脂质较成熟细胞少，在 细胞悬液中加入硫化氨基酸后，幼稚细胞结合硫化氨 基酸较成熟细胞多，且对溶血剂有抵抗作用，当加入 溶血剂后成熟细胞易被溶解，幼稚细胞形态不受破坏， 因此可通过电阻抗法检测出。
免疫学及临床检验教研室
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（5）多角度偏振光散 射方法 （MAPSS）
②溶血后对白细胞进行染色，染色后的标本进入鞘流池 进行双鞘流分析，由于淋巴、单核、中性以及嗜酸细胞对 染色剂的着色程度不同，细胞结构的光散射程度不同，产 生特定吸光率。
③嗜碱性粒细胞具有抗酸性，在WBC/BASO通道保持形态 完整，其他白细胞胞质溢出成为裸核，根据电阻抗得到嗜 碱性粒细胞直方图。
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图3-10 体积（V）、电导（C）和光散射（S）法
图3-11 VCS细胞检测立体散点图
图3-12 VCS异常细胞检测 平面散点图位置
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（2） 双鞘流技术和细胞化学染色原理
①标本在第一鞘流液中经过电阻抗分析，得到细胞体积， 第二鞘流液对进行光吸收率分析，对细胞内容物进行测定。
血细胞分析仪检测原理
三血红蛋白测定原理
血红蛋白测定采用光电比色原理 血细胞悬液中加入溶血剂后，红细胞溶 解释放血红蛋白，后者与溶血剂中有关成 分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋 白测试系统 特定波长(530～550nm)下进行光电比色
溶血剂
λ＝540nm
血红蛋白
血物红蛋白衍生
Hb浓度
吸光度
血红蛋白测定的溶血剂
溶血剂
多角度偏振光散射法（MAPSS)
①WBC计数通道：电阻抗法 90°D：垂直角度去偏振散射光，鉴别E与N
利用高频电磁波对细胞传
90°：垂直角度散射光：细胞内部颗粒及分叶状况 (2)Laser Scatter—激光散射 —针对细胞颗粒特性的测量方法
导性的特点，检测:
主要体现在白细胞分类，实质是选用较特异的方法将血含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出，发现异常细胞。
VCS白细胞分类
细
VCS
结 构
胞 内 的
颗
粒
性
、
电 阻 抗 技 术
细 胞 内 部 结
构
核 分 叶 性 和 细 胞
表
面
2.多角度偏振光散射法（MAPSS)
0°：前向散射光：细胞大小、数量
MAPSS
10°：侧向散射光：细胞内部结构及核染色 质的复杂性
90°：垂直角度散射光：细胞内部颗粒及分 叶状况
90°D：垂直角度去偏振散射光，鉴别E与 N
CPU对血小板和红细 胞分布图进行判断
红细胞、血小板体积分布直方图
PLT%
10
20 30(fl)
二联合检测型原理
主要体现在白细胞分类，实质是选用较特异的方法将血含 量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出，发现异常细胞。 共有特点是：均使用了鞘流技术。
血液分析仪检验临床检验基础
检测项目 M;M#;E#;E;B;B#;未成熟白细胞 NRBC;RET;IPF
01
代表仪器 SF-3000血细胞分析仪、EXCELTM22血细胞分析仪等。
02
仪器性能的评价
影响直方图变化的因素
仪器类型和特点
仪器方法学评价
仪器类型和特点 单纯电阻抗法三分群血液分析仪特点
检测参数：约20项左右。
P94
分析仪检测Hb 的原理： 被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂结合形成Hb衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成比例。
P96
四、分光光度法
血红蛋白
血红蛋白 衍生物
吸光度
Hb浓度
λ＝540nm
溶血剂
血液分析仪检测参数原理
白细胞分类：只能对白细胞进行三分群。
直方图：3种直方图。
报警功能： 以文字和(或)图标提示 异常检测结果的信息。
（一）仪器类型和特点
（一）仪器类型和特点
2.综合光学和电学等技术血液分析仪特点 (1)检测参数：约20至40项左右 (2)白细胞分类：能对白细胞进行五分类。 (3)直方图和散点图：3种直方图和散点图。 (4)报警功能： 以文字和(或)图标显示 异常检测结果的信息。 注意：各类型血液分析仪不具备识别异常细胞 形态的能力，故不能完全代替镜检。
血细胞直方图
1 血细胞直方图概念： 在细胞通过小孔计数时，感应器收集脉冲 的大小及数量，转换为相应的细胞体积和数量， 并在坐标上表示出来。坐标的横轴(x)代表体积 (FL)，纵轴(Y)代表相对数量，将各点用光滑的 曲线相连，就是直方图。即直方图是可以表示 出细胞群体体积分布情况的图形。
关于准确度和精密度的注意点
血液分析仪原理及血常规报告审核
（四）血液分析仪检测结果显微镜 涂片复检规则
2002年，Berend Houwen发起研究关于血液 分析仪全血细胞计数和白细胞分类的显微镜 复检规则 2005年，国际血液学组织提出显微镜复检的 41条建议性标准。
（五）报告审查
1.检定结果的报告； 2.根据参数、警告及直方图、散点图确定涂片分
类的过筛检测结果的报告； 3.检测结果极端异常标本应立即通知临床医生； 4.定期征求临床医护人员对本室结果的评价。
2）报警有效性： 灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值 和总效率。
3）报警形式： 图形、符号、文字
（2）标本因素
1）在形态学方面，任何血液分析仪不能替代人工 显微镜检查对异常血细胞形态的识别能力。
2）常见标本干扰因素： 血小板聚集、大血小板、红白细胞碎片、冷 凝集、白细胞增多、高脂血症、纤维蛋白、 红细胞溶解不完全、药物、溶血。
单核、淋巴增高 淋巴明显增高
再见！
检测系统
1.嗜酸性粒细胞检测系统 2.嗜碱性粒细胞检测系统 3.5种白细胞分类检测系统 4.幼稚细胞检测系统
2.光散射法红细胞检测原理
（1）激光束以低角度前向光散射和高角度散射 两个测量系统同时测量1个红细胞。
（2）低角度测量细胞大小、高角度测量细胞折 射指数。
3.光散射法血小板检测原理
（1）使用二维激光散射法； （2）低角度测量细胞大小,高角度检测折射
血球仪原理
血常规结果审核
库尔特原理
电阻抗法检测原理
专门试剂、通道及散点图技术
Forward scatter
专门试剂、通道及散点图技术
（2）容量、电导、光散射法（volume，
conductivity，scatter，VCS）
抽血验血实验报告
一、实验目的1. 掌握抽血的基本操作方法。
2. 了解血液的基本组成和功能。
3. 学会使用血液分析仪进行血液检验。
二、实验原理血液是人体的重要组成部分，负责运输氧气、营养物质、激素等物质，同时清除代谢废物。
血液的检验是临床诊断的重要手段之一。
本实验通过抽血验血，了解血液的基本组成和功能，为临床诊断提供依据。
三、实验材料1. 受试者：一名健康志愿者。
2. 采血器材：采血针、采血管、酒精棉球、无菌手套、针头、止血带等。
3. 血液分析仪：全自动血液分析仪。
4. 实验试剂：抗凝剂、溶血剂等。
四、实验方法1. 受试者准备：受试者取坐位，放松心情，选择肘正中静脉作为采血部位。
2. 采血操作：（1）戴无菌手套，用酒精棉球消毒受试者肘部皮肤。
（2）用止血带扎紧受试者上臂，使静脉充盈。
（3）在肘正中静脉上方约2cm处，用采血针穿刺静脉。
（4）抽血时，保持采血管与针头垂直，缓慢抽血，避免气泡产生。
（5）抽血完毕后，拔出采血针，用酒精棉球压迫穿刺点，直至止血。
3. 血液标本处理：（1）将采集到的血液标本注入抗凝管中，轻轻颠倒混匀。
（2）将血液标本注入溶血剂中，轻轻颠倒混匀。
4. 血液分析仪检测：（1）将处理好的血液标本注入血液分析仪，启动检测程序。
（2）根据血液分析仪显示的结果，进行数据分析。
五、实验结果1. 血常规检验结果：（1）红细胞计数：4.00×10^12/L（2）白细胞计数：7.50×10^9/L（3）血红蛋白浓度：130g/L（4）血小板计数：200×10^9/L2. 血液生化检验结果：（1）血糖：5.6mmol/L（2）总胆固醇：5.2mmol/L（3）甘油三酯：1.5mmol/L（4）高密度脂蛋白胆固醇：1.1mmol/L（5）低密度脂蛋白胆固醇：3.1mmol/L六、实验讨论1. 本实验成功完成了抽血验血操作，掌握了血液的基本组成和功能。
2. 血常规检验结果显示，受试者的红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度和血小板计数均在正常范围内，表明受试者血液状况良好。
浅析血液分析仪的测试原理及注意事项
浅析血液分析仪的测试原理及注意事项关键词血液分析仪;测试原理;注意事项近年来,随着医院实验室设备的全面改善,各种类型的血液分析仪迅速在全国普及,不但提高了工作效率和检验质量,还为临床提供了实验指标。
但由于对血液分析仪的原理尚缺乏足够的了解和经验,有些单位在使用过程中出现了些问题,甚至得出错误的结果,贻误临床诊断。
现就仪器应用中的一些共性的问题作初步探讨。
1 自配试剂的应用目前国内使用的血液分析仪基本上是进口产品,绝大部分因电阻不同采用阻抗法。
阻抗法记数细胞的原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小与仪器设定的阈值比较而得出的数据,脉冲大小除与细胞大小有关外(如粒细胞脉冲最大、淋巴细胞脉冲最小)还与溶血剂的种类,稀释液的渗透压、离子强度、电导率、仪器出厂时固定的孔电压和脉冲的增益率等有关,因此欲得到准确结果,原则上应使用原仪器的配套试剂[1]。
进口试剂价格昂贵,但用自配试剂应具备以下条件。
①自制试剂在成分和剂量上与配套试剂不尽相同,但同一份血液在配套试剂体系(稀释液+溶血剂)与自配试剂中细胞产生的脉冲信号应是相同的。
血细胞分类直方图是重合的,细胞分类结果应一致,如达不到这一点,不能代替进口试剂。
②在红细胞、血小板测试系统中,红细胞数、红细胞平均体积(MCV)、血小板平均体积(MPV)在两种试剂中所得的结果应是相同的(如果仪器的记数阈值是可调的,至少应在允许的变异范围内)。
空白记数应符合仪器的标准。
③溶血剂溶解血细胞的程度、速度及血红蛋白与溶血剂使用后的吸收光谱与HiCN应相似,吸收峰值最好在540nm。
④自配试剂的成分不应损坏仪器的部件或影响使用寿命。
2 直方图分析及白细胞分类的正确使用细胞直方图既给临床提供诊断参考数据,也为操作人员提供对仪器工作状态和实验结果是否可信的监控,一般必须在仔细分析直方图之后,确定是否需要显微镜检查再报告。
这一点在白细胞分类尤为重要。
尽管现代高科技不断在血液分析仪上应用,多方位测量同一细胞的高档血液分析仪相继问世,但迄今尚无一台血液分析仪能完全代替显微镜进行细胞分类记数,目前国内少数单位在白细胞分类时,只用仪器忽视显微镜检查倾向必须纠正。
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（2）标本因素
1）在形态学方面，任何血液分析仪不能替代人工 在形态学方面， 显微镜检查对异常血细胞形态的识别能力。 显微镜检查对异常血细胞形态的识别能力。 2）常见标本干扰因素： 常见标本干扰因素： 血小板聚集、大血小板、红白细胞碎片、冷 血小板聚集、大血小板、红白细胞碎片、 凝集、白细胞增多、高脂血症、纤维蛋白、 凝集、白细胞增多、高脂血症、纤维蛋白、 红细胞溶解不完全、药物、溶血。 红细胞溶解不完全、药物、溶血。
2.电导性（ 2.电导性（conductive）技术 电导性 ）
依据细胞壁能产生高频电流的性能, 依据细胞壁能产生高频电流的性能,采用高 频电磁探针测量细胞内部结构， 频电磁探针测量细胞内部结构，即检测细胞核 与细胞浆的比例及细胞内化学成分。 与细胞浆的比例及细胞内化学成分。辨别体积 完全相同而性质不同的两个细胞群,如小淋巴 完全相同而性质不同的两个细胞群, 和嗜碱性粒细胞。 和嗜碱性粒细胞检测的标本不能满足仪器软件的定义 或不能满足实验室（用户） 或不能满足实验室（用户）建立的检测标 准。
1）报警来源： 报警来源： 项目参考值、复检标准、 项目参考值、复检标准、临床疾病标本异常 和患者人群变异。 和患者人群变异。 2）报警有效性： 报警有效性： 灵敏度、特异性、阳性预测值、 灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值 和总效率。 和总效率。 3）报警形式： 报警形式： 图形、符号、 图形、符号、文字
（四）血液分析仪检测结果显微镜 涂片复检规则
2002年，Berend Houwen发起研究关于血液 年 发起研究关于血液 分析仪全血细胞计数和白细胞分类的显微镜 复检规则 2005年，国际血液学组织提出显微镜复检的 年 41条建议性标准。 条建议性标准。 条建议性标准
（五）报告审查
1.检定结果的报告； 检定结果的报告； 检定结果的报告 2.根据参数、警告及直方图、散点图确定涂片分 根据参数、警告及直方图、 根据参数 类的过筛检测结果的报告； 类的过筛检测结果的报告； 3.检测结果极端异常标本应立即通知临床医生； 检测结果极端异常标本应立即通知临床医生； 检测结果极端异常标本应立即通知临床医生 4.定期征求临床医护人员对本室结果的评价。 定期征求临床医护人员对本室结果的评价。 定期征求临床医护人员对本室结果的评价
COULTER GEN.S血液分析仪 血液分析仪
[检测原理] 检测原理]
1.应用电阻抗原理测量细胞体积（volume,V） 应用电阻抗原理测量细胞体积（ 应用电阻抗原理测量细胞体积 ） 缺点： 缺点： 小淋巴与成熟嗜碱性粒细胞、 小淋巴与成熟嗜碱性粒细胞、幼稚淋巴细胞 和成熟中性粒细胞大小相近，不能区分。 和成熟中性粒细胞大小相近，不能区分。
3.光散射技术 光散射技术(light scatter) 光散射技术
激光单色光束直接进入计数池敏感区， 激光单色光束直接进入计数池敏感区， 10-70°扫描分析细胞核形态、分叶状况及 °扫描分析细胞核形态、 光散射信息，确保粒细胞分类。 光散射信息，确保粒细胞分类。
(3)电阻抗与射频法 (3)电阻抗与射频法
RET试剂反应前后细胞形态的变化 RET试剂反应前后细胞形态的变化
前 向 散 射 光 密 度 LFR MFR HFR
荧光强度
（二）检测参数
1.检测参数分类 1.检测参数分类 （1）临床报告参数 （2）异常报警/研究参数 异常报警/ （3）仪器内部检测参数
2.血液分析仪总体目标 血液分析仪总体目标
射频（ 射频（radio frequence，RF）： ， ）： 即射频电流， 即射频电流，是 每秒>10000次的 每秒 次的 高频交流电磁波。 高频交流电磁波。
SYSMEX-XT1800系列血液分析仪 系列血液分析仪
检测系统
1.嗜酸性粒细胞检测系统 嗜酸性粒细胞检测系统 2.嗜碱性粒细胞检测系统 嗜碱性粒细胞检测系统 3.5种白细胞分类检测系统 种白细胞分类检测系统 4.幼稚细胞检测系统 幼稚细胞检测系统
（1）筛检和直接报告正常检验结果； 筛检和直接报告正常检验结果； （2）出现异常结果时，直接向检验人员报警； 出现异常结果时，直接向检验人员报警；
（三）结果显示
1.数据： 1.数据： 数据 项目名称、检测结果、参考值、指示箭头。 项目名称、检测结果、参考值、指示箭头。 2.图形： 2.图形： 图形 直方图（ ）、散点图 直方图（histogram）、散点图 ）、散点图(scattergram)
血球仪原理
血常规结果审核
库尔特原理
电阻抗法检测原理
专门试剂、 专门试剂、通道及散点图技术
Forward scatter
专门试剂、 专门试剂、通道及散点图技术
（2）容量、电导、光散射法（volume， 容量、电导、 ，
conductivity，scatter，VCS） ， ， ）
1）1987年由 oulter公 ） 年由C 年由 司首创； 司首创； 2）优势：保持白细胞 ）优势： 自然形态下进行分类。 自然形态下进行分类。
（1）使用二维激光散射法； 使用二维激光散射法； （2）低角度测量细胞大小,高角度检测折射 低角度测量细胞大小, 指数； 指数；
4.网织红细胞VCS原理 4.网织红细胞 网织红细胞VCS原理
（1）使用二维激光散射法； 使用二维激光散射法； （2）低角度测量细胞大小,高角度检测折射 低角度测量细胞大小, 指数； 指数；
2.光散射法红细胞检测原理 2.光散射法红细胞检测原理
（1）激光束以低角度前向光散射和高角度散射 两个测量系统同时测量1个红细胞。 两个测量系统同时测量1个红细胞。 （2）低角度测量细胞大小、高角度测量细胞折 低角度测量细胞大小、 射指数。 射指数。
3.光散射法血小板检测原理 3.光散射法血小板检测原理
射频/ 射频/阻抗分析术
射频技术用于测量细胞内容物 {包括颗粒量、粒度粗细、形状等物理信息） 包括颗粒量、粒度粗细、形状等物理信息）
专门试剂、 专门试剂、通道及散点图技术
试剂作用前
专门试剂、 专门试剂、通道及散点图技术
试剂作用后
scatter
conductivity
conductivity
单核、淋巴增高 淋巴明显增高
再见！